大鼠实验性牙髓炎组织中炎症信号血管粘附分子-1的表达及意义

目的 观察血管粘附分子1(VCAM-1)在正常大鼠牙髓及大鼠实验性牙髓炎中的表达情况,探讨其在实验性牙髓炎中的作用.方法 应用开髓暴露法建立大鼠实验性牙髓炎模型,采用免疫组化法及图像分析技术检测正常牙髓组、牙髓炎1h组、1d组、3d组、5d组、7d组中VCAM-1的表达情况.结果 正常牙髓组织中存在VCAM-1,VCAM-1在实验组比正常组阳性表达增强,光密度值增高,实验组第1天第达到高峰,到第7天逐渐减少,总体差异有统计学意义.结论 与正常牙髓组织相比,炎症牙髓组织中VCAM-1表达增强,提示VCAM-1在牙髓炎发展过程中起一定作用.     

巨噬细胞炎性蛋白1α mRNA在人炎症牙髓组织中的表达及意义

目的:探讨炎症牙髓中巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)的表达,揭示MIP-1α在牙髓炎发生及发展中的可能作用.方法:选择正常牙髓组织及炎症牙髓组织各4例,采用HE染色观察正常牙髓组织及牙髓炎牙髓组织形态学改变,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测正常牙髓组织及牙髓炎牙髓组织中MIP-1α的表达.结果:正常牙...     

Cryopyrin在大鼠实验性牙髓炎中的表达

目的:建立大鼠实验性牙髓炎模型,了解Cryopyrin在大鼠牙髓组织的表达情况。方法:30只SpragueDawley大鼠随机分为0,1,3,5,7d5组。除0d组外,其余四组大鼠双侧下颌第一磨牙开髓后暴露于口腔环境中,分别于开髓后1,3,5和7d处死大鼠,分离双侧下颌骨。常规组织学处理后HE染色观察牙髓炎症状况,免疫组化检测Cryopyrin在牙髓炎中的表达及定位。结果:大鼠正常牙髓组织成牙本质细胞层Cryopyrin阳性表达,牙髓内部血管内皮细胞偶见表达,牙髓成纤维细胞未见表达。炎性牙髓组织血管内皮细胞表达增加,牙髓成纤维细胞及多种炎症细胞均有阳性表达,且表达的数量和牙髓的炎症浸润强度显著正相关(r=0.655,P<0.01)。结论:Cryopyrin在牙髓组织中表达并在牙髓炎的发生发展中起着重要作用。     

牙髓炎模型大鼠血清褪黑素水平及其对牙髓炎症反应的抑制作用

目的：探讨牙髓炎大鼠血清褪黑素水平对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1（NLRP3/caspase-1）信号通路的影响,阐明褪黑素对牙髓炎的作用机制。方法：将130只大鼠随机分为对照组（n=40）、牙髓炎组（n=60）和牙髓炎+褪黑素组（n=30）,其中30只牙髓炎大鼠随机分为牙髓炎1 d组、牙髓炎3 d组和牙髓炎5 d组,采用开髓暴露法建立牙髓炎大鼠模型,牙髓炎+褪黑素组大鼠开髓术后腹腔注射褪黑素。HE染色确定各组大鼠牙髓炎建模情况,ELISA法检测各组大鼠血清白细胞介素1β（IL-1β）和褪黑素水平以及牙髓组织中IL-1β水平,RT-PCR法检测各组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1蛋白表达水平。结果：HE染色,对照组大鼠牙髓组织正常,牙髓炎组大鼠牙髓有脓腔形成,可见大量炎性细胞聚集。牙髓炎1 d和3 d组大鼠血清IL-1β水平明显高于对照组（P<0.05）,褪黑素水平明显低于对照组（P<0.05）;牙髓炎3 d组大鼠血清IL-1β水平明显低于牙髓炎1 d组（P<0.05）,褪黑素水平明显高于牙髓炎1 d组（P<0.05）;牙髓炎组和牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中IL-1β水平明显高于对照组（P<0.05）,且牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中IL-1β水平明显低于牙髓炎组（P<0.05）;牙髓炎组和牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组（P<0.05）,且牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1mRNA和蛋白水平明显低于牙髓炎组（P<0.05）。结论：牙髓炎大鼠血清褪黑素水平降低,褪黑素可通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路降低牙髓炎大鼠牙髓组织的炎症反应。     

单核细胞趋化蛋白1在牙髓中的免疫组化研究

目的:探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在牙髓炎发生、发展中的作用机理,为揭示MCP-1对牙髓炎性疾病发生、发展的作用提供依据。方法:采用免疫组织化学方法检测正常人及急、慢性牙髓炎患者牙髓组织中MCP-1的表达。结果:MCP-1在正常牙髓组织中无表达,在炎症组织中有不同程度的表达。     

牙髓炎患者牙髓组织中单核细胞趋化蛋白1的表达及意义

目的:探讨牙髓炎患者牙髓组织中单核细胞趋化蛋白1 （MCP-1）的表达,揭示MCP-1在牙髓炎性疾病发生、发展中的作用机理。方法：应用免疫组织化学方法检测MCP-1在正常人健康牙髓（正畸或烤瓷牙需要拔髓者）、急性及慢性牙髓炎患者牙髓组织(各30例)中的分布。结果:在健康牙髓组织中未发现MCP-1表达阳性细胞。在急性牙髓炎症组织中,可见大量的中性粒细胞游出血管并向炎症中心趋化,MCP-1阳性细胞主要分布于中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞, 阳性细胞平均灰度值119.73±17.12。在慢性牙髓炎症组织中,可见血管内皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、成纤维细胞、新生的毛细血管上MCP-1有不同程度的阳性表达,阳性细胞平均灰度值121.26±2.04,与急性牙髓炎症组织阳性细胞平均灰度值比较差异无显著性(P>0.05)。结论：MCP-1在牙髓炎牙髓组织中有表达,在牙髓炎发生、发展过程中可能促进炎症组织的愈合。     

热休克蛋白27在大鼠牙髓炎中的免疫组化研究

目的：研究内毒素（LPS）诱导大鼠牙髓炎模型中HSP27在不同时间的动态表达及定位情况，观察HSP27在牙髓炎中的表达特点，推测它在牙髓炎发生、发展中的意义。方法：通过对LPS诱导的大鼠磨牙实验性牙髓炎组织连续进行切片，同时超敏免疫组化分析。结果：1d组HSP27在成牙本质细胞呈中度阳性表达，成纤维细胞、血管壁及内皮细胞中均呈阳性表达，3、5、7d组中HSP27在成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞及内皮细胞表达减少，2周以后，成牙本质细胞、成牙本质细胞突、修复性牙本质和牙髓成纤维细胞可见HSP27阳性表达，3、4周以后，成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞、修复性牙本质呈弱阳性表达，5周以后，牙髓组织变性、坏死，呈均质弱阳性染色。结论：HSP27在牙髓炎早期能够保护牙髓细胞，限制炎症发展，在损伤晚期则可能参与牙齿矿化修复过程。     

在大鼠牙髓炎中的八聚体结合转录因子4B免疫组化研究

目的研究内毒素(LPS)诱导大鼠牙髓炎模型中八聚体结合转录因子4B(Oct-4B)在不同时间的表达特点及定位情况,以探讨Oct-4B在牙髓炎症中的可能作用,推测它在牙髓炎发生、发展中的意义.方法通过对LPS诱导的大鼠磨牙牙髓炎进行连续组织切片,同时采用免疫组织化学检测大鼠牙髓炎中Oct-4B的表达情况.结果 1 d组:成牙本质细胞呈中度阳性表达,牙髓成纤维细胞为中度至强阳性表达;3、5、7 d组:成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞阳性表达减弱.2周组:坏死区扩大呈均质弱阳性表达,成牙本质细胞、牙髓成维维细胞及内皮细胞减少,呈阳性,修复牙本质呈弱阳性表达;3周组:大部分坏死牙髓组织呈均质弱阳性表达.结论 Oct-4B在大鼠牙髓炎发生、发展呈动态表达,Oct-4B可能参与调节牙髓炎发生、发展及修复过程.     

细胞间粘附分子-1在老年患者牙髓炎中的表达及其意义

目的:研究急性牙髓炎高龄患者牙髓组织、牙龈组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的临床意义。方法:选取我院自2013年10月至2014年10月收治的43例急性牙髓炎高龄患者(急性牙髓炎组)、42例高龄全口义齿修复者(正常牙髓组)为研究对象,采用免疫组化(ABC)法对两组牙髓组织、牙龈组织ICAM-1实施免疫定位。结果:急性牙髓炎组牙髓组织光镜下面积值、积分吸光度值,牙龈组织白细胞数目、ICAM-1(+)白细胞数目及其所占比例均高于正常牙髓组(P0.05)。结论:针对急性牙髓炎高龄患者牙髓组织、牙龈组织ICAM-1表达增高的特点,可以将维持ICAM-1稳定状态作为切入点,制定拮抗ICAM-1的综合性抗炎治疗方案。     

布地奈德对哮喘大鼠ET-1及ET-1mRNA表达的影响

目的 观察吸入布地奈德(Budesonide)对哮喘大鼠模型哮喘发作、内皮素-1(ET-1)及支气管肺组织ET-1mRNA表达的影响，探讨布地奈德防治哮喘的机制。方法 建立哮喘大鼠模型，吸入布地奈德治疗，观察哮喘发作情况及肺组织病理变化；采用放射免疫测定法测定其血浆及支气管肺泡灌洗液(BAIF)中ET-1含量，以分子原位杂交技术检测支气管肺组织内ET-1mRNA的表达。结果 哮喘组血浆、BAIF中ET-1含量及支气管肺组织Er-1mRNA表达明显增加；治疗组哮喘发作及病理改变减轻，Er-1含量、支气管肺组织内ET-1mRNA的表达较哮喘组明显减少。结论 布地奈德缓解哮喘发作的机制可能与抑制ET-1合成及释放有关。     

解旋酶DDX41在人牙髓组织及牙髓细胞中的表达

目的研究解旋酶DDX41在人牙髓组织和细胞中的表达,为深入探讨其在龋病及牙髓病天然免疫应答过程中的作用奠定
基础。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫细胞化学和免疫组织化学技术对人牙髓组织和牙髓细胞中DDX41的
表达和定位进行分析。结果RT-PCR结果显示DDX41 mRNA在人牙髓细胞中有显著表达;免疫细胞化学和免疫组织化学染
色结果显示DDX41在牙髓细胞的胞浆和胞核中皆有表达,但胞核中的表达水平较低;在牙髓组织中,DDX41主要在牙髓组织
表面的成牙本质细胞的胞浆和胞核中皆有表达。结论人牙髓组织中的成牙本质细胞作为牙髓免疫的效应细胞之一,在龋病和
牙髓炎的免疫反应过程中,细胞内可能存在DDX41/STING依赖的TBK1-IRF3-IFN-β信号通路的活化。
     

大鼠炎症牙髓中钠离子通道Nav1.7的表达

目的：探讨大鼠炎症牙髓中钠离子通道Nav1.7的表达。方法60只SD大鼠分为正常组( A组)和炎症组,炎症组中,封脂多糖(LPS)1 d为B组、3 d为C组、5 d为D组。炎症组通过置入LPS诱导产生牙髓炎。通过HE染色观察各组大鼠牙髓组织病理学改变,通过免疫组化和ELISA检测各组大鼠牙髓中Nav1．7的表达。结果各组牙髓组织病理学发生改变,各组牙髓切片中均有Nav1．7的表达。 ELISA结果显示,4组牙髓中Nav1．7的表达量分别为(3．38±0．10)、(3．67±0．15)、(4．04±0．14)和(4．25±0．11)μg/L,各组间差异有统计学意义(P<0．05)。结论 Nav1．7的表达增高可能与牙髓炎症具有潜在关联性。     

HSP27在大鼠磨牙钻磨后牙髓的表达

目的 研究热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)在成年大鼠磨牙受到钻磨刺激后不同时间牙髓组织中的表达特点及定位情况. 方法 建立大鼠牙髓炎模型,用免疫组织化学方法检测热休克蛋白27在大鼠上颌磨牙钻磨后3 d,6d,9 d的表达. 结果 热休克蛋白27在牙髓炎晚期成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞、血管壁及内皮细胞中表达逐渐减弱.结论 热休克蛋白27的表达与牙髓炎症发生发展的程度有关,提示热休克蛋白27在牙髓损伤修复期可能是参与牙髓损伤修复的细胞因子之一.     

严重体表烧伤早期大鼠肾脏内皮素－1的基因表达

应用分子斑点杂交、原位杂交技术，观察了大鼠烧伤早期肾脏各时相点的内皮素－１（ＥＴ－１）ｍＲＮＡ的表达和定位变化。结果表明：烧伤早期肾脏ＥＴ－１ｍＲＮＡ含量明显上升，分布有所变化，且为肾脏自身分泌释放（自分泌／旁分泌）。文中还简要讨论了上述变化的原因     

牙痛穴贴对急性牙髓炎大鼠Notch信号蛋白的影响

目的 从分子生物学水平揭示穴贴对牙髓的保护作用.方法 选取60只Wistar大鼠,所有鼠牙牙体、牙列完整,无龋病,咬合关系正常.适应性喂养1周后,随机均分为空白组、模型组、阳溪组、颊车组.空白组:正常喂养,不实施任何干预手段;模型组:采用开髓封内毒素法(LPS)造急性牙髓炎模型;阳溪组:造急性牙髓炎模型,取远端同侧阳溪穴进行穴位贴敷;颊车组:造急性牙髓炎模型,取近段同侧颊车穴进行穴位贴敷,牙痛穴贴为自制.采用免疫组化法检测Notch1、Notch2蛋白在第1、3、5天的表达.结果 Notch1蛋白:穴贴治疗第1天,空白组表达量低于模型组、阳溪组、颊车组(P<0.05,P<0.01),第3天,模型组蛋白表达量低于阳溪组和夹车组,但高于空白组(P<0.05,P<0.01).第5天,空白组与其它各组比较表达量降低(P<0.01).Notch2信号蛋白:穴贴治疗第1天,穴贴各组与模型组和空白组两两比较表达增高(P<0.05,P<0.01).第3天,模型组与其它各组比较,表达高于空白组,低于穴贴治疗各组(P<0.05,P<0.01).第5天,空白组与其它各组比较表达量降低(P<0.01).结论 牙痛穴贴可通过缩短Notch信号蛋白表达上调时间,提高急性牙髓损伤后的自身修复能力,间接提高牙髓干细胞活性.     

不同炎症状态下犬年轻恒牙牙髓干细胞增殖及成骨分化能力的改变

目的：探究不同炎症状态对比格犬（Beagle犬）年轻恒牙牙髓干细胞增殖及成骨能力的影响,为炎症牙髓干细胞的应用提供理论依据。方法：选取Beagle犬年轻恒前磨牙14颗,通过开髓后牙髓暴露的方法建立牙髓炎模型。对照组于开髓后立即拔髓,实验组分别于术后2周和6周拔出牙髓组织。HE染色确定牙髓炎症程度,提取不同炎症状态下牙髓组织RNA,实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测炎症因子肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα,TNF-α）、白细胞介素（interleukin,IL）家族IL-1β、IL-6、IL-10的表达。酶消化法分离培养正常牙髓干细胞（dental pulp stem cell,DPSC）和炎症牙髓干细胞（inflammatory DPSC,IDPSC）,细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）法测定其生长曲线,并对其进行成骨分化诱导,茜素红染色,real-time PCR检测成骨相关基因骨涎蛋白（bone sialoprotein,BSP）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、牙本质涎磷蛋白（dentin sialophosphoprotein,DSPP）的表达情况。结果：开髓暴露2周和6周后,根管内仍有存活的牙髓组织,伴有不同程度的炎症细胞浸润,6周组牙髓中炎症因子高表达。各组牙髓均可分离培养出牙髓干细胞,IDPSC的增殖能力强于DPSC。经成骨诱导后实验组细胞BSP、ALP和DSPP的表达均显著高于DPSC（P<0.01）,但6周组表达显著低于2周组（P<0.01）。结论：Beagle犬年轻恒牙早期牙髓炎症状态下,牙髓干细胞的增殖和成骨分化能力均有所增强。     

有症状不可复性牙髓炎活髓保存的短期疗效观察

目的:探索性研究有症状不可复性牙髓炎能否采取活髓保存的治疗方式,同时与可复性牙髓炎保髓治疗比较3个月的短期疗效。方法:选择因龋病引起的可复性牙髓炎18例和有症状不可复性牙髓炎22例,共40颗磨牙,均采取活髓保存的治疗方式,比较3个月的短期疗效。结果:18例可复性牙髓炎组中,14例保髓治疗成功,成功率达77.8%;22例有症状不可复性牙髓炎组中,20例保髓成功,成功率达90.9%,比较两组之间3个月的短期疗效无统计学差异（P> 0.05）。结论:有症状不可复性牙髓炎可尝试采取活髄保存的治疗方式与可复性牙髓炎保髓相比3个月的短期疗效未见明显差别。