小花清风藤醇提液对RA大鼠相关蛋白的影响

目的:探讨小花清风藤醇提液对类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)的影响及对TNF-ɑ、HIF-1α、MMP-3及MMP-9表达的影响。方法:选择60只SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为6组。除正常组外,余5组大鼠建立RA模型20d。而后灌胃给药干预20d,其中分别给予小花清风藤醇提液120mg/kg、90mg/kg、60mg/kg、阳性对照地塞米松7. 5mg/kg,模型组予等体积生理盐水。40d后处死大鼠,取血清、膝关节滑膜,分析各组大鼠足爪图片、X射线影像及足跖肿胀度;膝关节滑膜HE染色分析组织形态改变;免疫组化检测滑膜中MMP-9、HIF-1α、MMP-3及TNF-ɑ的表达变化; ELISA法检测血清中TNF-ɑ、HIF-1α、MMP-3及MMP-9的含量。结果:模型组较正常组大鼠足爪见明显肿胀、畸形及溶骨现象,给药后各组症状均有减轻,正常组未见异常; HE染色显示,正常组大鼠滑膜组织形态正常,模型组大鼠滑膜组织中有大量炎细胞浸润、血管翳增生,给药后各组炎细胞浸润和血管翳增生均有减少,尤其是90mg/kg、120mg/kg组;模型组血清中TNF-ɑ、HIF-1α、MMP-3及MMP-9的表达均显著高于正常组,小花清风藤组和阳性组较模型组均有明显减少,尤其是90mg/kg组;免疫组化结果显示,模型组大鼠滑膜组织中TNF-α、HIF-1α、MMP-9及MMP-3的阳性表达均显著升高,用药后各组较之模型组均显著下降,尤其是90mg/kg组。结论:小花清风藤醇提液对RA具有治疗作用,其机制可能与下调HIF-1α、MMP-3、MMP-9、及TNF-ɑ表达,抑制炎症发展与血管新生相关。     

桂枝附子汤调控AGEs/RAGE/NF-κB信号通路对类风湿关节炎大鼠的影响

目的 研究桂枝附子汤对类风湿关节炎(RA)大鼠的干预作用及对晚期糖基化终末产物(AGEs)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 将50只大鼠随机分为空白组、模型组、桂枝附子汤组(6.1 g/kg)、RAGE抑制剂组(0.5 mg/kg)、桂枝附子汤+RAGE抑制剂组(6.1 g/kg+0.5 mg/kg),每组10只。用牛Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂(IFA)混合乳化诱导建立RA大鼠模型，造模后连续灌胃给药30 d。给药结束后，测定大鼠关节炎指数和关节肿胀度，HE染色观察大鼠踝关节软骨及滑膜组织病理变化，ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，Western blot法检测大鼠踝关节软骨组织RAGE、p-NF-κB p65蛋白表达，免疫组化(IHC)法观察大鼠踝关节软骨组织AGE和软骨及滑膜组织TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)阳性细胞表达。结果 与模型组比较，桂枝附子汤组、抑制剂组和桂枝附子汤+抑制剂组均能有效降低RA大鼠关节炎指数、关节肿胀度、血清炎性因子IL-6、TNF-α水平...     

加味芍甘附子汤对CIA大鼠血清IL-1β及滑膜组织VEGF表达的影响

目的:观察加味芍甘附子汤对CIA大鼠血清中白介素-1β(IL-1β)含量及滑膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,以探讨该方治疗RA的作用机理.方法:将50只SD雄性大鼠随机分为5组:空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、甲氨喋呤对照组(C组)、痹颗粒对照组(D组)、加味芍甘附子汤治疗组(E组).除A组外其余40只大鼠复制成CIA大鼠模型,于造模第20 d后,A、B两组予蒸馏水,其余各组分别给予相应药液灌胃;连续用药35 d后处死动物,用酶联免疫法测定其血清中IL-1β的含量,用免疫组化法测定滑膜组织中VEGF的表达.结果:加味芍甘附子汤能明显降低CIA大鼠血清中IL-1β的含量,抑制滑膜组织中VEGF的异常表达.结论:加味芍甘附子汤能明显改善CIA大鼠的全身和关节局部症状,其作用机理可能与抑制血清IL-1β炎症介质的产生和VEGF的异常表达有关.     

麝香乌龙丸对大鼠佐剂性关节炎滑膜病变及HIF-1α、MMP-2表达水平的影响

目的:观察麝香乌龙丸对大鼠佐剂性关节炎(RA)滑膜病理形态及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达水平的影响。方法:将60只健康雄性wistar大鼠,随机抽取12只为对照组,其余48只造模成功后分为模型组、麝香乌龙丸低剂量组、麝香乌龙丸中剂量组、麝香乌龙丸高剂量组,每组各12只。麝香乌龙丸低剂量组、麝香乌龙丸中剂量组、麝香乌龙丸高剂量组分别灌入麝香乌龙丸0.3 g·(kg·d)~(-1)、0.6 g·(kg·d)-1、1.2 g·(kg·d)~(-1),对照组、模型组灌入等容量生理盐水,连续2周。灌胃2周后,HE染色,光镜下观察滑膜病变,免采用疫组织化学法检测滑膜组织HIF-1α、MMP-2表达水平。结果:麝香乌龙丸能减轻RA大鼠滑膜病变的程度,各组大鼠滑膜病理形态评分比较,差异具有统计学意义(P0.05);麝香乌龙丸各组可不同程度的降低RA大鼠滑膜中HIF-1α、MMP-2的表达水平,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:麝香乌龙丸治疗RA的机理与调节HIF-1α、MMP-2的表达水平有关。     

基于TNF-α-HIF-1α-iNOS-NO信号通路探讨虎杖大黄素干预类风湿关节炎的作用研究

目的:研究大黄素对CIA模型大鼠TNF-α、HIF-1α、iNOS以及NO表达的影响,探讨大黄素通过调控TNF-α-HIF-1α-iNOS-NO信号通路干预RA的分子机理。方法:1.采用HPLC法进行虎杖中大黄素提取与含量测定。2.选60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、大黄素20、40、80 mg/kg组、地塞米松7. 5 mg/kg组。药物干预后,取大鼠足爪大体图片、X射线影像、脾脏、膝关节滑膜及血清。用HE染色观察滑膜组织形态学改变;用免疫组化、ELISA、Western blot以及RT-PCR法检测滑膜、血清以及脾脏中TNF-α、HIF-1α、iNOS及NO相关蛋白与mRNA表达变化。结果:造模后大鼠双后足跖逐渐红肿、畸形,甚至出现溶骨、成骨现象,第20 d症状表现最严重。给药后上述症状逐渐减轻,大黄素40 mg/kg组和地塞米松组溶骨现象基本消失。HE染色结果显示正常组滑膜组织形态未见异常。模型组滑膜细胞结构破坏,炎性细胞大量浸润,血管明显增生。与正常组比较,模型组血清、脾及滑膜组织中TNF-α、HIF-1α、iNOS及NO相关蛋白与mRNA表达明显上调。药物干预20 d后,炎性细胞浸润与血管新生均被抑制,大黄素40 mg/kg改善作用最强。各给药组上述相关蛋白与mRNA表达较之模型组均明显下调。结论:大黄素治疗RA的机制可能是抑制TNF-α-HIF-1α-iNOS-NO信号通路开放。     

艾灸对佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜组织低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察艾灸对佐剂性关节炎(AA)大鼠踝关节滑膜组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响,探讨艾灸抑制类风湿关节炎关节滑膜血管新生、改善关节症状的作用机制。方法:60只健康成年雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和甲氨蝶呤组,每组15只。采用右后足跖皮下注射弗氏完全佐剂法制备AA大鼠模型。艾灸组予双侧“足三里”“关元”和“阿是穴”艾灸治疗,每次20 min,每日1次,连续干预3周;甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤(0.35 mg/kg)灌胃给药,每周2次,连续干预3周。采用足趾容积测量仪检测大鼠足跖容积;HE染色法观察大鼠踝关节滑膜组织病理情况;免疫组织化学法和Western blot法检测大鼠踝关节滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠的足趾容积和踝关节滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白表达均明显升高(P<0.01),滑膜组织出现明显增生且有大量新生血管形成;与模型组比较,艾灸组和甲氨蝶呤组大鼠的足趾容积和踝关节滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),滑...     

艾灸对类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB信号通路的影响

目的:观察艾灸对类风湿性关节炎(RA)大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB(TLR 4-MyD 88-NF-κB)信号通路的影响,进一步探讨艾灸治疗RA的作用机制。方法 :40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和药物组,每组10只。采用风、寒、湿环境因素结合弗氏完全佐剂的方法复制RA模型。艾灸组以艾条悬灸大鼠"足三里""肾俞"穴,每天1次,连续治疗15d。药物组以雷公藤溶液灌胃(8.75mL/kg),每天1次,共15d。观察关节滑膜组织病理形态学变化,放射免疫法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)含量,实时荧光定量PCR方法检测滑膜组织TLR 4、MyD 88、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)mRNA的表达,免疫组化方法检测NF-κB p 65的表达。结果:与正常组比较,模型组滑膜组织有明显的病理改变,大量单核细胞及淋巴细胞等炎性细胞浸润,滑膜表面不整齐,滑膜增生变厚;与模型组比较,艾灸组和药物组均能明显缓解炎性细胞对滑膜的浸润,改善滑膜细胞增生反应。与正常组比较,模型组血清TNF-α、IL-1含量升高(P0.01),滑膜TLR 4mRNA、MyD 88mRNA、TRAF-6mRNA及NF-κB p 65表达均升高(P0.01);与模型组比较,艾灸组和药物组血清中TNF-α、IL-1含量降低(P0.01),滑膜TLR 4mRNA、MyD 88mRNA、TRAF-6mRNA及NF-κB p 65表达均降低(P0.01,P0.05)。结论:艾灸具有调节细胞因子的作用,其机制可能与艾灸抑制滑膜组织TLR 4-MyD 88-NF-κB信号通路的异常激活有关。     

芍甘附子汤加味对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管新生相关因子表达的影响

目的观察芍甘附子汤加味对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)和血管生成素2(angiopoietin-2,Ang-2)的影响,探讨其治疗类风湿关节炎的抗血管新生作用机制。方法选用健康Wistar大鼠30只,随机分为正常组、模型组、对照组(雷公藤多甙片组)和小、中、大剂量治疗组(芍甘附子汤加味组),除正常组均制备胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)模型,造模成功后连续给药28天。测定各组大鼠足趾肿胀体积,进行关节炎指数(Arthritis index,AI)评分,采用免疫组织化学方法检测大鼠膝关节滑膜组织HIF-1α、Ang-1和Ang-2的表达。结果与模型组比较,对照组和大剂量治疗组足趾肿胀体积有所降低(P0.05),对照组和中、大剂量治疗组AI评分明显降低(P0.01);与正常组比较,模型组HIF-1α和Ang-1表达均显著升高(P0.01),Ang-2表达有所升高(P0.05);与模型组比较,对照组和大、中剂量治疗组HIF-1α和Ang-1表达均出现显著降低(P0.01),Ang-2表达呈降低趋势。结论芍甘附子汤加味可能通过降低类风湿关节炎滑膜组织HIF-1α、Ang-1和Ang-2的表达,抑制滑膜血管新生,从而起到治疗类风湿关节炎的作用。     

甘草附子汤对佐剂性关节炎小鼠的治疗作用

目的:研究甘草附子汤对佐剂性关节炎(AA)小鼠的作用研究。方法:雄性Balb/c小鼠随机分为6组,为正常组、模型组、雷公藤多苷组、甘草附子汤高、中、低剂量组(3.9,7.8,15.6 g·kg-1),每组12只。除正常组外,采用AA小鼠模型,造模第12天,灌胃给予相应药物,1次/d,连续18 d,观察药物对AA小鼠足肿胀的影响;苏木素-伊红(HE)染色观察踝关节组织病理学改变;通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测AA小鼠血清中的细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)蛋白表达。结果:与模型组比较,甘草附子汤可抑制AA小鼠足肿胀,改变炎细胞浸润,减轻滑膜增生和骨侵蚀,减少AA小鼠血清中炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-6水平(P0.05),降低AA小鼠滑膜中MMP-1和MMP-3蛋白表达(P0.05)。结论:甘草附子汤AA小鼠具有明显治疗作用,其机制可能与降低炎症因子的产生和降低滑膜组织的MMP-1及MMP-3表达有关。     

山药多糖对肾缺血再灌注损伤大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

目的观察山药多糖对肾缺血再灌注损伤大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,并探讨其作用机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、山药多糖组,制备肾缺血再灌注损伤大鼠模型,术前7 d,山药多糖组每日给予山药多糖(200 mg/kg)灌胃,假手术组和模型组每日给予等体积生理盐水灌胃,缺血再灌注6 h后,检测各组大鼠血尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)的含量,Western Blot法检测各组肾组织HIF-1α蛋白表达水平,RT-PCR法检测各组肾组织HIF-1α、VEGF mRNA表达水平。结果与假手术组比较,模型组和山药多糖组血清BUN、SCr含量升高(P0.01),肾组织HIF-1αmRNA、蛋白表达及VEGF mRNA表达升高(P0.01);与模型组比较,山药多糖组血清BUN、SCr含量降低(P0.01),肾组织HIF-1α蛋白、mRNA表达及VEGF mRNA表达升高(P0.01)。结论山药多糖对肾缺血再灌注损伤大鼠具有明显保护作用,其机制可能是通过上调肾组织HIF-1α表达进而诱导VEGF的表达而达到治疗作用。     

艾灸对类风湿关节炎大鼠足趾关节滑膜组织AMPK/ULK1信号通路的影响

目的:观察艾灸对类风湿关节炎(RA)大鼠足趾关节滑膜组织中环磷酸腺苷(AMP)依赖的腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/UNC-51样激酶1(ULK1)信号通路的影响,探索艾灸治疗RA的作用机制。方法:SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、艾灸组、甲氨蝶呤组、雷帕霉素组,每组9只。采用弗氏完全佐剂注射法制备RA大鼠模型。艾灸组艾灸“足三里”“关元”,20 min/次,每日1次。甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤灌胃(0.35 mg/kg),每周2次。雷帕霉素组予腹腔内注射雷帕霉素(1 mg/kg),隔日1次。各组均干预3周。足趾容积测量仪检测大鼠左后肢足趾容积;ELISA法检测大鼠足趾关节滑膜组织中AMP含量;Western blot法检测大鼠足趾关节滑膜组织中AMPK、液泡分选蛋白34(VPS34)蛋白表达量;real-time PCR法检测足趾关节滑膜组织中Atg13、ULK1 mRNA的表达水平。结果:与空白组比较,模型组足趾容积增大(P<0.01),足趾关节滑膜组织AMP含量、AMPK和VPS34蛋白表达量、ULK1和Atg13 mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。与模型...     

新风胶囊对佐剂关节炎大鼠滑膜组织缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子的影响

目的探讨新风胶囊治疗类风湿关节炎抗血管新生的可能作用机制。方法 50只SD大鼠随机为正常对照组、模型对照组、甲氨蝶呤组、雷公藤多苷片组、新风胶囊组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均采用弗氏完全佐剂建立佐剂关节炎大鼠模型。造模后第19天,新风胶囊组给予新风胶囊溶液2.4 g/kg灌胃,雷公藤多苷片组给予雷公藤多苷片溶液10 mg/kg灌胃,均每天1次;甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤溶液3mg/kg灌胃,每周1次;正常对照组、模型对照组给予1.0g/kg生理盐水灌胃,每天1次,各组均灌胃30天。比较各组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数及滑膜组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并进行滑膜微血管密度(MVD)计数。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数升高,滑膜组织MVD计数、VEGF、HIF-1α表达显著升高(P0.01);与模型对照组比较,甲氨蝶呤组、雷公藤多苷片组及新风胶囊组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数降低,滑膜组织MVD计数、VEGF、HIF-1α表达显著降低(P0.05或P0.01);并且新风胶囊组HIF-1α较甲氨蝶呤组、雷公藤多苷片组降低明显,VEGF较甲氨蝶呤组降低明显(P0.05)。结论新风胶囊通过降低大鼠滑膜组织VEGF、HIF-1α的表达发挥抑制滑膜血管新生的作用。     

中药姜黄素对类风湿性关节炎大鼠的抗炎作用

目的研究姜黄素对类风湿性关节炎(RA)大鼠的治疗作用。方法建立RA大鼠模型;分别测定RA大鼠足跖肿胀度、关节炎指数、全血比粘度(WBV)、血浆比粘度(PV)、血清IL-1、PGE2和TNF-α水平以及大鼠滑膜组织中IL-17和TNF-α的表达。结果姜黄素可缓解RA大鼠的足跖肿胀度和关节炎指数(P0.05或P0.01)。与模型组相比,姜黄素处理使RA大鼠WBV和PV下降(P0.05或P0.01),抑制IL-1、PGE2和TNF-α的表达(P0.05或P0.01),下调滑膜组织中IL-17和TNF-α的表达(P0.01),但作用不及阿司匹林对照组(P0.05或P0.01)。结论姜黄素具有抗RA的作用,其机制可能与改善RA大鼠异常的血液流变性以及抑制炎症因子的表达有关。     

艾灸对实验性RA家兔滑膜HIF-1α/VEGF的调节作用

目的观察艾灸对实验性RA家兔滑膜HIF-1α/VEGF通路活性的影响,探讨针灸治疗RA的机制。方法 30只日本大耳白兔,随机分为空白组,模型组和艾灸组。每组10只。将弗氏完全佐剂(FCA)按0.5ml/kg注入模型组、艾灸组动物双膝关节腔内,空白组动物不做处理。艾灸组艾粒灸双侧"肾俞""足三里"穴各5壮,每日1次,6天为1个疗程,共治疗3个疗程,疗程间休息一天。治疗后21天取膝关节滑膜组织。采用HE染色法,切片观察病理形态变化。并根据滑膜组织病变程度分级标准对其进行病理评分。采用RT-PCR法,检测三组家兔滑膜组织中HIF-1α,VEGF蛋白基因表达含量。结果模型组与空白组比较,滑膜组织各项指标病理评分均升高,差异具有统计学意义(P0.01)。艾灸组与模型组相比,各项指标病理评分下降,差异具有统计学意义(P0.05)。模型组与空白组比较,滑膜组织模型组与空白组比较,滑膜组织HIF-1α和VEGF基因表达明显升高,差异有统计学意义(P0.01,P0.05)。艾灸组与模型组相比,滑膜组织中HIF-1α和VEGF基因表达降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论艾灸对实验性RA家兔滑膜HIF-1α/VEGF通路激活有明显抑制作用。     

艾灸对佐剂性关节炎大鼠足趾滑膜组织自噬和凋亡的影响

目的:观察艾灸对佐剂性关节炎(AA)大鼠足趾滑膜组织自噬和凋亡相关指标的影响,探讨艾灸治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组、甲氨蝶呤组、雷帕霉素组,每组9只。采用弗氏完全佐剂注射法制备AA大鼠模型。艾灸组予艾灸“足三里”“关元”,每次20 min,每日1次;甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤(0.35 mg/kg)灌胃,每周2次;雷帕霉素组予雷帕霉素腹腔注射(1 mg/kg),隔日1次;3组均干预3周。采用足趾容积测量仪检测大鼠左后肢足趾容积,ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,透射电镜观察大鼠足趾关节滑膜细胞自噬体,Western blot法检测大鼠足趾滑膜组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)C1、磷酸化(p)-mTORC1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、死亡受体(Fas)、死亡受体配体(FasL)蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠足趾容积增大(P<0.01),血清中IL-1、TNF-α含量显著升高(P<0.001),足趾滑膜组织中p-mTORC1蛋白表达量升高(P<0...     

汝无糯鸡抗类风湿性关节炎的机制

目的:研究彝族药汝无糯鸡对佐剂性关节炎(AA)大鼠模型的滑膜病变及滑膜细胞核转录因子-κB(NF-κB),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9表达的影响,探讨其抗类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分成空白组,模型组,尼美舒利组,汝无糯鸡高、中、低剂量组(按生药量计5.0,2.5,1.25 g·kg-1),采用完全弗氏佐剂建立AA大鼠模型,灌胃给药28 d后取样并处死大鼠,苏木素-伊红(HE)染色光镜下观察大鼠踝关节滑膜组织形态学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清白细胞介素(IL)-1β,IL-6,IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),一氧化氮(NO),前列腺素E2(PGE2)含量,免疫组化法检测大鼠滑膜组织中NF-κB,MMP-2,MMP-9的表达水平。结果:彝族药汝无糯鸡组明显减轻滑膜细胞的异常增殖,减少炎性细胞浸润,各剂量组不同程度降低AA大鼠血清中IL-1β,IL-6,TNF-α,NO,PGE2的含量和升高IL-10的含量,降低关节滑膜组织NF-κB,MMP-2,MMP-9的蛋白含量(P0.05,P0.01)。结论:彝族药汝无糯鸡治疗RA的作用机制可能是通过下调AA大鼠滑膜组织中NF-κB,MMP-2,MMP-9的蛋白表达,抑制炎性细胞因子生成,从而加速细胞凋亡,改善滑膜病变。     

电针对类风湿性关节炎大鼠足趾滑膜组织PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的 观察电针对类风湿性关节炎(RA)大鼠足趾滑膜组织中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)的影响，探索电针治疗RA的作用机制。方法 将45只SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、甲氨蝶呤组、PI3K抑制剂组，每组9只。采用弗氏完全佐剂造模法制备RA大鼠模型。电针组予电针“足三里”“关元”,留针20 min,每日1次；甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤灌胃(0.35 mg/㎏),每周2次；PI3K抑制剂组予BEZ-235灌胃(45mg/kg),每日1次；空白组、模型组大鼠给予艾灸组大鼠同样时长及强度的捆绑操作。各组均干预3周。足趾容积测量仪检测各组大鼠左后肢足趾容积，Elisa法检测血清中IL-2的含量，Western blot法检测大鼠足趾滑膜组织PI3K、Akt、mTOR、p-mTOR、Beclin1蛋白表达水平，RT-PCR法检测滑膜组织ULK1mRNA、Atg13mRNA的表达。结果 与空白组比较，模型组足趾容积增大(P<0.01),IL-2含量显著性升高(P<0.001),PI3K、AKt、p-mTOR蛋白表达量显著性升高(P&...     

刺山柑果风湿止痛贴对类风湿关节炎大鼠滑膜组织MMP-9表达的影响

目的观察刺山柑果风湿止痛贴对类风湿关节炎(RA)大鼠血清TNF-α、IL-1β、VEGF水平以及滑膜组织MMP-9蛋白表达的影响,探讨其对RA软骨保护的作用机制。方法 40只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和刺山柑组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠足跖底部注射完全弗氏佐剂复制RA模型。阳性药组和刺山柑组分别以伤湿止痛膏和刺山柑果风湿止痛贴外敷,模型组以同样方式予以空白凝胶膏剂外敷,正常组不干预;各组均连续干预21 d(3个疗程),观察大鼠AI指数评分、足爪容积和热痛阈,ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-1β和VEGF水平,Western blot法检测滑膜组织中MMP-9蛋白表达。结果与正常组比较,造模后大鼠均出现炎症表现和热痛阈降低,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β和VEGF水平明显升高(P0.05,P0.01),MMP-9蛋白表达显著增高(P0.01)。与模型组比较,阳性药组和刺山柑组的关节炎症和热痛阈敏感均明显改善,且刺山柑果风湿止痛贴的消肿作用起效更快(7 d),并能显著降低大鼠血清VEGF水平和滑膜组织中MMP-9蛋白的表达(P0.05),而阳性药组均无明显变化(P0.05)。结论刺山柑果风湿止痛贴对类风湿关节炎大鼠的消炎止痛作用可能与降低血清TNF-α、IL-1β、VEGF水平,抑制滑膜组织MMP-9蛋白表达有关。     

艾灸对类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织转录信号转导因子1、细胞因子信号负调控因子基因表达的影响

目的:观察艾灸对类风湿性关节炎(RA)大鼠关节滑膜组织转录信号转导因子1(STAT 1)、细胞因子信号负调控因子(SOCS)mRNA表达的影响,进一步探讨艾灸治疗RA的作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、针刺组、红外组,每组8只。采用"病证结合"的造模方法复制RA模型。艾灸组造模3d后开始艾灸两侧"肾俞"穴,针刺组造模3d后开始针刺两侧"肾俞"穴,红外组造模3d后用改装后远红外线理疗仪照射两侧"肾俞"穴,均隔日1次,共治疗10次,每次20min。测量各组大鼠足跖肿胀度,放射免疫法检测血清白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素2(IL-2)的含量,RT-PCR法检测关节滑膜组织STAT 1、SOCS mRNA表达情况。结果:模型组大鼠足跖与踝部呈急性炎性红肿,跖围较正常组明显增粗,血清中IL-1含量升高,IL-2水平降低,关节滑膜组织STAT 1、SOCS mRNA表达下降(均P0.01)。经治疗后,艾灸组、针刺组和红外组跖围减小,血清中IL-1含量降低,IL-2水平升高,关节滑膜组织STAT 1、SOCS mRNA表达明显增加(P0.05,P0.01)。针刺组、红外组IL-2含量,STAT 1、SOCS mRNA表达明显低于艾灸组(均P0.01)。结论:艾灸"肾俞"穴能抑制RA大鼠继发性足肿胀,与其抑制血清中致炎因子IL-1的释放,提高免疫调节因子IL-2含量,增强RA大鼠关节滑膜组织的STAT 1和SOCS mRNA表达有关。     

彝药劳伤药对佐剂性关节炎大鼠滑膜病变及NF-κB蛋白表达的影响

目的:观察劳伤药乙醇浸膏对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜病变及滑膜细胞核转录因子(NF-κB)蛋白表达的影响,探讨其治疗类风湿性关节炎(RA)可能的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分成6组:空白组,模型组,尼美舒利组,劳伤药高、中、低剂量组,采用大鼠右后足趾皮内注射0.l m L弗氏完全佐剂,致炎形成AA模型,给药28 d后处死大鼠,HE染色观察踝关节滑膜组织形态学变化,酶联免疫吸附法测定大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、NO、PGE_2含量,免疫组化法检测滑膜组织中NF-κB的蛋白表达水平。结果:与模型组比较,劳伤药组(5 g/kg)明显减轻滑膜细胞的增生,减少滑膜层和滑膜下层淋巴细胞浸润,明显降低AA大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、PGE_2的含量和升高IL-10的含量,降低关节滑膜组织NF-κB的蛋白含量。结论:劳伤药能下调滑膜组织中NF-κB的蛋白表达,从而促进细胞凋亡,改善滑膜病变。