组蛋白去乙酰化酶抑制剂在造血干细胞体外扩增中的作用

造血干细胞的自我更新和分化受到高度协调的表观遗传调控,其中组蛋白乙酰化修饰可以激活或沉默基因的转录。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)可以抑制造血干细胞中组蛋白去乙酰化酶的活性,增加组蛋白乙酰化水平。多种HDACIs,如曲古他汀A、丙戊酸钠等,被用于在体外无血清培养中与细胞因子组合联合处理造血干细胞,尤其是脐血造血干细胞,促进与干细胞自我更新相关的多能基因的转录表达,抑制分化相关基因的表达,从而促进造血干细胞扩增,抑制分化,获得数量更多的长期重建细胞。小分子HDACIs体外扩增脐血造血干细胞有望改变脐血干细胞数量不足、造血及免疫重建延迟的缺陷。大规模高通量筛选出扩增作用强的HDACIs、选择不同通路表观修饰剂协同作用、筛选高选择性HDACIs是进一步研究方向。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂在脓毒症及急性肺损伤中的作用研究进展

组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HADCIs)具有干扰组蛋白去乙酰化酶的功能,可通过提高细胞内组蛋白的乙酰化程度,调控基因转录,在恶性肿瘤的治疗中发挥重要作用。在脓毒症及其相关肺损伤中,HDACIs可发挥抑制炎症反应以及组织器官保护等多重作用,组蛋白乙酰化调控可能成为有价值的脓毒症治疗靶点,其机制包括抑制Toll样受体4-髓样细胞分化因子88-核因子κB/促分裂原活化的蛋白激酶信号通道,下调炎症相关因子释放;通过调控微RNA转录水平抑制炎症相关基因表达;抑制肺泡上皮细胞凋亡等。     

血液恶性肿瘤的组蛋白去乙酰化及靶向去乙酰化酶抑制剂治疗进展

组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)作为一种新型靶向药物,它通过调节染色质和某些非组蛋白的乙酰化状态,调控基因的转录,并发挥一系列生物学效应如诱导肿瘤细胞凋亡等.近期临床试验发现,HDACIs对某些类型肿瘤,尤其是血液恶性肿瘤有良好疗效.本文主要在血液恶性肿瘤的组蛋白去乙酰化及靶向去乙酰化酶抑制剂治疗进展方面进行介绍.     

炎症因子IFN-γ调控小鼠成肌细胞FoxO1乙酰化及活性的机制研究

目的:在炎症信号IFN-γ作用下,研究小鼠成肌细胞(C2C12)内FoxO1的活性和乙酰化水平的改变,探讨炎症在2型糖尿病发病过程中的机制?方法:免疫共沉淀分析Ⅲ型脱乙酰化酶沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)激动剂白藜芦醇对IFN-γ升高FoxO1乙酰化水平的影响?通过荧光素酶报告基因活性实验分析IFN-γ?CⅡTA对FoxO1转录活性的影响,同时用小RNA干扰内源性CⅡTA后再检测IFN-γ作用下FoxO1转录活性的改变?结果:蛋白实验显示,IFN-γ处理后FoxO1乙酰化水平明显升高,白藜芦醇降低该效应?报告基因实验显示IFN-γ抑制野生型FoxO1的转录活性,对赖氨酸突变的FoxO1作用不大?过表达CⅡTA抑制了FoxO1靶基因FHRE启动子的活性,且在同时转染FoxO1时抑制60%左右?IFN-γ抑制FoxO1的转录活性,内源性CⅡTA干扰后再给予IFN-γ,抑制作用消失?结论:IFN-γ通过激活CⅡTA降低SIRT1酶活性,使SIRT1对FoxO1的去乙酰化作用减弱,提高了FoxO1乙酰化水平,抑制了FoxO1的转录活性?本研究为临床2型糖尿病的治疗提供了新思路?     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂对人骨肉瘤细胞生长的影响

目的 观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)在体内及体外对人骨肉瘤细胞的作用机制.方法 本实验应用两种不同类型的HDACIs:辛二酰基酰替苯胺异羟肟酸(SAHA)和丁酸钠(SB),评价其在体内和体外对人骨肉瘤细胞(SaOS2、U2OS)生长的影响.应用甲基甲苯基硫细胞检测(MTS)法检测细胞增殖活性,流式细胞技术和蛋白免疫印迹法检测细胞周期和组蛋白乙酰化程度.结果 MTS显示SAHA及SB浓度由0,0.04 μmol/L每5倍递增,最大剂量625 μmol/L,SaOS2 A值分别由1.8降至0.46,1.8降至0.7;U2OS细胞A值分别由1.62降至0.37,1.63降至0.53.SAHA和SB对SaOS2和U2OS细胞生长的抑制具有明显的浓度依赖性.蛋白免疫印迹法显示HDACIs治疗后,组蛋白H3乙酰化水平上升,SAHA处理后SaOS2和U2OS细胞的乙酰化H3与对照组组蛋白乙酰化水平比值分别为1.4和1.7;SB处理后的比值分别为1.2和1.3.流式细胞技术显示SAHA将细胞阻滞在分裂周期的G1和G2/M期,而SB将细胞阻滞在分裂周期的G2/M期.同时,肿瘤抑制因子的效果在小鼠动物模型上得到了有效的验证,SAHA组(2.0 mg/kg)第1天肿瘤体积103.8 mm3,28 d后相比对照组明显减小(1040 mm3比1465 mm3);SB组(50 mg/kg)第1天肿瘤体积103.0 mm3,第28天后相比对照组明显减小(1040 mm3比1465 mm3).结论 SAHA和SB能够阻滞小鼠模型体内的SaOS2细胞.SAHA和SB可抑制了人骨肉瘤细胞生长,阻碍了细胞周期进程.     

三七皂苷对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞保护作用及其机制研究

[目的]从氧化应激及炎症角度观察三七皂苷(panax nologinoside,PNS)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(rat mesangial cell,RMC)保护作用及从SIRT1/NF-κB信号通路探讨其机制。[方法]培养RMC,并将其分为4组:正常对照组、高糖组、PNS组及SIRT1RNAi+PNS组;采用MTT及Annexin V-FITC分别检测细胞活力及凋亡情况;采用Real-time PCR技术检测RMC SIRT1、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的m RNA表达;Western Blot技术检测SIRT1和乙酰化NF-κB P65蛋白的表达;采用经典的氮蓝四唑(NBT)显色法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α、TGF-β1、丙二醛(malondialdehyde,MDA)等的浓度。[结果]与正常对照组比较,高糖刺激使RMC活力降低,细胞凋亡增加,SOD活性降低,MDA含量增加,SIRT1基因及蛋白表达降低,NF-κB P65蛋白乙酰化水平增高,TNF-α、TGF-β1的m RNA和蛋白水平增高。PNS干预可逆转高糖引起的上述变化,但沉默SIRT1基因后,PNS干预作用不明显。[结论]PNS对高糖诱导的RMC具有保护作用,其机制可能通过增加SIRT1表达及活性,降低NF-κB P65蛋白乙酰化水平,使其转录活性降低,进而抑制炎症及氧化应激。     

蛋白C途径的抗炎及其在自身免疫性疾病中的作用

蛋白C是由肝脏产生的血浆丝氨酸蛋白酶酶原,其活性形式为活化蛋白C(aPC)。aPC与凝血酶结合,具有抗凝血活性和细胞保护活性。其中,aPC的抗凝血活性受到广泛关注。除抗凝血活性外,aPC还具有一系列细胞保护活性,如抗凋亡、抗炎和调节基因表达等。近年来,许多研究人员在不同的自身免疫性疾病模型体内、体外实验中对炎症反应下aPC所诱导的细胞保护途径进行了研究,揭示了aPC在多种自身免疫性疾病发生发展中的作用,这为一些疾病(糖尿病、类风湿关节炎等)的治疗提供了新方向。     

红细胞沉降率和C-反应蛋白联合检测在儿科疾病中的应用

目的:观察儿童呼吸道炎症疾病及免疫性疾病中红细胞沉降率(ESR)与C-反应蛋白(CRP)的关系。方法:检测和比较正常对照组和疾病组的ESR和CRP水平。结果:WBC、ESR、CRP在以上两种儿科疾病都有不同程度的升高,且三者升高的水平呈正相关。结论:ESR和CRP都是反应炎症的良好指标,ESR和CRP的增高在免疫性疾病患者中较WBC更灵敏。     

SIRT3的生物学功能与肿瘤关系

沉默信息调节因子3(SIRT3)是线粒体去乙酰化蛋白,参与线粒体蛋白去乙酰化调节,激活超氧化物歧化酶2(SOD2),降低线粒体活性氧(ROS)水平,维持细胞内稳态平衡,调节氧化等应激反应。SIRT3是线粒体高保真蛋白,其在细胞的发育和修复挥着重要作用。因此,SIRT3缺失可导致线粒体代谢异常和细胞损伤,增加细胞自噬活性,激发炎症或者肿瘤因子等相关的病理症状发生发展。本文通过回顾总结SIRT3在细胞代谢中的生物学功能以及其在肿瘤疾病中的作用,有利于进一步探寻其具体作用靶点,为SIRT3在相关病理及生理机制的研究提供有益参考。     

组蛋白乙酰化修饰调控流感病毒复制中间体dsRNA引起的IL-6激活表达

目的研究组蛋白乙酰化修饰在流感病毒复制中间体dsRNA引起IL-6 表达中的调控作用。方法以病毒复制中间体
dsRNA为诱导物,利用组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂、DNA甲基转移酶（DNMT）抑制剂或HDAC siRNA分别处理A549细
胞,双荧光素酶报告系统分析IL-6启动子活性、RT-PCR检测mRNA转录水平以及ELISA检测蛋白表达。结果dsRNA可激活
IL-6启动子活性、增强mRNA转录水平和蛋白的分泌表达,用HDAC抑制剂TSA处理或HADC siRNA干扰均可显著增强IL-6
启动子活性和mRNA转录,同时,HDAC抑制剂TSA和DNA甲基转移酶抑制剂DAC在调控IL-6表达过程中无协同作用。结
论在流感病毒复制中间体dsRNA引起IL-6表达上调过程中受到组蛋白乙酰化修饰调控。
     

RNA干扰技术在治疗系统性红斑狼疮中的应用

系统性红斑狼疮是典型的自身免疫性疾病,免疫系统的多种要素均可能成为狼疮治疗的靶点。RNA干扰是一种序列特异的转录后基因沉默,是一项新兴的基因阻断技术,其作用相当于基因剔除,导致相应基因的表型缺失。同治疗肿瘤一样,对免疫系统疾病的治疗也在不断寻找新的方法,可以避免传统药物治疗的不良反应,更精确地直达治疗靶点,最大程度地保护健康的细胞或组织。小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）成为治疗系统性红斑狼疮的新方法、新靶点,在免疫系统疾病的诊断治疗中,siRNA具有广阔的应用前景。     

lncRNA在免疫细胞及自身免疫性疾病中的研究进展

长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是继miRNA后又一类具有调控功能的非编码RNA,其可在基因水平、转录水平和蛋白质水平等多方面影响疾病的发生发展。目前已在基因印迹、肿瘤疾病、神经退行性疾病等领域取得较好的研究进展,而其在自身免疫方面的研究才刚刚起步,但诸多lncRNA已被证实参与免疫细胞的发育分化,并在免疫系统稳态维持及自身免疫性疾病的发生发展中发挥重要作用。本文将从免疫细胞和自身免疫性疾病方面阐述lncRNA的研究进展。     

卵巢肿瘤组织中抑癌基因ARHI的表达及组蛋白去乙酰化酶抑制剂对其的影响

目的：检测卵巢肿瘤组织中ARHI的表达,探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲谷抑菌素(TSA)对恶性卵巢肿瘤细胞生长抑制作用和基因表达的影响。方法：利用RT PCR技术检测正常卵巢组织和卵巢肿瘤组织中ARHI mRNA的表达,比较ARHI基因表达与肿瘤良恶性、恶性肿瘤临床分期、组织分型的关系。利用MTT和RT PCR检测组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA对4种卵巢癌细胞珠(SKOV3、A2780、COC1、OC3)的生长和ARHI基因表达的影响。结果：①正常卵巢组织中ARHI表达均为阳性（100％）,卵巢良性肿瘤组织、交界性、恶性组织中不同程度表达缺失;②ARHI的表达与卵巢肿瘤的良恶性有关（P＜0.05）,与恶性肿瘤的组织学分型无关（P＞0.05）,与卵巢肿瘤临床分期有关（P＜0.05）;③4种卵巢癌细胞系中均未见ARHI表达,组蛋白去乙酰化酶抑制剂作用后仅SKOV3细胞系 ARHI表达增强;④组蛋白去乙酰化酶抑制剂对卵巢肿瘤细胞生长有较明显抑制率且与浓度和时间有关(P＜0.05),与顺铂比较,两者对4种细胞系的抑制率无明显差异（P＞0.05）。结论：ARHI基因在卵巢肿瘤组织中有不同程度的低表达甚至缺失,与卵巢肿瘤的恶性程度有关。组蛋白去乙酰化酶抑制剂能有效抑制卵巢肿瘤细胞活性,是治疗肿瘤的新靶点。     

生物节律紊乱与阿尔茨海默症关联基因的生物信息学挖掘

目的：挖掘阿尔茨海默症与生物节律紊乱相关联的治疗性分子靶标。方法：从基因表达综合数据库GEO 中获取GSE28146 芯片数据，使用R 软件挖掘、筛选差异表达基因；利用文本挖掘和蛋白互作筛选出与生物节律紊乱相关联的阿尔茨海默症基因，并对其进行染色体定位、功能注释和通路分析。结果：挖掘出372 个阿尔茨海默症差异表达基因，在染色体上分布广泛，参与转录调控和免疫应答等过程；TIPIN 基因既属于阿尔茨海默症差异表达基因又属于生物节律紊乱基因；有34 个阿尔茨海默症差异表达基因与43 个生物节律基因发生互作。结论：生物节律紊乱与阿尔茨海默症的发生密切相关。     

调节性树突状细胞与免疫耐受

树突状细胞是专职抗原递呈细胞,可以双向调节免疫反应。调节性树突状细胞是树突状细胞中具有免疫调节功能的一个群体,在维持免疫平衡,诱导免疫耐受中发挥重要作用。近年来,调节性树突状细胞在肿瘤、感染、移植耐受及免疫性疾病的发病机制与治疗中的作用成为免疫学领域的研究热点。现就调节性树突状细胞的生物学特性、培养、诱导免疫耐受的机制及在临床中的应用予以综述。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂治疗卵巢癌的研究进展

卵巢癌是致死率最高的妇科恶性肿瘤,其发病机制的探讨是肿瘤研究领域的难点,近年研究发现卵巢癌的发生与表观遗传学改变密切相关,针对影响表观遗传的重要分子靶标组蛋白去乙酰化酶的研究成为新热点。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDAC Is)可以明显地抑制卵巢癌细胞生长,诱导细胞周期阻滞、分化和凋亡,抑制卵巢癌相关致癌基因的表达,具有抗肿瘤活性且无明显不良反应,提示HDACIs为卵巢癌的治疗提供了一种新策略。     

microRNA在固有免疫中的作用研究进展

MicroRNA(miRNA)是一类短小非编码RNA,能够调节机体内mRNA的转录表达水平。目前,固有免疫在免疫系统中的作用逐渐成为学者们研究的热点,而miRNA在固有免疫应答过程中,能够对多种细胞的应答水平具有显著的调节作用,影响、参与全身各器官炎症反应过程,对免疫状态的调节有重要的意义。本文对microRNA在炎症的固有免疫阶段的调节活动的研究进行综述,以期对后续研究提供理论参考。     

多巴胺与免疫反应调节的研究进展

 神经递质多巴胺(dopamine,DA)是联接神经和免疫的重要分子。白细胞能合成和转运DA,几乎所有的免疫细胞亚群都表达DA受体,DA与其受体结合,通过自分泌/旁分泌方式调节免疫细胞的活化、增殖和细胞因子分泌。在中枢神经系统和外周组织,DA主要通过D1和D2受体抑制或加强免疫效应细胞的功能。中枢神经系统退行性疾病表现出免疫功能失调,可能与免疫细胞上DA受体表达水平以及信号传导通路的变化相关。因此,选择性针对免疫细胞的DA受体激动剂或拮抗剂在治疗DA介导的免疫失调性疾病中可能发挥重要作用。本文就DA受体在免疫细胞上的表达、DA作为免疫调节分子的作用以及在免疫功能障碍相关疾病中的研究进展作一综述。     

Neuroimmune mechanisms in health and disease: 2. Disease.

In the second part of their article on the emerging field of neuroimmunology, the authors present an overview of the role of neuroimmune mechanisms in defence against infectious diseases and in immune disorders. During acute febrile illness, immune-derived cytokines initiate an acute phase response, which is characterized by fever, inactivity, fatigue, anorexia and catabolism. Profound neuroendocrine and metabolic changes take place: acute phase proteins are produced in the liver, bone marrow function and the metabolic activity of leukocytes are greatly increased, and specific immune reactivity is suppressed. Defects in regulatory processes, which are fundamental to immune disorders and inflammatory diseases, may lie in the immune system, the neuro endocrine system or both. Defects in the hypothalamus-pituitary-adrenal axis have been observed in autoimmune and rheumatic diseases, chronic inflammatory disease, chronic fatigue syndrome and fibromyalgia. Prolactin levels are often elevated in patients with systemic lupus erythematosus and other autoimmune diseases, whereas the bioactivity of prolactin is decreased in patients with rheumatoid arthritis. Levels of sex hormones and thyroid hormone are decreased during severe inflammatory disease. Defective neural regulation of inflammation likely plays a pathogenic role in allergy and asthma, in the symmetrical form of rheumatoid arthritis and in gastrointestinal inflammatory disease. A better understanding of neuroimmunoregulation holds the promise of new approaches to the treatment of immune and inflammatory diseases with the use of hormones, neurotransmitters, neuropeptides and drugs that modulate these newly recognized immune regulators.