电纺载盐酸四环素的聚乳酸-聚乙醇酸纳米纤维膜制备以及性能表征

背景：由于良好的疗效和较低的不良反应,局部药物控制释放系统防止感染正在引起越来越多的关注。而静电纺丝制得的高分子纳米纤维,是一种良好的载药材料。 目的：使用静电纺丝技术制备载不同含量盐酸四环素的聚乳酸-聚乙醇酸载药纳米纤维膜,着重观察其抑菌性能和细胞相容性。 方法：以15~20 kV的电压,0.3~0.5 mL/h的流速使用静电纺丝技术制备载不同含量盐酸四环素的聚乳酸-聚乙醇酸载药纳米纤维膜。通过扫描电镜观察纳米纤维膜的形貌。检测载药率,绘制药物释放曲线,并用改良的Kirby-Bauer实验来观察载药纳米纤维膜的体外抑菌性能。用MG-63细胞来检测纳米纤维膜的生物相容性。 结果与结论：载不同含量盐酸四环素的聚乳酸-聚乙醇酸载药纳米纤维直径均在360~470 nm之间。且载药率都可以达到80%以上。载药量为10%的纳米纤维突释最大。载药纳米纤维膜可以有效的抑制金黄色葡萄球菌的生长但是对于MG-63细胞的黏附和增殖没有明显的不良影响。相比较而言,载药量为3%和5%的载盐酸四环素纳米纤维膜对于防止引导组织再生术后感染而言是较好的选择。 关键词：盐酸四环素;聚乳酸-聚乙醇酸;静电纺丝;纳米纤维;载药 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.018     

脂质体介导CD基因转染SHG-44胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的以含胞嘧啶脱氨酶（CD）基因的pCMVCD重组表达质粒转染SHG-44胶质瘤细胞，体外观察5-氟胞嘧啶（5-FC）对转染CD基因的胶质瘤细胞的凋亡诱导作用。方法体外扩增、酶切鉴定pCMVCD质粒并采用DNA序列测定pCMVCD质粒中的CD基因；脂质体Lipofectamine 2000介导pCMVCD质粒转染SHG-44细胞，G418筛选培养获取抗性细胞克隆（即SHG-44／CD细胞）；免疫细胞化学检测SHG-44／CD细胞的CD基因蛋白水平表达；流式细胞仪、TUNEL实验及透射电子显微镜观察5-FC对表达CD基因的SHG-44／CD细胞凋亡的诱导作用。结果含CD基因的pCMVCD质粒成功转染进入SHG-44细胞，获取了含CD基因的SHG-44／CD细胞，免疫细胞化学染色显示SHG-44／CD细胞成功地表达了CD。在含5-FC的培养液中培养，SHG-44／CD细胞出现典型的凋亡形态，TUNEL显示凋亡细胞比例极高；透射电镜可见凋亡改变；流式细胞术检测凋亡率达18．6％，凋亡率呈剂量依赖性。结论建立了SHG-44恶性人脑胶质瘤细胞的CD／5-FC自杀基因系统。诱导SHG-44／CD胶质瘤细胞产生凋亡可能是脑胶质瘤CD基因疗法的重要机制。     

包载雷帕霉素聚乳酸-聚乙醇酸纳米粒子的制备、表征及体外释放试验**☆

背景：新型可生物降解多聚物纳米控释载药制剂能显著改善药物穿透组织能力、再分布时程和滞留时间，可能克服载药基质对血管修复的负性影响，有望避免药物洗脱支架晚期支架内血栓。 目的：制备雷帕霉素-聚乳酸-聚乙醇酸纳米粒子（rapamycin poly(lactic-co-glycolic) acid nanoparticles, RPM-PLGA-NPs）并观察其表征及体外控释性能。 设计、时间及地点：单一样本实验于2003-03/09在中国医学科学院,中国协和医科大学,生物医学工程研究所生物医学材料重点实验室完成。 材料：聚乳酸-聚乙烯醇酸共聚物50∶50由美国Birmingham Polymers 公司提供。 方法：以可生物降解高分子材料聚乳酸-聚乙醇酸共聚物作载药基质，超声乳化-溶剂挥发法制备RPM-PLGA-NPs，采用双室扩散池行体外药物释放试验。 主要观察指标：测定平均载药量、平均包封率；激光光散射实验测定纳米粒子的粒径及分布；扫描电镜观察纳米粒子的表面形态；高效液相色谱法计算体外药物释放量、绘制累积释放曲线。 结果：成功制备了平均粒径为246.8 nm的RPM-PLGA-NPs，平均粒径246.8 nm，粒径分布集中在208~294 nm，呈窄分布；包封率大于77%,平均载药量为19.42%。体外释放近似于零级过程，至2周释放75％的药物。 结论：超声乳化-溶剂挥发法制备RPM-PLGA-NPs稳定可靠，包封效率高，载药量控制稳定，粒径小、范围窄，体外释放药物恒定、具有良好的控释效能。     

FasL基因诱导胶质瘤细胞凋亡和抑制作用的研究

目的：探讨FasL基因诱导胶质瘤细胞凋亡和抑制增殖的作用。方法：脂质体介导FasL基因转染TJ905胶质瘤细胞系，原位杂交，FasL免疫组化鉴定转染成功,应用MTT法、Ki-67免疫组化检测TJ905细胞的增殖变化，TUNEL法检测细胞凋亡。结果：FasL基因转染成功后，肿瘤细胞内FasL表达增加，细胞增殖率降低，而凋亡细胞数增多。结论；FasL基因诱导的细胞凋亡可能成为胶质瘤治疗的新途径之一。     

U-251人星形细胞瘤系的体外热化疗试验

目的 探讨热疗、化疗及两者序贯治疗对脑胶质瘤细胞增殖的影响.方法 体外传代培养的人星形细胞瘤系U-251细胞分别通过42℃、44℃高热环境和化疗药物顺铂、鬼臼噻吩甙在37℃恒温箱中孵育1 h;另取星形细胞瘤系U-251细胞同时行热疗和化疗联合应用1 h;再取星形细胞瘤系U-251细胞行序贯治疗,即先用1种处理方法,然后间隔1 h、4h,间隔期间在37℃恒温箱中孵育.治疗后采用MTT法测定肿瘤细胞增殖情况并进行统计学分析.结果 不同温度的热疗和不同种类的化疗药物对肿瘤细胞均可产生有效的杀伤作用,细胞增殖率明显下降.热化疗联合应用较单独应用能明显增加其抗肿瘤的效果,序贯治疗中可见44℃热疗+化疗组、44 ℃热疗后间隔1 h再行化疗组,其抗肿瘤的效果明显强于其他序贯处理组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 热化疗能有效杀伤肿瘤细胞,联合应用具有协同效应.两种治疗措施序贯治疗可见44 ℃高热预处理能提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,但化疗药物的预处理效果相对较差,故该协同效应的机制可能是由于高热损伤了肿瘤细胞膜结构从而增加了药物的穿透所致.     

可生物降解高分子超细纤维PLA药物缓释体作用于脑胶质瘤的体外研究

目的比较可生物降解药物缓释体与单纯抗瘤药物体外抗胶质瘤细胞的作用。方法通过MTT法筛选药物敏感浓度后，应用化学电纺锤工艺将聚乳酸（PLA）与卡氮芥、阿霉素、紫杉醇制成缓释体，并应用高效液相色谱仪测定其缓释率，筛选缓释效果好的缓释体。体外利用L929细胞在空载体浸出液培养后测定吸光度值（OD值），计算相对增殖率（RGR），按六级评分标准评价空载体毒性，0～1级无毒性；利用C6胶质瘤细胞在药物缓释体中培养后计算细胞抑制率（IR）验证药物缓释体的缓释杀瘤效果。结果卡氮芥-PLA缓释体、阿霉素-PLA缓释体缓释平稳，紫杉醇-PLA缓释体缓释效果差并有暴释。空载体毒性为0～1级。卡氮芥-PLA缓释体平稳释放后细胞抑制率为12．3％。结论载体材料无毒性作用，卡氮芥-PLA缓释体缓释效果好，体外杀瘤平稳、持续杀瘤．可进一步通过体内动物实验验证其有效性．     

阿霉素-透明质酸纳米颗粒对口腔鳞状细胞癌细胞的作用*★

背景：透明质酸具有与受体特异结合的特性，将其与阿霉素联合制成纳米粒，可以充分发挥药物靶向作用，降低药物的毒副作用。 目的：探讨阿霉素-透明质酸纳米颗粒于体外靶向杀伤口腔鳞状细胞癌的作用。 设计、时间及地点：体外对比观察实验，于2008-01/07在中国海洋大学药理学实验室完成。 材料：人舌癌T8113细胞株由上海第九人民医院陈万涛教授惠赠，阿霉素-透明质酸纳米粒由中国海洋大学海洋生命学院惠赠。 方法：在体外培养的口腔鳞状细胞癌细胞中分别加入阿霉素质量浓度为0. 5，1.0，5.0，10.0 mg/L的阿霉素-透明质酸纳米颗粒，利用体外细胞毒实验四甲基偶氮唑蓝法检测阿霉素-透明质酸纳米颗粒对肿瘤细胞的靶向杀伤作用；阿霉素质量浓度为5.0，10.0 mg/L时分别作用0，6，12，24，48 h后，利用流式细胞仪检测其对肿瘤细胞凋亡的作影响。 主要观察指标：①细胞生存率。②细胞凋亡率。 结果：24，48 h 细胞毒试验阿霉素-透明质酸纳米颗粒对肿瘤细胞的杀伤作用优于游离阿霉素(t=5.78~42.05, P < 0.01) 。相同浓度阿霉素-透明质酸纳米颗粒细胞凋亡百分率随时间增加而升高(F=4 200.40，4 775.36, P < 0.01)，相同作用时间凋亡率随浓度增加而升高(t=12.06~20.08，P < 0.05)。 结论：阿霉素-透明质酸纳米颗粒可特异性识别肿瘤细胞，并实现其杀伤作用，并随时间延长增加杀伤作用。     

可注射生物降解聚合物聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸温敏凝胶的体外释药行为

背景：蓖麻毒素具有强烈的细胞毒活性，但缺乏特异性，全身用药可导致严重毒副作用，采用缓释载体包载进行间质化疗可达到提高肿瘤局部治疗效应，并且避免全身毒性的效果。 目的: 制备可注射可生物降解的聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸温敏型凝胶，观察其作为蓖麻毒素缓释载体的体外药物释放行为。 设计、时间及地点：对比观察实验，于2007/08-12在福建医科大学医药生物工程中心完成。 材料:蓖麻毒素由福建省超声医学研究所纯化，纯度达95%。DL-丙交酯、L-乙交酯由北京元生融科技有限公司提供。 方法：采用开环聚合法合成聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸聚合物。 主要观察指标：试管翻转法测定相转变温度，高效凝胶渗透色谱法测定相对分子质量，核磁共振推测聚合物嵌段比例，酶联免疫吸附法测定凝胶包载蓖麻毒素的体外释放行为，高效液相色谱法检测释放蓖麻毒素结构完整性，MTT法测定体外释放蓖麻毒素的细胞毒活性。 结果:合成的聚合物具有反向热敏性，质量浓度为230 g/L时的相转变温度为26 ℃。聚合物质均分子质量为8 027，数均分子质量为 6 643，多元分散系数为1.17, 聚乙二醇与聚乳酸嵌段比例约为3∶2。载药凝胶在体外持续释放蓖麻毒素达18 d，并且较好地保持了蓖麻毒素结构稳定性和细胞毒活性。 结论：合成的聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸聚合物是蓖麻毒素较理想的药物缓释载体。     

生物素化聚乙二醇/聚乳酸纳米粒子的体外主动靶向行为

背景：目前研究的大部分高分子药物载体没有靶向性,在应用上有局限性,只有几个国外课题组报道生物素化聚乙二醇/聚乳酸(Biotin-PEO-PLA)纳米粒子的体外靶向行为,国内没有这方面的研究报道。 目的：分析Biotin-PEO-PLA纳米粒子作为靶向药物载体的可行性。 方法：透析法制备包埋紫杉醇的Biotin-PEO-PLA纳米粒子并表征;通过高效液相色谱研究包埋紫杉醇的Biotin-PEO-PLA纳米粒子的体外释放行为;利用细胞毒性法比较研究生物素-亲和素三步法实施的包埋紫杉醇的Biotin-PEO-PLA纳米粒子对OVCAR-3(表面表达CA-125抗体)和SKOV-3(表面不表达CA-125抗体)细胞的体外靶向行为。 结果与结论：包埋在Biotin-PEO-PLA纳米粒子中的紫杉醇的释放呈现初期的快速释放以及随后的缓慢释放。利用三步法处理的OVCAR-3细胞存活率明显低于SKOV-3细胞,表明通过Biotin-PEO-PLA/avidin/biotinylated MAB X306与OVCAR-3细胞表面CA-125抗原的特异性相互作用,包埋紫杉醇的Biotin-PEO-PLA纳米粒子被更为有效地传递进了OVCAR-3细胞。     

辣椒碱载药纳米微球抗脑胶质瘤作用的实验研究

目的探讨聚己内脂-聚乙二醇二嵌段共聚物(m PEG-PCL)制备的辣椒碱纳米微球的理化性质,通过实验评价其抗胶质瘤效果。方法通过开环聚合法和溶剂分散法制备负载辣椒碱的纳米微球,应用负载荧光素纳米粒子的肿瘤细胞摄取实验以及辣椒碱纳米微球的细胞毒性实验。结果实验显示载药微球具有缓释特性,细胞可通过胞吞作用将纳米微球摄入,负载NIR-797纳米微球可以很好地透过血-脑屏障,辣椒碱纳米微球对U251细胞的生长有明显的抑制作用。结论 m PEG-PCL为载体的辣椒碱纳米微球能够有效抑制胶质瘤细胞增殖,为脑胶质瘤药物治疗提供了一条极有前途的治疗途径。     

九节龙皂苷诱导胶质瘤SHG-44细胞凋亡及其机制研究

目的研究九节龙皂苷对胶质瘤SHG-44细胞潜在的治疗作用及其机制。方法用四甲基偶氨唑蓝（MTT）法检测不同剂量九节龙皂苷于不同时间（6、12、24、72h）对人胶质瘤SHG-d4细胞活性的影响和细胞流式术检测SGH-44细胞调亡情况;Western—blot检测caspase-3和Bcl-2在SHG-44细胞中的表达情况。结果流式细胞仪检测显示,随着九节龙皂苷浓度的增大和时间延长,SHG-44细胞的凋亡率明显上升,Western—blot结果提示九节龙皂苷下调了凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达并激活了凋亡蛋白caspase-3,九节龙皂苷明显抑制SHG-44细胞的生长与增殖。结论九节龙皂苷引起胶质瘤细胞大量凋亡,具有显著的抗肿瘤作用,通过调控caspase-3和Bcl-2诱导胶质瘤SHG-44细胞凋亡。     

过表达钙整合素结合蛋白CIB诱导SHG44胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的 观察CIB基因对人胶质瘤SHG44细胞体外生长和细胞凋亡的影响.方法 构建重组质粒pcDNA3-CIB,转染人胶质瘤细胞株SHG44,MTT观察各组细胞的体外生长情况,流式细胞术(FCM)测定各组细胞的细胞周期和凋亡细胞数量,Western-blot检测CIB转染后凋亡相关蛋白的表达变化.结果 RT-PCR、Western印迹显示pcDNA3-CIB转染组CIB的mRNA及CIB蛋白表达水平明显高于对照组;与对照组细胞相比,转染CIB的SHG44-CIB组细胞牛长明显减缓(P＜0.01),SHG44-CIB组细胞G_1、S期细胞减少,G_2期细胞增多,凋亡细胞增加至19.2%;凋亡相关蛋白Bcl-2表达下调,Bax表达上调.结论 CIB在体外明显抑制SHG44细胞的生长并诱导其发生凋亡,CIB诱导的凋亡可能与Bcl-2及Bax表达的变化相关.     

Comparative characterization of cellular and molecular anti-restenotic profiles of paclitaxel and sirolimus. Implications for local drug delivery

Pleiotropic anti-restenotic properties of drugs that are eluted from coated stents are critical for efficacy and safety. Little is known about comparative drug properties in appropriate human coronary target cell lines for the two compounds that are utilized on FDA-approved drug-eluting stent (DES) platforms, paclitaxel (PTX) and sirolimus (SRL). Target cell lines that play a pivotal role for the pathogenesis of restenosis and vascular healing include human coronary artery smooth muscle (CASMC) and endothelial cells (CAEC). PTX and SRL inhibited CASMC and CAEC proliferation and migration efficiently. However, there was a differential effect on proliferation and migration in CAEC with a more profound inhibition of both parameters by PTX, even at low dosages. Induction of cytotoxicity and apoptosis was pronounced in PTX- and very modest in SRL-treated CASMC and CAEC. PTX increased eNOS activity and nitric oxide (NO) release from CAEC. Neutrophilic leukocyte activation and transmigration, which should be avoided since it may precipitate adverse coronary events such as restenosis and stent thrombosis, was suppressed by SRL, whereas PTX tended to increase neutrophilic leucocyte activity. Therefore, although the primary drug target, inhibition of mitogen-mediated CASMC proliferation, is effectively accomplished by both drugs, auxiliary pharmacological properties that are crucial for the anti-restenotic drug effect and vascular healing are considerably different between PTX and SRL. In comparison with PTX, SRL shows minor interference with endothelial cell proliferation and migration, lower levels of cytotoxicity and apoptosis, a broader therapeutic range and distinctive immunosuppressive properties.     

华蟾素诱导人胶质瘤U87细胞凋亡的作用机制研究

目的 探讨华蟾素(Cinobufacini)对人胶质瘤U87细胞凋亡的促进作用及其机制。方法 将体外培养的胶质瘤U87细胞分为对照组、华蟾素组(依华蟾素水平不同分为3个亚组),MTT法测定细胞增殖率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,Hoechst 33258核染色法观察细胞核凋亡,透射电镜观察细胞形态学的变化,Western blot法检测胶质瘤U87细胞内Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9的蛋白表达水平。结果 华蟾素对胶质瘤U87细胞增殖有抑制作用; 流式细胞仪及Hoechst 33258核染色法的检测显示,随着华蟾素作用浓度的递增,胶质瘤U87细胞凋亡率呈剂量依赖性递增; 华蟾素作用后可使Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9蛋白的表达水平升高。结论 华蟾素通过改变Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9蛋白的表达水平来抑制胶质瘤U87细胞增殖并促进其凋亡。     

Antitumor effect and peritumoral brain edema formation in relation to MX2, ACNU,and doxorubicin therapy: A comparative analysis using rodent models of gliomas

Abstract

The potential antitumor effect of MX2, a new lipophilic morpholino anthracycline, was compared with those of ACNU or doxorubicin (DOX) using two different rodent glioma models. A mouse subcutaneous glioma model (203 glioma) was used to measure the effect of each drug on reducing the glioma size and a rat 9L intracerebral glioma model (9L glioma) was used to assess the antitumor effect on survival rate in a clinically similar fashion. Treatment with ACNU inhibited tumor growth by 94.6% ip ? 0.0001) and complete regression of the tumor was observed in 3 of 25 (12.0%) of the ACNU-treated cases. Tumor growth was inhibited by 32.4% with DOX despite a tendency (p?0.16) and by 59.4% with MX-2 7p ? 0.001); neither of these drugs resulted in complete tumor regression. In the intracerebral glioma rats, only ACNU tended to ameliorate survival rate, but there was no statistical significance. These results suggest that ACNU has the most potent effect but MX2 can be an option for chemotherapy of malignant gliomas. Interestingly, all three drugs significantly elevated the brain water content on both the ipsilateral and contralateral sides of the tumor, although they did not induce brain edema in the normal rat brains. Careful management of brain edema might be required regardless of the drug used during chemotherapy to maximize the prognosis of glioma patients. [Neurol Res 2000; 22: 819-824]     

华蟾素对人脑胶质瘤细胞SHG44增殖及凋亡的影响

目的初步探讨华蟾素对人脑胶质瘤细胞SHG44增殖、细胞周期分布及凋亡的影响机制。方法利用MTT法、流式细胞仪检测华蟾素对人脑胶质瘤细胞SHG44增殖及细胞周期变化的影响。AO／EB染色、透射电镜观察人脑胶质瘤细胞SHG44凋亡细胞形态学的变化。Westernblot检测Bcl-2与Caspase8蛋白的表达。结果华蟾素（1μg／ml、10μg／ml）对细胞株增殖具有显著抑制作用（P〈0．05）,并呈时间和浓度依赖性。沆式细胞仪检测可见凋亡峰,Go／G。期细胞明显增多（P〈0．05）;华蟾素作用后可使Bcl-2蛋白表达降低．Caspase8蛋白表达升高。结论华蟾素可调控人脑胶质瘤细胞SHG44的周期进程,诱导Bcl-2及Caspase8差异性表达,且具有抑制肿瘤细胞增殖及促凋亡的作用。     

白藜芦醇抑制SHG-44胶质瘤细胞生长实验研究

目的探讨白藜芦醇(Res)在体外诱导脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡并抑制其生长的作用。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测量不同剂量的Res作用6h、24h和48h后对SHG-44胶质瘤细胞增殖的影响。HE染色、Hoechst33342荧光染色观察细胞形态改变,DNAladder检测细胞DNA裂解情况,流式细胞仪用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(AnnexinV-FITC)和碘化丙啶(PI)双染检测凋亡率,并测定细胞周期的改变。结果Res明显抑制SHG-44细胞的生长和增殖(P<0.01),呈浓度及时间依赖性反应;Res所致的SHG-44胶质瘤细胞凋亡为浓度依赖关系,随着浓度的增高,凋亡更明显。此凋亡细胞周期主要发生G1期比例升高,S、G2期比例降低。结论Res明显抑制SHG-44细胞生长并诱导其发生凋亡和细胞周期改变,为Res用于治疗脑胶质细胞瘤提供了实验依据。     

铜绿假单胞菌制剂对大鼠C6胶质瘤细胞作用的体外机制研究

[摘要] 目的 初步探讨铜绿假单胞菌制剂（PA-MSHA）对体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞的增殖抑制机制。方法 体外培养大鼠C6胶质瘤细胞, MTT比色法测定不同时间、不同浓度PA-MSHA对C6胶质瘤细胞的增殖抑制率。Hochest 33258染色,荧光显微镜下检测细胞凋亡,流式细胞仪检测PA-MSHA对C6细胞周期的影响。结果MTT比色法结果提示,细胞生长抑制率与药物作用时间和剂量正相关。24小时和48小时IC50值分别为(5.80±1.79)× 108cfu/ml和(3.90±2.14) × 108cfu/ml。Hochest33258染色可见明显的细胞凋亡形态学改变,流式细胞仪检测,药物作用组可见典型的亚二倍体峰即凋亡峰（AP）,且随浓度加大S期比例明显增多。 结论 铜绿假单胞菌(PA-MSHA)制剂对体外培养的C6胶质瘤细胞具有增殖抑制作用,且呈时间剂量依赖性。其机制可能与诱导细胞凋亡及S期阻滞有关。     

Ginkgo biloba extract regulates differentially the cell death induced by hydrogen peroxide and simvastatin

Several human diseases have been associated with the overproduction of reactive oxygen species (ROS) and subsequently various antioxidants emerged as potential therapeutic agents that scavenge ROS. As an oxidative stress model of human disease, we used hydrogen peroxide (H2O2) to study effect of ROS on C6 glioma cells as a surrogate for astrocytes. H2O2 induced dose- and time-dependent apoptotic cell death which was preceded by growth arrest, and transiently activated the signalling proteins ATF-2, ERK1/2 and AKT in C6 glioma cells. While several antioxidants failed to block H2O2-induced apoptosis of these cells, Ginkgo biloba extract (EGb) totally prevented the cell death and growth inhibition induced by H2O2. Interestingly, EGb did not prevent the activation of ATF-2, ERK1/2 and AKT induced by H2O2 excluding the role of these factors in the pro-apoptotic effect of H2O2. We have previously shown that the lipid-lowering drug, simvastatin, causes apoptotic cell death in C6 glioma cells [Koyuturk M, Ersoz M, Altiok N. Simvastatin induces proliferation inhibition and apoptosis in C6 glioma cells via c-jun N-terminal kinase. Neurosci Lett 2004;370(2-3):212-7]. However, in parallel experiments with H2O2, EGb was unable to prevent cell death induced by simvastatin suggesting the involvement of separate signalling pathways between H2O2 and simvastatin. Thus, EGb and other plant flavonoids might have potential as protective agents against apoptosis through scavenging ROS upon cerebral or myocardial diseases associated with free radical generation.     

RNA干扰XBP1基因表达对人胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨X-盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)对人脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法 设计并合成干扰XBP1表达的小干扰RNA(siXBP1),转染人脑胶质瘤U251细胞,MTT 法检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡,Western blot法检测Bax、Caspase-3及Bcl-2的表达水平。结果 siXBP1可有效抑制U251细胞增殖,促进细胞凋亡,Western blot显示,siXBP1上调了U251细胞中促凋亡信号分子Bax及Caspase-3的表达,抑制了U251细胞中抗凋亡信号分子Bcl-2的表达。结论 下调脑胶质瘤细胞XBP1基因表达有望为脑胶质瘤的治疗提供理想的分子靶点。