益气活血药对心梗后心功能不全大鼠心肌细胞RYR2、SERCA2a及PLB mRNA表达的影响

目的:探讨党参、黄芪、丹参等益气活血药对心梗后心功能不全大鼠心肌细胞RYR2,SERCA2a,PLB mRNA表达的干预作用。方法:SD大鼠42只,冠状动脉前降支结扎术后随机分成3组:假手术组(对照组)、模型组、中药组。模型组和对照组给予生理盐水灌服。中药组给予益气活血中药浸膏灌胃,治疗4周和8周后分别杀死一半大鼠,取出心脏PCR检测RYR2、SERCA2a及PLB mRNA。结果:各组心衰大鼠RYR2、SERCA2a及PLB mRNA的表达较对照组下降,但中药干预4周后中药组RYR2、SERCA2a及PLB mRNA表达较模型组都有明显增高(P<0.05)。中药干预8周后,RYR2、SERCA2a mRNA仍然高于模型组(P<0.05)。结论:党参、黄芪等中药能抑制心梗后心衰大鼠RYR2、SERCA2a及PLB mRNA下降的作用,但缺乏特异性,可能与益气活血药能促进心肌细胞的能量代谢,防止心衰后心肌细胞的凋亡,心室重构有关。     

益气活血药对心肌梗死大鼠心脏蛋白激酶C表达的影响

目的探讨益气活血中药(生脉注射液联合血塞通注射液)对心肌梗死大鼠心脏蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为模型组、假手术组、卡托普利组和益气活血组。结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型(假手术组只穿线,不结扎)。模型组和假手术组给予生理盐水;卡托普利组给予卡托普利片4.39 mg/(kg·d)溶解灌胃;益气活血组给予生脉注射液3.51 m L/(kg·d)联合血塞通注射液17.54 mg/(kg·d)腹腔注射。治疗4周后取材,称重计算心脏质量指数;RT-PCR法检测左心室心肌组织PKC mRNA的表达;Western blot法检测PKC蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组心脏质量指数显著增加(P0.01),PKC的mRNA和蛋白表达亦显著增加(P0.05或P0.01);与模型组比较,益气活血组和卡托普利组心脏质量指数显著降低(P0.05),同时PKC的mRNA和蛋白表达也显著降低(P0.05或P0.01)。结论益气活血药(生脉注射液联合血塞通注射液)可以改善心脏重构,其机制与抑制心肌梗死后心肌组织PKC的高表达有关。     

益气活血法对老龄大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的：研究益气活血法对老龄大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法：用具有益气活血作用的康心颗粒干预老龄大鼠6个月，用DNA末端标记法和流式细胞仪观察大鼠心肌细胞的凋亡。结果：老龄大鼠心肌细胞有典型的凋亡特征，康心颗粒干预后心肌细胞凋亡率显著下降。结论：益气活血法可显著抑制老龄大鼠的心肌细胞凋亡。     

益气活血法对老龄大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:研究益气活血法对老龄大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法:用具有益气活血作用的康心颗粒干预老龄大鼠6个月,用DNA末端标记法和流式细胞仪观察大鼠心肌细胞的凋亡.结果:老龄大鼠心肌细胞有典型的凋亡特征,康心颗粒干预后心肌细胞凋亡率显著下降.结论:益气活血法可显著抑制老龄大鼠的心肌细胞凋亡.     

益气活血中药对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察益气活血中药对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法以高脂高糖饮食负荷腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病心肌病大鼠模型,造模4周后给予益气活血中药灌胃治疗,设空白对照、模型组为对照,4周后观察大鼠一般情况,计算心脏重量指数,采用HE染色光镜下观察心肌病理损害,流式细胞术测定心肌细胞凋亡率。结果与模型组比较,给予益气活血中药各组血糖水平降低、体重增加,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);心肌病理损害减轻,心肌细胞凋亡率降低。结论益气活血中药能改善糖尿病心肌病大鼠一般情况、血糖、体重及心肌组织结构,抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞的凋亡。     

益气活血方对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡影响的研究

目的观察益气活血方对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡和B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-Associated X protein,Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase 3,C-caspase 3)表达情况的影响,探讨益气活血方影响心肌细胞凋亡的作用机制。方法结扎左冠状动脉前降支构建心肌梗死大鼠模型,并随机分为模型组、益气活血组、培哚普利组,假手术组(即对照组,只穿线不结扎),每组大鼠10只。术后第二天开始灌胃给药,以28天作为观察时间点。小动物超声检测各组大鼠心脏结构和功能的变化,HE染色观察心肌组织病理形态变化,TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡指数,Western blot技术检测心肌梗死边缘区Bax、Bcl-2、C-caspase 3蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠左心室射血分数(left venteicular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular shortening fraction,LVFS)均显著降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic dimension,LVESD)、左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)均升高(P<0.01);两用药组LVEF、LVFS相较于模型组均显著升高(P<0.01),LVESD、LVEDD均降低(P<0.01)。与假手术组相比,模型组心肌细胞凋亡指数明显上升(P<0.01);与模型组比较,益气活血组与培哚普利组大鼠心肌细胞凋亡指数明显降低(P<0.01)。Western blot结果显示,模型组大鼠Bax、C-caspase 3表达与假手术组相比均有明显升高(P<0.01),Bcl-2表达及Bcl-2/Bax相较于假手术组有所降低(P<0.01)。与模型组比较,益气活血组大鼠Bax蛋白表达有所下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达与Bcl-2/Bax显著升高(P<0.05,P<0.01),C-caspase 3蛋白表达有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05);相较于模型组,培哚普利组大鼠Bax表达降低(P<0.01),Bcl-2/Bax比值上升(P<0.05),Bcl-2呈升高趋势,C-caspase 3有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气活血方能够提高心肌梗死大鼠心功能,下调促凋亡蛋白Bax的表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值,从而减轻心肌凋亡损伤以保护心脏。     

比索洛尔对高血压左室肥大大鼠心肌细胞GRK2表达的影响

目的观察比索洛尔对大鼠肥大心肌细胞G蛋白受体激酶2（GRK2）的影响,探讨比索洛尔改善心肌重塑的可能机制。方法以自发性高血压心力衰竭大鼠（SHR）为研究对象,通过免疫荧光标记、共聚焦显微镜及Werstern Blot等方法,检测比索洛尔干预后SHR左心室心肌细胞中GRK2的表达及其分布。结果心肌总蛋白中GRK2表达6月龄SHR组和WKY组比较无明显变化（60.7±1.9,62.1±2.2,P〉0.05）,8月龄SHR比6月龄SHR显著增加（78.5±2.1,60.7±1.9,P〈0.05）,均有心肌细胞膜上的聚积,8月龄SHR药物组比非药物组显著减少（65.9±2.2,78.5±2.1,P〈0.05）,心肌细胞膜上聚积减少。结论在心肌肥大的过程中,GRK2表达增加且有心肌细胞膜（闰盘）上的聚积,说明GRK2与心肌肥大关系密切,参与心肌肥大细胞信号途径的调控;比索洛尔抑制心肌细胞GRK2的表达以及细胞膜上的聚积,提示改善心肌肥大细胞信号途径的调控可能是比索洛尔逆转心脏重塑的机制之一。     

益气活血药对心梗后心肌纤维化大鼠不同亚型血小板源性生长因子表达的影响

目的 探究益气活血药对心肌梗死后心肌纤维化大鼠血小板源性生长因子(platelet-derived growth factors,PDGF)表达的影响。方法 结扎左前降支建立心肌梗死大鼠模型,假手术组只穿线,不结扎。术后将成模动物随机分为假手术组、模型组、培哚普利组和益气活血组,每组9只,给予相应药物灌胃治疗28天后,采用超声心动图评价大鼠心脏结构和功能的变化,马松(masson)染色法观察药物对心肌纤维化的影响,蛋白质印迹法(western blot)检测collagenⅠ、collagenⅢ及PDGFs的蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴率(left ventricular fraction shortened,LVFS)均显著降低(P0.01),左室收缩末期内径(left ventricular internal dimension systole,LVIDs)、左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVIDd)、心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)显著升高(P0.01),collagenⅠ、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值和PDGF-B升高(P0.05,P0.01),PDGF-A和PDGF-C显著下降(P 0. 01)。与模型组相比,两给药组LVEF、LVFS均显著升高(P 0. 01),LVIDs、LVIDd、CVF显著降低(P0.01),其中益气活血组collagenⅠ、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值和PDGF-B下降(P0.01),PDGF-A升高(P0.05)。结论 益气活血药作用于血小板源性生长因子能够通过降低PDGF-B减轻MI大鼠纤维化水平,并可上调PDGF-A发挥保护心脏功能的作用。     

益气活血组方对急性心梗模型大鼠SDF-1、CXCR4、VEGF变化的影响

目的观察益气活血组方对AMI大鼠缺血区心肌组织SDF-1、CXCR4、VEGF含量变化的影响。方法 80只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、麝香保心丸组和益气活血组方组,每组20只。根据处死时间再将各组分为3 d,7 d,14 d 3个时相组;药物干预后通过聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠心肌组织SDF-1、CXCR4、VEGFmRNA的表达;Western-blot法检测大鼠心肌组织SDF-1、CXCR4、VEGF蛋白的表达。结果麝香保心丸和益气活血组方表达SDF-1/CXCR4 mRNA水平均与假手术组、对照组比较差异有统计学意义(P0.05),麝香保心丸与益气活血方比较,其表达SDF-1/CXCR4 mRNA水平差别不大(P0.05)。麝香保心丸组表达CXCR4 mRNA水平高于益气活血组方组(P0.05)。益气活血组方组、麝香保心丸干预组较假手术组和模型组的CXCR4和SDF-1蛋白表达量明显增高(P0.05)。结论益气活血组方对急性心肌梗死模型大鼠有较好的治疗作用,其作用机理可能是通过增加VEGF和CXCR4、SDF-1来发挥促进毛细血管新生、EPCs动员和趋化的作用。     

三七总皂苷对新生大鼠心肌细胞肥大的影响及机制

目的在原代培养的新生大鼠心肌细胞上,观察三七总皂苷对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大的影响。方法采用MTT法检测细胞毒性;采用相差显微镜测量细胞大小,3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率作为心肌细胞肥大的指标;RT-PCR检测心肌细胞原癌基因c-fos mRNA的表达。结果三七总皂苷能抑制AngⅡ诱导的心肌细胞增大,蛋白质合成速率的显著增加及心肌细胞原癌基因c-fos mRNA表达的增强,其效果与AngⅡ受体阻滞剂缬沙坦相似。结论三七总皂苷可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,这与其抑制了原癌基因c-fos的表达有关。     

益气活血方对气虚血瘀型心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察自拟益气活血方对慢性气虚血瘀型心力衰竭大鼠心肌凋亡及其心室重塑的影响。方法将60只SD大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型组、依那普利组、益气活血方组,每组15只。前两组给予等量的生理盐水灌胃,每日1次,后两组分别给予上述相应的药物治疗。各组大鼠分笼饲养,自由饮食。经过一系列措施在实验结束后观察对比4组血清AngⅡ、TNF-α、IL-6表达水平以及阳性反应面积率的差异。结果与模型组相比,益气活血方组、依那普利组均可有效降低大鼠血清AngⅡ、TNF-α、IL-6的水平(P0.05),且益气活血方组与依那普利组的AngⅡ、TNF-α、IL-6的水平无明显差异;与模型组相比,依那普利组、益气活血方组细胞凋亡的阳性反应面积率均降低(P0.01);益气活血方组细胞凋亡的阳性反应面积低于依那普利组(P0.05)。结论益气活血方对气虚血瘀型心衰大鼠的心功能有改善作用,其作用机制可能于抑制AngⅡ、TNF-α、IL-6达水平有一定的相关性。     

益气活血药对心肌梗死大鼠心脏结构和Cx43表达的影响

目的 探讨益气活血药对心肌梗死（myocardial infarction,MI）大鼠心脏结构及心肌电偶联的关键结构缝隙连接蛋白43（connexin 43,Cx43）表达的影响.方法 结扎雄性SD大鼠冠状动脉前降支建立MI模型,将30只MI大鼠随机分为模型组、益气活血组（参芍片0.25 g/kg联合复方丹参片0.75 g/kg）和倍他乐克组（12 mg/kg）,每组10只,于造模成功后24 h开始灌胃,1次/日,连续4周.另设假手术组10只,给予等量去离子水灌胃.4周后取材进行苏木素-伊红染色观察心肌组织病理,图像分析测量左室内径和心肌梗死百分比,免疫组织化学法检测心肌Cx43的表达.结果 与假手术组比较,术后4周模型组大鼠左室内径明显增大,心肌Cx43表达的平均光密度值（average optical density,AOD）、阳性表达面积（Area）和积分光密度（integral optical density,IOD）明显降低（P〈0.01）.与模型组比较,益气活血组和倍他乐克组的左室内径和心肌梗死百分比均明显减少（P〈0.05或P〈0.01）,在心肌Cx43的表达上,仅益气活血组心肌Cx43表达的AOD和IOD明显增加（P〈0.05或P〈0.01）.结论 益气活血治疗能减少MI大鼠左室内径和心肌梗死百分比,增加心肌Cx43表达强度和部分好转Cx43弥散表达状态,对MI后缺血心肌有保护作用,可能是稳定MI后心肌细胞间电偶联的机制之一.     

益气活血方对大鼠心肌梗死后心肌肥大的影响及作用机制

目的 观察益气活血方对大鼠心肌梗死后心肌肥大的影响,探究其作用机制.方法 采取结扎大鼠冠状动脉的方法建立心肌梗死动物模型,将其随机分为模型组、益气活血药组、酒石酸美托洛尔组,另设假手术组,每组9只,术后第二天开始灌胃,干预治疗7天后,采用小动物超声检测大鼠心脏结构和功能的变化,苏木精—伊红(hematoxylin-eo...     

益母草水苏碱对大鼠心肌细胞肥大的肌浆网钙摄取能力的影响

目的：探讨益母草水苏碱（stachydrine,Sta）对去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）诱导的新生大鼠心肌细胞肥大肌浆网钙摄取能力的影响。方法：采用不同浓度的益母草水苏碱（10-4、10-5、10-6mol/L）对NE诱导的心肌肥大模型组进行干预,通过大鼠心肌肌浆网的蛋白水平和钙摄取能力来反映益母草水苏碱对NE诱导的新生大鼠心肌细胞肥大的影响。结果：益母草水苏碱能够明显减少心肌细胞蛋白含量,降低Protein/DNA比值;益母草水苏碱可剂量依赖地提高NE诱导的心肌肥大细胞的肌浆网钙摄取功能。结论：益母草水苏碱对NE诱导的心肌肥大细胞的肌浆网钙摄取功能有一定的程度的提高,与剂量有一定的依赖关系,随着益母草水苏碱的浓度的提高,肌浆网的钙摄取速率也明显提高。     

葛根素对PMA诱发心肌细胞肥大的影响

 目的 利用体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞,探讨葛根素(puerarin,Pue对PKC通路的激动剂(佛波醇酯,PMA所致心肌细胞肥大的抑制作用和与蛋白激酶C(PKC,c-fos之间的关系。方法 新生大鼠心肌细胞培养,除对照组外,分别给予PMA(均为10-7mol·L-1、PMA+Pue（其中Pue按浓度分为10-8mol·L-1,10-7mol·L-1,10-6mol·L-1、PMA+10-5mol·L-1白屈菜季氨碱(chelerythrine,Che,观察Pue对培养心肌细胞体积、总蛋白质含量、3H-亮氨酸的掺入、PKC活性及c-fos的影响。结果 PMA组的上述指标与对照组相比显示心肌肥厚模型制备成功(P<0.01;Pue可显著减少肥大心肌细胞的蛋白质含量、心肌细胞体积、3H-亮氨酸的掺入、PKC活性及c-fos的表达,且与che无明显差异。结论 Pue抑制心肌肥大可能与PKC和c-fos有关。     

心衰康颗粒对心梗后大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白的影响

凋亡是不同于坏死的一种重要的病理现象，研究发现心肌梗死后不仅有心肌细胞死亡，心肌细胞凋亡也是心肌细胞的一种重要死亡形式，二者均可导致心肌有效收缩成分的减少，最终造成心功能下降和左室重构形成。细胞凋亡具有非常复杂的分子调控机制，研究报道Bcl-2和Bax基因是主要的调控基因，Bcl．2抑制心肌细胞凋亡，Bax促发心肌细胞凋亡。     

益气活血方对心梗后大鼠血小板聚集率和APTT、PT、TT的影响

目的:观察益气活血方对心梗后大鼠血小板聚集率和部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)的影响,探讨其防治心梗的作用机制。方法:建立心梗模型后,分为5组,灌胃3个月,于腹主动脉采血测定血小板聚集率和APTT、PT、TT。结果:益气活血方能明显抑制心梗后大鼠血小板聚集率,延长APTT、PT、TT(P<0郾05),且大剂量组明显优于模型组和小剂量组(P<0郾05),但大剂量组与卡托普利组无显著性差异(P>0郾05)。结论:益气活血方具有抑制血小板聚集功能、降低血小板聚集率、延长APTT、PT、TT等作用,这可能是临床上使用益气活血方防治心血管疾病的机制之一。     

川芎嗪在逆转心肌细胞肥大过程中对心肌细胞线粒体结构和功能的影响

目的探讨心肌肥大过程中有关心肌细胞线粒体结构和功能的改变,以及川芎嗪的保护作用。方法提取和培养乳鼠心肌细胞,并与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)共培养72、96h。通过BCA法检测细胞总蛋白含量,倒置显微镜拍摄并测量细胞直径,反映心肌细胞增殖情况;通过荧光显微镜测量线粒体内膜膜电位,酶标仪检测线粒体单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性,分光光度计检测线粒体细胞色素C氧化酶(cytochromec oxidase,COX)活性和线粒体损伤百分率等反映心肌细胞线粒外膜结构和内外膜功能的损伤。在此基础上给予川芎嗪与对照药缬沙坦,分析其对心肌细胞重构中线粒体结构和功能的药理作用。结果在72、96h时,模型组较空白组心肌细胞总蛋白含量均增加(P<0.01),心肌细胞直径均增大(P<0.01)。在该增殖过程中,心肌细胞MAO活性和线粒体外膜损伤百分率均显著升高(P<0.01),COX线粒体细胞活性和线粒体膜电位均显著减低(P<0.01)。与模型组同期比较,川芎嗪在72、96h时能显著减少心肌细胞总蛋白质含量及心肌细胞直径,并显著降低心肌细胞MAO活性,提高线粒体COX活性,改善线粒体外膜损伤百分率和内膜膜电位,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论在心肌肥大过程中,存在线粒体的结构和功能的损害;川芎嗪在逆转AngⅡ所引起的心肌细胞肥大的过程中具有保护心肌细胞线粒体结构和功能的作用。     

细辛含药血清对大鼠心肌细胞钠通道的影响

目的研究中药细辛舍药血清对大鼠心肌细胞钠通道的影响,在离子通道水平揭示细辛抗缓慢型心律失常作用的可能机制。方法用原代培养的方法获得单个心肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录心肌细胞钠通道电流加入含药血清前后的变化。结果25％细辛舍药血清对钠通道的激活曲线、1-V曲线均有影响。结论细辛含药血清对心肌细胞钠通道电流有增强作用。