维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的影响

目的探讨维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达的影响及其治疗支气管哮喘的效果。方法支气管哮喘患儿160例,随机分为观察组和对照组各80例,对照组在常规对症支持治疗基础上给予硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂1揿/次,3次/d,喷吸;观察组在对照组治疗基础上给予维生素D_30.25μg/次,1次/d,口服;2组疗程均为12周。采用ELISA法检测2组治疗前、后血清1,25-二羟维生素D_3[1,25-dihydroxyvitamin D_3,1,25(OH)_2D_3]、白细胞介素(interleukin,IL)-4,IL-10,IL-17水平,采用流式细胞技术检测CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达,比较2组疗效。结果观察组总有效率(96.2%)高于对照组(87.5%)(P0.05);观察组和对照组治疗后CD4~+CD25~+调节性T细胞[(7.56±1.24)%、(5.44±1.34)%]、1,25(OH)_2D_3[(36.06±5.98)、(31.44±6.32)nmol/L]水平均高于治疗前[CD4~+CD25~+调节性T细胞:(3.53±1.03)%、(3.54±1.01)%;1,25(OH)_2D_3:(25.64±5.24)、(25.72±4.65)nmol/L],Th17细胞[(1.94±0.73)%、(2.87±0.97)%],IL-17[(58.26±10.24)、(76.21±9.42)ng/L]、IL-4[(14.26±3.24)、(21.21±4.26)ng/L]及IL-10[(42.44±9.53)、(64.37±11.33)ng/L]水平均低于治疗前[Th17细胞:(4.38±1.68)%、(4.36±1.21)%;IL-17:(110.22±15.32)、(109.24±16.64)ng/L;IL-4:(41.22±9.32)、(41.24±10.64)ng/L;IL-10:(92.43±12.83)、(92.40±10.42)ng/L](P0.05),且观察组治疗后各指标改善较对照组明显(P0.05)。结论补充维生素D_3可提高支气管哮喘患儿临床疗效,其机制可能与上调CD4~+CD25~+调节性T细胞、抑制Th17细胞表达有关。     

脐带间充质干细胞对类风湿关节炎患者免疫系统的作用

目的探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cell,UC-MSC)移植治疗类风湿关节炎的疗效及免疫相关因子变化情况。方法类风湿关节炎患者30例,15例常规药物治疗者为对照组,15例在常规药物治疗基础上加行UC-MSC移植治疗者为观察组,评定2组治疗前、后ACR20临床缓解状况评分、DAS28关节活动度评分及HAQ健康评分,检测治疗前及治疗后3个月患者血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-17、类风湿因子、C-反应蛋白水平及血清CD3~+、CD4~+、CD8~+、B细胞比例,并进行2组间比较。结果治疗前,观察组DAS28评分[(5.12±0.33)分]、HAQ评分[(3.71±0.46)分]、ACR20评分[(6.34±0.74)分]与对照组[(5.09±0.27)、(3.69±0.31)、(6.29±0.61)分]比较差异均无统计学意义(P0.05);治疗后3个月,观察组DAS28评分[(3.84±0.28)分]、HAQ评分[(2.43±0.64)分]、ACR20评分[(3.07±0.38)分]低于对照组[(4.76±0.36)、(3.31±0.52)、(4.87±0.73)分]和治疗前(P0.05),对照组DAS28评分、HAQ评分、ACR20评分与治疗前比较差异无统计学意义(P0.05);治疗前,观察组与对照组TNF-α[(2.19±0.51)、(2.21±0.54)μg/L]、IFN-γ[(9.60±1.34)%、(9.56±1.21)%]、IL-4[(6.91±0.31)、(6.85±0.29)u/mL]、IL-17[(2.51±0.52)、(2.52±0.45)u/mL]、类风湿因子[(198.54±136.32)、(194.81±125.56)u/mL]、C-反应蛋白水平[(32.84±20.25)、(33.74±25.41)mg/L]及CD3~+[(6.07±0.64)%、(6.12±0.61)%]、CD4~+[(3.65±0.34)%、(3.69±0.32)%]、CD8~+[(1.86±0.24)%、(1.87±0.21)%]和B细胞比率[(16.46±2.13)%、(16.72±2.27)%]比较差异均无统计学意义(P0.05),治疗后3个月,观察组IL-4水平[(12.40±0.46)u/mL]、CD4~+比率[(4.82±0.38)%]、CD8~+比率[(2.67±0.32)%]高于治疗前和对照组治疗后[(7.64±0.21)u/mL、(3.94±0.31)%、(2.19±0.31)%],TNF-α[(0.84±0.24)μg/L]、类风湿因子[(94.32±73.75)u/mL]、C-反应蛋白水平[(13.55±11.37)mg/L]低于治疗前和对照组治疗后[(1.67±0.37)μg/L、(167.08±89.17)u/mL、(29.48±18.56)mg/L](P0.05),IL-17水平[(3.02±0.62)u/mL]及IFN-γ[(11.74±1.47)%]、CD3~+[(6.63±0.75)%]、B细胞比率[(12.41±2.93)%]与治疗前及对照组治疗后[(2.76±0.43)u/mL、(10.34±1.04)%、(6.27±0.72)%、(15.24±1.87)%]比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论移植UC-MSC可降低类风湿关节炎患者机体炎性相关因子,提高免疫相关因子水平。     

Graves病患者CD3~+CD56~+自然杀伤T细胞及其分泌的细胞因子表达研究

目的探讨CD3~+CD56~+自然杀伤T细胞(natural killer T cell,NKT)及其分泌的白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)等细胞因子和血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT_3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT_4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)和促甲状腺素受体抗体(thyrotrophin receptor antibody,TRAb)水平在Graves病患者体内表达情况。方法 Graves病患者30例为观察组,同期体检健康者30例为对照组,检测2组外周血CD3~+CD56~+NKT占淋巴细胞比率、CD3~+CD56~+NKT分泌的细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平及血清FT_3、FT_4、TSH、TPOAb、TGAb、TRAb水平。结果观察组CD3~+CD56~+NKT占淋巴细胞总数比率[(1.37±0.43)%]低于对照组[(2.47±0.39)%](P0.05);观察组血清FT_3[(23.76±5.51)pmol/L]、FT_4[(88.29±31.35)pmol/L]、TSH[(1.68±1.01)mu/L]、TPOAb[(293.58±141.32)u/mL]、TGAb[(380.58±215.31)u/mL]、TRAb抗体[(10.75±8.23)u/mL]水平均高于对照组[FT_3(4.79±0.59)pmol/L、FT_4(17.84±3.15)pmol/L、TSH(0.08±0.01)u/L、TPOAb(20.06±4.85)u/mL、TGAb(31.48±22.68)u/mL、TRAb抗体(1.21±0.23)u/mL](P0.05);观察组血清IL-6[(2.51±0.31)μg/L]、IL-10[(43.79±21.54)ng/L]、IL-12[(1 306.14±514.39)ng/L]、TNF-α[(4.38±0.66)ng/L]水平均高于对照组[(1.01±0.20)μg/L、(27.68±5.41)ng/L、(584.34±214.57)ng/L、(2.41±0.81)ng/L](P0.05);观察组IL-2表达水平[(1.26±0.43)ng/L]低于对照组[(4.81±0.71)ng/L](P0.05)。结论 Graves病患者存在免疫功能紊乱情况及免疫调节细胞失衡,通过CD3~+CD56~+NKT减少及其分泌的细胞因子调节Th1/Th2分化,参与Graves病的发病过程。     

强化阿托伐他汀对急性冠状动脉综合征行介入治疗患者内皮细胞微粒和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的影响

目的 探讨强化剂量阿托伐他汀治疗对急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)行经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗患者外周血内皮细胞微粒(endothelial microparticles,EMP)水平和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及细胞因子水平的影响。方法 行PCI治疗的ACS患者104例,根据治疗方法分为阿托伐他汀强化治疗组(强化组)和阿托伐他汀常规治疗组(常规组)各52例。常规组PCI术前、术后均口服阿托伐他汀20mg/d,强化组PCI术前口服阿托伐他汀80mg/d,术后40mg/d。分别于术前、术后1周检测2组外周血EMPs水平、CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达水平,分析EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平的相关性。结果 强化组和常规组术后CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率[(4.62±0.51)%、(3.85±0.60)%]、Foxp3 mRNA[(224.2±10.9)%、(173.7±11.6)%]和TGF-β1[(305.2±33.9)、(214.6±36.1)ng/L]均高于术前[(3.19±0.55)%、(3.25±0.49)%,(99.9±8.2)%、(101.2±9.4)%,(159.8±32.8)ng/L、(167.3±38.2)ng/L],EMPs水平[(1 062.2±336.8)个/μL、(1 387.8±353.6)个/μL]低于术前[(1 661.9±346.5)个/μL、(1 647.4±368.2)个/μL](P0.01),且强化组较常规组变化更明显,差异有统计学意义(P0.01);EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平均呈负相关(r=-0.526,P=-0.000;r=-0.487,P=-0.001;r=-0.581,P=0.000)。结论 强化剂量阿托伐他汀治疗可能通过下调EMPs水平,从而上调CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞和TGF-β1水平,进而减轻炎症反应,稳定斑块。     

肝素雾化吸入治疗喘息样支气管炎反复发作的免疫学机制

目的探讨在常规治疗基础上给予肝素雾化吸入治疗小儿喘息样支气管炎反复发作的疗效及免疫学机制。方法喘息性支气管炎患儿50例,随机分为观察组30例和对照组20例,对照组给予吸氧、抗感染等常规治疗,观察组在对照组基础上给予肝素100u/kg+生理盐水5mL雾化吸入,2次/d,共14d。记录2组喘息时间和肺部啰音时间;分别于治疗前及治疗14d后检测2组血清白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-8、正常T细胞表达分泌的活性调节蛋白(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)、干扰素-γ(interferon-gamma,INF-γ)水平及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率,并与18例体检健康者(阴性对照组)进行比较。结果观察组喘息时间[(4.5±1.1)d]及肺部啰音时间[(6.9±0.8)d]较对照组[(6.6±1.4)、(8.1±0.9)d]短(P<0.01);治疗前,观察组和对照组血清IL-4[(2.45±0.22)、(2.38±0.18)ng/L]、IL-8[(33.90±2.20)、(32.10±2.00)ng/L]、RANTES[(48.8±8.7)、(41.9±9.5)μg/L]水平均明显高于阴性对照组[IL-4(1.41±0.17)ng/L、IL-8(15.60±2.20)ng/L、RANTES(13.3±4.8)μg/L](P<0.01),INF-γ[(0.37±0.14)、(0.38±0.09)ng/L]及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率[(6.4±0.9)%、(5.5±0.8)%]均低于阴性对照组[(1.44±0.20)ng/L、(7.9±1.2)%](P<0.01);观察组治疗后血清IL-4[(1.52±0.13)ng/L]、IL-8[(18.60±2.10)ng/L]及RANTES[(23.1±4.5)μg/L]水平均较对照组治疗后[(1.78±0.16)ng/L)、(22.90±1.20)ng/L、(28.0±6.1)μg/L]降低(P<0.05),观察组治疗后血清INF-γ[(1.46±0.16)ng/L)]及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率[(7.2±0.9)%]均较对照组治疗后[(0.83±0.09)ng/L、(6.4±1.0)%]增高(P<0.05)。结论喘息样支气管炎反复发作患儿在常规治疗基础上给予肝素雾化吸入治疗,可下调血清IL-4、IL-8、RANTES水平,上调INF-γ和CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率,缩短喘息时间及肺部啰音时间。     

肠道病毒性脑炎患儿外周血T淋巴细胞亚群与自然杀伤细胞及相关免疫细胞因子水平变化

目的探讨肠道病毒性脑炎(enteroviral encephalitis,EVE)患儿外周血T淋巴细胞亚群、自然杀伤(natural killer,NK)细胞、相关免疫细胞因子水平变化及其临床意义。方法246例EVE患儿为EVE组,同期体检健康儿童100例为对照组,测定2组外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞、免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)A、IgG、IgM、白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、干扰素-γ(interferonγ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平。结果EVE组CD8^+T淋巴细胞比率[(24.13±9.71)%]、CD3^+T淋巴细胞比率[(61.42±12.26)%]及血清IL-6[(41.63±34.26)ng/L]、TNF-α[(2.92±1.55)ng/L]、IFN-γ[(9.45±4.26)ng/L]水平高于对照组[(20.11±5.98)%、(57.94±10.53)%、(12.45±10.46)ng/L、(2.04±0.73)ng/L、(6.27±3.44)ng/L](P<0.05),CD4^+/CD8^+(1.37±0.75)、CD20^+T淋巴细胞比率[(0.87±0.75)%]、CD3^-CD16^+CD56^+T淋巴细胞比率[(7.87±5.26)%]、IgA[(0.45±0.32)g/L]、IgG[(7.67±1.35)g/L]及血清IL-2[(3.52±1.02)ng/L]水平低于对照组[1.83±1.23、(1.47±1.41)%、(13.23±6.11)%、(1.05±0.22)g/L、(8.02±1.42)g/L、(4.13±1.28)ng/L](P<0.05);EVE组CD4^+T淋巴细胞比率[(28.81±9.56)%]、IgM[(1.35±0.21)g/L、IL-4[(3.17±0.81)ng/L]与对照组[(30.95±9.22)%、(1.34±0.19)g/L、(3.12±0.86)ng/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论T淋巴细胞调节紊乱、体液免疫紊乱可能参与EVE的发病过程。     

乳腺癌患者外周血T淋巴细胞及调节性T细胞的检测意义

目的 探讨乳腺癌患者外周血中T淋巴细胞亚群及调节性T细胞的变化和临床意义.方法 采用流式细胞技术检测30例乳腺癌患者外周血中T淋巴细胞亚群及调节性T细胞的变化,并与健康对照组进行比较.结果 乳腺癌患者外周血CD4+CD25+及CD4+CD25+high调节性T细胞占CD3+CD4+T细胞的比率为(15.52±1.54)%及(3.49±0.54)%,高于健康对照组(6.11±0.72)%及(1.42±0.61)%,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌患者CD3+T淋巴细胞比率为(50.98±6.79)%、CD4+Th细胞比率为(28.37±7.58)%和Th/Ts比值为(1.05±0.38),显著低于健康对照组(67.55±5.98)%、(40.12±5.27)%和(1.59±0.65),差异有统计学意义(均P<0.05),而CD8+Ts细胞比率为(30.05±7.79)%,与健康对照组(29.97±7.14)%比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 乳腺癌患者外周血调节性T细胞水平升高,T淋巴细胞及Th细胞降低可能是乳腺癌患者细胞免疫功能受损的重要原因之一.     

原发免疫性血小板减少症患者外周血Tr1细胞表达

目的探讨原发免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia, ITP)患者外周血1型调节性T(type 1 regulatory T, Tr1)细胞表达及与血小板计数的关系。方法 ITP患者15例为ITP组,同期体检健康者13例为对照组。2组均行血常规检查,记录血小板计数、淋巴细胞计数;采用流式细胞仪检测2组外周血CD4~+T淋巴细胞、Tr1细胞计数,计算Tr1细胞占淋巴细胞百分比(Tr1/Lym)、CD4~+T淋巴细胞占淋巴细胞百分比(CD4~+T/Lym)、Tr1占CD4~+T淋巴细胞百分比(Tr1/CD4~+T);Pearson法分析ITP组Tr1细胞计数与血小板计数的相关性。结果 ITP组Tr1细胞计数[(0.940 9±0.672 2)×10~6/L]、血小板计数[(25.152 6±16.159 0)×10~9/L]、Tr1/Lym[(0.058 3±0.047 7)%]均较对照组[(1.644 0±0.992 6)×10~6/L、(282.738 5±95.414 4)×10~9/L、(0.130 8±0.122 1)%]降低(P0.05),Tr1/CD4~+T[(0.167 5±0.164 0)%]、CD4~+T/Lym[(39.559 4±9.918 4)%]与对照组[(0.383 5±0.382 4)%、(38.810 5±10.152 8)%]比较差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关分析结果显示,ITP组Tr1细胞计数与血小板计数无线性相关(r=0.530,P=0.063)。结论 ITP患者外周血Tr1细胞计数减少,免疫抑制作用减弱,Tr1细胞计数与血小板计数无明显相关。     

再生障碍性贫血患者穿孔素和颗粒酶B表达及意义

目的探讨再生障碍性贫血(aplastic anemia, AA)患者外周血穿孔素及颗粒酶B的表达及其临床意义。方法 AA患者60例,其中重型AA(severe AA, SAA)患者22例为SAA组,非SAA患者38例为非SAA组,选取60例体检健康者为正常对照组;采用流式细胞仪检测3组外周血T淋巴细胞亚群及穿孔素和颗粒酶B表达情况,采用ELISA法检测3组血清穿孔素和颗粒酶B水平,并进行比较。结果 SAA组及非SAA组外周血CD4~+细胞比率、CD4~+/CD8~+和自然杀伤(natural killing, NK)细胞比率均低于正常对照组(P0.05),CD8~+细胞比率高于正常对照组(P0.05)。SAA组和非SAA组CD8~+T淋巴细胞中穿孔素[(17.72±5.53)%、(15.95±6.11)%]和颗粒酶B[(76.91±17.44)%、(69.89±16.69)%]阳性表达率均高于正常对照组[(8.83±4.76)%、(32.57±15.22)%](P0.05),SAA组NK细胞穿孔素[(78.82±9.41)%]和颗粒酶B[(87.66±10.53)%]阳性表达率高于正常对照组[(62.33±5.76)%、(73.15±8.94)%](P0.05);SAA组血清穿孔素[(6 195.26±1 168.35)ng/L]和颗粒酶B[(7.726±2.611)ng/L]水平高于非SAA组[(3 875.77±1 094.68)ng/L、(3.152±1.787)ng/L]和正常对照组[(3 324.92±1 283.51)ng/L、(2.878±0.997)ng/L](P0.05),非SAA组与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 CD8~+T细胞参与了AA的免疫应答,CD8~+T淋巴细胞、NK细胞中穿孔素和颗粒酶B在AA发病中可能起一定作用。     

免疫抑制剂治疗重型再生障碍性贫血患儿的临床效果

目的探讨抗胸腺细胞球蛋白(antithymocyte globulin, ATG)联合环孢菌素A(cyclosporinem, CsA)治疗儿童重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia, SAA)的临床疗效及对患儿免疫功能的影响。方法 66例SAA患儿,46例采用ATG联合CsA治疗者为观察组,20例应用CsA治疗者为对照组。比较2组治疗前,治疗3、6、12个月免疫功能,分别于治疗3、6、12个月评定治疗效果,并记录治疗期间不良反应发生率及病死率。结果观察组治疗3、6、12个月缓解率(65.22%、69.56%、73.91%)高于对照组(35.00%、40.00%、45.00%)(P0.05);观察组治疗3、6、12个月CD8~+T淋巴细胞比率[(33.26±3.25)%、(28.15±3.24)%、(23.15±4.69)%]、IgG水平[(8.22±3.69)、(7.25±2.85)、(6.25±2.45)g/L]低于对照组[CD8~+T淋巴细胞比率:(39.45±2.58)%、(32.64±1.58)%、(30.16±2.45)%;IgG:(9.68±4.12)、(8.63±2.15)、(8.05±1.23)g/L],CD4~+/CD8~+(0.77±0.15、1.15±0.13、1.78±0.22)、IgA水平[(1.25±0.34)、(1.36±0.25)、(1.62±0.48)g/L]高于对照组[CD4~+/CD8~+:0.67±0.22、0.86±0.15、1.06±2.36;IgA:(1.22±0.16)、(1.28±0.26)、(1.45±0.36)g/L](P0.05);观察组治疗6、12个月CD3~+T淋巴细胞比率[(76.18±4.69)%、(78.59±6.58)%]、CD4~+T淋巴细胞比率[(32.36±5.12)%、(41.25±4.25)%]高于对照组[CD3~+T淋巴细胞比率:(74.56±2.36)、(75.69±3.58)%;CD4~+T淋巴细胞比率:(28.46±2.58)%、(32.15±4.26)%](P0.05);观察组治疗12个月不良反应发生率(56.25%)高于对照组(5.00%)(P0.05),病死率(17.39%)与对照组(25.00%)比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 ATG联合CsA治疗可改善SAA患儿免疫功能,其临床效果明显优于单纯CsA治疗。     

整肠生对肝纤维化大鼠肠黏膜屏障及肥大细胞的影响

目的明确整肠生对肝纤维化大鼠肠黏膜屏障是否具有保护作用及对肠黏膜肥大细胞有何影响。方法雄性SD大鼠32只随机分为4组,每组8只:正常对照组、模型组、整肠生低剂量组、整肠生高剂量组。采用经典的硫代乙酰胺(TAA)皮下注射制备肝纤维化模型,整肠生干预组在此基础上给予整肠生活菌制剂灌胃。取血检测血浆内毒素水平、血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平和反映肠黏膜屏障功能的二胺氧化酶(DAO)水平,取肝组织行HE染色,回肠组织行HE染色及甲苯胺蓝染色。结果 9周后模型组、整肠生低和高剂量组大鼠体重增长与正常对照组体重增长相比差异有统计学意义(P<0.01),模型组大鼠体重增长与整肠生低和高剂量组体重增长相比差异无统计学意义(P>0.05);与正常对照组血浆内毒素水平[(0.07±0.03)EU/ml]、血清AST水平[(15.26±1.40)IU/L]、血清DAO水平[(10.65±4.09)U/L]相比,模型组血浆内毒素水平[(0.35±0.19)EU/ml]、血清AST水平[(18.03±1.13)IU/L]和DAO水平[(22.26±6.18)U/L]均升高(P均<0.01);与模型组相比,整肠生低剂量组血浆内毒素水平[(0.11±0.04)EU/ml]、血清AST水平[(15.68±1.52)IU/L]、血清DAO水平[(11.39±5.96)U/L]和整肠生高剂量组血浆内毒素水平[(0.14±0.05)EU/ml]、血清AST水平[(15.28±1.50)IU/L]、血清DAO水平[(12.03±7.37)U/L]均降低(P均<0.01);与正常对照组血浆内毒素水平相比,整肠生高剂量组血浆内毒素水平升高(P<0.01);与模型组相比,肝组织及回肠组织病理改变均减轻,回肠组织肥大细胞数量均减少,脱颗粒现象亦减少。结论整肠生对肝纤维化大鼠肠黏膜屏障具有保护作用,并能减少其肠黏膜肥大细胞的数量及脱颗粒现象,进而减轻肝损伤。     

中性粒细胞CD11b、1,25-(OH)2 VitD3和γ干扰素在小儿轮状病毒性肠炎中的表达及与免疫功能的关系

目的探究中性粒细胞CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、γ干扰素(INF-γ)在小儿轮状病毒性肠炎(PRE)中的表达及与免疫功能的关系。方法采用前瞻性研究方法,选取2017年9月至2019年9月琼海市人民医院收治的90例PRE患儿作为观察组,另选择同期健康体检儿童104例作为对照组。检测对比两组患儿血清CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ水平,Logistic回归分析探究各血清指标与PRE的关系。根据脱水程度分为轻度患儿28例、中度患儿42例、重度患儿20例,比较不同病情患儿血清CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ水平、细胞免疫指标(CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+)、体液免疫指标[免疫球蛋白A(Ig A)、Ig G、Ig M],采用Pearson相关性分析评价血清CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ与细胞免疫、体液免疫的关系。结果观察组患儿的血清CD11b[(86.24±7.16)%]、INF-γ[(3.62±0.72)pg/ml]高于对照组[(69.35±4.42)%、(1.15±0.20)pg/ml],1,25-(OH)_2Vit D_3[(20.75±5.03)pg/ml]低于对照组[(35.66±7.14)pg/ml],差异具有统计学意义(P0.05);Logistic回归分析显示,血清CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ与PRE显著相关,差异具有统计学意义(P0.05);重度患儿血清CD11b[(92.71±6.35)%]、INF-γ[(5.23±1.04)pg/ml]高于中度[(86.23±5.79)%、(3.72±0.65)pg/ml]、轻度患儿[(81.63±4.90)%、(2.32±0.49)pg/ml],1,25-(OH)_2Vit D_3[(18.10±2.16)pg/ml]低于中度[(20.42±2.77)pg/ml]、轻度患儿[(23.14±3.05)pg/ml],差异具有统计学意义(P0.05);重度患儿外周血CD3~+[(48.81±3.44)%]、CD4~+[(22.39±1.80)%]、CD4~+/CD8~+(0.52±0.04)、IgA[(0.92±0.21)g/L]、IgG[(6.48±1.02)g/L]、IgM[(0.48±0.10)g/L]低于中度[(51.06±4.02)%、(23.97±2.25)%、(0.58±0.05)、(1.18±0.26)g/L、(7.75±1.44)g/L、(0.61±0.13)g/L]及轻度患儿[(54.11±4.50)%、(26.08±2.73)%、(0.63±0.07)、(1.47±0.30)g/L、(9.22±1.93)g/L、(0.74±0.15)g/L],差异具有统计学意义(P0.05);血清CD11b(r_1=-0.400;r_2=-0.492;r_3=-0.431)、INF-γ(r_1=-0.406;r_2=-0.529;r_3=-0.577)与CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+呈负相关,1,25-(OH)_2Vit D_3(r_1=0.514;r_2=0.568;r_3=0.502)与CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+呈正相关(P0.05);血清CD11b(r_1=-0.519;r_2=-0.518;r_3=-0.506)、INF-γ(r_1=-0.616;r_2=-0.660;r_3=-0.692)与Ig A、Ig G、Ig M呈负相关,1,25-(OH)_2Vit D_3(r_1=0.669;r_2=0.551;r_3=0.663)与Ig A、Ig G、Ig M呈正相关(P0.05)。结论中性粒细胞CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ与PRE发生及其免疫功能显著相关,可作为预测疾病发生、评估免疫紊乱及病情程度的重要因子。     

骨髓瘤患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞及淋巴细胞亚群的研究

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)调节性T细胞(Treg)及淋巴细胞亚群的比例,初步探讨其在MM患者发生免疫抑制机制中作用。方法采用流式细胞术分别检测65例MM患者和20例健康对照组外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Tregs以及淋巴细胞亚群的比例。结果 MM患者外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Treg比例[(10.85±2.19)%]高于健康对照组[(7.48±1.66)%],差异有统计学意义(P0.01);MM患者外周血中CD3~+CD4~+(Th)细胞的比例[(31.39±5.19)%]低于健康对照组[(36.55±3.02)%],差异有统计学意义(P0.01);MM患者外周血中CD3~+CD8~+(Tc)细胞的比例[(34.80±4.29)%],高于健康对照组[(28.93±3.61)%],差异有统计学意义(P0.01);同时,MM组外周血中Th/Tc的比值(0.95±0.24)低于健康对照组(1.29±0.27),差异有统计学意义(P0.01)。结论 MM患者存在淋巴细胞亚群的比例异常,导致MM患者更易产生免疫功能失调;同时,由于MM患者CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Treg细胞比例的增加可能进一步加剧骨髓瘤患者的免疫抑制,促进了肿瘤细胞的免疫逃逸。     

腺病毒与呼吸道合胞病毒肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群差异分析

目的比较腺病毒(adeno virus,ADV)与呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)肺炎患儿及健康儿童外周血淋巴细胞亚群的百分比例并探讨其临床意义。方法收集2014年1月~2015年12月期间在深圳市儿童医院住院的腺病毒肺炎患儿(ADV组)30例,呼吸道合胞病毒肺炎患儿(RSV组)30例(入选依据:60例病毒感染患儿肺部听诊均可闻及中小湿啰音,肺部X线片有点状或片状阴影,临床诊断为肺炎,直接免疫荧光法检测相关病毒抗原结果为阳性且无其他病原感染的临床及实验室证据)以及健康体检儿童(健康组)35例,应用流式细胞术检测上述研究对象外周血中CD3~+T细胞,CD3~+CD4~+T细胞,CD3~+CD8~+T细胞,CD3~-CD56~+NK细胞及CD3~-CD19~+B细胞的百分比并比较各组间的差异。结果与健康组相比较,ADV组[(55.04±8.45)%vs(69.07±9.30)%,t=3.32,P=0.002]与RSV组[(60.90±11.12)%vs(69.07±9.30)%,t=2.43,P=0.004]的CD3~+T细胞比例均下降,差异具有统计学意义(P0.01),特别是ADV组[(21.26±6.16)%vs(26.97±7.63)%,t=1.87,P=0.04]与RSV组[(21.56±7.06)%vs(26.97±7.63)%,t=1.68,P=0.04]的CD3~+CD8~+T细胞比例明显下降,差异具有统计学意义(P0.05);与此同时,与健康组相比,ADV组[(28.22±5.16)%vs(17.06±6.42)%,t=3.25,P=0.001]和RSV组[(29.14±10.96)%vs(17.06±6.42)%,t=2.79,P=0.009]的CD3~-CD9~+B细胞比例升高,差异具有统计学意义(P0.05)。与健康组[(13.54±5.95)%,t=2.01,P=0.03]及ADV组[(16.26±8.34)%,t=2.89,P=0.005]相比,RSV组的CD3~-CD56~+NK细胞亚群比例[(9.59±5.54)%]下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论腺病毒肺炎和呼吸道合胞病毒肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群比例存在统计学差异,病毒性肺炎患儿体内可能存在免疫应答紊乱。     

腹腔镜下直肠癌手术对免疫平衡及CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+T细胞的影响

目的 通过分别测定腹腔镜手术和开腹手术直肠癌患者Th1/Th2平衡偏移情况及CD4+CD45R细胞的比例变化,以比较两种术式对直肠癌患者免疫功能的影响.方法 分别采用流式细胞学和酶联免疫吸附法方法 检测行腹腔镜下直肠癌手术和常规开腹手术2组患者术前1 d、术后2、7 d的外周血中CD4+IFN-γ+T和CD4+IL-4+T细胞比率及IFN-γ和IL-4血清浓度,同时检测CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞在不同手术影响下的比例变化.结果 开腹组术后2、7 d的Th1细胞[(4.51±1.52)%,(7.26±2.59)%]与术前[(12.06±1.82)%]相比明显减少(P均<0.05),Th2细胞[(6.70±2.41)%,(6.70±2.41)%]与术前[(4.47±1.90)%]相比明显增加(P均<0.05);开腹组术后2、7 d的IFN-γ[(57.15±23.64)ng/L,(72.70±27.31)ng/L]与术前(123.47±32.52)ng/L相比明显下降(P均<0.05),而术后2、7 d的IL-4[(55.55±7.29)ng/L,(57.56±7.13)ng/L]与术前[(41.87±5.83)ng/L]相比明显升高(P均<0.05);腹腔镜组Th1细胞、Th2细胞、IFN-γ和IL-4手术前后数量无明显变化(P均>0.05);术后7 d开腹组CD4+CD45RA+T细胞(35.11±7.82)与术前(31.11±6.72)相比明显增加(P均<0.05),开腹组术后CD4+CD45R O+T细胞(61.21±9.13)较术前(68.11±11.42)减少(P<0.05).结论 腹腔镜下直肠癌手术较开腹手术对机体免疫平衡影响较小,有利于保护直肠癌患者的细胞免疫功能.     

慢性牙周炎患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞表达

目的探讨外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞(Tregulatory, Treg)在慢性牙周炎患者中的表达。方法慢性牙周炎患者40例,其中轻中度组22例和重度组18例;同期31例牙周健康者为对照组。采用流式细胞术检测3组CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg表达;采用ELISA法测定3组血浆转化生长因子-β(transforming grow factor-β, TGF-β)水平;Pearson法分析CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg与CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg,CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与牙周袋探诊深度的相关性。结果轻中度组、重度组CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg[(2.88±1.50)%、(2.52±1.03)%]、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达[(4.42±1.49)%、(3.85±1.02)%]、血浆TGF-β水平[(1 054.18±370.35)、(1 003.78±398.76)ng/L]低于对照组[(3.57±1.11)%、(6.27±1.67)%、(1 296.60±303.17)ng/L](P0.05),轻中度组与重度组比较差异无统计学意义(P0.05);Pearson线性相关分析结果显示,CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达呈正相关(r=0.776,P0.001),CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg均与牙周袋探诊深度呈负相关(r=-0.333,P=0.005;r=-0.551,P0.001)。结论慢性牙周炎CD4~+CD25~+Treg介导的免疫应答减弱,可能促进疾病的发生、发展。     

卵巢癌患者外周血调节性T细胞与TGF-β、IL-10检测及其临床意义

目的探讨卵巢癌患者手术前后及化疗前后外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)比例,与TGF-β1、TGF-β2、IL-10含量变化的意义。方法收集30例卵巢癌患者手术前后及化疗后的外周静脉血。采用流式细胞术检测外周血Treg比例;用ELISA法检测血清中细胞因子TGF-β1、TGF-β2、IL-10的含量,并以同期30例健康体检者为对照组。结果与健康对照组比较,卵巢癌患者CD4~+CD25~+CD127LOW占CD4~+T淋巴细胞的比率、CD4~+CD25~+Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比率及TGF-β1、IL-10含量明显增高、TGF-β2明显降低,差异有统计学意义(P0.01),手术后及化疗后外周血CD4~+CD25~+CD127LOW占CD4~+T淋巴细胞的比率分别为[(1.610±0.465)%],[(1.182±0.195)%],[(1.033±0.210)%];CD4~+CD25~+Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比率分别为[(2.305±0.77)%],[(1.573±0.45)%],[(0.986±0.37)%];细胞因子TGF-β1含量分别为(425.1±239.8)pg/ml,(287.5±239.8)pg/ml,(196.7±192.5)pg/ml;TGF-β2含量分别为(47.76±25.36)pg/ml,(32.22±17.81)pg/ml,(19.59±13.15)pg/ml;IL-10含量分别为(42.13±61.22)pg/ml,(17.34±11.21)pg/ml,(9.67±4.05)pg/ml,手术后及化疗后卵巢癌患者CD4~+CD25~+CD127LOW占CD4~+T淋巴细胞的比率、CD4~+CD25~+Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比率及TGF-β1、TGF-β2、IL-10的含量较术前明显减低(P0.01)。结论卵巢癌患者手术后及化疗后外周血CD4~+CD25~+CD127LOW占CD4~+T淋巴细胞的比率、CD4~+CD25~+Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比率及血清中细胞因子TGF-β1、TGF-β2、IL-10水平明显降低,动态监测它们的水平变化可作为评估卵巢癌患者免疫功能的可靠指标,对其辅助诊断及疗效观察的评价具有重要临床意义。     

颈动脉超声造影及血浆T淋巴细胞亚群在急性冠状动脉综合征中的应用

目的探讨颈动脉超声造影及血浆T淋巴细胞亚群在急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)中的应用价值。方法冠心病患者220例分为ACS组130例和稳定型心绞痛(stable angina pectoris,SAP)组90例,同期住院非冠心病患者50例为对照组。3组均行颈动脉超声造影,采用声学定量分析软件分析颈动脉斑块数目、斑块类型、斑块新生微血管等级评分、斑块峰值强度(peak intensity,PI)、达峰时间(time to peak,TTP)、增强密度(density echo,DE)等指标,采用ELISA法检测3组血浆CD3~+T淋巴细胞、CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T细胞表达水平,计算CD4~+/CD8~+。结果 ACS组和SAP组血浆CD3~+T淋巴细胞[(56.32±9.87)%、(54.33±10.08)%]、CD4~+T淋巴细胞[(36.44±8.12)%、(33.54±7.91)%]及CD4~+/CD8~+(1.84±0.65、1.25±0.57)均高于对照组[(50.37±9.36)%、(28.29±7.23)%、0.97±0.45],且ACS组高于SAP组(P0.05),CD8~+T淋巴细胞[(20.81±6.92)%、(22.76±6.85)%]均低于对照组[(25.38±6.41)%],且ACS组低于SAP组(P0.05);ACS组、SAP组颈动脉软斑比率(55.18%、37.08%)、PI[(0.75±0.09)、(0.58±0.07)cm]、DE[(3.47±0.71)、(2.69±0.65)db/cm2]、斑块新生微血管等级评分[(3.42±0.84)、(1.98±0.67)分]均高于对照组[13.89%、(0.26±0.05)cm、(1.78±0.52)db/cm2、(0.88±0.32)分],且ACS组高于SAP组(P0.05),TTP[(17.04±2.98)、(18.75±3.52)s]均较对照组[(20.57±3.19)s]短,且ACS组短于SAP组(P0.05)。结论颈动脉超声造影及T淋巴细胞亚群有助于发现ACS患者颈动脉内斑块的不稳定状态。     

急性白血病患儿T淋巴细胞亚群及血清白三烯B4含量变化的临床意义

目的 探讨急性白血病(AL)患儿外周血T淋巴细胞亚群和血清白三烯B4含量的变化及临床意义.方法 用免疫荧光流式细胞技术检测40例AL患儿(观察组)及40名正常儿童(对照组)外周血T淋巴细胞亚群CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞水平及自然杀伤(NK)细胞活性;同时采用酶联免疫吸附试验(ELSA)方法检测上述AL患儿与正常儿童血清白三烯B4含量的变化情况.结果 AL患儿CD3+T细胞[(49.51±6.53)%]、CD4+T细胞[(22.15±4.87)%]及CD8+T细胞[(23.41±3.96)%]均低于对照组[分别为(67.63±5.23)%、(34.43±5.07)%(28.17±4.61)%],差异有统计学意义(t=13.698、t=11.047、t=4.953,P＜0.01);AL患儿自然杀伤细胞活性[(5.41±4.25)%]明显低于对照组[(13.10±4.91)%],差异有统计学意义(t=7.498,P＜0.01);而AL患儿血清白三烯B4含量[(25.23±6.24)ng/L]明显高于对照组[(8.28±2.53)ng/L],差异有统计学意义(t=15.921,P＜0.01).结论 AL患儿T淋巴细胞亚群及白三烯B4发生明显改变,对揭示AL发病机制提供重要的理论依据.

Abstract：

Objective To study the changes of T lymphocyte subtype levels and serum levels of leukotriene B4 ( LTB4 )in children with acute leukemia (AL). Methods The activity of T lymphocyte subsets:CD3+ T cells,CD4+ T cells,CD8 + T cell levels and NK cell were detected in 40 cases of AL and 40 control by Flow Cytometry(FCM). The serum level of LTB4 was measured by ELISA in all subjects. Results Compared with normal control , the percentages of CD3 + T cells ( [ 49.51 ± 6.53 ] ％ vs [ 67.63 ± 5.23 ] ％ ), CD4 + T cells ([22.15±4.87]％ vs [34.43 ±5.07]％),CD8+ T cell ([23.41 ±3.96]％ vs [28. 17 ±4.61]％),NK cell ( [5.41 ± 4.25 ] ％ vs [ 13.10 ± 4.91 ] ％ ) were significantly lower in children AL patients, ( Ps ＜0.01 ). However,the serum levels of LTB4 increased significantly in AL patients compared with normal control ( [ 25.23 ± 6.24 ] ng/L vs [ 8.28 ± 2.53 ] ng/L, P ＜ 0.01 ). Conclusion T lymphocyte subtype and serum level of LTB4 showed significant changes in children AL patients compared with normal control, which revealed an important theoretical basis to AL pathogenesis.