乳腺癌干细胞及其分化细胞中雌激素受体、孕激素受体和人类表皮生长因子受体2的表达

目的探讨乳腺癌干细胞及其分化细胞中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人类表皮生长因子受体2(HER-2)的表达及意义。方法选取2016年1月至2016年10月新乡医学院第一附属医院标本室保存的新鲜乳腺癌标本35例,制备单细胞悬液,利用免疫磁珠分选法进行细胞分选,分选出乳腺癌干细胞(CD44~+CD24~-/low细胞)和分化细胞(CD44~-CD24~-细胞),利用Envision二步法检测乳腺癌干细胞及其分化细胞中ER、PR、HER-2的表达。结果同一患者的乳腺癌干细胞与分化细胞的ER、PR、HER-2表达呈现出3种情况:(1)乳腺癌干细胞阴性表达,分化细胞阳性表达;(2)乳腺癌干细胞阳性表达,分化细胞阳性表达;(3)乳腺癌干细胞阴性表达,分化细胞阴性表达。分化细胞中ER、PR及HER-2阳性表达率显著高于乳腺癌干细胞(P<0.05)。乳腺癌干细胞及其分化细胞共有4种表型,分别为SR~+HER-2~-、SR~+HER-2~+、SR-HER-2~+和SR-HER-2~-,其中,SR表示ER和(或)PR。乳腺癌干细胞的SR-HER-2~-表型比例最大,分化细胞的SR~+HER-2~-表型比例最大;分化细胞的SR~+HER-2~-、SR~+HER-2~+表型比例显著高于乳腺癌干细胞(P<0.05),分化细胞的SR-HER-2~-表型比例显著低于乳腺癌干细胞(P<0.05),但分化细胞与乳腺癌干细胞的SR-HER-2~+表型比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论乳腺癌干细胞中ER、PR、HER-2阳性表达较低,随着乳腺癌干细胞的不断分化,阳性表达逐渐增加。     

雌激素对乳腺癌细胞的生长及p185蛋白和表皮生长因子受体表…

为了研究乳腺癌的发展过程中雌二醇（Ｅ２）的作用机制及参与因素，作者使用流式细胞仪观察了人乳腺癌细胞株ＳＫ－ＢＲ－３在Ｅ２作用下的生长特征及ｐ１８５蛋白和表皮生长因子（ＥＧＦ）受体的表达。结果提示ＥＧＦ在乳腺癌的早期发展中可能发挥主要的作用。     

SiRNA-EGFR对人乳腺癌细胞表皮生长因子受体表达的影响

目的 探讨SiRNA-EGFR对人乳腺癌细胞乳腺癌表皮生长因子受体表达的影响.方法 应用RT-PCR测定RNA干扰人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-453S、ZR-75和ZR-75-30后Hyase基因的mRNA的表达变化.结果 SiRNA-EGFR作用于表达不同水平透明质酸酶的人乳腺癌细胞铢MDA-MB-231、MDA-MB-453S、ZR.75.30和ZR-75后能明显抑制其乳腺癌表皮生长因子受体的mRNA表达水平(P＜0.05).结论 iRNA-EGFR作用于人乳腺癌细胞后能特异性抑制EGFR的mRNA的表达水平.     

乳腺癌雌激素受体和人类表皮生长因子受体-2联合表达与淋巴结转移相关性分析

目的 分析乳腺癌组织中雌激素受体（ER）、人类表皮生长因子受体-2(HER2)的表达与腋窝淋巴结转移的相关性,为其临床诊疗提供参考。方法 选取成都医学院第二附属医院·核工业四一六医院2018年1月至2022年1月收治的148例乳腺癌患者为研究对象,采用免疫组化法检测肿瘤原发灶中ER、HER2蛋白表达,并分析患者肿瘤原发灶ER、HER2蛋白表达与淋巴结转移情况。结果 乳腺癌患者肿瘤原发灶中ER联合HER2的表达情况与淋巴结转移相关（r=0.235,P<0.05）。结论 乳腺癌原发灶组织中ER联合HER2的表达与淋巴结转移相关,ER-/HER2+乳腺癌患者需积极探查淋巴结情况。     

表皮生长因子受体反义RNA表达对乳腺癌细胞恶性表型的抑制作用

表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）是具有酪氨酸蛋白激酶活性的跨膜糖蛋白［１］。为了直接观察ＥＧＦＲ过表达在人类肿瘤中的作用，我们应用反义核酸技术，针对ＥＧＦＲ５′１３５０ｂｐ片段构建了反义ＲＮＡ表达质粒ｐＬＸＳＮＡＥ５′，将其导入人乳腺癌细胞ＭＤＡＭＢ...     

老年乳腺癌组织中雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体2的表达及临床意义

目的:分析雌激素受体(estrogen receptor,ER),孕激素受体(progesterone receptor,PR),人表皮生长因子受体2 (human epithelial receptor-2,CerbB2)在老年女性乳腺癌中的表达情况,并探讨其临床意义.方法:回顾性分析125例老年乳腺癌患者的临床资料,免疫组织化学法检测ER,PR及CerbB2的表达情况,分析其与肿块大小、组织学分级、肿瘤部位以及淋巴结转移情况的关系.结果:ER,PR,CerbB2呈阳性表达者分别为84例(67.2％),83例(66.4％),25例(20.0％).ER,PR阳性表达与患者组织学分级相关,CerbB2阳性表达与患者肿块大小、组织学分级和淋巴结转移显著相关(P均＜0.01).3年及5年生存率分别为74.9％和62.0％,中位生存时间6.9年.结论:ER,PR在老年乳腺癌患者中阳性表达率高,而CerbB2阳性表达率低,联合检测三者表达可较好地反映老年乳腺癌病理生物学特征并指导手术治疗.     

对-壬基酚对MCF-7人类乳腺癌细胞雌激素受体表达的影响

目的　观察对 -壬基酚 (p- NP)对 MCF- 7人类乳腺癌细胞株雌激素受体 (ER)及 ERαm RNA表达的影响 ,探讨其雌激素样活性。方法　以 RPMI 16 4 0培养液 (含 10 %小牛血清 )对 MCF- 7细胞进行半开放式贴壁培养 ,试验前以 DMEM(不含酚红 )培养液洗涤细胞 ,以含 3% C/D胎牛血清的 DMEM(不含酚红 )培养液继续培养 3d。试验设溶剂对照、阳性对照和 p- NP 5个浓度组 ,采用免疫组织化学法和定量 RT- PCR法分别对 MCF- 7细胞 ER蛋白和 ERαm RNA表达情况进行分析。结果　 1× 10 - 5m ol/L p- NP作用于 MCF- 7细胞 2 4 h下调 ER蛋白表达 ;1× 10 - 6 mol/L～ 1× 10 - 5m ol/L p- NP作用于 MCF- 7细胞 2 h和 2 4 h下调 ERαm RNA表达。p- NP各浓度组均表现出 ER蛋白和 ERαm RNA表达随 p- NP作用于 MCF- 7细胞时间的延长而进一步下降的趋势。结论　 p- NP可模拟雌激素下调 MCF- 7细胞 ER蛋白和 ERαm RNA表达 ,具有雌激素样活性     

表皮生长因子受体与雌激素受体在良性前列腺增生组织中表达的研究

表皮生长因子受体与雌激素受体在良性前列腺增生组织中表达的研究中国医科大学第二临床学院泌尿外科（１１０００３）卜仁戈宋永胜郭恩忠表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）与其配体结合后，会引起细胞的增殖及分化，有学者认为ＥＧＦＲ在良性前列腺增生（ＢＰＨ）的发生中起重...     

子宫肌瘤中表皮细胞生长因子受体变化及其与雌激素和孕激素受体的关系

目的 探讨人子宫肌瘤及周围正常子宫平滑肌细胞中表皮细胞生长因子受体(EGFR)的变化及其与雌、孕激素受体的关系.方法 选择30例子宫肌瘤患者为研究对象,子宫肌瘤组(S组)为手术切除的子宫肌瘤组织,对照组分别为子宫肌瘤周围邻近肌层组织(A组)及远离子宫肌瘤5 cm的正常平滑肌组织(B组).应用免疫组织化学亲和素-生物素-过氧化酶复合物(SABC)法检测雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及EGFR的表达,并对其进行图像分析.结果 3组子宫组织中,ER及EGFR的阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.01);3组子宫组织中,PR的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05).S组增生期和分泌期子宫组织中ER、EGFR的阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 子宫肌瘤的生长与子宫肌瘤组织细胞ER、EGFR的表达增强有关.     

雌激素对乳腺癌细胞的生长及p185蛋白和表皮生长因子受体表达的影响

为了研究乳腺癌的发展过程中雌二醇（Ｅ＿２）的作用机制及参与因素，作者使用流式细胞仪观察了人乳腺癌细胞株ＳＫ－ＢＲ－３在Ｅ＿２作用下的生长特征及ｐ１８５蛋白和表皮生长因子（ＥＧＦ）受体的表达．结果表明，乳腺癌细胞生长加快，ＤＮＡ合成增加，Ｓ期百分率升高（Ｅ＿２组２６．７±２．５，对照组２１．２±２．１，Ｐ＜０．０５）．在Ｅ＿２的作用下，乳腺癌细胞的ｐ１８５蛋白表达降低（Ｅ＿２３５±５．６，对照组６１±１３．１，Ｐ＜０．０５）而ＥＧＦ受体表达升高（Ｅ＿２３９±６．９，对照组２１±５．４，Ｐ＜０．０５），提示ＥＧＦ在乳腺癌的早期发展中可能发挥更主要的作用．     

人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中糖皮质激素受体的表达及其调节

目的研究地塞米松(Dex)在MCF-7细胞中是否具有糖皮质激素受体(GR)的表达,以及Dex对其受体表达的调节。方法采用氨基安替比林法测定GR拮抗剂(RU486)作用MCF-7细胞后能否阻断糖皮质激素的效应,采用放射配体结合分析法检测MCF-7细胞中GR的表达及Dex对其调节作用。结果 RU486可完全阻断Dex对MCF-7细胞活性的诱导作用;在细胞中存在高亲和力、低容量GR;Dex明显降低GR结合活性,且具有时间、剂量依赖性。结论在MCF-7细胞中存在GR,Dex调节MCF-7细胞增殖分化的作用通过 GR介导,Dex对MCF-7细胞GR的结合活性具有向下调节作用,且呈时间、剂量依赖性。     

羟基喜树碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨羟基喜树碱在体外对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响,为乳腺癌的临床用药提供实验依据。方法：将不同浓度（10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L）的羟基喜树碱作用于人乳腺癌MCF-7细胞48 h,并设不加羟基喜树碱溶液的MCF-7细胞作为对照组,用MTT法测定MCF-7细胞的增殖情况,用Hoechst33258染色检测MCF-7细胞的凋亡情况,以RT-PCR检测羟基喜树碱对MCF-7细胞Casepase-3 mRNA表达的影响。结果：与对照组比较,50μmol/L、100μmol/L及200μmol/L羟基喜树碱对细胞增殖均有抑制作用（P〈0.05、P〈0.01）,尤以200μmol/L的抑制作用最明显,其抑制率呈浓度依赖性增加。荧光显微镜观察显示,100μmol/L及200μmol/L羟基喜树碱处理组中可见典型的凋亡形态学改变。与对照组比较,各羟基喜树碱处理组中MCF-7细胞Caspase-3 mRNA表达水平均升高（P〈0.05、P〈0.01）,并呈浓度依赖性升高趋势。结论：羟基喜树碱可在体外抑制MCF-7细胞增殖,并通过Caspase-3途径诱导细胞凋亡,达到抑制肿瘤细胞生长的作用。     

尿激酶型纤溶酶原激活剂和血管内皮生长因子在乳腺癌中表达的临床意义

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂（urokinase type plasmivnogen activator,UPA）和血管内皮生长因子（vas-calia endothelial grouth factor,VEGF）在乳腺癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法利用SP免疫组织化学方法检测86例乳腺癌、46例腺瘤中UPA和VEGF的表达,并分析它们之间的关系。结果UPA和VEGF在乳腺腺瘤中阳性率分别为32．6l1％（15／46）和34．78％（16／46）;乳腺癌中阳性率前者为58．89％（53／90）,后者为56．67％（51,90）,在乳腺癌中的表达明显高于腺瘤（P〈0．05）;在浸润型癌组的表达明显高于原位癌组（P〈0．05）;淋巴结转移组明显高于无转移组（P〈0．05）。结论UPA和VEGF高表达与乳腺癌发生及转移有关,而且两者呈低度正相关。检测乳腺癌UPA和VEGF对提示预后和靶向化学治疗有指导作用。     

人乳腺癌细胞株MCF-7、MCF-7／ADM细胞迁移能力的对比研究

目的探讨乳腺癌细胞化疗继发耐药后细胞迁移能力的变化,并筛选出相关基因。方法以MCF-7细胞株为亲本细胞,采用阿霉素（ADM）低浓度持续加量诱导法建立对ADM耐药的人乳腺癌细胞株MCF-7／ADM。应用ATP-TCA药物敏感检测法和×CELLligence／RT-CES实时细胞电子分析系统检测人乳腺癌细胞株MCF-7、MCF-7／ADM对多种化疗药物的耐药情况及细胞增殖能力。应用Transwell实验和xCELLligence／RT-CIM实时细胞电子分析系统检测人乳腺癌细胞株MCF-7、MCF-7／ADM的细胞迁移能力。应用比较基因组芯片筛选出人乳腺癌细胞株MCF-7、MCF-7／ADMDNA拷贝数4倍差异的基因。结果撤药培养150d后,MCF-7／ADM细胞较亲本细胞MCF-7的ADM耐药指数为72.9,对其他化疗药物无明显的交叉耐药性。MCF-7／ADM细胞迁移能力较MCF-7明显降低（P〈0．05）。MCF-7／ADM有12种基因DNA拷贝数是MCF-7的4倍,MCF-7有6种基因DNA拷贝数是MCF-7／ADM的4倍。结论乳腺癌细胞化疗继发耐药伴随细胞迁移能力明显降低,其相关基因的DNA拷贝数亦有明显差异。     

乳腺癌BAG-1基因表达与表皮生长因子受体表达的相关性

目的 探讨乳腺癌BAG-1基因表达与表皮生长因子受体（EGFR）表达的相关性。方法 培养乳腺癌细胞株,采用实时聚合酶链反应技术检测EGFR（＋）和EGFR（-）细胞株中BAG-1 m RNA的表达情况,West blot法检测其蛋白水平。分析BAG-1基因表达与EGFR表达的相关性。结果 MDA-MB-231、T47D细胞株EGFR m RNA和EGFR蛋白阳性表达,MCF-7、SLBP3细胞株EGFR m RNA和EGFR蛋白阴性表达。T47D细胞株BAG-1 m RNA的表达水平最高[（29.6±0.4）×10-4],其次为MDA-MB-231细胞株[（6.9±0.3）×10-4],两者的表达水平均显著高于MCF-7细胞株[（4.3±0.5）×10-4]、SKBR3细胞株[（0.3±0.1）×10-4],差异的有高度统计学意义（P〈0.01）。结论 BAG-1表达与EGFR存在相关性,可作为乳腺癌靶向治疗的潜在靶点。     

三氧化二砷对人乳腺癌耐药细胞系MCF-7/BCRP的细胞毒作用

【目的】探讨三氧化二砷(As2O3)对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/BCRP的毒性作用及其作用机制。【方法】MTT法和台月分蓝拒染实验检测As2O3对MCF-7/BCRP细胞的毒性作用;氚-嘧啶核苷掺入法检测As2O3对MCF-7/BCRP细胞的增殖抑制;流式细胞术测定As2O3对MCF-7/BCRP细胞周期和凋亡的影响。【结果】As2O3可显著抑制MCF-7/BCRP细胞生长,呈剂量效应关系(r=0.977,P<0.05),IC50为4.06μmol/L;As2O3可直接诱导细胞死亡,抑制细胞增殖,并使细胞周期阻滞在G2/M期,促进细胞凋亡。【结论】As2O3对MCF-7/BCRP细胞有显著的毒性作用,可直接引起细胞死亡。     

Nanog表达上调促进乳腺癌细胞MCF-7的增殖和侵袭

目的：观察Nanog高表达对乳腺癌细胞MCF-7生物学特性的影响。方法：构建重组质粒pcDNA3.1（-）-Nanog,利用免疫荧光观察Nanog高表达后,乳腺癌细胞MCF-7中Nanog的定位。利用平皿克隆分离法获得Nanog高表达的乳腺癌细胞系MCF-7。应用克隆形成实验、Transwell迁移和侵袭实验观察Nanog高表达对乳腺癌细胞MCF-7生物学特性的影响。结果：Nanog在MCF-7细胞中定位于核,Nanog高表达后,乳腺癌细胞MCF-7的增殖、迁移和侵袭能力显著增强。结论：Nanog能够促进乳腺癌细胞MCF-7的增殖、迁移和侵袭能力。     

砷剂对乳腺癌MCF-7和MCF-7/ADR 细胞生长抑制作用的比较研究

目的:探讨As2O3对人乳腺癌MCF-7细胞和多药耐药MCF-7/ADR细胞生长抑制作用的差异.方法:采用MTI还原法、光镜、电镜和流式细胞术等方法检测As2O3对MCF-7和MCF-7/ADR细胞的生长抑制作用和诱导凋亡的情况.结果:As2O3对MCF-7和MCF-7/ADR细胞均有生长抑制作用,并呈时间剂量依赖关系,96h的IC50值分别为3μmol/L和12.8μmol/L,形态学检测显示其抑制作用主要源于凋亡;在相同作用时间及浓度下,As2O3对MCF-7细胞的抑制率显著高于MCF-7/ADR细胞,起效时间亦早于后者.结论:As2O3能诱导乳腺癌MCF-7和MCF-7/ADR细胞凋亡;MCF-7/ADR细胞虽对As2O3表现耐药,但耐药倍数较低(4.27).     

Traf6通过降低TAK1活性抑制乳腺癌MCF 7细胞增殖能力

【摘要】 目的 探讨肿瘤坏死因子相关受体因子6（Traf6）对乳腺癌MCF 7细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法 采用pGPU6/Neo载体构建稳定敲除Traf6的MCF 7细胞株,应用实时定量PCR和免疫印迹验证Traf6基因和蛋白的均低表达,采用细胞计数试剂盒 8（CCK8）法检测MCF 7细胞增殖情况,流式细胞仪检测MCF 7细胞周期的变化,蛋白印记法（Western Blot）检测MCF 7细胞中周期蛋白A（Cyclin A）、周期蛋白B（Cyclin B）、周期蛋白依赖激酶（CDK/p34）表达量和转录生长因子β 活化激酶1（TAK1）磷酸化水平。结果 使用pGPU6/Neo载体能够稳定的敲除MCF 7细胞中Traf6的表达,敲除Traf6能够抑制MCF 7细胞增殖并诱导其凋亡,将细胞阻滞在G1期,同时抑制细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B及CDK/p34的表达及TAK1磷酸化。结论 Traf6表达的降低能抑制TAK1信号通路活性,进而抑制乳腺癌MCF 7细胞增殖能力。