巯亚硝基卡托普利对环匹阿尼酸引起的平滑肌细胞胞浆游离Ca2+浓度升高作用的影响

目的探讨巯亚硝基卡托普利(S-nitrosocaptopril,CapNO)对Ca 2+池操纵性Ca2+内流信号转导过程的影响.方法以Fura-2 荧光探针测定胞浆游离Ca2+ 浓度([Ca2+]i ).结果①CapNO(20～120 μmol·L -1)呈浓度依赖性抑制环匹阿尼酸(cyclopiazonic acid, CPA)引起的 [Ca2+]i升高,80 μmol·L-1 CapNO为最大效应浓度.相同浓度的captopril对CPA升高[Ca2+ ]i无明显抑制作用.②在80 μmol·L-1 CapNO抑制CPA引起[Ca2+]i升高作用的基础上(31%±11%);随后加入1 μmol·L-1硝苯地平不能降低[Ca2+ ]i,再加入20 μmol·L-1SK&F96365(最大效应浓度)可进一步降低 [Ca 2+]i(54%±18%),其中SK&F96365净抑制率为24%±10%,与SK&F96365单独作用抑制率(54%±11%)比较差异有显著性.③不同顺序给予最大效应浓度CapNO(80 μmol·L -1)和tyrphostinAG490(2 μmol·     

S—nitrosocaptopril抑制大鼠主动脉平滑肌细胞Ca^2＋池操纵性Ca^2＋内流

Ｎｏｍｕｒａ等的研究表明 :高血压大鼠肌浆网Ｃａ2 ＡＴＰ酶转运功能障碍 ,使由电压依赖性Ｃａ2 通道 (ｖｏｌａｇｅ ｄｅｐｅｎ ｄｅｎｔＣａ2 ｃｈａｎｎｅｌ,ＶＤＣＣ)和Ｃａ2 池操纵性Ｃａ2 通道 (ｓｔｏｒｅ ｏｐｅｒａｔｅｄＣａ2 ｃｈａｎｎｅｌ,ＳＯＣＣ)开放的机率增加[1,2 ] 。Ｓ ｎｉ ｔｒｏｓｏｃａｐｔｏｐｒｉｌ(ＣａｐＮＯ)是我们近年合成的一种一氧化氮供体类舒血管药。ＣａｐＮＯ作为外源性一氧化氮供体是直接作用于血管平滑肌的活性物 ,对正常和不同类型高血压大鼠均表现明显的剂量依赖性的降压效应[3] 。本文以…     

Bcl-2蛋白对环匹阿尼酸诱导CHO细胞凋亡的保护作用

Hoechst 33258染色和DNA电泳分析揭示了内质网钙泵抑制剂环匹阿尼酸(CPA)呈浓度依赖性地诱导CHO细胞凋亡, 表现出染色体固缩和DNA片断形成的典型特征. Bcl-2的过度表达对CPA诱导的CHO细胞凋亡具有保护作用. 采用Fura-2技术测定细胞内游离钙浓度(［Ca²⁺］_i)变化，观察到Bcl-2对CPA触发的细胞Ca²⁺库Ca²⁺释放无任何影响. 结果表明Bcl-2蛋白对CPA诱导的CHO细胞凋亡的保护作用不是通过抑制CPA诱导的Ca²⁺释放，而是作用于［Ca²⁺］_i升高的下游途径.     

环匹阿尼酸对一氧化氮、硝普纳和8－溴鸟苷环一磷酸松弛家兔主动脉作用的影响

环匹阿尼酸对一氧化氮、硝普纳和８－溴鸟苷环一磷酸松弛家兔主动脉作用的影响罗大力，杨宝峰，李光泽（哈尔滨医科大学药理教研室，哈尔滨１５００８６）硝酸酯类血管扩张剂对心绞痛和顽固性心衰等疾病的治疗发挥十分重要的作用。其松弛血管平滑肌的机理与内源性血管平滑...     

谷氨酸对牛大脑中动脉平滑肌细胞胞浆静息Ca^2＋和ATP触发的Ca^2＋内流的影响

目的：观察谷氨酸对牛脑中动脉平滑肌细胞有无直接的激动作以及对ATP触发的Ca^2 内流有无影响？方法：采用Fura-2荧光法测定胞浆内Ca^2 变化技术。在培养的乳牛大脑中动脉平滑肌细胞上观察药物作用。结果：谷氨酸（10－200μmol.L^-1）不能增加或减少细胞胞浆静息游离Ca^2 浓度（[Ca^2 ]i)和ATP触发的Ca^2 内流（谷氨酸：10－400μmol.L^-1）。结论：谷氨酸对大脑中动脉平滑肌细胞信息Ca^2 水平和Ca^2 内流均无直接的影响。谷氨酸可能没有直接与脑血管张力的调节。     

牛磺酸对H2O2引起的大鼠血管平滑肌细胞核[Ca^2＋]及细胞浆[Ca^2＋]变化的影响

目的 毒性剂量H2O2可引起细胞坏死或凋亡,此过程是否与H2O2引起的核[Ca^2 ][Ca^2 ]n变化有关未见报导。本文研究牛磺酸对H2O2引起的血管平滑肌细胞（VSMC）[Ca^2 ]n与胞浆[Ca^2 ][Ca^2 ]c）的变化影响。方法 应用激光共聚焦显微镜对负载Fluo-3的培养在大鼠VSMC的[Ca^2 ]n及[Ca^2 ]c变化进行研究。结果 在0．5％H2O2作用下,[Ca^2 ]n及[Ca^2 ]c持续升高,用抗氧化细胞保护剂－牛磺酸20mmol.L^-1预处理细胞,可降低H2O2引起的[Ca^2 ]n升幅（P＜0．05）,但不影响[Ca^2 ]c升幅（P＞0．05）,表明[Ca^2 ]n变化与[Ca^2 ]c变化对牛磺酸反应性存在差异。结论 VSMC的核Ca^2 调控与胞浆Ca^2 调控各自具有一定的独立性。牛磺酸对H2O2引起的大鼠VSMC核Ca^2 的变化具有保护作用。     

卡托普利和依那普利拉对分离的大鼠心肌细胞内游离Ca^2＋浓度的影响

目的：研究转换酶抑制剂卡托普利（Ｃａｐ）和依那普利拉（Ｅｎａ）对ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠心肌细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度的影响，方法：用荧光探针Ｆｕｒａ２－ＡＭ结合计算机图象处理技术测定分离心肌细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度，结果：ＳＨＲ心理细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度（１７４±５ｎｍｏｌ．Ｌ＾－１）较ＷＫＹ大鼠（１４８±１５ｎｍｏｌ．Ｌ＾－１）高（Ｐ〈０．０１），Ｃａｐ和Ｅｎａ能明显降低ＳＨＲ心肌细胞内游离Ｃａ＾２     

Cl^—1通道阻断剂对A10细胞α1—AR介导的Ca^2＋内流的影响

目的在胚胎大鼠主动脉平滑肌细胞(A10),探讨Cl-通道与Ca2+内流的关系及酪氨酸磷酸化对Ca2+内流的作用.方法采用Fura-2荧光探针双波长测定胞浆游离Ca2+浓度([Ca2+]i).结果Ca2+通道阻断剂nifedipine和SK&F96365可阻止肾上腺素(Adr)触发的Ca2+内流;氯通道阻断剂niflumicacid(NFA)和furosemide呈浓度依赖性抑制Ca2+内流.在Ca2+内流被SK&F96365最大限度抑制后,NFA和furosemide可进一步抑制Ca2+内流;而Ca2+内流被NFA和furosemide分别最大抑制28%和35%后,SK&F96365也可进一步抑制Ca2+内流达53%和52%.genistein呈浓度依赖性抑制Ca2+内流;vanadate浓度依赖性促进Ca2+内流.结论在A10细胞,肾上腺素受体触发的Ca2+内流涉及电压依赖性Ca2+通道(VDC)和受体操纵性Ca2+通道(ROC);氯通道参与了VDC及ROC介导的Ca2+内流;蛋白酪氨酸磷酸化的水平影响Ca2+内流.     

蛋白酪氨酸激酶抑制剂对脑血管平滑肌细胞Ca~(2+)池操纵性Ca~(2+)内流的影响

目的　研究蛋白酪氨酸激酶和蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂对牛脑血管平滑肌细胞 (CSMC)Ca2 + 池操纵性Ca2 + 内流的影响。方法　采用培养的CSMC ,在生物荧光双波长影像分析系统用Fura 2 /Am荧光探针测定单个细胞内游离Ca2 + 浓度。结果　 (1)蛋白酪氨酸激酶抑制剂 (genistein ,2 5 ,5 ,10 μmol·L-1)能浓度依赖性降低内皮素 1(ET 1,10 -7mol·L-1)刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,抑制率分别为5 6%± 2 .9%、2 5 6%± 3 9%、48 9%± 3 7% ;蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂 (vanadate ,2 ,4,8μmol·L-1)能浓度依赖性升高CPA刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,增加比率分别为8 2 %± 3 9%、18 8%± 4 9%、46 6%± 6 9% ;(2 ) genistein(2 5 ,5 ,10 μmol·L-1)能浓度依赖性降低ATP(10 μmol·L-1)刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,抑制率分别为 6 7%±2 6%、2 4 6%± 6 5 %、5 1 3 %± 6 9% ;vanadate (2 ,4,8μmol·L-1)能浓度依赖性升高ATP刺激引起的CSMCCa2 +内流 ,增加比率分别为 4 8%± 2 0 %、2 8 5 %± 4 6%、49 6%± 3 3 % ;(3 ) genistein (2 5 ,5 ,10 μmol·L-1)能浓度依赖性降低环匹阿尼酸 (Cyclopiazonicacid ,CPA ,10 μmol·L-1)刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,抑制率分别为 6 5 %± 3 0 %、2 2 5 %± 5 2 %、     

小檗胺对ATP诱导的培养平滑肌及心肌细胞内游离钙动员的影响

目的:研究小檗胺(Ber)对ATP诱导的细胞内钙动员的作用。方法:以Fura 3-AM负载培养的VSMC和心肌细胞,共聚焦技术检测细胞内钙荧光强度的变化。结果:(1)ATP使VSMC和心肌细胞内钙升高,但VSMC核区不明显。(2)Ber对静息荧光强度无影响,但降低ATP升高的胞内钙(P<0.01),Ber 100μmol·L~(-1)延长达峰值的时间(P<0.01),并不能完全抑制ATP升高的胞内钙。(3)在无外钙时,Ber对ATP诱导的胞内钙升高无抑制作用(P>0.05)。(4)Ber的作用与维拉帕米(Ver)相似。结论:ATP引起细胞外钙内流和内钙释放,Ber可阻断ATP引起的外钙内流,对其内钙释放无影响。     

牛磺酸对H-2O_2引起的大鼠血管平滑肌细胞核[Ca~(2+)]及胞浆[Ca~(2+)]变化的影响

目的　毒性剂量H2 O2 可引起细胞坏死或凋亡 ,此过程是否与H2 O2 引起的核 [Ca2 +]([Ca2 +]n)变化有关未见报导。本文研究牛磺酸对H2 O2 引起的血管平滑肌细胞(VSMC) [Ca2 +]n 与胞浆 [Ca2 +]([Ca2 +]c)的变化影响。方法　应用激光共聚焦显微镜对负载Fluo 3的培养大鼠VSMC的 [Ca2 +]n 及 [Ca2 +]c 变化进行研究。结果　在0 5 %H2 O2 作用下 ,[Ca2 +]n 与 [Ca2 +]c 持续升高 ,用抗氧化细胞保护剂 牛磺酸 2 0mmol·L-1预处理细胞 ,可降低H2 O2 引起的 [Ca2 +]n升幅 (P <0 0 5 ) ,但不影响 [Ca2 +]c 升幅 (P >0 0 5 ) ,表明 [Ca2 +]n 变化与 [Ca2 +]c 变化对牛磺酸反应性存在差异。结论　VSMC的核Ca2 +调控与胞浆Ca2 +调控各自具有一定的独立性。牛磺酸对H2 O2 引起的大鼠VSMC核Ca2 +的变化具有保护作用     

GDP对柴胡皂甙(Ⅰ)促大鼠胰腺腺泡酶分泌和升高[Ca~(2 )]_i的影响

目的:研究鸟苷二磷酸(GDP)对柴胡皂甙(Ⅰ)[SA(Ⅰ)]刺激大鼠胰腺腺泡酶分泌和胞内钙离子升高的影响。方法:分离大鼠胰腺腺泡细胞,用链球菌溶血素-O(SLO)通透细胞膜,检测腺泡分泌蛋白量标志腺泡酶分泌功能。用钙离子荧光指示剂Fluo-3和荧光光谱测定胞内钙离子浓度。结果:GDP可抑制SA(Ⅰ)促胰腺腺泡的酶分泌作用,抑制作用随剂量增加而加强;SA(Ⅰ)10μmol/L以双峰值为特征使[Ca~(2 )]_i显著上升;GDP5mmol/L,导致[Ca~(2 )]_i逐步升高且两个峰值消失。细胞通透以后,与正常细胞相比,SA(Ⅰ)刺激的30min酶分泌的累积量下降了57％;GDP5mmol/L使SA(Ⅰ)刺激的早期酶分泌速率进一步降低。结论:GDP通过抑制细胞[Ca~(2 )]_i的升高抑制了SA(Ⅰ)刺激的胰腺腺泡酶分泌作用。     

钙和钙调素与血管平滑肌细胞的增殖

采用MTT法,一种快速和不用放射物的新方法测定血管平滑肌细胞的增殖。本法与[~3H]TdR参入法和细胞计数法之间均有良好的线性关系。人胚和家兔主动脉平滑肌细胞的增殖依赖于FCS和Ca~(2+)。在FCS存在下,Ca~(2+)可促使细胞进入增殖周期和增加G_1晚期CaM含量;TFP可完全逆转Ca~(2+)的作用;阻断Ca~(2+)内流也能抑制细胞增殖;说明Ca~(2+)-CaM可刺激血管平滑肌细胞增殖,可能通过触发DNA合成所致。     

小檗胺对高钾、去甲肾上腺素及咖啡因引起大鼠心肌细胞内钙动员的拮抗作用(英文)

目的:研究小檗胺(Ber)对氯化钾、NE及咖啡因引起大鼠培养心肌细胞[Ca~(2 )]_i动员的影响,方法:Fluo 3-AM负载后,共聚焦法测定心肌细胞[Ca~(2 )]_i荧光强度的变化。结果:Ber对心肌细胞静息[Ca~(2 )]_i水平无影响,但可剂量依赖性地抑制KCl60mmol·L~(-1)及NE 30 μmol·L~(-1)引起的内钙动员(P<0.01),此作用与维拉帕米相似.Egtazic acid3 mmol·L~(-1)并不能增强Ber对NE引起的[Ca~(2 )]_i升高的抑制作用,无外钙时,咖啡因80-160μmol·L~(-1)的[Ca~(2 )]_i动员不受Ber的影响(P>0.05),结论:Ber与维拉帕米相似,对大鼠心肌细胞靠电压依赖性和受体操纵性钙通道而升高的胞[Ca~(2 )]_i有拮抗作用,并不影响[Ca~(2 )]_i释放。     

超氧阴离子对培养的牛动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响

目的研究超氧阴离子对牛主动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响。方法采用Ｆｕｒａ－２测定牛肺动脉平滑肌细胞内钙及采用胶原凝胶实验方法分析平滑肌细胞的收缩性。结果超氧阴离子作用于平滑肌细胞后使ＡＴＰ（１０μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导的细胞内钙浓度的增加从（２０６± １０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１降到（１４７±１５） ｎｍｏｌ·Ｌ－１。 ５ ｍｉｎ内细胞内钙浓度增加的积分（∫　△［Ｃａ２＋］ｉ·ｄｔ）从（１２．２± ０．５）μｍｏｌ· Ｌ－１·ｓ－１降至（９．８± ０．８）μｍｏｌ·Ｌ－１·ｓ－１。ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ在无钙溶液中诱导的细胞内钙浓度的增加不受超氧阴离子的影响,而在含钙的Ｋｒｅｂａ溶液中,超氧阴离子能使随后的钙释放激活的钙进入（△［Ｃａ２＋］ｉＣＲＡＣ）从（２７．３ ±１．０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１降到（１３．５ ±１．０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１。ＡＴＰ诱导的凝胶面积减少的百分比从２４％±５％降到 ７．４％ ±０．２％;在无钙 Ｋｒｅｂｓ溶液中,ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ诱导的凝胶面积减少的百分比从 ３．５％± ０．６％降到－０．５％±０．７％。结论超氧阴离子通过影响平滑肌细胞的内钙动员而降低它的收缩性。     

卡托普利对血管平滑肌细胞结构和钙的影响

为调查卡托普利（Ｃａｐ）的特殊血管效应和探讨其机制，用电镜和图象技术观察口服Ｃａｐ对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）超微结构和Ｃａ２＋的影响。用Ｃａｐ治疗ＳＨＲ１６ｗｋ，降低主动脉中膜厚度（１０４．７±６．６μｍｖｓ１３５．７±８．１μｍ）和改善ＡＳＭＣ的异常超微结构征象如异形核、线粒体肿胀和管状结构扩张以及降低ＡＳＭＣＣａ２＋浓度。故Ｃａｐ有阻止ＳＨＲ主动脉中膜肥厚和改善ＳＨＲＡＳＭＣ异常性超微结构的特殊血管效应。而降ＡＳＭＣＣａ２＋可能部分与它的特殊效应有关。