环氧木香内酯通过NF-κB信号通路下调MMP-2/9抑制胶质瘤细胞U251侵袭和迁移

目的探讨环氧木香内酯(EMCL)对胶质瘤U251细胞侵袭和迁移的抑制作用及其机制。方法不同浓度EMCL处理胶质瘤U251细胞48 h后,用CCK-8法检测EMCL对胶质瘤细胞增殖抑制作用及半数抑制浓度IC₅₀;采用划痕实验和Transwell侵袭实验检测EMCL对胶质瘤U251细胞侵袭迁移的影响;采用Western blot检测胶质瘤细胞中MMP-2、MMP-9、p-p65和p65蛋白的表达。结果胶质瘤U251细胞经EMCL处理后,细胞数目显著减少,细胞形态变圆、变小,细胞与细胞间的接触、丝状伪足均显著减少;胶质瘤U251细胞迁移和侵袭能力随着EMCL浓度的升高而显著下降;MMP-2和MMP-9蛋白表达均下调;p-p65/p65的表达下调。结论环氧木香内酯能够抑制胶质瘤U251细胞侵袭和迁移能力。     

VHL基因对U251胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响

  目的   研究VHL基因对U251胶质瘤细胞侵袭和迁移能力的影响   方法   使用VHL表达质粒转染胶质瘤细胞,采用RT-PCR检测VHL mRNA表达,Western blot检测VHL、MMP-2、MMP-9蛋白表达,应用Transwell体外侵袭实验、划痕实验检测上调VHL基因后对U251胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响。使用VHL表达质粒处理后的U251细胞建立裸鼠颅内模型,利用免疫组织化学染色法对颅内模型组织切片中VHL、MMP-2、MMP-9蛋白表达进行检测。   结果   VHL表达质粒转染胶质瘤细胞后VHL mRNA、VHL蛋白表达增高,MMP-2、MMP-9蛋白表达下降;并抑制U251胶质瘤细胞侵袭迁移能力。对染色后的组织切片进行分析,VHL表达质粒处理组中VHL的表达较对照组明显升高,MMP-2、MMP-9蛋白较对照组表达减少。   结论   VHL基因能够有效抑制U251胶质瘤细胞侵袭迁移能力,VHL基因可成为治疗胶质瘤的一个有效靶点。      

国产虫草素对Hela细胞MMP-9、TIMP-1及TIMP-1 mRNA表达的调节

目的:观察国产虫草素对人宫颈癌Hela细胞生长,MMP-9,TIMP-1及TIMP-1 mRNA表达的影响.方法:采用MTT法观察不同浓度的虫草素溶液(0,1,2,4mg/ml)对Hela细胞增殖抑制作用.人MMP-9/TIMP-1 ELISA试剂盒及RT-PCR技术检测经不同浓度虫草素溶液(0,1,2,4mg/ml)处理后不同时间点(12,24,48h)Hela细胞MMP-9/TIMP-1及TIMP-1 mRNA表达的影响.结果:国产虫草素以剂量依赖方式抑制Hela细胞生长.不同浓度虫草素处理不同时间的Hela细胞分泌MMP-9呈轻度剂量依赖抑制方式,但未见统计学差异(P＞0.05).可上调TIMP-1及其mRNA的表达,且呈明显剂量依赖方式,统计学差异显著(P＜0.05),尤其在24h TIMP-1 mRNA的表达及蛋白分泌达最高峰.结论:国产虫草素可以以剂量依赖方式抑制肿瘤细胞的生长;可以通过上调TIMP-1mRNA及蛋白的表达发挥潜在的抗肿瘤细胞侵润转移的作用,为国产新型抗肿瘤药物的临床研发及应用提供实验室依据.     

人参多糖注射液对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭迁移能力的影响及机制研究

目的 探讨人参多糖注射液对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭迁移能力的影响。方法 以不同作用浓度(12.5μL/mL、25μL/mL、50μL/mL、100μL/mL)人参多糖注射液处理MCF-7细胞株,以PBS作为空白对照,分别采用Transwell小室侵袭实验、划痕实验及Western blot检测细胞侵袭能力、迁移能力及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达。结果 人参多糖注射液对MCF-7细胞体外侵袭和迁移能力具有显著的抑制作用,并呈现剂量及时间依赖性。人参多糖注射液处理后,MCF-7细胞MMP-2蛋白表达及MMP-9蛋白表达比值显著降低,并呈现剂量及时间依赖性。结论 人参多糖注射液可显著抑制人乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力和迁移能力,下调MMP-2及MMP-9蛋白表达是其可能的作用机制。     

咖啡因通过FAK/AKT/ROCK通路调控人脑胶质瘤U-373MG细胞的恶 性生物学行为

目的：探讨咖啡因通过调节FAK/AKT/ROCK信号通路来影响人脑胶质瘤U-373MG细胞的增殖、迁移和侵袭能力。方法：常规培养U-373MG细胞,将其分为对照组、咖啡因低剂量（1 mmol/L）组、咖啡因高剂量（2 mmol/L）组、PF573228组（FAK抑制剂,1 μmol/L）、咖啡因高剂量+SC79组（AKT激活剂,8 mg/L）。用CCK-8法、Transwell小室实验、流式细胞术和WB法分别检测各组U-373MG细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡,以及U-373MG细胞中p-FAK、p-AKT、p-ROCK、Ki67、MMP-9蛋白表达水平。建立U-373MG细胞裸鼠移植瘤模型,观察咖啡因对移植瘤生长的影响,WB法检测移植瘤组织中相关蛋白的表达。结果：咖啡因、PF573228可显著抑制U-373MG细胞的增殖、迁移、侵袭能力,促进U-373MG细胞凋亡,抑制p-FAK、p-AKT、p-ROCK、Ki67、MMP-9蛋白的表达（均P<0.05）,SC79则可部分逆转咖啡因对U-373MG细胞的作用（均P<0.05）。咖啡因可显著抑制移植瘤的生长及移植瘤组织中上述相关蛋白的表达（均P<0.05）。结论：咖啡因可通过抑制FAK/AKT/ROCK信号通路抑制U-373MG细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进其凋亡。     

HOTAIRM1靶向miR-129-5p对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响

目的:研究长链非编码RNA HOTAIRM1（lncRNA HOTAIRM1）与微小RNA-129-5p（miR-129-5p）的靶向关系及其对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响。 方法:荧光定量PCR（qPCR）检测HOTAIRM1和miR-129-5p在人正常脑组织和胶质瘤组织中的表达。建立抑制HOTAIRM1表达细胞株,研究其对U251细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）、上皮钙黏素（E-cadherin）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）水平。生物学信息预测和双荧光素酶报告基因法分析HOTAIRM1和miR-129-5p之间的靶向关系。共转染si-HOTAIRM1和anti-miR-129-5p,观察抑制miR-129-5p表达对抑制HOTAIRM1表达诱导的U251细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。 结果:HOTAIRM1在胶质瘤组织中的表达明显上调（P<0.05）,miR-129-5p表达下调（P<0.05）。抑制HOTAIRM1表达显著降低U251细胞24 h、48 h、72 h的细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数及Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2蛋白表达量（P<0.05）,明显增加U251细胞凋亡率和p21、Bax、E-cadherin蛋白表达量（P<0.05）。miR-129-5p是HOTAIRM1的靶基因。上调或下调HOTAIRM1表达明显调控miR-129-5p表达（P<0.05）。抑制miR-129-5p表达逆转了抑制HOTAIRM1表达对U251细胞24 h、48 h、72 h的细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数及Cyclin D1、MMP-2、Bcl-2蛋白表达的抑制作用,并逆转了抑制HOTAIRM1表达对U251细胞p21、E-cadherin、Bax蛋白表达和细胞凋亡率的促进作用。 结论:lncRNA HOTAIRM1通过靶向miR-129-5p影响胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭。     

小分子化合物O-565抑制胃癌细胞迁移侵袭及机制研究

目的:研究小分子化合物O-565对人胃癌细胞BGC823、MKN-45增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:应用MTT检测不同浓度小分子化合物O-565对胃癌细胞BGC823和MKN-45增殖能力的影响。分别用0、20、40、60μmol/L浓度的化合物O-565处理BGC823和MKN-45两种胃癌细胞,应用Transwell小室检测其对上述两种细胞迁移侵袭能力的抑制作用,Westernblot检测化合物对金属基质蛋白酶2(MMP-2)表达及丝切蛋白(Cofilin)磷酸化水平的影响。结果:化合物O-565对于BGC823和MKN-45两种胃癌细胞的增殖能力无明显影响,却能够以剂量依赖的方式抑制上述细胞的迁移和侵袭。Westernblot结果显示O-565能够下调胃癌细胞BGC823中MMP-2的表达及Cofilin的磷酸化水平。结论:化合物O-565可能通过下调细胞中MMP-2的表达及Cofilin的磷酸化水平,抑制BGC823、MKN-45胃癌细胞的迁移和侵袭。     

白藜芦醇抑制胶质瘤细胞增殖的体内外实验研究

目的 探讨白藜芦醇(Res)对C6胶质瘤细胞增殖的抑制作用及其机制.方法 将不同浓度Res作用于C6大鼠胶质瘤细胞系,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,蛋白印迹(Western blot)检测Res处理前后C6细胞表皮生长因子受体(EGFR)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;免疫组化分析基质金属蛋白酶(MMP)-9、转录核因子-κB(NF-κB)的表达.应用立体定向术建立大鼠动物模型,将20只大鼠分为对照组和治疗组,治疗组8只以8 mg·kg-1·d-1的剂量饲喂,2只以16 mg·kg-1·d-1的剂量饲喂,观察动物一般表现及生存期.MRI动态监测肿瘤大小,脑标本进行病理组织学及相关指标检测.结果 在体外Res可明显抑制C6胶质瘤细胞生长,细胞周期被阻滞在S期,诱导肿瘤细胞凋亡,Res可延长荷瘤SD大鼠生存期,免疫组化检测EGFR、MMP-9、NF-κB表达降低,而GFAP表达升高.结论 Res可抑制胶质瘤细胞增殖,延长荷瘤动物生存期,具有潜在临床应用价值.     

siRNA沉默FAM83A基因表达对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:研究FAM83A基因对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤生长的影响。方法:运用qRT-PCR法检测非小细胞肺癌细胞H1299中FAM83A的表达;将blank组（未作任何处理）、si-control组（转染si-control）、si-FAM83A组（转染si-FAM83A）用脂质体法转染至H1299细胞;Western blot检测细胞中FAM83A、p16、p21、MMP-2、MMP-9的蛋白表达;MTT法检测细胞的增殖;Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭;裸鼠成瘤实验检测肿瘤的生长。结果:沉默FAM83A后,H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力均得到显著下调,并且p16、p21的蛋白表达明显上调,MMP-2、MMP-9的蛋白表达明显下调。最重要的是,沉默FAM83A后的异种移植裸鼠体内的肿瘤生长能力得到明显抑制。结论:沉默FAM83A可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制裸鼠体内肿瘤的生长。     

Sphk1基因对间充质干细胞诱导结肠癌RKO细胞增殖和迁移的影响

目的： 探讨鞘氨醇激酶1 （sphigosine kinase 1, SphK1）基因下调对间充质干细胞（mesenchymal stem cell, MSC）诱导的 结肠癌RKO细胞增殖和迁移的影响。 方法： 采用MSC条件培养液（MSC-CM）和对照培养液（Control-CM）分别干预RKO细胞, CCK-8法检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的迁移能力,Western blotting法检测Ki-67抗原（Ki-67）、MMP-2/9、肿瘤干 细胞标志物CD44和CD133蛋白的表达。用慢病毒shRNA载体转染RKO细胞抑制SphK1的表达,观察抑制SphK1的表达对 MSC-CM诱导的RKO细胞增殖、迁移以及MMP-2/9、CD44和CD133蛋白表达的影响。 结果： MSC-CM可时间依赖性促进RKO 细胞的增殖(P<0.05),并明显增强细胞的迁移能力(P<0.01)和细胞中Ki-67、MMP-2/9、CD44和CD133蛋白的表达(均P<0.05或P< 0.01)。慢病毒shRNA转染明显抑制RKO细胞SphK1的表达,抑制SphK1的表达可显著抑制MSC-CM对RKO细胞增殖和迁移的 促进作用(均P<0.05或P<0.01),且明显抑制MSC-CM诱导的Ki-67、MMP-2/9、CD44和CD133蛋白的表达。 结论： MSC-CM可 促进RKO细胞的增殖和迁移,下调SphK1可通过抑制MMP-2/9、CD44和CD133的表达逆转MSC-CM诱导的细胞增殖和迁移。     

Tamoxifen体内外抑制胶质瘤细胞生长研究

目的：探讨Tamoxifen在体内外对胶质瘤细胞的抑制作用及其机制；方法：Tamoxifen在体内外作用于C6大鼠胶质瘤细胞系，并用MTT法、TUNEL法、免疫组化及动态MRI来检测效果；结果：Tamoxifen能在体外明显抑制胶质瘤细胞生长，在体内抑制作用尚不确定；Tamoxifen可抑制PKC及IGF-1表达；结论：Tamoxifen抑制胶质瘤细胞生长的机制之一可能是抑制PKC及IGF-1活性。     

延龄草总皂苷抑制宫颈癌Hela细胞转移的作用及机制

目的:观察延龄草总皂苷对宫颈癌Hela细胞侵袭与迁移的影响及其机制.方法:培养宫颈癌细胞Hela,加入延龄草总皂苷(1、2 mg/L)24 h后,采用细胞侵袭实验、划痕实验观察延龄草总皂苷对Hela细胞侵袭与迁移的影响,以Western blot方法检测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达.结果:延龄草总皂苷能够有效地抑制Hela细胞的侵袭与迁移,浓度依赖性地降低MMP-2、MMP-9的蛋白表达.结论:延龄草总皂苷可能通过降低MMP-2、MMP-9的表达发挥抑制宫颈癌细胞Hela侵袭与迁移的作用.     

Inhibition of cell invasion by indomethacin on glioma cell lines: <Emphasis Type="Italic">in vitro</Emphasis> study

Malignant glioma invasion into the surrounding brain tissue is still a major problem for any therapeutical methods. Matrix metalloproteinases (MMPs) have been implicated as important factors in this pathological process. In this study, one of the non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) indomethacin was employed to investigate the effect of inhibition of cell invasion mediated by MMP-2 and MMP-9 in human malignant glioma cell lines, A172, U87MG, U251MG, and U373MG in vitro. MTT assay was firstly examined to determine non-cytotoxic dose range, then gelatin zymography, matrigel invasion assay, migration assay and MMP-2 activity assay for 24 h exposure in indomethacin were employed to assess the inhibitory effect of indomethacin. MTT assay revealed that dose with 0, 50, and 500 M/ml were non-cytotoxic. Zymography demonstrated: (a) expression of MMP-2 and MMP-9 activity was downregulated along with elevated dose of indomethacin. (b) MMP-2 activity that changed from pro-MMP-2 to active form of MMP-2 in supernatants of cell lines could not be inhibited by indomethacin. Invasion assay disclosed that the number of invading cells through the matrigel were significantly decreased in a dose dependent manner. Migration assay indicated indomethacin did not affect cells migration. MMP-2 activity assay showed the total and active MMP-2 secretion was suppressed by 500 M/ml of indomethacin. Our present study is the first report on inhibitive effect of indomethacin mediated by MMP-2 and MMP-9 in invasion assay of glioma cell lines. The current study suggested that non-cytotoxic level of indomethacin was able to reduce the cell invasion of malignant gliomas mediated by MMP-2 and MMP-9, but it did not affected on cell motility. It also lowered down the activity of MMP-2 and MMP-9, and could reduce of MMP-2 secretion of cell lines. Thus, high concentration of indomethacin within non-cytotoxic dose might offer a new therapeutic strategy to impair cell invasion of gliomas.     

全反式维甲酸诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的: 探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞的增殖抑制及其分子机制。 方法: MTT法检测全反式维甲酸作用于大鼠C6脑胶质瘤细胞后,观察其对细胞增殖抑制率的影响。流式细胞仪观察肿瘤细胞周期及凋亡率的变化。电镜观察C6细胞超微结构变化。Western blot法在不同时间点对凋亡相关基因caspase-3活性蛋白产物的表达进行了检测。 结果: MTT结果表明ATRA对C6细胞的抑制作用具有时间和浓度依赖性。流式细胞仪检测证明与对照组相比,处理组C6细胞发生G₁期阻滞;S、G₂期细胞比例下降;细胞出现亚二倍峰,凋亡比例明显增加。电镜下全反式维甲酸作用72h后处理组C6细胞呈凋亡改变:如核固缩、染色质趋边凝聚。Western blot检测发现,处理组出现了caspase-3蛋白活性裂解片段。 结论: 全反式维甲酸抑制C6脑胶质瘤细胞生长,全反式维甲酸抑制脑胶质瘤的作用机理可能至少通过改变细胞周期分布、诱导凋亡来实现。     

Transwell小室筛选高侵袭性C6细胞MMP-2和TIMP-2的表达

目的:通过观察Transwell小室筛选的高侵袭性C6细胞中组织金属蛋白酶抑制剂-2(tissueinhibitorofmetalloproteinase-2,TIMP-2)的表达,探讨基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)及TIMP-2在胶质瘤侵袭中的作用机制。方法:通过Transwell小室筛选出一种更具有侵袭能力的C6-C1细胞,用细胞损伤愈合实验及Transwell小室评价其侵袭转移能力,用明胶酶谱、反向明胶酶谱及Westernblot等方法来检测MMP-2和TIMP-2的表达。结果:与同源C6细胞相比,这种体外筛选的C6-C1侵袭能力增加3倍多,增强了快速的单层细胞损伤愈合能力,MMP-2激活水平增加80%,TIMP-2的蛋白表达水平增长2倍。结论:MMP-2的激活水平增加与胶质瘤的侵袭转移能力相关,并与TIMP-2的表达增高相关。TIMP-2表达增加促进了MMP-2的激活和细胞侵袭。     

他莫昔芬对乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力的影响及其作用机制

目的 探讨他莫昔芬(TAM)对乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力的影响及其作用机制.方法 采用对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞,以无血清无酚红高糖DMEM培养基对其进行24 h的培养,然后将其分别接种并分为对照组(无血清无酚红高糖DMEM培养基)、TAM组(含有1μmol/L TAM的无血清无酚红高糖DMEM培养基),采用Western blot法、RT-PCR法检测两组MCF-7细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MMP-2、血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白及mRNA表达水平,采用Transwell法检测MCF-7细胞的侵袭能力.结果 TAM组MCF-7细胞中VEGF、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平均明显高于对照组,VEGF、MMP-9、MMP-2 mRNA相对表达水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01);TAM组MCF-7细胞的侵袭能力相对数明显高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01).结论 TAM可能发挥类雌激素功能,促进乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力,这与其提高MCF-7细胞中VEGF、MMP-9、MMP-2表达水平有关.     

The Expression and Activation of Matrix Metalloproteinase-2 in Rat Brain After Implantation of C6 Rat Glioma Cells

It has been reported that matrix metalloproteinases (MMPs) are highly expressed in malignant glioma cells and that this increased expression may facilitate the invasiveness of tumor cells. The authors investigated the expression and enzymatic activity of MMPs in rat brain during the growth of malignant gliomas at different time intervals. C6 rat glioma cells were unilaterally implanted into rat cerebral hemispheres. After 7 or 14 days, these brain tissues were prepared for SDS-PAGE zymography, Western blotting, immunohistochemistry, and in situ zymography. SDS-PAGE zymography and Western blotting revealed that the expression of proMMP-2 in rat brains with C6 glioma cells was significantly higher than that in normal or the sham-operated rat brains, and that the activated form of MMP-2 was detected only in the former but not in the latter. On immunohistochemistry, C6 glioma cells presenting invasive growth into the rat brain parenchyma and vessels demonstrated MMP-2 immunoreactivity. On in situ zymography, foci of invasive C6 glioma cells in rat brain tissue showed gelatinolytic activity. These results suggest that expression and activation of MMP-2 may be one of the crucial steps for glioma cell invasion into the brain parenchyma in vivo.     

Interaction of coagulation factors and tumor-associated macrophages mediates migration and invasion of gastric cancer

Abundant macrophage infiltration and increased expression of coagulation factors have been observed in cancer patients. The aim of the present study was to determine how the interaction between activated coagulation factors and monocytes/macrophages contributes to gastric cancer (GC) cell migration and invasion. We assessed cytokine/chemokine production of coagulation-factor-treated macrophages by ELISA. The effects of the interaction between coagulation factors and tumor-associated macrophages (TAM) on GC cell migration and invasion were determined by in vitro migration and invasion assay. In addition, we used an in vitro co-culture system of GC cells/TAM treated by coagulation factors to evaluate the effect of coagulation factor/TAM interaction on the human umbilical vein endothelial cell line (HUVEC). We found that the M2-like phenotype of interleukin (IL)-4(high), IL-10(high), transforming growth factor (TGF)-β(high), tumor necrosis factor (TNF)-α(high) was exhibited when the human monocytic cell line THP-1 was stimulated by coagulation factors III (TF), VIIa (FVIIa) and XIIa (FXIIa). For the migration assay, the GC cells (BGC-823 or SGC-7901) that were co-cultured with activated coagulation factor/TAM both showed increased migration. For the invasion assay, both BGC-823 and SGC-7901 cells co-cultured with TF/TAM showed increased invasion. We also found that TAM activated by coagulation factors could induce vascular endothelial growth factor/MMP-9 expression, which could promote invasion of GC cells. The HUVEC co-cultured with TAM (PMA-treated THP-1 macrophages co-cultured with GC cells) expressed high levels of FXIIa. In conclusion, coagulation factors might facilitate GC cell migration and invasion by transforming macrophages toward TAM-like cells. Interaction of coagulation factors and TAM mediates migration and invasion of GC.     

柴胡皂苷d通过AKT/mTOR信号通路调控胶质瘤C6细胞自噬

目的 探讨柴胡皂苷d在胶质瘤C6细胞自噬中的作用及其机制。方法 分别以终浓度为0 μmol/L（Control组）、2 μmol/L、4 μmol/L、6 μmol/L、8 μmol/L、10 μmol/L、12 μmol/L的柴胡皂苷d作用胶质瘤C6细胞后,用CCK⁃8检测细胞增殖能力,后续分别采用克隆形成实验、划痕实验检测柴胡皂苷d（8 μmol/L）对胶质瘤C6细胞增殖能力和细胞迁移能力的影响,Western blot和qRT⁃PCR检测胶质瘤C6细胞中自噬相关蛋白Beclin1、LC3和AKT/mTOR信号通路相关蛋白及基因的表达情况。结果 与Control组比较,各浓度柴胡皂苷d均能抑制胶质瘤C6细胞增殖且增殖抑制率随着药物浓度的升高而升高（均P<0.01）。8 μmol/L柴胡皂苷d作用24 h后,与Control组比较,胶质瘤C6细胞的克隆形成数目显著减少［（479.33±30.66）个 vs （258.66±73.35）个,P<0.01］,细胞迁移率显著降低［（70.83±4.29）% vs （19.47±1.71）%,P<0.001］,自噬相关蛋白Beclin1和LC3的蛋白及mRNA表达水平均显著升高（均P<0.01）,而AKT和mTOR信号蛋白及mRNA表达水平均降低（均P<0.01）。结论 柴胡皂苷d可能通过抑制AKT/mTOR信号通路诱导胶质瘤C6细胞发生自噬并抑制其增殖与迁移。