UV-C诱导体外平滑肌细胞凋亡的相关信号机理的研究

为观察经ＵＶＣ照射诱导的体外凋亡动脉中膜平滑肌细胞(ＳＭＣ)内Ｃａ2+浓度及ａｃｔｉｎ表达的变化,应用ＳＰ免疫组织化学技术和图像分析技术检测凋亡ＳＭＣ内ａｃｔｉｎ的表达;应用粘附细胞分析及筛选激光细胞仪观察凋亡ＳＭＣ内Ｃａ2+浓度的变化。结果:ＵＶＣ照射后,ＳＭＣ出现典型的凋亡形态学和生化指标上的改变。ＵＶＣ动态照射10ｍｉｎ引起胞浆内Ｃａ2+浓度的快速升高;并引起照射后不同时期ＳＭＣ中Ｃａ2+浓度的持续升高。凋亡ＳＭＣ内ａｃｔｉｎ表达较正常大大加强,并出现从胞内向核周、从胞内向核内的迁移和再分布。据此认为:Ｃａ2…     

UV-C照射诱导体外血管平滑肌细胞凋亡模型的建立

应用常规细胞培养超净台紫外消毒灯(220Ｗ,220Ｖ,50Ｈｚ)发射的ＵＶＣ波段的紫外光源(254ｎｍ),垂直照射距离其10ｃｍ处的大鼠主动脉平滑肌细胞(ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓ,ＳＭＣｓ),发现经照射后细胞出现典型的凋亡形态学改变,如细胞变圆、染色质浓缩、细胞膜出泡、出现凋亡小体等;细胞面积、核面积及核/胞面积比均显著降低;且提取细胞ＤＮＡ的琼脂糖凝胶电泳呈现梯状图谱。从形态学和生化指标方面证明了ＵＶＣ照射可诱导体外血管ＳＭＣｓ凋亡。此方法可作为进一步研究ＳＭＣｓ凋亡的内在调控机制的一个简便、稳定、可靠的模型。…     

细胞增殖状态及细胞周期分布对激光诱导血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 :探讨细胞的增殖状态及细胞周期分布对体外培养的血管平滑肌细胞凋亡的激光诱导率的影响。方法 :组织贴块法培养兔胸主动脉平滑肌细胞 ,实验取第四代细胞。饥饿法同步化后 ,随机分为三组 :(1) 10 %新生牛血清 (ＮＣＳ)组 ,(2 )ＰＤＧＦ组 ,(3) 4 0 %胎牛血清 (ＦＢＳ)组。各组加入相应的生长因子作用 16ｈ之后 ,ＭＴＴ比色法检测增殖代谢状况 ,流式细胞仪 (ＦＣＭ)检测细胞的周期分布情况 ,5 10 6ｎｍ的铜蒸汽激光照射后 ,ＴＵＮＥＬ法计数细胞凋亡率。结果 :ＭＴＴ法检测 40 %ＦＢＳ组 5 70ｎｍ处的吸光值最高 ,ＰＤＧＦ组次之 ,10 %…     

UV-C诱导的体外凋亡SMC内Bcl-2蛋白表达的研究

为观察经ＵＶＣ照射后的凋亡ＳＭＣ内Ｂｃｌ2蛋白表达的情况。应用组织贴块法进行体外ＳＭＣ培养,ＳＰ免疫组织化学技术和图像分析技术检测经ＵＶＣ照射后的ＳＭＣ内Ｂｃｌ2蛋白的表达。结果:ＵＶＣ照射体外ＳＭＣ后,细胞出现典型的凋亡形态学和生化指标的改变;凋亡ＳＭＣ胞浆内Ｂｃｌ2表达下降和出现胞浆内Ｂｃｌ2的迁移和再分布入核。认为ＵＶＣ照射可引起体外ＳＭＣ凋亡,且Ｂｃｌ2可能参与了ＵＶＣ诱导的ＳＭＣ凋亡的基因调控过程。UV-C诱导的体外凋亡SMC内Bcl-2蛋白表达的研究@李晓丹@李进     

波长510.6 nm铜蒸气激光诱导兔血管平滑肌细胞凋亡的照射剂量筛选

目的　筛选对离体培养的兔血管平滑肌细胞 (VSMC)能诱导出较高凋亡率的激光照射剂量参数。方法　取离体培养的第 4代兔VSMC ,予波长 5 10 6nm铜蒸气激光照射 ,照射剂量为功率密度 10 0、2 0 0、30 0mW cm2 ,能量密度10 0、15 0、180、2 0 0、2 10、30 0J cm2 。脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 (TUNEL)标记检测各照射剂量组细胞凋亡率。结果　与对照组比较 ,各照射组VSMC凋亡率明显增高 ,达对照组凋亡率的 2 9～ 14 7倍 (P <0 0 5 )。以功率密度 30 0mW cm2照射 6 6 7s照射组之VSMC凋亡率最高 ,达 30 %。结论　以波长 5 10 6nm、功率密度 30 0mW cm2 铜蒸气激光照射兔VSMC 6 6 7s可诱导发生较高的细胞凋亡率     

510nm激光诱导血管平滑肌细胞凋亡的初步研究

为了探讨用激光防治血管成形术后再狭窄的可能性，以５１０ｎｍ激光照射体外培养的血管平滑肌细胞，以ＤＮＡ片断末端标记法观察细胞凋亡现象。结果显示，５０和７５Ｊ／ｃｍ２照射后４小时ＳＭＣ出现凋亡现象，２４小时凋亡最为显著，凋亡率分别为９．４％和６．１％。表明激光直接照射能引起平滑肌细胞凋亡。这可能有益于减轻血管内膜的增厚程度     

光动力学疗法试治放疗后复发性鼻咽癌

目的 :探讨治疗放疗后复发性鼻咽癌的方法。资料和方法 :患者男性 4例 ,女性 4例 ;年龄 42～ 70岁 ,病理分型未分化癌 2例、鳞癌 6例 ,均为鼻咽癌 2疗程放疗后复发。按ＵＩＣＣＴＮＭ标准早期 (Ｔ1-2 ) 4例 ,晚期 (Ｔ3 -4 ) 4例。皮试阴性者按每公斤体重 5ｍｇＨｐＤ加 5 %葡萄糖盐水2 5 0ｍｌ静脉滴注 ,给药后 2ｈ行激光照射 ,行脉冲激光光敏治癌。诊断光 (绿光 )波长为 5 10ｎｍ ,功率密度为 10 0Ｊ/ｃｍ2 ;治疗光波长为 6 30ｎｍ ,平均输出功率密度 40 0Ｊ/ｃｍ2 。本组中Ｔ1-2 病例照射 2次 ,Ｔ3 -4 病例照射 3次。先用 5 10ｎｍ的诊断…     

血啉甲醚用于光动力防治损伤性血管内膜增生的参数筛选

目的 :选择ＰＤＴ防治损伤性血管内膜增生的最优参数。方法 :新西兰白兔 2 4只 ,根据临床经验和预实验初选的ＰＤＴ参数范围 :功率密度 30～ 90ｍＷ/ｃｍ2 ;照射时间 15～ 30ｍｉｎ ;ＨＭＭＥ用量 5～ 10ｍｋ/ｋｇ体重。按 3因素 2水平正交法把新西兰白兔设计为四组 :第 1组的功率密度 30ｍＷ/ｃｍ2 、照射时间 15ｍｉｎ、ＨＭＭＥ剂量 5ｍｇ/ｋｇ;第 2组的功率密度 30ｍＷ/ｃｍ2 、照射时间 30ｍｉｎ、ＨＭＭＥ剂量 10ｍｇ/ｋｇ体重 ;第 3组的功率密度 90ｍＷ /ｃｍ2 、照射时间 15ｍｉｎ、ＨＭＭＥ剂量 10ｍｇ/ｋｇ体重 ;第 4组的功率密度…     

强压力波对血管内皮细胞,血管平滑肌细胞释放内皮素,一氧化氮的 …

目的 探讨强压力波对血管内皮细胞及血管平滑肌细胞释放内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）的影响。方法 １５只犬高速投射物致伤，检测致伤前后血浆ＥＴ、ＮＯ浓度，并用肠系膜血管内皮细胞（ＶＥＣ）、血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）联合培养，体外检测强压力波致伤前后培养上清中的ＥＴ－１、ＮＯ浓度。结果 高速投射物致伤犬后血浆中的ＥＴ、ＮＯ浓度显著升高。联合培养血管内皮细胞、平滑肌细胞致伤后ＥＴ、ＮＯ浓度在致伤后１０     

心痛定抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和癌基因c-fos的表达

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ表达的测定观察了心痛定对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：心痛定（１０－７－１０－４ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体外培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，１０－５ｍｏｌ／Ｌ抑制血清诱导ＶＳＭＣ中的ｃ－ｆｏｓ基因表达。     

宁夏42台医用诊断X射线机质量控制检测结果

笔者以大肠癌细胞ＳＷ1116为对象 ,研究其放射敏感性 ,以便指导临床治疗 ;同时观察大肠癌细胞ＳＷ1116受照后的细胞周期变化 ,为综合治疗中有目的地选择细胞周期特异性的化疗药物提供理论依据。一、材料和方法1 细胞培养 :ＳＷ1116细胞由本所细胞室提供。采用含10 %小牛血清的ＰＲＭＩ16 40培养基 ,在 37℃ ,饱和湿度 ,5 %ＣＯ2 培养箱中培养。2 照射方法 :采用Ｓｉｅｍｅｎｓ直线加速器 ,6ＭＶＸ射线照射 ,照射野 10ｃｍ× 10ｃｍ ,源皮距 10 0ｃｍ ,吸收剂量率为 2 0 0ｃＧｙ ｍｉｎ ,皿上覆盖 1 5ｃｍ厚的补偿块。3 细胞存活率测定 :取…     

8-Br-cAMP和~(60)Co照射诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及相关基因表达的研究

应用８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 和６０ Ｃｏ 照射体外诱导 Ｈｅｌａ 细胞凋亡。探讨ｂｘ Ｌ ２ ,ｗ ｐ５３ ,ｍ ｐ５３ ,ｃ ｍ ｙｃｉ Ｎｏｓ 的基因表达和ｉ Ｎｏｓ , Ｆａｓ 蛋白表达之间的关系,为探讨无毒性８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 对宫颈癌治疗的新途径提供依据。采用 Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ 法和 Ｆｅｕｌｇｅｎ 法进行细胞凋亡实验;采用本实验室创新的完整细胞原位 Ｒ Ｎ Ａ 斑点印迹技术检测 Ｆａｓ 和ｉ Ｎｏｓ蛋白,应用高速薄层色谱扫描仪对斑点印迹信号进行定量测定。结果８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 和６０ Ｃｏ 照射均可上调 Ｈｅｌａ ｗｐ５３ ,ｉ Ｎｏｓ 的基因表达;下调ｍ ｐ５３ ,ｂｃｌ ２ ,ｃ ｍｙｃ 的基因表达。可增强ｉ Ｎｏｓ 蛋白质的酶活性,降低 Ｆａｓ 蛋白质的免疫反应性。显示出８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 可能代替放疗作为一种治疗宫颈癌的新途径。     

激光治疗草莓状血管瘤疗效观察

目的 :比较ＣＯ2 激光、Ｎｄ∶ＹＡＧ激光治疗草莓状血管瘤的疗效。方法 :ＣＯ2 激光波长 10 6 μｍ ,治疗功率 5～ 2 5Ｗ ,功率密度 15 0～ 30 0Ｗ /ｃｍ2 ,对血管瘤进行汽化。Ｎｄ∶ＹＡＧ激光波长1 0 6 μｍ ,光纤末端输出功率 2 0～ 30Ｗ ,功率密度 318～ 6 36Ｗ/ｃｍ2 ,能量密度 6 38～ 12 73Ｊ/ｃｍ2 ,对血管瘤作连续扫描或点状照射。结果 :5 6例 6 3个血管瘤ＣＯ2 激光一次治疗全部消失 ,8例面积较大的分二次治疗。用Ｎｄ∶ＹＡＧ激光对 34例 47个血管瘤中 2 9个一次治疗全部消失 ,其中 7个治疗后留有瘢痕。结论 :血管瘤类型和激光…     

金蒸汽激光低功率照射对基因转染血管平滑肌细胞的影响

本文将体外培养的血管平滑肌细胞经波长为６２７．８ｎｍ的金蒸汽激光，以功率密度为１、１０、１００ｍＷ／ｃｍ＾２，能量密度为０．６、６、６０Ｊ／ｃｍ＾２照射后，转染Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ包课的含Ｌｓｃ Ｚ基因的质粒ＤＮＡ，经７２小时培养，测基因产物β－半乳糖苷酶的活性。结果显示，１和１０ｍＷ／ｃｍ＾２照射组酶活性分别高于对照组３和７倍，而１００ｍＷ／ｃｍ＾２照射组未见明显提高。提示适量的低功率激光照射可     

肿瘤坏死因子α对小鼠骨髓型放射损伤的防护作用

目的：研究肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）对受照射小鼠骨髓造血细胞的近期影响和造血重建功能的作用探讨ＴＮＦα对骨髓造血细胞的辐射防护作用。方法小鼠照射前２４ｈ一次性注射ＴＮＦα,２周后检测共外周血ＷＢＣ、骨髓ＭＮＣ、ＣＦＵ－Ｓ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ,流式细胞仪分析骨髓ｃ－Ｋｉｔ＋细胞;并进行长期造血重建实验燧注射ＴＦＮα的小鼠,２周后外周血ＷＢＣ、骨髓ＭＮＣ、内源性ＣＦＵ－Ｓ、ＣＵＦ－Ｍｉｘ数量和ｃ－Ｋｉｔ＋     

510.6nm激光诱导兔在体血管平滑肌细胞凋亡的研究

目的　观察510-6 nm 波长激光对兔在体血管平滑肌细胞(SMC) 凋亡的诱导作用。方法　日本大耳白兔36 只,由股动脉导入柱状光纤至腹主动脉,对腹主动脉血管壁进行分段激光照射,功率密度分别为50 、100 、200 或300 m W/cm2 ,照射500 或1 000 s 。于照射后4 、8 、12 、24 或72 h 处死动物,取照射段腹主动脉,光镜观察SMC 形态改变,DNA 末端标记法确定细胞凋亡率。结果　兔腹主动脉经100 m W/cm2 及以上功率密度的激光照射后24 h,SMC 可出现变性、凋亡和坏死三种损伤性改变,而血管内皮细胞无明显变化。激光诱导下SMC 呈现典型的细胞凋亡形态特征:细胞明显固缩,细胞质着色加深,染色质固缩深染,并沿核膜着边排列。DNA 末端标记显示,SMC 凋亡与激光照射剂量有关。在100 m W/cm2 照射1000 s 和200 m W/cm2 照射500 s组( 能量密度均为100 J/cm2) ,细胞凋亡的发生率最高。结论　510 .6 nm 激光以能量密度100 J/cm2 照射,能使兔在体腹主动脉SMC 发生细胞凋亡,且发生率较高。     

强压力波对血管内皮细胞、血管平滑肌细胞释放内皮素、一氧化氮的影响

目的探讨强压力波对血管内皮细胞及血管平滑肌细胞释放内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）的影响。方法１５只犬高速投射物致伤，检测致伤前后血浆ＥＴ、ＮＯ浓度，并用肠系膜血管内皮细胞（ＶＥＣ）、血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）联合培养，体外检测强压力波致伤前后培养上清中的的ＥＴ－１、ＮＯ浓度。结果高速投射物致伤犬后血浆中的ＥＴ、ＮＯ浓度显著升高。联合培养血管内皮细胞、平滑肌细胞致伤后ＥＴ、ＮＯ浓度在致伤后１０分钟迅速升高，至６小时仍维持在较高水平，且以ＥＴ升高更显著，持续时间更长。结论实验结果提示在血管应激反应过程中，血管组织可能通过局部自分泌、旁分泌方式，释放ＥＴ－１、ＮＯ调节局部血管舒缩功能。在高速投射物致伤的强压力波作用下，由于ＥＴ释放占优势，在血管出现以收缩为主的反应中可能起重要作用     

牛磺酸抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和癌基因c-fos、c-myc的表达

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的测定，观察了牛磺酸对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：牛磺酸（３×１０－６～５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体外培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ抑制血清诱导ＶＳＭＣ中的ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ基因表达。     

心痛定抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和…

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒ ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ表达的测定观察了心痛定对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：心痛定（１０＾－８－１０＾０４ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，１０＾－５     

60Coγ射线对大鼠血管平滑肌细胞L-Arg/NO生成系统的影响

经皮腔内冠状动脉成形术 (Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌｃｏｒｏ ｎａｒｙａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ ,ＰＴＣＡ)是目前治疗冠心病的有效措施之一 ,但其易损伤与剥脱血管内皮 ,导致术后血管平滑肌细胞(ＶＳＭＣ)增生和新生内膜增厚 ,约 30 %～ 50 %的病人半年内发生术后再狭窄 (ＲＳ) [1 ] 。一氧化氮 (ＮＯ)是调节血管张力和影响血管结构变化的重要因子。ＰＴＣＡ术后血管ＮＯ生成紊乱是再狭窄发生的决定因素之一[4] 。本工作拟在培养的大鼠ＶＳＭＣ上观察60 Ｃｏγ射线辐射对ＮＯ生成系统即Ｌ 精氨酸(Ｌ Ａｒｇ)、ＮＯ…