针刺通过TLR4/NF-κB信号通路调控炎症反应治疗中枢神经系统疾病的作用机制研究进展

以Toll样受体-4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路调控炎症反应为切入点,阐述针刺治疗缺血性脑卒、脊髓损伤、帕金森病、阿尔茨海默病等中枢神经系统疾病的作用机制。针刺治疗缺血性脑卒中的机制为通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,抑制小胶质细胞激活和炎症因子释放,从而发挥神经保护作用;针刺可通过抑制NF-κB的激活,发挥抗炎作用及抗氧化应激反应,从而治疗脊髓损伤;针刺能够有效降低TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白的表达,减少其引起的神经性炎症和黑质多巴胺能神经元的凋亡,从而治疗帕金森病;针刺治疗阿尔茨海默病的机制为通过TLR4/NF-κB信号通路抑制海马区胶质细胞的激活并降低促炎性细胞因子表达,从而减缓神经元坏死和神经元凋亡。     

TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在RA中的作用及中药干预研究进展

TLR4/MyD88/NF-κB作为机体炎症的重要信号通路，参与许多疾病的发生与调控过程。类风湿关节炎（RA）是一种慢性自身免疫性疾病，发病机制尚不完全明确，但诸多研究表明，TLRs、NF-κB等炎症信号通路在RA的发生、发展中起着重要的作用，另有研究表明中药可通过影响TLRs、MyD88、NF-κB等信号通路起到调节免疫、调节细胞因子的作用。因此，拟通过分析TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在RA发生、发展中的作用，初步探讨中医药通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路治疗RA的研究现状及作用机理，为RA的治疗提供更多的治疗途径。     

针刺对慢性疲劳模型大鼠海马TLR4/NF-κB信号通路及星形胶质细胞的影响

目的：探究针刺对慢性疲劳模型大鼠海马TLR4/NF-κB信号通路及星形胶质细胞的影响。 方法：将SD大鼠分为对照组、模型组、针刺组,模型组和针刺组进行慢性束缚造模,造模后针刺组进行针刺干预。对各组大鼠进行旷场实验观察大鼠行为学变化;RT-PCR检测Tlr4、Nfkb mRNA表达;Western blot检测TLR4、p-NF-κB/NF-κB、MyD88、GFAP蛋白表达;免疫组化技术检测GFAP表达情况;Sholl分析星形胶质细胞突起形态变化。 结果：针刺可改善慢性疲劳综合征（Chronic fatigue syndrome,CFS）大鼠的行为学变化;模型组Tlr4、Nfkb mRNA表达升高,针刺组降低;与对照组相比,模型组TLR4、p-NF-κB蛋白表达升高,针刺组相对模型组TLR4、p-NF-κB蛋白表达降低,差异有统计学意义;与对照组相比,Western blot和免疫组化技术显示模型组GFAP蛋白表达下降,针刺组相对模型组GFAP蛋白表达上调,差异有统计学意义;Sholl分析结果显示模型组星形胶质细胞突起受到抑制,针刺能够修复CFS引起的星形胶质细胞突起抑制。 结论：针刺可以抑制CFS引起的神经炎症同时对星形胶质细胞起到调节作用,可能是其治疗CFS的机制之一。     

基于TLR4-NF-κB/MAPK-炎症轴的槐果碱药理作用研究进展

槐果碱为喹诺里西啶类生物碱,是从豆科槐属植物苦参、山豆根等中草药中提取而来。研究表明,槐果碱在多种疾病的进展中能抑制TLR4-NF-κB/MAPK通路,减少各类炎症因子如IL-6、IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2和MCP-1等的释放,调节免疫细胞的分泌,抵抗炎症对机体的损害,进而发挥保护肝脏、改善心血管和抗自身免疫性疾病等多种药理作用。基于TLR4-NF-κB/MAPK-炎症轴对近年来槐果碱的多种药理作用作以综述,以期为槐果碱新药进一步研究提供参考。     

基于TLR4信号通路的中药抗肝脏疾病作用研究进展

肝脏疾病是发生在肝脏的所有疾病的总称。近年来中药在治疗肝脏疾病中有一定优势,其实验研究作用显著或临床应用疗效较好,不良反应较少,呈现了广阔的前景。Toll样受体4(TLR4)信号通路与肝脏疾病息息相关,其抑制机制是通过TLR4介导的信号通路活化核转录因子-κB(NF-κB),抑制白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子的分泌,抑制肝细胞的炎症损伤,进一步抑制了IL-1β,IL-6,TNF-α等对肝星状细胞(HSC)等细胞的激活,其阻断TRL4通路的方式为①抑制TLR4的表达;②抑制TLR4二聚体化;③阻断胞内信号转导,通过作用于衔接蛋白,作用于激酶IL-1受体相关激酶(IRAKs),作用于去泛素化酶锌指蛋白A20(TLRAFst)。通过这几个方面阻断TRL4通路,抑制炎症反应发生,达到抗肝脏疾病的作用。因此,抑制或增强TLR4信号通路或针对TLR4信号通路中某些环节进行干预成为肝病治疗的新策略。目前TLR4信号通路成为中药抗肝脏疾病的靶点之一。本文对近年中药抗TLR4信号通路活化,通过中药单体及有效部位、中药提取物、中药复方等发挥抗肝脏疾病作用的文献进行整理,为下一步中西医治疗肝脏疾病提供重要的指导意义和方向。     

中药基于核因子-κB信号通路治疗骨关节炎作用机制的研究进展

骨关节炎(osteoarthritis, OA)是一种临床上常见的慢性退行性关节疾病。核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路参与机体的免疫应答、炎症反应、细胞分化、细胞凋亡等多种生物过程，与OA的发生发展关系密切。中药在改善OA症状方面疗效显著，而中药治疗OA的作用机制与抑制NF-κB信号通路的异常激活关系密切。本文概述了NF-κB信号通路，探讨了NF-κB信号通路与OA的关系，对中药基于NF-κB信号通路治疗OA作用机制的研究进展进行了综述。     

基于氧化应激和TLR4/NF-κB炎症信号通路研究地胆头治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重疗效

目的 观察地胆头治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECO-PD)患者的疗效及对氧化应激和Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)炎症信号通路及下游炎性介质表达的影响,以期为AECOPD防治提供新依据.方法 选择2018年10月-2019年6月在海南医学院第一附属医院住院治疗的AECOPD患者160例,按...     

TLR4/NF-κB信号通路在姜黄素减轻癫痫小鼠神经元损伤中的作用

目的探讨TLR4/NF-κB信号通路在姜黄素减轻癫痫小鼠神经元损伤中的作用。方法 60只小鼠腹腔注射匹罗卡品(300 mg/kg)建立癫痫模型,并随机分为对照组、模型组、治疗组,每组20只,其中对照组腹腔注射等量生理盐水,治疗组在造模前12 h腹腔注射姜黄素(400 mg/kg)。TUNEL法检测神经细胞凋亡,活性检测试剂盒检测Caspase-3表达,Western blot、免疫组织化学法检测TLR4、NF-κB蛋白水平。结果与模型组比较,治疗组Caspase-3活性、凋亡神经细胞数量显著减少(P0.05),TLR4、NF-κB蛋白平均光密度和水平显著降低(P0.05)。结论姜黄素具有一定的神经保护作用,可通过调节TLR4/NF-κB信号通路来改善癫痫小鼠神经元损伤。     

热毒宁注射液治疗AECOPD的疗效及对TLR4/NF-κB炎症信号通路的影响

目的:观察热毒宁注射液治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的临床疗效及对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)炎症信号通路的影响,并探讨其可能作用机制.方法:将72例AECOPD患者随机分为治疗组和对照组,每组各36例.对照组采用西医常规治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用热毒宁注射液治疗.比较2组的综合疗效、中医证候积分、血清TLR4/NF-KB炎症信号通路相关炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、TLR4、NF-κB]水平.结果:总有效率治疗组为91.67％(33/36),对照组为69.44％(25/36),2组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后2组中医证候积分、TNF-α、IL-6、IL-8、TLR4和NF-κB均降低,且治疗组降低幅度更明显,2组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:热毒宁注射液联合西医常规治疗AECOPD临床疗效颇佳,能有效缓解患者炎症反应,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-KB炎症信号通路的激活,减少其下游炎症因子的释放有关.     

补肾通络法干预代谢综合征及其对TLR4/NF-κB炎性信号通路影响的临床研究

目的:观察补肾通络法干预代谢综合征(MS)的疗效及其对TLR4/NF-κB炎性信号通路的影响。方法:将符合纳入标准的98例MS患者随机分为2组,在行为干预的基础上,治疗组50例口服补肾通络方药清眩颗粒,对照组48例口服二甲双胍。2个月后观察2组患者体重、血压、血糖、血脂指标及TLR4/NF-κB炎性信号通路(TLR4、NF-κB p56、IL-6、TNF-α)的变化情况。结果:2组均有减重,改善空腹血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数,降低胆固醇、低密度脂蛋白的作用(P0.05),组间比较无统计学差异(P0.05)。而治疗组降低血压、甘油三酯,升高高密度脂蛋白及调控TLR4/NF-κB炎性信号通路的作用优于对照组(P0.01或P0.05)。结论:补肾通络法能有效干预MS,其机制可能与调控TLR4/NF-κB炎性信号通路有关。     

槐定碱与TLR4/MD-2阻断剂对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞TLR4-NF-κB-TNF-α通路的影响

目的:研究槐定碱及TLR4/MD-2阻断剂对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞TLR4-NF-κB-TNF-α通路的影响,探讨其抗内毒素的药理机制。方法:培养RAW264.7巨噬细胞,分为5组:空白对照组,LPS模型组,槐定碱+LPS组,TLR4/MD-2阻断剂+LPS组,TLR4/MD-2阻断剂+槐定碱+LPS组,各组分别于处理完毕后120 min时收集细胞及细胞培养液。West-ern blot检测TLR4蛋白表达,免疫细胞化学检测NF-κB蛋白的分布与表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB,TNF-αmRNA表达,放射免疫分析法检测细胞培养液中TNF-α含量。结果:与LPS模型组比较,槐定碱+LPS组TLR4蛋白,NF-κBmRNA与NF-κB入核率,TNF-αmRNA及培养液中TNF-α含量均显著降低(P<0.01);TLR4/MD-2阻断剂+LPS组与TLR4/MD-2阻断剂+槐定碱+LPS组NF-κB mRNA及NF-κB入核率,TNF-αmRNA及培养液中TNF-α含量均低于LPS模型组(P<0.01),接近空白对照组,但2组之间上述各值的差异均无统计学意义。结论:TLR4/MD-2可能是槐定碱作用的靶位之一,槐定碱抑制TLR4-NF-κB-TNF-α通路活化可能是其抗内毒素机制之一。     

香砂六君子汤对菌致慢性萎缩性胃炎TLR信号通路的影响

为研究香砂六君子汤对幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)大鼠的疗效及其对Toll样受体(Toll likereceptors,TLR)信号通路的影响。将60只清洁级的SD大鼠随机分为6组:正常对照组,模型组,香砂六君子汤组(低、中、高剂量3组)以及抑制剂(SB203580)组。通过采用幽门螺杆菌(HP)灌胃构建慢性萎缩性胃炎模型。组织病理检测胃黏膜组织的病变情况;ELISA检测TNF-α,IL-6含量以及iNOS的活性;硝酸还原酶法测定NO的含量;QPCR,Western-blot检测胃黏膜组织TLR2,TLR4,P38MAPK,NF-κB基因的表达情况。结果显示,大鼠模型组与正常对照组相比,胃黏膜组织TLR2,TLR4,p-P38MAPK蛋白以及细胞核内NF-κB蛋白表达均增加(P0.01);与模型组相比,香砂六君子汤组大鼠胃黏膜TLR2,TLR4,p-P38MAPK蛋白以及细胞核内NF-κB蛋白表达逐渐降低,以高剂量组降低最为明显(P0.01),且HP根除率逐渐提高、慢性萎缩性胃炎的病理变化逐渐减轻。结果表明,在大鼠模型中,HP通过激活TLR2,TLR4/MAPK/NF-κB/iNOS/NO信号通路诱发慢性萎缩性胃炎的病理改变,香砂六君子汤能根除HP,可减轻HP引起的慢性萎缩性胃炎的黏膜炎症反应。该中药方剂治疗HP所致的慢性萎缩性胃炎既安全又有效。     

自噬及中医药调控自噬在治疗和防治疾病中的研究进展

自噬是广泛存在于真核细胞中的生命现象,维持细胞内的稳态及胞内成分的不断更新,在保持细胞正常的生理状态过程中起着至关重要的调节作用。其是一条依赖溶酶体降解的途径,它具有清除细胞内蛋白质聚集体、损伤的细胞器,维持细胞内稳态的作用,同时还参与细胞很多生理和病理过程,尤其与肿瘤和神经退行性疾病的发生发展密切相关。近年来,中药单体通过调控自噬的某些信号通路,影响和抑制肿瘤的发生发展的作用机制日渐明了;此外,中医药在防治老年神经退行性疾病理论知识方面也取得了很多突破;本文介绍了与自噬密切相关的信号通路如雷帕霉素靶向蛋白信号通路(m TOR),磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号转导通路,活性氧(ROS)信号通路,核转录因子-κB(NF-κB)信号通路,另外还从中药单体调节自噬机制方面,概述中药单体在肿瘤和神经退行性疾病治疗中的应用及其分子机制。诸多研究表明,中药单体通过激活自噬途径,调节自噬活性,在肿瘤治疗和防治老年病如帕金森、阿尔兹海默症、亨廷顿等疾病方面有很好的改善作用,研究中药单体对肿瘤和神经退行性疾病的防治是崭新的思路和方法,以期为中医药研究工作者在探索中医药调控自噬的作用靶点研究中提供基础理论支撑,发现更多的中药及单体化合物通过调节自噬用于治疗肿瘤、神经退行性疾病等多种疾病。     

基于肠道菌群探讨中医药调控阿尔茨海默病相关信号通路研究进展

阿尔茨海默病(AD)是慢性神经退行性疾病，其发病机制复杂且未完全阐明，亟待进一步探索新的治疗靶点。阿尔茨海默病的病理机制极为复杂，涉及的信号通路繁多，主要与炎症反应、氧化应激、细胞凋亡等过程有关，同时肠道菌群紊乱影响AD患者海马区Aβ清除功能促进该病的发生发展。目前，西医治疗阿尔茨海默病的研究进展较缓慢，且其临床应用效果仍不理想。中医治疗该病具有悠久的历史，具有疗效确切、不良反应少的特点。因此，现以肠道菌群失调激活/抑制AD相关信号通路为出发点，总结中药单体、中药复方或针灸在治疗AD中所涉及的BDNF/TrkB、C/EBPβ/AEP、HMGB1/TLR4/NF-κB、Wnt/β-catenin、TMA/FMO3/TMAO信号通路。旨在探讨中医药治疗AD的优势，为探寻AD防治的新策略拓展思路。     

Toll样受体4与溃疡性结肠炎相关性研究

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种病因尚未完全阐明的慢性非特异性炎性肠病,近几年研究发现Toll样受体4(TLR4)在UC的发生发展过程中起到了极其重要的作用。TLR4信号转导主要通过MyD88依赖性信号转导路径和MyD88非依赖性信号转导路径活化NF-κB及炎症因子转录,从而导致NF-κB激活,引起炎性因子释放,最终介导炎症反应。大量的研究显示UC动物实验模型和UC患者结肠黏膜中TLR4的高表达,干预TLR4通路传导的相关药物的实验疗效也得到了证实。TLR4信号转导通路为今后治疗UC提供了新的思路。     

TLR4/NF-κB信号通路调控血管性痴呆小胶质细胞极化以及中医治疗的研究进展

血管性痴呆(vascular dementia, VaD)为临床常见的神经退行性疾病,严重危害人类健康。不管是持续低灌注状态还是重建血流导致的再灌注损伤,大脑中都存在严重的神经性炎症,其中小胶质细胞作为中枢神经系统炎症反应的关键调节因子,在神经元的死亡起着重要的作用,其表型极化的激活传统上被归类为神经毒性M1型或神经保护性M2型,促进小胶质细胞向M2型极化具有明显抗炎作用而改善神经炎症。Toll样受体(toll like receptors TLRS)家族的TLR4在小胶质细胞表面广泛表达,并通过激活下游信号经典炎症蛋白核因子κB(nuclear factor kappa-B)NF-κB参与神经炎症的调节,因此研究TLR4/NF-κB信号通路通过调控小胶质细胞表型极化而抑制神经性炎症具有重要的意义,中医药治疗VaD具有悠久的历史,其疗效显著不良反应小,目前多项研究表明中医药单体、中药复方等通过多靶点治疗的优势,可通过抑制TLR4/NF-κB的激活从而调控小胶质细胞从炎症M1表型到保护性M2表型的早期转变而保护神经元细胞,因而从TLR4/NF-κB信号通路调控VaD小胶质细胞极化的机制研...     

不同年龄小鼠感染流感病毒后TLR4/NF-κB信号通路改变的对比研究

目的:观察流感病毒对幼龄鼠与成龄鼠肺组织NF-κB p65及TLR4的表达的影响。方法:昆明种小鼠随机分为幼龄模型组、成龄模型组、幼龄正常对照组、成龄正常对照组,每组40只,采用经鼻腔接种甲型流感病毒FM1株使小鼠产生肺炎。各组小鼠感染第1、3、5、7天,处死动物取材,每组各取10只,采用免疫组化染色法检测各组小鼠肺组织NF-k B p65和TLR4的表达。结果:幼龄鼠TLR4、NF-κB P65表达显著升高,成龄鼠轻度升高,二者差异显著。结论:幼龄鼠和成龄鼠IV感染后肺组织TLR4-NF-κB P65信号通路活化程度不同。     

盆宁煎剂灌肠治疗慢性子宫内膜炎临床疗效及对TLR4-MyD88-NF-κB炎性信号通路的影响

目的：观察盆宁煎剂治疗慢性子宫内膜炎患者的疗效及可能的作用机制。方法：观察100例宫腔镜检查联合病理诊断为慢性子宫内膜炎患者，其中观察组52例，对照组48例。对照组予常规抗生素治疗，观察组予盆宁煎剂灌肠治疗。评价两组治疗后的临床疗效；检测两组患者子宫内膜组织炎性相关因子表达，包括Toll样受体4(TLR4)蛋白、核转录因子κB(NF-κB)蛋白、髓样分化因子88(MyD88)；随访患者妊娠成功率。结果：观察组总有效率高于对照组（P<0.05）；两组治疗后TLR4、NF-κB、MyD88表达均低于治疗前，观察组明显低于对照组（P<0.05）；治疗后6个月内观察组妊娠率明显高于对照组（P<0.05）。结论：盆宁煎剂对慢性子宫内膜炎患者具有较好的临床疗效，其机制可能与抑制TLR4信号通路的激活，下调下游因子MyD88、NF-κB的表达有关。     

蠲痹历节清方对痛风细胞模型中TLR4/NF-κB信号通路主要元件的影响

目的:研究蠲痹历节清方对痛风作用及对TLR4/NF-κB信号通路主要元件的影响。方法:实验分为两部分,①不添加TLR4受体抑制剂部分;②添加TLR4受体抑制剂部分。每部分利用单钠尿酸盐(MSU)结晶诱导巨噬细胞产生痛风模型,随机分正常对照组、模型组、蠲痹历节清方组,并分别干预。用Westen-blot法测定干预后巨噬细胞中髓样分化分子88(MyD88)、IκB激酶-β(IKK-β)、NF-κB抑制蛋白α(IκB-α)蛋白表达,RT-PCR测定干预后各组巨噬细胞中Toll样受体4(TLR4)基因表达;免疫荧光法检测巨噬细胞核转录因子kappa B(NF-κB)核移位情况;ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果:不添加TLR4受体抑制剂部分:与正常对照组相比,模型组MyD88蛋白、IKK-β、TLR4 mRNA表达含量明显升高;TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显升高;IκB-α蛋白明显降低。与模型组比较,蠲痹历节清方组中MyD88蛋白、IKK-β、TLR4 mRNA表达含量明显降低;TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显降低;IκB-α蛋白含量明显升高。正常对照组血清组中NF-κB p65主要集中在细胞浆,细胞核中表达较少,模型组中NF-κB蛋白表达呈猩红色明显增强,主要集中在细胞核中,细胞浆中较少,表明NF-κB核移位明显;蠲痹历节清方组NF-κB主要在细胞浆中,细胞核中相对较少,未出现明显NF-κB核移位情况。同步使用通路阻断剂TAK-242(TLR4受体抑制剂)进行试验对照,上述通路及其上下游各分子(因子)水平均受到明显抑制。各组巨噬细胞NF-κB表达明显受到抑制。结论:蠲痹历节清方可改善痛风细胞模型炎症因子情况,抑制TLR4 mRNA及MyD88、IKK-β蛋白表达和上调IκB-α蛋白表达、抑制NF-κB活化作用,因此推测蠲痹历节清方治疗急性痛风性关节炎局部组织炎症的部分作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路表达有关,可能是以通路中MyD88依赖性信号转导经典途径。     

补肾通脉方对急性心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗术后患者血清TLR4/NF-κB炎性信号通路的影响

目的观察补肾通脉方干预急性心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后患者的疗效及可能作用机制。方法将96例急性心肌梗死且急诊行PCI术后患者随机分为治疗组和对照组各48例,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上,于术后第2天开始加用补肾通脉方口服4周。于治疗前后测定两组患者血清TLR4/NF-κB炎性信号通路相关因子表达,包括白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平及Toll样受体4(TLR4)蛋白、核转录因子κB(NF-κB)蛋白;并于治疗后评价心功能疗效。结果治疗后治疗组心功能疗效总有效率为95.8%,高于对照组的85.4%(P0.05);治疗组与对照组治疗前IL-6、TNF-α水平及TLR4蛋白、NF-κB蛋白水平比较差异无统计学意义(P0.05),治疗后两组IL-6、TNF-α水平及TLR4蛋白、NF-κB蛋白均低于本组治疗前(P0.05),且治疗组低于对照组(P0.05)。结论补肾通脉方对急性心肌梗死PCI术后患者具有心肌保护作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB炎性信号通路的激活,减少其下游炎症因子TNF-α、IL-6的表达有关。