靶向c－Met的嵌合抗原受体T细胞制备及其对非小细胞肺癌的杀伤作用

目的制备靶向c-Met蛋白的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T), 并检测其对人非小细胞肺癌(NSCLC)H1975细胞的体外杀伤作用。方法将含c-Met抗体scFv片段的CAR序列插入慢病毒质粒中, 用酶切质粒电泳, 检测目的基因正确性。质粒转染工具为HEK293细胞, 收集浓缩慢病毒, 通过慢病毒感染的方式制备第二代c-Met CAR-T, 通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot验证CAR序列的表达, 采用流式细胞术检测c-Met CAR-T的阳性率、细胞亚型, 流式细胞术验证NSCLC细胞H1975中c-Met蛋白的阳性表达并选择c-Met蛋白阴性表达的卵巢癌细胞A2780作为对照, 采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测c-Met CAR-T在效靶比为1∶1、1∶5、1∶10、1∶20时对H1975细胞的杀伤作用。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测c-Met CAR-T在靶抗原刺激下, 细胞因子白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IFN-γ的释放情况。结果成功合成c-Met CAR慢病毒重组质粒, 酶切条带位置符合理论值。基因测序结...     

嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞在肿瘤免疫治疗中的研究

近年来运用嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)基因修饰T淋巴细胞治疗白血病、神经胶质瘤、淋巴瘤、神经母细胞瘤等恶性肿瘤,取得令人可喜的成果.CAR基因修饰T淋巴细胞主要将能够识别肿瘤相关抗原的单链抗体和T细胞胞内活化基序借助铰链结构连接为一体,通过基因转导T淋巴细胞,赋予T淋巴细胞对肿瘤抗原的高亲和性及特异性杀伤能力.在针对CAR治疗肿瘤研究中,“脱靶效应”、“细胞因子风暴”、免疫抑制等问题使得CAR技术发展受到阻碍.因此,临床需要采取应对措施使CAR能够安全有效地应用.本篇综述将针对CAR近些年在治疗恶性肿瘤的发展情况和未来应用前景进行阐述.     

嵌合抗原受体修饰T细胞在实体肿瘤中应用的研究进展

近年来,嵌合抗原受体（CAR）修饰T细胞在治疗肿瘤中取得了很大进展。CAR具有赋予T细胞更强的靶向性并能打破宿主免疫耐受状态等理论优势,在白血病、淋巴瘤中取得了不错的疗效。但由于实体肿瘤的脱靶效应、免疫细胞不易进入实体瘤内部等因素,该应用尚处于临床前期试验阶段。本文将CAR修饰T细胞应用于部分实体瘤的试验进行综述,以便于读者更全面的认识CAR修饰T细胞的应用。     

基于嵌合抗原受体修饰T细胞的肿瘤免疫治疗新策略

嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）修饰T细胞是近年来迅速发展的肿瘤过继免疫治疗新手段,其独特的作用机制和诱人的应用前景为肿瘤生物治疗开辟了一个崭新的舞台。CAR将识别肿瘤相关抗原的单链抗体和T细胞的活化基序相结合,通过基因转导赋予T细胞肿瘤靶向性、更强的杀伤活性和持久的生命力。自1989年Eshhar等首次提出CAR以来,CAR已从第一代发展至含有共刺激分子的第二、三代,CAR的Ⅰ/Ⅱ期临床试验在白血病、淋巴瘤、黑素瘤等恶性肿瘤中取得了可喜的成果,但是也面临脱靶效应、细胞因子风暴、移植物抗宿主病等潜在的安全性问题,未来研究将集中于设计更安全的第四代CAR、甄选具备最佳治疗潜质的T细胞亚群、优化临床治疗方案、完善临床前试验模型等方面。相信随着免疫学、基因治疗和细胞工程等领域不断取得新突破,CAR从实验室向临床转化的障碍将会逐一扫除,CAR有望成为主流的肿瘤治疗方法。     

嵌合抗原受体修饰T细胞在恶性肿瘤中的研究进展

近年来在肿瘤免疫治疗领域,嵌合抗原受体（CAR）修饰T细胞在基础研究和临床试验中取得了巨大进展。CAR由特异性单克隆抗体的可变区和CD3ζ结构域组成。CAR修饰T细胞的胞外区直接识别肿瘤相关抗原（TAA）。T细胞和靶抗原结合后可直接介导细胞毒性,并释放一些细胞因子如穿孔素、颗粒酶、干扰素-γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,最终导致肿瘤细胞的坏死。尽管CAR-T细胞具有显著的抗肿瘤效应,一些基础研究和临床实验中观察到的安全性问题值得关注。     

CAR T细胞治疗的现状与临床应用前景

嵌合抗原受体T细胞（CAR T）疗法是肿瘤过继免疫治疗的新手段。CAR T细胞疗法治疗B细胞急性淋巴细胞白血病（B ALL）的完全缓解率高达90％。然而,目前CAR T细胞疗法在血液肿瘤的治疗过程中尚存在脱靶效应、毒副作用、体内持续时间短与复发率高等问题。此外,在CAR T细胞治疗实体瘤方面的安全性和有效性虽已得到证实,但疗效还有待提高。本文对近年来CAR T细胞治疗的研究进展及该领域中亟需解决的问题作一分析与展望。     

CAR-T细胞治疗肿瘤的脱靶效应及其预防策略

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是单链抗体的可变区(single-chain variable fragments,scFv)和T细胞信号分子的重组融合蛋白,它使T细胞可以通过非MHC限制性方式识别特异性抗原.最近的临床研究证明,CAR-T细胞在治疗B细胞肿瘤中取得了显著效果.但在目前的临床应用中存在诸多限制,尤其是当肿瘤抗原在正常组织中表达时会造成脱靶效应.本文就靶抗原的选择、脱靶效应及相应的预防策略作一综述,期望这些策略的实施,将会提高CAR-T细胞治疗的安全性及有效性,使更多肿瘤患者从中获益.     

EGFRvⅢ/CAR-T对EGFRvⅢ + U87胶质瘤细胞和裸鼠移植瘤的特异性 杀伤作用

目的： 制备靶向EGFRvⅢ的第三代CAR-T(EGFRvⅢ/3CAR-T),检测其在体外和体内对EGFRvⅢ + U87胶质瘤细胞的 特异性杀伤效应。 方法： 用磷酸钙沉淀法将三质粒共转染HEK293T细胞包装EGFRvⅢ/3CAR慢病毒（LV-EGFRvⅢ/3CAR）,感 染健康人CD3 + T细胞,Western blotting和流式细胞术检测T细胞中EGFRvⅢ/3CAR的表达水平, 51 Cr释放法检测EGFRvⅢ/3CAR- T对EGFRvⅢ + U87细胞的体外杀伤效应,ELISA法检测EGFRvⅢ/3CAR + T的IFN-γ分泌水平。构建裸鼠异种胶质瘤移植模型, 检测EGFRvⅢ/3CAR-T对移植瘤的体内杀伤活性。 结果： EGFRvⅢ/3CAR慢病毒包装成功,滴度值为5×10 6 TU/ml。Western blotting在相对分子质量58 000处检测到EGFRvⅢ/3CAR表达,未转导组无相同分子量蛋白表达。流式细胞术检测结果显示EG- FRvⅢ/3CAR转导效率平均为52.3%, 51 Cr释放法检测EGFRvⅢ/3CAR-T特异性杀伤作用与E∶T值（E∶T为4∶1、为8∶1、16∶1、32∶ 1）呈正比关系。ELISA法检测到细胞因子IFN-γ分泌量为(1 836±148.2) pg/ml,与NT T和GFP + T细胞相比差异有统计学意义 （ P ＜0.01）。EGFRvⅢ/3CAR + T细胞的特异性杀伤活性及IFN-γ分泌均依赖于EGFRvⅢ在U87细胞中的表达水平。体内肿瘤生 长检测结果显示,注射后3周EGFRvⅢ/3CAR + T组肿瘤体积较GFP + T细胞和PBS组差异有统计学意义（ P< 0.01）。 结论： EGFRv Ⅲ/3CAR-T在体外和体内均能发挥靶向杀伤EGFRvⅢ + 脑胶质瘤细胞的作用,为后续临床试验提供依据。     

CAR-NK在实体瘤治疗中的研究进展

瘤免疫细胞治疗近年来备受瞩目。嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor engineered T-cell,CAR-T)细胞用于治疗血液系统恶性肿瘤已经颇见成效,但在实体瘤治疗方面却存在不足。由于具有不同于T细胞的非特异性杀伤肿瘤细胞的能力,CAR修饰的自然杀伤(nature killer,NK)细胞逐渐成为研究热点。目前,广泛的临床前研究证明了CAR-NK细胞疗法的安全性和有效性,尤其在实体瘤治疗方面,展现出了优于CAR-T细胞的应用前景。然而,CAR-NK细胞疗法仍存在一些局限性,需要进一步研究以期实现其临床转化。     

嵌合抗原受体修饰T细胞免疫治疗肿瘤的研究进展

以嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰T细胞为基础的肿瘤过继细胞免疫治疗近年来取得了很大的进步,它赋予T细胞靶向杀伤活性,并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境和打破宿主免疫耐受状态。CAR以单链抗体-共刺激分子-免疫受体酪氨酸活化基序的嵌合模式修饰T细胞显示出良好的抗肿瘤作用,Ⅰ/Ⅱ期临床试验在白血病、淋巴瘤等恶性肿瘤中取得了令人鼓舞的治疗效果;CAR修饰T细胞临床治疗也带来了挑战,比如脱靶效应、细胞因子风暴、移植物抗宿主病样损伤等。研究者正在通过安装人工基因调控系统、优化共刺激分子、筛选最佳治疗潜质的T细胞亚群来提高CAR修饰T细胞的有效性和安全性,相信随着研究的不段深入,基于CAR的免疫治疗新策略会给肿瘤患者带来新的希望。     

shRNA靶向抑制CD38的抗CD38 CAR-T细胞构建及其功能的初步鉴定

目的：探讨shRNA靶向抑制CD38的方法能否增强抗CD38 CAR-T细胞的抗癌功能。方法：构建shRNA靶向抑制CD38的抗CD38 CAR-T细胞的CAR分子,利用逆转录病毒载体包装成功后转导人原代T细胞,制备CAR-T细胞。实验分为shRNA1 CD38 CAR-T组、shRNA2 CD38 CAR-T组和对照组（shR-NC-CD38 CAR-T细胞）。采用qPCR法检测CAR-T细胞CD38 mRNA相对表达水平,计算CAR-T细胞培养0～14 d的增殖倍数,CFSE法检测CAR-T细胞与人Burkitt淋巴瘤细胞Raji-luc或人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞RPMI-8226-luc共培养时的增殖情况,荧光素酶化学发光法检测CAR-T细胞在不同效靶比（1∶1、1∶2、1∶4、1∶8）时对Raji-luc和RPMI-8226-luc细胞的杀伤效率,ELISA法检测CAR-T细胞杀伤Raji-luc或RPMI-8226-luc细胞时上清液中IFN-γ水平,FCM检测CAR-T细胞表面耗竭T细胞生物标志物PD-1的表达水平。结果：shR-NC-CD38 CAR、shRNA1-...     

靶向肝癌的GPC3-CAR-T细胞的构建与功能鉴定

目的:构建靶向GPC3阳性肝癌细胞的嵌合抗原受体修饰T细胞[chimeric antigen receptor-modified T cell,CAR-T cell],并评估其对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤效能.方法:选择偏爱密码子技术改造基因序列,以增强CAR分子表达效率,设计靶向GPC3抗原的CAR分子基因并构建携带GPC3-CAR基因的慢病毒表达载体pCDH-GPC3-CAR,感染T细胞;采用Western blotting、流式细胞术、实时细胞监测和ELISA技术分别检测GPC3-CAR分子在CAR-T细胞的表达、慢病毒感染T细胞效率、GPC3-CAR-T细胞对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤活性和特异性.结果:双酶切pCDH-GPC3-CAR重组慢病毒质粒可见分子质量和GPC3-CAR分子一致的基因片段,成功构建pCDH-GPC3-CAR慢病毒质粒.约54.38％的GPC3-T细胞表达GPC3-CAR分子,称为GPC3-CAR-T细胞.GPC3-CAR-T细胞对GPC3阳性的肝癌细胞Huh-7比GPC3阴性的肝癌细胞SK-HEP-1具有更高效的杀伤能力[(78.96±4.76)％ vs (6.87±3.15)％,P＜0.01].与GPC3阳性Huh-7肝癌细胞共培养的肝癌GPC3-CAR-T细胞分泌IFN-γ水平比Mock组高效[(21 371.4±1 808.3) vs (152.8±12.5) pg/ml,P＜0.01],这可能是其高效杀伤肝癌细胞的机制之一.结论:靶向肝癌的GPC3-CAR-T细胞具有高效分泌IFN-γ细胞因子并特异高效杀伤GPC3阳性肝癌细胞的能力,为进一步推进GPC3-CAR-T临床前和临床研究奠定基础.     

自杀基因作为一种“安全性开关”控制CAR-T细胞毒性的临床前研究

目的：探讨小分子化学诱导药AP1903能否在体内外终止过表达iCasp9自杀基因的CD19靶向嵌合抗原受体修饰T（CD19CAR-T）细胞毒性功能。方法：构建过表达iCasp9的CD19CAR-T（iCasp9-CD19CAR-T）细胞并和AP1903共孵育，采用流式细胞术检测细胞表型及凋亡的方法，分别在K562和T细胞上验证iCasp9/CID自杀基因系统，在体内（观察荷Raji细胞移植瘤NCG小鼠的生存率）和体外（流式细胞术检测细胞的杀伤功能）检测AP1903给药情况下iCasp9-CD19CAR-T细胞的杀伤功能。结果：和 CD19CAR-T 细胞相比，iCasp9-CD19CAR-T 细胞的增殖能力、表型及体内外杀伤功能均无显著差异（均 P>0.05）。AP1903给药2 h后双表达iCasp9和CD19CAR的K562和T细胞分别有（33.8±0.9）%和（27.95±0.35）%的细胞出现凋亡，AP1903给药 24 h 后双表达 iCasp9 和 CD19CAR 的 K562 和 T 细胞均已经全部死亡。检测 AP1903 给药和未给药两种条件下的 iCasp9-CD19CAR-T细胞体外杀伤效率，前者明显低于后者（P<0.01）；iCasp9-CD19CAR-T细胞治疗荷Raji细胞移植瘤NCG小鼠，其60 d 生存率同样是AP1903给药的明显低于未给药的（P<0.01）。结论：小分子化学诱导药物AP1903能在体内外有效终止iCasp9-CD19CAR-T细胞毒性功能。     

MEK抑制剂显著增强EGFR CAR-T细胞对口腔鳞癌的抗肿瘤活性

目的:构建靶向表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的二代嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）-T细胞,以探索MEK抑制剂联合EGFR CAR-T细胞是否可以对口腔鳞癌产生显著的抗肿瘤活性。方法:免疫组化法检测口腔鳞癌患者癌和癌旁组织中EGFR的表达;流式细胞术检测口腔鳞癌细胞系中EGFR的表达;慢病毒感染法构建EGFR CAR-T细胞;生物发光法检测EGFR CAR-T细胞联合MEKi对靶细胞的杀伤活性;流式细胞术检测共孵育后效靶细胞的占比情况;活体成像监测小鼠肿瘤的生长;免疫组化法检测小鼠肿瘤组织中CD3的表达;ELISA法检测肿瘤组织中IFN-γ和GrmB的含量。结果:人口腔鳞癌组织较癌旁组织EGFR显著高表达,大部分口腔鳞癌细胞系高表达EGFR。联合MEKi在短时间的共孵育中并不能显著增强EGFR CAR-T细胞对肿瘤细胞系的杀伤活性,但在较长时间的共孵育后,联合MEKi显著增强EGFR CAR-T细胞的增殖（P＜0.01）和对肿瘤细胞的细胞毒性（P＜0.001）。体内实验也表明,联合MEKi较单独使用EGFR CAR-T细胞而言对肿瘤抑制能力更强（P＜0.01）,肿瘤组织中CD3+T细胞的浸润更多（P＜0.001）,肿瘤部位细胞因子IFN-γ（P＜0.001）和GrmB（P＜0.001）的含量也更高。结论:联合MEKi可以在体内外条件下显著增强EGFR CAR-T细胞的抗肿瘤活性,有望成为针对口腔鳞癌的潜在治疗策略。     

嵌合抗原受体T细胞在B细胞性血液肿瘤中的研究进展

嵌合抗原受体（CAR）转染的T细胞通过释放细胞因子及细胞毒性T淋巴细胞（CTL）效应可高效杀伤靶抗原阳性的肿瘤细胞,且不受相容性复合体（MHC）的限制.近年欧美多个癌症中心的临床试验表明,CD19靶向的CAR-T细胞输注不仅可使复发状态的B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）患者达完全缓解,且分子水平的微小残留病（MRD）也可转阴.其在慢性淋巴细胞白血病、B细胞性恶性淋巴瘤患者中也取得了显著疗效,相信不久的将来该技术必将成为肿瘤综合治疗的重要手段.     

Efficiency of CD19 chimeric antigen receptor-modified T cells for treatment of B cell malignancies in phase I clinical trials: a meta-analysis

Chimeric antigen receptor (CAR) modified T cells targeted CD19 showed promising clinical outcomes in treatment of B cell malignances such as chronic lymphocytic leukemia (CLL), acute lymphoblastic leukemia (ALL) and other indolent lymphomas. However, the clinical benefit varies tremendously among different trials. This meta-analysis investigated the efficacy (response rates and survival time) of CD19-CAR T cells in refractory B cell malignances in Phase I clinical trials. We searched publications between 1991 and 2014 from PubMed and Web of Science. Pooled response rates were calculated using random-effects models. Heterogeneity was investigated by subgroup analysis and meta-regression. Fourteen clinical trials including 119 patients were eligible for response rate evaluation, 62 patients in 12 clinical trials were eligible for progression-free survival analysis. The overall pooled response rate of CD19-CAR T cells was 73% (95% confidence interval [CI]: 46-94%). Significant heterogeneity across estimates of response rates was observed (p < 0.001, I2=88.3%). ALL patients have higher response rate (93%, 95% CI: 65-100%) than CLL (62%, 95% CI: 27-93%) and lymphoma patients (36%, 95% CI: 1-83%). Meta-regression analysis identified lymphodepletion and no IL-2 administrated T cells as two key factors associated with better clinical response. Lymphodepletion and higher infused CAR T cell number were associated with better prognosis. In conclusion, this meta-analysis showed a high clinical response rate of CD19-CAR T cell-based immunotherapy in treatment of refractory B cell malignancies. Lymphodepletion and increasing number of infused CD19-CAR T cells have positive correlations with the clinical efficiency, on the contrary, IL-2 administration to T cells is not recommended.     

Efficacy and safety of humanized CD19 CAR-T as a salvage therapy for recurrent CNSL of B-ALL following murine CD19 CAR-T cell therapy

The present study aimed to compare the differences between the humanized CD19 chimeric antigen receptor (CAR)-T cell therapy and the murine CD19 CAR-T therapy in recurrent B-acute lymphoblastic leukemia (B-ALL). A 62-year-old male patient who had B-ALL (BCR/ABL⁺) for 4 years was diagnosed with relapsed central nervous system leukemia (CNSL). After several courses of high dose methotrexate combined with intrathecal chemotherapy, the patient received murine CD19 CAR-T therapy and achieved complete response (CR). The patient was diagnosed with relapsed CNSL again 15 months after his murine CD19 CAR-T therapy, and was therefore enrolled in the humanized CD19 CAR-T therapy. Subsequently, the present study aimed to compare murine and humanized CD19 CAR-T cells against Nalm-6 cells in vitro and in mice. The patient initially achieved CR from his murine CD19 CAR-T therapy with Grade 1 cytokine-release syndrome (CRS) and Grade 1 CAR-T cell-related encephalopathy syndrome (CRES). The patient then achieved CR again from his humanized CD19 CAR-T therapy with Grade 1 CRS and Grade 2 CRES. Peak levels of CD19 CAR-T cells were higher in humanized CD19 CAR-T therapy than those in murine CD19 CAR-T therapy 7 days after infusion in the peripheral blood, in bone marrow and in cerebrospinal fluid (CSF). The cytokine levels were higher in humanized CD19 CAR-T therapy than those in murine CD19 CAR-T therapy in the peripheral blood and in CSF. The cytotoxicity to Nalm-6 cells was higher in humanized CD19 CAR-T cells than that in murine CD19 CAR-T cells in vitro. In Nalm-6 BALB/c mice, the median survival time of mice in the murine CD19 CAR-T group was 35 days, while it was 43 days in the humanized CD19 CAR-T group. In conclusion, humanized CD19 CAR-T cell therapy had a better curative effect than that of murine CD19 CAR-T therapy, and may be used as a salvage treatment for recurrent B-ALL after treatment with murine CD19 CAR-T therapy.     

Ibrutinib improves the efficacy of anti-CD19-CAR T-cell therapy in patients with refractory non-Hodgkin lymphoma

The efficacy and side effects of the second-time humanized CD19 chimeric antigen receptor (CD19-CAR) T-cell therapy after unsuccessful first-time anti-CD19-CAR T-cell therapy and subsequent ibrutinib salvage treatment were observed in patients with refractory B-cell lymphoma. In our study, 3 patients with refractory mantle cell lymphoma (MCL) and 4 patients with refractory follicular lymphoma (FL) reached stable disease (SD), partial remission (PR), or progression of disease (PD) after first-time humanized anti-CD19-CAR T-cell therapy. They received ibrutinib as a salvage treatment and kept an SD in the following 7-16 mo, but their disease progressed again during ibrutinib salvage treatment. All 7 patients received a second-time humanized anti-CD19-CAR T-cell therapy, which was the same as their first-time anti-CD19-CAR T-cell therapy. In total, 3 MCL patients and 3 FL patients reached complete response (CR) with the second-time anti-CD19-CAR T-cell therapy combined with ibrutinib, whereas 1 FL patient reached PR. There were no differences in the transduction efficiency and proliferation between the 2 instances of anti-CD19-CAR T-cell therapy. However, the second-time anti-CD19-CAR T-cell therapy led to higher peaks of anti-CD19-CAR T cells and anti-CD19-CAR gene copies, but also to higher grades of cytokine release syndrome (CRS) and more serious hematological toxicity. The successful outcome of the second-time anti-CD19-CAR T-cell therapy might suggest that the previous ibrutinib treatment improved the activities of anti-CD19-CAR T cells.     

CAR －T 细胞治疗在血液系统恶性肿瘤中的研究进展

嵌合抗原受体T（ CAR－T）细胞是近年来迅速发展的肿瘤过继性免疫治疗新手段。其主要特点是通过基因工程改造获得识别肿瘤抗原特异性受体的T细胞并赋予其靶向性、杀伤性及持久性的治疗方法。1989年首次提出CAR－T,现已经发展到第四代,且多研究中心对CD19－CAR－T细胞治疗技术进行了Ⅰ期临床研究显示出活性。 CAR－T疗法是目前有望治愈复发难治性血液肿瘤的新方法。     

CD19及CD22嵌合抗原受体T细胞序贯治疗复发难治纵隔B淋巴母细胞淋巴瘤一例并文献复习

目的探讨CD19及CD22嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)序贯治疗复发难治纵隔B淋巴母细胞淋巴瘤(B-LBL)的效果。方法报道华中科技大学同济医学院附属同济医院2017年3月收治的1例经CD19及CD22 CAR-T序贯治疗的复发难治纵隔B-LBL患者,分析CD19及CD22 CAR-T序贯治疗后1、3、6、12、18个月原发病缓解相关指标,并复习相关文献。结果该患者经过三线化疗后疾病复发进展,后行CD19及CD22CAR-T序贯治疗。在细胞免疫治疗过程中,患者出现1级细胞因子释放综合征,经积极治疗,病情稳定后出院。患者定期来院复查,动态追踪观察纵隔包块。行CAR-T治疗后患者纵隔包块明显缩小,病情持续缓解达18个月。结论 CD19及CD22 CAR-T序贯治疗为复发难治B-LBL提供了新的治疗手段。对于常规化疗效果欠佳的患者,应尽早积极行CAR-T治疗,从而提高缓解率,改善患者的远期预后。