高效液相色谱法测定血浆中乌头碱的含量

目的:测定血浆中的乌头碱,为其是否中毒提出示警。方法:以高效液相色谱法对血浆乌头碱的浓度进行测定。结果:经检测,口服药酒的血浆中乌头碱可达0.196mg/mL,服用含有附子的中药汤剂血浆中乌头碱可达0.216mg/mL。结论:高效液相色谱法可对乌头碱的含量进行快速测定,服用乌头类中药易引发乌头碱中毒。     

高效液相色谱荧光检测法测定人体内血浆中双嘧达莫的浓度

目的:建立一种简便、快速的高效液相色谱(HPLC)荧光检测法测定人体内血浆中双嘧达莫的浓度。方法:采用Kro-masil C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温30℃,流动相为0.02 mol.L-1磷酸二氢钾(含0.04%的三乙胺)-乙腈(39:61),流速为1.0 ml.min-1,荧光检测激发波长290 nm,发射波长485 nm。氟伐他汀为内标。结果:双嘧达莫在10～4000μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.9997)。日内和日间RSD%均低于10%。结论:该方法灵敏度高、快速、简便、无杂质干扰,适合于双嘧达莫的血药浓度监测及药物动力学研究。     

HPLC测定苦豆子不同部位中苦豆碱的含量

目的:建立苦豆子中苦豆碱的HPLC法;对苦豆子药材不同部位中苦豆碱含量进行考察,确定药材最佳采收部位.方法:采用Kromasil NH2(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-无水乙醇-3％磷酸水溶液(70:15:15)为流动相,检测波长205 nm,柱温25℃,流速1.0 mL· min-1.结果:苦豆碱的线性范围为11.21 ～224.20 mg·L-1(r=0.9999),平均回收率(n =6)98.18％ (RSD 4.1％);苦豆子叶、茎中苦豆碱含量分别为0.38％,0.02％,豆荚、花及种子中不含苦豆碱.结论:该方法简便、准确、重复性好,可以作为苦豆子中苦豆碱的含量测定方法;研究结果显示苦豆碱在叶子中含量最高,可以将叶子作为提取分离苦豆碱的最佳药材部位.     

高效液相色谱法测定雄黄染毒小鼠肝脏内GSH含量

目的:建立柱前衍生化-HPLC法检测肝脏GSH的方法,探讨雄黄中砷对小鼠肝脏GSH含量的影响。方法:将40只ICR小鼠随机分成对照组、雄黄低、中、高剂量组(0.15 g/kg、0.45 g/kg、1.35 g/kg雄黄),连续灌胃8周;采用柱前衍生化-高效液相色谱-紫外检测法测定小鼠肝脏GSH含量,同时采用氢化物发生-火焰原子吸收法(HGFAAS)测定雄黄染毒小鼠肝脏砷含量。结果:GSH在10~500μmol/L范围内线性关系良好,日内、日间精密度的RSD均小于5%,加标回收率在81.9%~96.4%之间;随着雄黄染毒剂量的升高,GSH含量呈现出先升高后降低的趋势,且雄黄低、中剂量组较对照组有显著性差异(P0.05),而雄黄高剂量组较对照组未表现出显著性差异(P0.05);雄黄染毒小鼠肝脏砷含量随着染毒剂量增加而逐渐升高,且低、中、高剂量均较对照组有显著性差异(P0.05)。结论:该方法操作简单、快速、准确、重现性好、灵敏度高,适合肝脏中GSH含量的测定;雄黄染毒8周,可引起小鼠肝脏中GSH含量变化。     

高效液相色谱测定莱菔子总碱中芥子碱硫氰酸盐含量

目的:建立莱菔子总碱中芥子碱硫氰酸盐的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,以乙腈-0.08 mol·L-1KH2P04溶液(12:88)为流动相,流速1.0 mL·min-1进行检测.结果:芥子碱硫氰酸盐线性范围为0.482 ～2.892 μg,平均加样回收率103.63％.结论:该法快速、简便,结果准确、可靠,可用于莱菔子总碱中芥子碱硫氰酸盐的测定.     

AQC 柱前衍生高效液相色谱方法测定康复新液中游离氨基酸和总肽的含量

目的 应用 6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯 （AQC） 柱前衍生化技术,建立康复新液中游 离氨基酸和总肽的高效液相色谱 （HPLC） 含量测定方法,并以总肽含量为指标对市售样品进行检测。方法 以 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 （Kromasil 100-5 C18 色谱柱） ;60% 乙腈 （A） -0.14 mol·L-1 三水合乙酸钠溶液, 用磷酸调节 pH 值至 5.0 （B） 为流动相,梯度洗脱;柱温：39 ℃;流速：1.0 mL·min-1 ,检测波长：248 nm。 结果 14 种氨基酸均能达到良好的分离效果;门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、精氨酸、苏氨 酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸分别在 2.0~99.7、3.4~168.5、2.8~139.6、 4.0~201.4、 4.8~238.1、 6.7~336.9、 3.3~167.5、 9.7~487.3、 4.1~202.5、 4.4~221.6、 5.4~270.5、 3.3~166.8、 4.8~240.8、4.7~236.6 μg·mL-1 范围内呈现良好的线性关系 （r=0.999 5~1.000 0） ;游离氨基酸的平均加样回收率 （n=6） 为 86.8%~108.1%,RSD 为 2.8%~4.4%,总肽酸水解氨基酸的平均加样回收率 （n=6） 为 83.2%~102.7%, RSD 为 0.1%~3.1%;仪器精密度、重复性、稳定性实验的 RSD 均小于 5.0%。结论 该方法与现行质量标准的 紫外分光光度法比较,二者测定的总氨基酸含量结果基本一致,但前者的专属性、重现性更优;以具有生物活 性的总肽为质控指标,针对性更强,可为康复新液的质量评价提供更科学、合理的方法。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中马钱子碱与血浆蛋白的结合率

目的 研究马钱子碱与大鼠血浆蛋白的结合率.方法 采用大鼠血浆平衡透析法,HPLC法测定透析袋两侧溶液中马钱子碱的质量浓度,计算马钱子碱的血浆蛋白结合率.结果 马钱子碱在质量浓度为2.5,1,0.4μg·mL-1时与血浆蛋白结合率分别为59.679%,59.935%,56.387%.结论 高效液相色谱法用于马钱子碱的生物样品测定具有简便、快速、灵敏与选择性高的特点;马钱子碱具有中等强度的血浆蛋白结合率.     

美洲大蠊药材中氨基酸含量的柱前衍生化高效液相色谱法测定

目的建立HPLC法测定美洲大蠊药材中氨基酸含量的方法。方法用盐酸水解、邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生,0.50%磷酸二氢钠缓冲液(pH7.8)-甲醇-乙腈为流动相,柱温:35℃,检测波长:338 nm,梯度洗脱后测定氨基酸的含量。结果各氨基酸衍生物在40 min内均能得到良好的分离,r值为0.999～1.000 0(n=6),平均回收率为92.34%～103.9%,RSD为1.18%～4.76%。结论该方法简便、准确、重复性好,可作为美洲大蠊中氨基酸的含量测定。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定三七及其制剂中三七素含量

目的：建立三七药材及其制剂中三七素含量测定的方法。方法：以硼砂缓冲液（pH 9.18）为提取溶剂,回流提取药材及制剂中的三七素；以氯甲酸芴甲酯（FMOC）作为衍生化试剂,对三七素提取液进行柱前衍生化,采用RP-HPLC,ODS柱分离,并通过紫外检测的方法进行测定。结果：在本实验条件下,三七素的线性范围为1.76～352 mg·L^-1,最低检测限为60 μg·L^-1。衍生化产物稳定,过量的衍生化试剂无干扰。平均加样回收率为95.3%,RSD为1.7%。结论：该方法操作简单,快速,灵敏度高,可用于三七药材及制剂中三七素的分析测定和三七素的药物代谢研究。     

血浆中东莨菪碱的高效液相色谱测定

目的 建立血浆中东莨菪碱的高效液相色谱(HPLC)测定方法,为含东莨菪碱的中药复方动物体内药动学研究提供基础.方法 采用ZORBAX SB-C18 (5 μm,250mm×4.60 mm)色谱柱;以甲醇-0.001 mol·L-1磷酸(70:30)(流动相含0.02 mol·L-1十二烷基硫酸钠)为流动相,流速为1.00 ml·min-1,检测波长为203 nm.结果 东莨菪碱在4.5～249.5 μg·ml-1范围内与峰面积比值呈良好的线性关系(r=0.998 8,r=0.999 4).回收率分别为113.51%,97.16%和97.59%.两者日内、日间精密度的RSD<5%.结论 建立的高效液相色谱测定方法为动物体内东莨菪碱的测定提供了一个可靠的方法.     

柱前衍生化高效液相色谱法测定清开消炎片中猪去氧胆酸的含量

目的建立柱前衍生化高效液相色谱法测定清开消炎片中猪去氧胆酸含量。方法以0.1%18-冠醚-6乙腈溶液为催化剂,0.6%1-溴乙酰基对硝基苯乙腈溶液对清开消炎片中的猪去氧胆酸进行衍生化,采用高效液相色谱法测定;以Waters Symmetry 5C1(8250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱;流动相:乙腈-水(60:40);流速:1.0mL·min-1;柱温:35℃;检测波长:254nm。结果空白无干扰,线性关系良好。结论该方法简便、快捷、重复性好,能准确测定清开消炎片中猪去氧胆酸的含量,为清开消炎片的质量控制提供了依据。     

高效液相色谱法测定大鼠组织中乌头碱的含量

目的:建立高效液相色谱法测定口服乌头碱后大鼠组织中的含量。方法:采用Waters 2690-996PAD色谱系统。色谱条件:用HAlSIL100 C18(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇∶水∶二乙胺(75∶25∶0.1),流速0.9 mL/min,检测波长240 nm。脏器样品按重量体积比(1∶5)加入1.0 mmoL/L HCl,匀浆离心取上清液,冷冻干燥,有机溶剂提取,减压蒸干,用适量甲醇溶解残渣,30μL进样。结果:大鼠脏器心、肝、脾、肺、肾均检测出乌头碱,脑与脊髓中未检出。心、脾、肺、肾线性范围为8.0 ng~2.0μg,相关系数(r)分别为0.9972,0.9986,0.9993,0.9994;肝脏线性范围为0.04μg~4.0μg,相关系数(r)为0.9990。最低检测限为0.4μg/mL。样品回收率均大于88%,精密度RSD均小于10%。结论:该法是一种准确高效的检测方法,为临床检测乌头碱中毒提供了依据。     

大鼠血浆中麻黄碱伪麻黄碱含量的高效液相色谱法测定

目的 建立高效液相色谱( HPLC)法测定大鼠口服中药复方麻黄制剂后血浆中麻黄碱、伪麻黄碱的含量,为研究中药复方麻黄制剂在大鼠体内药动学提供基础.方法 采用Synergi 4u Polar-RP 80A(250 mm ×4.60 mm,4μm)色谱柱,以甲醇-0.092％磷酸(含0.04％三乙胺、0.02％二正丁胺)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,检测波长为207nm.结果 麻黄碱在1.43 ～ 45.76 μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 8),伪麻黄碱在1.35 ～43.12 μg/ml范围内线性关系良好(r =0.999 8),回收率符合生物样品分析,两者日内、日间精密度的RSD＜5％.结论 建立的高效液相色谱测定方法为动物体内麻黄碱、伪麻黄碱的测定提供了一个可靠的方法.     

高效液相色谱串联质谱法测定大鼠血浆及组织中卡巴拉汀含量

 目的 建立准确、灵敏、可靠的高效液相色谱-串联质谱法 (HPLC-MS/MS)检测大鼠血浆及组织中卡巴拉汀的含量。方法 采用Agilent C₁₈ (4.6 mm×100 mm,3.5 μm) 色谱柱,以水-甲醇 (20∶80) 为流动相,流速0.3 mL·min^-1。质谱采用电喷雾电离源正离子模式 (ESI⁺),多重反应检测 (MRM) 方式进行离子监测,药物卡巴拉汀和内标安替比林用于定量的特征反应分别是251.3→206.1和189.1→106.1。体内所有生物样品采用醋酸乙酯萃取法处理。结果 卡巴拉汀在各自测定的浓度范围内线性均良好,r > 0.999 0,相对提取回收率>60%,中、高浓度精密度RSD     

反相高效液相色谱法测定血浆中青藤碱的含量

 用反相高效液相法测定血浆中青藤碱的含量。色谱条件：仪器为Varian 5000液相色谱仪， 色谱柱为ODS C₁₈柱，流动相为乙腈-0.01mol/L磷酸二氫钾（55:45)，内标为氨基比林，流速为1ml/min,检测波长为263nm。线性范围在0.8-12.4μg/ml (r= 0.9974)。最小检出量为0.03g。平均回收率为96.95%±1.62%，RSD= 1.6%。曰内误差PSD<2% 、日间误差RSD<3% 。     

柱前衍生高效液相色谱法测定新疆金鸡菊中游离氨基酸

目的建立柱前衍生高效液相色谱法测定新疆金鸡菊中游离氨基酸。方法采用异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,高效液相色谱法测定新疆金鸡菊中游离氨基酸的含有量。色谱柱为Shim-pack VP-ODS(5μm,250 mm×4.6mm),梯度洗脱,柱温35℃,UV 254 nm波长处检测。结果本方法测定18种氨基酸的线性范围分别为8～720μg/mL,r值均大于0.99;平均回收率分别为94.08%～105.3%。结论应用本法对新疆金鸡菊中的游离氨基酸进行测定,灵敏度高,结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定人血浆中依托泊苷浓度

 目的 建立人血浆中依托泊苷的HPLC测定方法。方法 取样本100 μL,以替尼泊苷为内标,二氯甲烷液液提取,有机相室温下氮气吹干,流动相复溶后加正己烷,振荡离心后取下层进样分析。色谱柱为Shim-pack CLC-ODS 柱（4.6 mm×150 mm,5 μm;流动相为甲醇-水=60∶40;流速1.0 mL·min-1;激发波长为240 nm,发射波长为326 nm。结果 在0.05~50 mg·L-1内线性良好（r=0.999 2,n=7。低（0.10 mg·L-1、中（2.00 mg·L-1、高（30.00 mg·L-13个浓度质控样品的批内变异（RSD为3.07%~6.79%,批间变异（RSD为2.19%~5.51%,方法学回收率为100.15%~103.58%。结论 本方法灵敏度高,简便快捷,为开展依托泊苷的人体药动学研究提供了基础。     

高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠脑脊液中的石杉碱甲

 目的建立大鼠脑脊液中石杉碱甲的高效液相色谱-荧光测定方法。方法采用ODS-C₁₈柱(4.6mm×250mm,10μm),以甲醇-水-三乙醇胺(60:40:0.1)为流动相,流速1mL·min^-1,荧光检测器于激发波长310nm,发射波长370nm处检测,同时紫外检测器于波长310nm处检测作为对照。结果石杉碱甲质量浓度在0.5～200μg·L^-1内线性关系良好(r=0.9999),最低定量限为0.5μg·L^-1,比紫外法降低了10倍。结论该方法准确,可靠,比高效液相-紫外法灵敏度更高。     

LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中4种黄连生物碱的含量

目的: 建立LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中黄连碱、药根碱、巴马汀和小檗碱含量的方法。 方法: 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相乙腈-水(含2 mmoL乙酸铵和0.05%甲酸),流速0.3 mL·min^-1,柱温30 ℃,以士的宁为内标,血浆样品用4倍量乙腈萃取并沉淀蛋白,用电喷雾离子化(ESI)和正离子多离子反应监测(MRM)模式检测,选择离子对为药根碱m/z 338.227→m/z 322.824;黄连碱m/z 320.244→m/z 291.996;巴马汀:m/z 352.243→m/z 308.016;小檗碱:m/z 336.227→m/z 277.981;士的宁:m/z 335.264→m/z 184.017。 结果: 药根碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的线性范围分别为1.01~505,1.06~530,1.13~565,1.07~535 μg·L^-1;定量下限分别为0.539 2,0.646 3,0.761 5,0.197 1 μg·L^-1; 平均回收率分别为103.90%,101.50%,101.58%,115.54%;日内和日间精密度、稳定性的RSD均<10%。 结论: 建立的方法准确、灵敏、特异、简便,适用于大鼠血浆中黄连碱、药根碱、巴马汀和小檗碱的同时测定及药动学研究。     

吴茱萸水提物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的高效液相色谱含量测定

目的 测定吴茱萸水提物中的吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量.方法 采用碱性氯仿萃取处理样品,高效液相色谱(HPLC)法测定.色谱条件为Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18>色谱柱(4.6mm×250mm,5 μm),流动相为乙腈-水(体积比为49:51),检测波长225 nm,流速1.0ml/min,柱温25℃,进样量20μl.结果 吴茱萸碱浓度在0.2～4.0μg/ml范围内呈良好的线性关系,r=0.999 7,平均回收率为101.50%,RSD=1.93%;吴茱萸次碱浓度在0.5～6.0 μg/ml内呈良好的线性关系,R=0.999 9,平均回收率为100.80%,RSD=0.72%.结论 该方法简便、准确、分离效果好,可以用来测定吴茱萸水提物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量.