改良"彗星"分析法检测鼻咽癌放射敏感性的初步研究

目的　评价改良”彗星”分析法应用于预测临床鼻咽癌放射敏感性的价值。方法　应用改良”彗星”分析法对 10 5例鼻咽癌患者放射治疗前的鼻咽活检组织标本进行分析。将鼻咽癌活检标本制备的单细胞悬液分为对照管和单次 5Gy照射管。所有病例在放射治疗前及至 5 0Gy时行螺旋CT或MRI检查 ,分别测量肿瘤最大横截面积 (S0 为疗前 ,S50 为疗中至 5 0Gy时 )。临床放射敏感性评价应用肿瘤最大横截面积的消退率表示 [即Rs=(S0 S50 ) /S0 ],Rs≥ 0 .9为高度敏感 ,0 .7≤Rs<0 .9为中度敏感 ,Rs<0 .7为不敏感。实验室根据图像特点将”彗星”图分为ⅠA、ⅠB、ⅡA、ⅡB四类 ,根据尾力矩、DNA积分吸光度等参数设定实验室放射敏感性判断标准。统计分析采用SPSS10 .0软件包 ,用Kappa分析法进行临床和实验室结果一致性分析。结果　全组患者临床放射敏感性高度敏感 4 1例 ,中度敏感 2 1例 ,低敏感 4 3例。改良”彗星”分析法放射敏感性敏感 5 8例 ,不敏感 4 7例。改良”彗星”分析法的敏感性为 71.0 % ,特异性为 6 7.4 % ,准确性为 6 9.5 %。两种检测方法接近中高度一致性(Kappa=0 .38)。结论　改良”彗星”分析法检测人鼻咽癌活检标本 ,在放射治疗前能对鼻咽癌的临床放射敏感性作出预测 ,方法简单、检测周期短 ,具有较强的     

中性彗星分析法检测肿瘤细胞的放射敏感性

[目的]研究中性彗星分析法检测肿瘤细胞内在放射敏感性的可靠性和影响因素.[方法]人鼻咽高分化鳞癌细胞株CNE-1和人纤维肉瘤细胞株HT1080细胞,用6MV X线以0、100、200、300、400、600、800、1000cGy等不同剂量点照射,克隆形成法制定存活曲线,比较其放射敏感性的差异.然后进行两种细胞于600cGy照射后1、2、4、8h的中性彗星分析,以尾力矩为指标,动态检测不同时间点残留的DNA双链断裂,并与克隆形成分析结果相比较.[结果]克隆形成分析法显示CNE-1细胞的放射敏感性低于HT1080细胞,其2Gy照射后存活分数(SF2)和平均致死剂量D0值分别为0.397、0.331和1.898、1.287.两种细胞在照射后1、2、4h的中性彗星尾力矩分别为0.148±0.106、0.100±0.083、0.058±0.043和0.297±0.179、0.157±0.092、0.092±0.060,各时间点之间有显著性差异(P＜0.05),但差别逐渐减小;照射后2h和4h的尾力矩比值分别为0.637和0.630,与SF2比值和D0比值的倒数(0.834和0.678)较接近;两种细胞照射后8h的尾力矩比较差异无显著性.[结论]中性彗星分析法与克隆形成分析法的检测结果有确切的相关性,照射后一定时间内的残留DNA双链断裂有可能成为检测肿瘤细胞放射敏感性的指标.     

"彗星"分析法测定人癌体外培养细胞的放射敏感性

目的探讨"彗星"分析法在检测人癌体外培养细胞放射敏感性方面的应用价值.方法应用"彗星"法对人鼻咽高分化鳞状细胞癌CNE-1和肺腺癌973细胞进行检测,以尾力矩作为定量评价指标,检测细胞照射后的DNA初始损伤和损伤后的修复能力;同时,用经典的克隆形成方法测算CNE-1和973细胞的D0值和Dq值,并对两种实验方法所得结果进行比较.结果 (1)"彗星"法测定显示,CNE-1细胞的初始DNA损伤大于973细胞,差异有显著性(P<0.01),提示CNE-1细胞的放射敏感性高于973细胞;细胞存活曲线检测显示,CNE-1细胞的D0值为1.631,973细胞的D0值为1.822,提示CNE-1细胞的放射敏感性高于973细胞.两种方法检测结果所反映细胞放射敏感性的趋势一致.(2)"彗星"分析法检测显示,973细胞DNA损伤的半修复时间为33 min,CNE-1细胞的半修复时间为41 min, 提示973细胞对DNA损伤的修复能力强于CNE-1细胞;细胞存活曲线显示,973细胞的Dq值为2.152,CNE-1细胞的Dq值为0.626,提示973细胞的亚致死损伤修复能力大于CNE-1细胞.两种方法测定结果所反映的损伤修复能力的差异也一致.结论 "彗星"分析法检测CNE-1和973细胞的DNA初始损伤及修复所反映的放射敏感性,与经典细胞存活曲线法所测的放射敏感性一致,说明"彗星"分析法是一种能够较准确检测细胞放射敏感性的方法.     

脑胶质瘤不同照射方案生物效应的实验研究

目的 通过对人脑多形性胶质母细胞瘤(BT325细胞系)裸小鼠移植瘤不同分割模式照射后生物效应的实验研究,加深对人脑胶质瘤放射反应生物学特性认识,为临床设计照射计划、制定合理分次治疗方案提供实验依据.方法 对BT325细胞系裸小鼠移植瘤进行单次10、20、30、40、60 Gy照射和2 Gy每周5次每天照射、3 Gy每周3次隔天照射、3 Gy每周5次每天照射、4 Gy每周3次隔天照射,总剂量分别为125、114、126、112 Gy.用肿瘤生长曲线评价剂量效应关系并测定肿瘤体积倍增时间.取贴壁生长的指数生长期BT325细胞,用生长曲线测定细胞倍增时间,细胞克隆形成分析法绘制细胞存活曲线(照射剂量为0、1、2、4、6、8、10 Gy)计算曲线参数值,彗星分析法测定DNA单链断裂半修复时间(T1/2).结果 单次照射各剂量点均不能有效控制肿瘤.2 Gy5次/周和3 Gy3次/周治疗方案对人脑胶质瘤实体瘤也无明显治疗效果.增加分次剂量可使脑胶质瘤实体肿瘤有较明显的消退,其中4 Gy3次/周方案好于其他方案但仍未能达到治愈肿瘤的效果.表明对肿瘤干细胞的控制不理想.各项生物学参数的测定结果:BT325细胞倍增时间为30.16 h,裸小鼠移植瘤肿瘤倍增时间为43 d;细胞存活曲线LQ模型拟合的α=0.360 Gy-1、β=0.057 Gy-2,多靶单击模型拟合的D0=1.394 Gy、Dq=2.127 Gy、SF2=0.714;5 Gy照射DNA单链断裂的T1/2=9.999 min.结论 本实验从实证实验角度印证了临床上脑胶质瘤是一种放射耐受性较高的肿瘤的看法.研究结果提示增高分割剂量有可能提高肿瘤的近期疗效(使肿瘤消退率增加),但如何提高对肿瘤干细胞的控制还需进一步深入研究.各项生物学参数测定结果提示脑胶质瘤细胞内在放射敏感性较差.     

碱性"彗星"法检测肺癌初始放射损伤与临床疗效的相关性

背景与目的肺癌细胞具有显著的生物学异质性和内在放射敏感性差异，探求其放射敏感性相关参数以优化治疗计划是亟待解决的问题。“彗星”分析法（cometassay）可以通过荧光显微镜直接定量地检测单个细胞的DNA损伤。具有需要细胞数少、灵敏和快速的优点。临床前的相关研究显示：彗星分析法与经典的克隆形成率分析的结果趋势一致，是一种有潜力的放射敏感性分析法。本研究旨在用碱性彗星法检测31例放射治疗肺癌标本的初始DNA损伤，初步探讨其与疗效的相关性。方法2002年4月至2002年11月，用碱性彗星法检测31例接受放射治疗的肺癌病例在治疗前经支气管镜活检标本的初始DNA损伤，以经本底较正的平均尾力矩（RTM）为评价指标，同时以胸部CT扫描评价局部肿瘤反应率（RR）和肿瘤进展时间（TTP）；用SPSS10．0统计软件以曼-惠特尼U检验和克鲁斯-沃里斯H检验比较不同病理类型、RR和TTP组的中位RTM；计算RTM与RR和TTP的斯皮尔曼等级相关系数。结果不同病理类型组、RR≥50％组和TTP〉9个月组中位RTM与对应组相应值间比较均无统计学差异（χ^2=0．347，P=0．84；U=63．5，P=0．57；U=71，P=0．057）；RTM与RR和TTP的斯皮尔曼相关系数分别为-0．105（P=0．57）和0．38（P=0．035）；非小细胞肺癌的RTM与TTP斯皮尔曼相关系数为0．47（P=0．048），而小细胞肺癌为0．043（P=0．89）。结论尽管受取材质量和混杂因素致本底DNA损伤高的影响，碱性彗星法检测的肺癌初始放射损伤（RTM）仍可显示出与非小细胞肺癌局部TTP具有中等强度的正相关性，“彗星”分析法是一种有希望的肺癌细胞放射敏感性分析法，其取材和实验方法有待改进。     

“彗星” 法分析人肿瘤细胞DNA放射损伤和修复

探讨“彗星”分析法 (CA)在检测体外培养人肿瘤细胞DNA放射损伤与修复和放射敏感性的关系。方法　采用碱性CA检测鼻咽高分化鳞癌上皮细胞系 (CNE 1)、食管鳞癌上皮细胞系 (Ec 10 9)、肺腺癌细胞系 (GLC)和胃低分化腺癌细胞系 (BGC 82 3)经 6MVX射线照射后单细胞内DNA单链断裂 (SSB)程度及其与放射剂量的关系 ,以及CNE 1和GLC细胞系在分别接受了 16GyX射线照射后的自身修复情况 ,同时与相应的细胞存活曲线比较。结果　碱性CA可以检测出 4个细胞系DNA的SSB ,并与放射剂量呈良好的线性关系。 16Gy剂量下各细胞系的SSB程度依次为CNE 1>Ec 10 9>GLC >BGC 82 3。CNE 1,Ec 10 9,GLC和BGC 82 3细胞系的Do值分别为 1.2 5 ,1.2 7,1.88和 1.5 6。 16Gy诱导CNE 1和GLC细胞系的DNA损伤后 ,其半修复时间分别为 7.4,17.8min。结论　采用碱性CA能确切反映 4种人肿瘤细胞系DNA的定量损伤程度及其与放射剂量的关系 ,并能确切反映辐射损伤后自身修复能力 (CNE 1和GLC)在受测时间中的定量变化情况。自身修复能力的大小在鳞癌和腺癌细胞系间与放射敏感性的大小 (Do值 )有较好的对应关系。     

改良"彗星"分析法检测实体肿瘤放射敏感性的方法学研究

目的 改进和完善改良"彗星"分析法以更好地用于检测实体肿瘤的放射敏感性.方法 门诊活检标本制成单细胞悬液,冰上照射后立即铺胶制板,在裂解液中裂解50 min,漂洗后进行细胞电泳20 min.PI染色后在荧光显微镜下采图并用专用软件进行图像分析.每例样品均设对照(包括外参对照和自身对照)+m5 Gy照射,并对活检样品的正常细胞和肿瘤细胞进行分类采图.观察指标为细胞DNA含量和尾力矩.结果 影响实验室测定结果与临床肿瘤放射反应相关性的因素主要有:(1)取材较表浅样品中仅有淋巴细胞而无肿瘤细胞,从而导致实验室测定结果与临床肿瘤放射敏感性的吻合性下降;(2)样品中坏死细胞较多,使本底增高,是影响放射敏感性分析的重要因素;(3)增设淋巴瘤细胞作为外参对照可对实验系统误差进行校正,是质量控制不可缺少的环节;(4)对活检样品中正常细胞和肿瘤细胞进行分类采图能提高临床与实验室检测结果的吻合性.结论 实验同时设置内、外参对照和对样品中肿瘤细胞和正常组织细胞进行分类采图,能不同程度提高实验室检测结果与临床肿瘤实际放射反应的吻和性.     

人子宫内膜癌裸小鼠移植瘤放射敏感性的测定

作者通过观察单次剂量照射后两个人子宫内膜癌裸小鼠移植瘤的肿瘤生长延迟时间，研究两个移植瘤的放射敏感性。１材料和方法１．１肿瘤来源：两个人子宫内膜癌裸小鼠移植瘤模型由本院妇瘤科自建，目前已分别传至１４代，命名为Ｓ－Ｌ－１和Ｓ－Ｌ－２。经染色体分析，显示...     

人肺癌裸小鼠移植模型在沪通过鉴定

1982年中国科学院上海药物研究所开展了人肺癌裸小鼠移植模型的研究,用上海市胸科医院提供的外科手术切除的肺癌标本,先后在裸小鼠体内建成三株皮下型移植瘤模型,即:人肺燕麦细胞癌、人肺腺癌及人肺鳞癌,至今已连续传10代、34代和21代。中科院药物所、上海市胸科医院与协作单位上海医科大学肿瘤医院病理研究室,对三株移植瘤的生长特     

辐射所致残存染色体易位与放射敏感性关系研究

目的 :应用荧光原位杂交 (FISH)方法研究人肿瘤细胞放射敏感性与染色体残存易位关系及临床应用的可行性。方法 :采用 3种放射敏感性不同的人肿瘤细胞系 :鼻咽鳞癌 (CNE)、肺腺癌 (SPC)和乳腺腺癌 (MCF 7)。通过克隆形成方法测定 2Gy、4Gy、6Gy和 8GyX线照射剂量下肿瘤细胞的存活率。采用常规染色体制片过程和 2号染色体涂染探针及FISH方法 ,测定 2Gy、4Gy和 6GyX线照射2 4h后 ,肿瘤细胞 2号染色体内在和诱导的畸变量。结果 :未照射的对照细胞 2号染色体存在不同程度的内在畸变。 2Gy、4Gy和 6Gy照射后 2 4h ,CNE、SPC和MCF 7细胞诱导生成的残存染色体畸变与剂量关系一致 ,能够反映细胞的放射敏感性 ,所有细胞系诱导 2号染色体生成的畸变与细胞存活率均存在良好相关性 (rs=0 96)。结论 :诱导的残存染色体畸变与照射剂量呈线性关系 ,采用FISH方法计数照射诱导的残存染色体畸变 ,可以预测肿瘤细胞间的放射敏感性差异并具有重要的临床意义     

Pharmacogénétique des fluoropyrimidines. La méthylènetétrahydrofolate réductase

Résumé: Lefficacité optimale des fluoropyrimidines nécessite des concentrations élevées en 5-10 méthylènetétrahydrofolate (CH₂FH₄), contrôlées par la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR) qui convertit irréversiblement le CH₂FH₄ en 5-méthyltétrahydrofolate (CH₃FH₄). Les polymorphismes 677CT et 1298AC du gène MTHFR sont associés à une baisse dactivité de lenzyme. Les tumeurs «MTHFR mutées» devraient donc être plus sensibles aux fluoropyrimidines que les tumeurs «MTHFR sauvages». Les études expérimentales et cliniques publiées à ce jour tendent à montrer une plus grande sensibilité au 5-FU (associé ou non à lacide folinique) dans les tumeurs MTHFR mutées par rapport aux tumeurs sauvages. Ces résultats montrent la nécessité de poursuivre ces recherches afin de confirmer limpact de ces polymorphismes sur lefficacité des fluoropyrimidines.     

Oncogénétique et psycho-oncologie, une collaboration recommandée...

Résumé: La possibilité depuis 1994, de connaître la probabilité individuelle de développer certains cancers a permis de proposer de nouvelles modalités de prévention, de traitements et contribué au développement actuel de loncogénétique. Une meilleure connaissance des répercussions psychologiques tant pour les patients que pour les apparentés est désormais possible et limplication des psycho-oncologues dans ce cadre de la réalisation des tests prédictifs, recommandée. La mission de «messager» qui incombe au «cas-index» doit faire lobjet dune attention particulière. La complexité de linformation et la dimension paradoxale que peut avoir parfois la communication à propos des choix, rend difficile lévaluation de la qualité du consentement. La situation particulièrement délicate dune aide à la décision à légard de la chirurgie prophylactique, exige une collaboration étroite des généticiens et des psycho-oncologues.Les soins de support en oncologie     

The role of papillomaviruses in human cancers

This review comprehensively evaluates the influence of gene-gene, gene-environment and multiple interactions on the risk of colorectal cancer (CRC). Methods of studying these interactions and their limitations have been discussed herein. There is a need to develop biomarkers of exposure and of risk that are sensitive, specific, present in the pathway of the disease, and that have been clinically tested for routine use. The influence of inherited variation (polymorphism) in several genes has been discussed in this review; however, due to study limitations and confounders, it is difficult to conclude which ones are associated with the highest risk (either individually or in combination with environmental factors) to CRC. The majority of the sporadic cancer is believed to be due to modification of mutation risk by other genetic and/or environmental factors. Micronutrient deficiency may explain the association between low consumption of fruit/vegetables and CRC in human studies. Mitochondrial modulation by dietary factors influences the balance between cell renewal and death critical in colon mucosal homeostasis. Both genetic and epigenetic interactions are intricately dependent on each other, and collectively influence the process of colorectal tumorigenesis. The genetic and environmental interactions present a good prospect and a challenge for prevention strategies for CRC because they support the view that this highly prevalent cancer is preventable.     

裘法祖教授生平

Prof.Fazu Qiu,member of the Chinese Communist Party,surgery professor of Tongji Hospital,departed in Tongji Hospital,Wuhan,China,at fourteen to nine a.m,June 14,2008,after a disease.He turns 94 this year.He was the senior academician of the Academia Sinica,the illustrious medical scientist of China,and the Honorary Director of Tongji Medical College,as well as Huazhong University of Science & Technology.     

Antifungal combination therapy in localized candidosis

A mouse model of localized candidosis in air-filled subcutaneous cysts imitating thrush has been developed. We have now tested various antifungal combinations in this animal model. Flucytosine (5-FC) + amphotericin B (Amph B) showed the highest efficacy, a clear additive or even synergistic effect was seen. The combination of 5-FC + imidazole or triazole derivative was less efficacious, an additive effect was rare. The combination of 5-FC + Amph B was also tested against Candida albicans strains showing various degrees of 5-FC-resistance. A significant reduction in 5-FC-resistant mutants was seen after the treatment with the combination.     

Les génériques en cancérologie: à molécule identique, médicaments identiques? Les biosimilaires, des super-génériques?

Résumé: Les biosimilaires vont bientôt voir leur apparition en Europe. Comment un laboratoire peut-il aborder le développement de son dossier dAMM? Quelles sont les bases légales et les recommandations officielles? Comment la similarité et/ou le caractère générique peuvent-ils être démontrés? Les règles sont-elles identiques à celles des produits chimiques conventionnels pour lesquels, notamment en cancérologie, il existe des médicaments génériques? Comment faire pour que la sécurité et lefficacité des médicaments biosimilaires soient assurées pour les patients?     

PSA-Test zur Früherkennung des Prostatakarzinoms

Zusammenfassung Prostatakrebs ist hierzulande seit einigen Jahren die häufigste Krebserkrankung bei Männern. Da über die Ätiologie wenig gesichertes Wissen vorliegt und daher kaum Möglichkeiten zur primären Prävention bestehen, konzentrieren sich die Anstrengungen auf die Suche nach wirksamen Verfahren zur sekundären Prävention. Hierbei gilt die Verwendung des PSA-Tests zur Früherkennung des Prostatakarzinoms als derzeit aussichtsreichstes Verfahren. Bevor ein neues Früherkennungsverfahren zur breiten Anwendung empfohlen oder in das gesetzliche Früherkennungsprogramm aufgenommen wird, muss jedoch seine Wirksamkeit in hierfür geeigneten wissenschaftlichen Untersuchungen nachgewiesen werden. Bis jetzt gibt es bereits eine ganze Reihe epidemiologischer Studien zur Effektivität des PSA-Screenings, doch konnte ein Wirksamkeitsnachweis bisher nicht erbracht werden. Zwei große randomisierte Studien in Europa und den USA lassen für die Jahre 2005–08 erste Ergebnisse erwarten. Da epidemiologische Arbeiten belegen, dass durch PSA-Screening eine nicht unerhebliche Überdiagnostik und Übertherapie eintritt, d. h. Schaden angerichtet werden kann, ist das Ergebnis der genannten randomisierten Studien vor weitergehenden Entscheidungen unbedingt abzuwarten. Bis dahin sollte von der Anwendung des PSA-Tests zur Prostatakrebsfrüherkennung unmissverständlich abgeraten werden. Da für den Test bereits ausgiebig Werbung betrieben wurde, kommt einer gründlichen ärztlichen Aufklärung von an dem Test interessierten Personen eine Schlüsselrolle zu.     

Dermatomycosis in Dogs

During the routine examination of dogs for cutaneous lesions, 205 dogs were screened for fungi other than dermatophytes. Twenty-two dogs (10.8%) revealed the presence of non-dermatophytic fungi suspicious for representing the etiologic agents of the skin lesions. The fungi isolated were Alternaria sp. (2.9%), Penicillium sp. (2.4%), Aspergillus fumigatus (2.0%), Mucor sp. (1.5%), Cladosporium sp. (1.5%) and Fusarium sp. (0.5%). No dermatophyte was isolated in association with these fungi. The incidence of these infections was found to be greater in warm and humid climate.     

Cancer immunotherapy

Unprecedented progress has seen made in the last decade in the field of cancer immunotherapy. The recent approval of nivolumab （Opdivo）, the first anti-programmed cell death-1 （PD-1） antibody, for metastatic melanoma in Japan, marked a milestone in the rapidly advancing field of cancer immunotherapy. Nivolumab together with ipilimumab （Yervoy）, the anti-cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 （CTLA-4） antibody, are the first 2 drugs in the class of ＂immune checkpoint inhibitors＂ that have delivered impressive responses in patients with metastatic melanoma and renal cell cancer （RCC） as well as a variety of solid tumors.