应用大载体-生物反应罐系统生产抗人B型红细胞单克隆抗体

应用体外细胞大量繁殖系统生产抗人B型红细胞单克隆抗体,结合细胞生长和分泌抗体的特性,设置离线和在线参数等,对细胞增殖状态和生产抗体进行连续控制。一次运转52天,共收获含抗体培液23.25L,血凝效价1:64～1:512,为批量生产以单克隆抗体作为人血型定型试剂提供了条件。     

抗人血浆纤维结合蛋白单克隆抗体的初步研究

本文应用人血浆纤维结合蛋白免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经细胞融合制备出一组（５株）人血浆纤维结合蛋白的单克隆抗体。经免疫酶标和免疫组化检测，这组单抗仅特异地与人血浆纤维结合蛋白结合，而与血浆中的其它大分子糖蛋白如纤维蛋白原、凝血酶敏感蛋白和胶原等均无明显的交叉反应。与多种器官，组织的间质可发生性异性反应，而与组织中的细胞则无反应，间接免疫荧光测定，这组抗体与正常人的造血细胞及某些造血细胞系和部分白血病病     

人醛缩酶A单克隆抗体的制备及应用

纯化并鉴定了人醛缩酶Ａ、Ｂ、Ｃ（ｈＡＬＤ－Ａ、Ｂ、Ｃ）。用ｈＡＬＤ－Ａ免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，将免疫的脾细胞和Ｐ＿３－Ｘ＿（６３）－Ａｇ８．６５３骨髓瘤细胞用ＰＥＧ进行融合，用ＥＬＩＳＡ法筛选，ｈＡＬＤ－Ｂ、Ｃ作阴性对照，将阳性反应的杂交瘤细胞进行克隆，获得３株杂交瘤细胞株。其ＭｃＡｂ的亚类分别为ＩｇＧ２ｂ，ＩｇＧ１、ＩｇＭ，亲合常数分别为７．５×１０￣（１０）、３．５×１０￣９、２．３×１０￣９。３株细胞株分泌的单抗通过Ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ得到证实。用亲合层析法从人肝癌细胞中提纯了ＡＬＤ－Ａ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示为单一区带，但其电泳迁移率较ｈＡＬＤ－Ａ滞后。     

抗人胰岛素单克隆抗体的制备及其应用

抗人胰岛素单克隆抗体的制备及其应用刘彩云孙素莲（北京市肿瘤防治研究所免疫室，北京１０００３４）人血中胰岛素的测定主要用于评估糖尿病患者胰岛细胞的分泌功能，对于选用药物和判定某些药物的疗效，以及对胰岛瘤的诊断也具有一定的意义。目前，一般应用ＲＩＡ测定人...     

抗重组人干扰素-α2b单克隆抗体的制备与应用

<正> 人α型IFN治疗慢性乙型肝炎、丙型肝炎及白血病有显著疗效。rHuIFN-α2b因其副作用小,疗效高,因而更为广泛使用。其生产过程中亲和层析纯化至关重要。为此我们制备了高特异性单克隆抗体3D9McAb用于分离纯化重组人干扰素α-2b(rHuIFN-α2b),现报道如下。1 材料和方法1.1 rHuIFN-α2b抗原制备 本所自制,用亲和层析柱纯化,比活2.0×10~8IU/mg,SDS-PAGE纯度达99％。1.2 单抗的筛选和制备 取8周龄雌Balb/c小鼠,用适当处理过的抗原免疫5次后进行细胞融合。ELISA法筛选,有限稀释法4次克隆后获得3D9细胞扩大培养,诱生腹水。     

抗人纤维结合蛋白单克隆抗体的研制及其在妊娠高血压综合征诊断和预测中的应用

纤维结合蛋白(Fibronectin，FN)．是分子量为44万的糖蛋白，存在于血浆和细胞外基质中，与细胞的许多生物学活性有关，体液中FN的浓度有重要的生理意义，在感染、创伤、器官功能衰竭等疾病时，测定血FN的浓度有助于疾病的诊断和预后的判断。由于单克隆抗体(McAb)具有特异性高，抗体成份、性质和结构纯一，试验结果重复性好等优点，正在不断替代多克隆抗体作为临床诊断试剂。     

ABO血型McAb取代常规人血清血型试剂的可行性探讨

为了获得可用于大量细胞培养生产血型单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,本文在7次细胞融合中,建立了35种分泌抗A、抗B McAb的细胞株,并对其细胞培养上清抗体效价≥1:128的6种McAb进行特性分析和临床验证,实验结果表明,这些细胞具有工业生产血型 McAb的潜力,本文对所得McAb替代现用人血清血型试剂的可行性进行探讨。     

腺病毒抗独特型单克隆抗体的制备及性质研究

采用了多种免疫方式及一种新的检测方法：用经固定的杂交瘤细胞（Ａｂ１）包被酶标板，加入待测上清孵育后加入只与哺乳类动物抗体Ｆｃ段结合的ＨＲＰ－ＰｒｏｔｅｉｎＡ。共得到了６株分泌抗独特型单抗的杂交瘤细胞。其中两株与Ａｂｌ的结合可被腺病毒抑制，且都能在Ｂａｌｂ／ｃ小鼠诱导出与腺病毒结合的Ａｂ３。因此为Ａｂ２β。     

抗hCG-β单克隆抗体的产生及初步鉴定

本文报道用hCG免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞NS-1融合,获得6株分泌抗hCG单克隆抗体的杂交瘤细胞。其中,2B5和2D8二株细胞的分泌抗体,对hCG-β亚基呈强阳性反应。其培养液抗体的ELISA效价为10~(-2)～10~(-4);注入同系小鼠腹腔诱生的腹水抗体效价达10~(-5)～10~(-7)。2B5抗体为IgA,2D8抗体属IgG_1。它们对hCG-β的亲和常数(K_a)分别为0.8×10~9升/克分子和1.8×10~9升/克分子.在以~(125)I-hCG-β作为标记物的检测系统中,2B5抗体在50％抑制时同hLH的交叉反应为5.7％,而2D8抗体为3.1％.     

抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的研制和初步应用

本文采用体细胞杂交瘤技术和酶联免疫吸附试验筛选技术,获得了6株持续分泌抗人甲状腺球蛋白 McAb 的杂交瘤细胞系。这6种 McAb 对人 T_3/T_4、及家兔、小牛、大鼠的甲状腺球蛋白均无交叉反应,但其中4种 McAb 对狗甲状腺球蛋白有不同程度的交叉反应,包括2种 McAb对人甲状腺微粒体也有交叉反应,余2种 McAb 均无交叉反应。将所得杂交瘤细胞接种 BALB/c鼠腹腔,获得高效价的腹水 McAb。本文还以这些 McAb 用免疫组化法,研究和检测病理甲状腺组织中甲状腺球蛋白的可能性进行了初步探索,并讨论了其临床意义。     

抗核心脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放IL-1及其mRNA表达的影响

采用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ等方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＩＬ－１及其ｍＲ－ＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＩＬ－１的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能降低ＩＬ－１ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ作用于效应细胞，从而降低或阻碍了效应细胞中ＩＬ－１ｍＲＮＡ的表达，达到抑制细胞释放ＩＬ－１的作用。     

鼠抗人Fas单克隆抗体的制备及鉴定

采用Ｊｕｒｋａｔ细胞Ｂａｌｂ／ｃ小鼠制备１株抗人ＦａｓｍＡｂ２Ａ１,它能特异性识别Ｊｕｒｋａｔ,Ｒａｊｉ,ＴＨＰ－１细胞膜表面５０ＫＤ左右的蛋白,并能与ＳｒＦａｓ标准蛋白反应,其识别的细胞膜蛋白与单抗特异性抗人Ｆａｓ ＰｃＡｂＮ－１８相一致。ｌｅｑ     

微透析技术在建立灵长类帕金森病模型中的应用

为了检测单侧注射ＭＰＴＰ制备的帕金森病恒河猴模型纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量变化,本研究采用脑内微透析技术和高效液相色谱－ 电化学方法检测了双侧尾状核头部多巴胺及其代谢产物３,４－二羟基苯乙酸和高香草酸的含量。结果证明,ＭＰＴＰ注射侧与注射对侧相比,多巴胺、３,４－二羟基笨乙酸和高香草酸的含量分别降低８５．７％ , ９５．１％ 和６７．８％ 。这与动物呈现单侧帕金森病症状,核磁共振检查显示单侧黑质区域密度减低、面积缩小以及经抗酪氨酸羟化酶免疫组化方法显示脑切片单侧多巴胺能神经元明显减少等现象一致。以上结果表明,脑内微透析技术是活体检测脑内神经递质含量变化的有效方法,可以反映模型的病程变化,可用于评价帕金森病的治疗效果。     

抗人白介素6受体单抗的制备和鉴定

利用重组人可溶性ＩＬ－６受体免疫小鼠后，制备了两株抗ＩＬ－６Ｒ的单克隆抗体１７６／Ｂ６帮１５１／Ｈ１２两者分别识别ＩＬ－６胞外肽段的近膜区和远膜区。免疫迹分析表明，两株单抗均能够特异地结合天然的膜ＩＬ－６Ｒ蛋白，然而不能阻断ＩＬ－６Ｒ的生物功能。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

用肾综合征出血热病毒(HFRSV)陈氏株免疫获得5株单克隆抗体(McAb).B_9株McAb具有血凝抑制和体内保护活性:F_-3、H_(11)株McAb具有较弱的中和活性及体内保护活性;B_9株McAb与重型HFRSV毒株的大部分发生反应.与轻型HFRSV毒株不反应;F_3、H_7株McAb与检测的24个HFRSV毒株均发生反应.B_(11)、F_3、H_7、H_(11)等4株McAb可用于酶联免疫吸附试验。