高效液相色谱法测定食品中大豆异黄酮

目的：建立高效液相色谱法测定食品中大豆异黄酮（包括染料木黄酮和大豆苷元）的含量，探讨样品的提取方法及测定影响因素。方法：样品经0.50mol/L盐酸回液和乙醇提取大豆异黄酮后，采用甲醇－0.01mol/L乙酸铵溶液（pH4.5)(60 40)作为流动相分离待测物质，等度洗脱，采用紫外检测器于254nm波长下测定。结果：染料木黄酮的检出限为0．04μg/ml，大豆苷元为0．05μg/ml，样品的加标回收率为91．4％－113．1％，日内和日间相对标准偏差分别为1．1％－2．8％和2．9％－5．1％。结论：本法简便、快速，易于推广普及，为大豆及其制品和保健食品中大豆异黄酮的检测和膳食摄取植物性雌激素提供了分析方法。     

大豆异黄酮软胶囊的初步药效学研究

目的：进行大豆异黄酮软胶囊的药效学研究，为该药品的功能定位提供一定的参考。方法：采用子宫增重试验、脑功能试验、游泳试验、增强免疫力试验及耐常压缺氧试验等试验方法，考察大豆异黄酮软胶囊对小鼠子宫发育、记忆力、抗疲劳、免疫器官重量及其对抗缺氧能力的影响。结果：与空白组相比，大豆异黄酮软胶囊的大、中、小剂量和阳性对照药均能促进未成熟雌性小鼠子宫的发育；可延长小鼠在跳台上的停留时间(潜伏期)，减少3min内受刺激而跳下的次数(错误次数)。同时该软胶囊可延长小鼠在缺氧条件下的存活时间和游泳时间，但并不能显著增加免疫器官的重量。结论：大豆异黄酮软胶囊具有弱的雌激素样作用，能延长小鼠的生存时间，并有可能改善实验动物的记忆力；但药效试验同时也表明该软胶囊不能增加免疫器官的重量。     

高效液相色谱(HPLC)法分析检测食品中大豆异黄酮含量

目的：分离并测定食品中异黄酮各组分含量，建立快速、有效的分离、检测异黄酮含量方法。方法：利用高效液相色谱技术(HPLC)。结果：异黄酮的最佳提取时间是2-3h温度、流动相及其比例对异黄酮的分离有较大影响。与检测的总大豆异黄酮百分比合量相比，5种豆制品异黄酮含量不同。异黄酮的平均回收率为98．15％，精密度为0．544％。结论：HPLC法能简便，快速地测定食品中大豆异黄酮各个组份的含量。     

贺兰山黄芪的化学成分研究

目的：对贺兰山黄芪的根进行化学成分研究。方法：运用层析手段和波 谱解析对其根部的化学成分进行分离和鉴定。结果：得到3个异黄烷及一个异黄酮类成分。结论：化合物3为新化合物，结构为2‘,4‘-二甲氧基－3‘-羟基－异黄烷－6－O－β－葡萄糖甙；化合物1和4为黄芪属植物中首次发现。     

膜荚黄芪中黄酮类化学成分研究

目的 : 研究膜荚黄芪中黄酮类化学成分。方法: 采用硅胶柱色谱和HPLC制备色谱方法分离纯化得到单体化合物,采用有机波谱方法鉴定化合物结构。结果: 从膜荚黄芪乙醇提取物中分离得到8个黄酮类化合物,分别为2’,7-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷-2’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),3’,4’-二甲基异黄烷(2),芒柄花素(3),芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷(4),毛蕊异黄酮(5),(6aR,11aR)3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷(6),(6aR,11aR)9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷(7),7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)。结论: 化合物1为首次从该属植物中分离得到。     

红花岩黄芪化学成分研究

目的：对红花岩黄芪化学成分进行研究。方法：用溶剂法、色谱法提取、分离红花岩黄芪化学成分,用波谱法鉴定其结构。结果：从红花岩黄芪中分离得到7个化合物,碳三十醇（1）,二十四碳酸（2）,5,7-二羟基-4′-甲氧基-6,8-二异戊烯基异黄酮（ 3）,对香豆酸二十二酯（4）,豆甾醇（5）, 5,7-二羟基-4,-甲氧基- 6-异戊烯基异黄酮（6）,咖啡酸二十四酯（7）。结论：化合物3和4为新天然产物,其它化合物均为首次从该植物中获得。     

保元汤中黄酮类成分的分离和结构鉴定

目的 对中药复方保元汤中的化学成分进行研究。方法 用多种色谱和光谱方法对保元汤中的化学成分进行分离和结构鉴定。结果 从保元汤水提物中分离得到15个黄酮类化合物,分别是异甘草素葡萄糖芹糖苷(1)、芒柄花苷(2)、芒柄花素(3)、异短尖剑豆酚(4)、达维荚迷苷元(5)、2′,4′二甲氧基3′羟基异黄烷6-O-β-D-葡萄糖苷(6)、(6a-R-,11a-R-)9,10二甲氧基紫檀烷3-O-β-D-葡萄糖苷(7)、大萼赝靛素(毛蕊异黄酮,8)、甘草素(9)、5去羟山柰素(10)、甘草苷(11)、异甘草苷(12)、异甘草素(13)、7 ,3′二羟基5′甲氧基异黄酮(14)、降香黄烃(odoriflavene,15)。结论 以上化合物均为首次从保元汤中分离得到。     

准葛尔鸢尾叶的化学成分

目的：研究鸢尾科鸢尾属植物准葛尔鸢尾（Iris sonata Schrenk）叶的化学成分。方法：采用70％乙醇提取，硅胶柱反复层析分离及重结晶等方法从准格尔鸢尾叶中分离其化学成分，通过波谱及化学方法进行结构鉴定。结果：分离并鉴定了18个化合物，其中3个黄酮类化合物：5-羟基-7-甲氧基黄酮（tectochrysin，Ⅰ），5，7-二羟基-8-甲氧基黄酮（wogonin，Ⅱ），蒙花苷（acacetin-7-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→6）-β-D-glucopyranoside，Ⅲ）；2个黄酮醇类化合物：良姜素（izapinin，Ⅳ），异鼠李素-葡萄糖苷（isorhamnetin-7-O-β-D-glucoside，Ⅴ）；1个二氢黄酮类化合物：5，2＇-二羟基-6，7-亚甲二氧基二氢黄酮（Ⅵ）；4个异黄酮类化合物：分别为：5，7-二羟基-6，2＇-二甲氧基异黄酮（Ⅶ），4’，5，7-三羟基-6-甲氧基异黄酮（tectorigenin，Ⅶ），鸢尾苷（tectoridin，Ⅸ），4’-羟基-5-甲氧基-6，7-亚甲二氧基异黄酮（irisolone，Ⅹ）；3个为peltogynoids型化合物：irisoid A（Ⅺ），irisoid B（Ⅻ），irisoid D（Ⅹ Ⅲ）；另外5个化合物为三十一烷醇n-hentriacontanol（Ⅹ Ⅳ），胡萝卜苷（daucosterol，Ⅹ Ⅴ），豆甾醇（stigmasterol，Ⅹ Ⅵ），nonadecanoic acid（ⅩⅦ）和谷甾醇（β-sitosterol，ⅩⅧ）。结论：这些化合物均为首次从该植物中分得，其中化合物Ⅲ．Ⅳ和Ⅴ为本属植物中首次发现。     

蓍的黄酮类部位对豚鼠离体回肠的抗痉挛作用

蓍Achillea millefolium s.l.的茶剂具有消炎、解痉以及抗菌等药理活性,因此常用来治疗胃肠功能紊乱等。作者研究了该植物主要的黄酮类化合物及包括这些化合物的黄酮部位、槲皮素和2个黄酮类代谢物的抗痉挛活性。所试黄酮类化合物包括藤黄菌素-7-O-葡糖苷(1)、藤黄菌素-4’-O-葡糖苷(2)、藤黄菌素-7-O-葡糖苷酸(3)、藤黄菌素(4)、芦丁(5)、槲皮素(6)、芹黄素-7-O-葡糖苷(7)和芹黄素(8)等。黄酮类化合物的2个代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(9)和3-甲氧基-4-羟基苯乙酸(10)也在研究之列。在豚鼠回肠经过一平衡期后,以逐渐积累的方式向其器官浴中…     

内生真菌YD-01次生代谢产物的研究Ⅰ.

目的：研究交链孢霉属真菌（Alternaria sp．）YD-01次生代谢产物的化学成分。方法：应用多种色谱方法进行分离和纯化，并用NMR、IR和MS等方法解析其化学结构。结果：从交链孢霉属真菌YD-01次生代谢产物中分离到3个化合物，它们的结构分别被鉴定为：石杉碱甲（1），6-甲氧基-7，4’-二羟基异黄酮（2），4-羟基苯基-（-D-葡萄吡喃糖苷（3）。结论：微生物发酵是生产石杉碱甲一条新途径，     

Hydrolysis of soy isoflavone conjugates using enzyme may underestimate isoflavone concentrations in tissue

Objective: To investigate the differences of using enzymatic hydrolysis and acid hydrolysis for identification and quantification of isoflavone aglycones from biomatrices. Methods: β-glucuronidase/sulfatase isolated from Helix pomat/a for routine enzy-matic hydrolysis or 6N HC1 was used to release glucuronide and sulfate conjugates in the serum, urine and tissue samples. Profiles of soy isoflavones after enzymatic hydrolysis or acid hydrolysis in several tissues of rat fed with diets containing soy protein isolate were also com-pared using I.C/MS and HPLC-ECD. Results: Acid hydrolysis released more aglycone than enzymatic digestion (P＜0.05) in liver tissue. The total genistein, daidzein and other metabolites were 20% to 60% lower in samples from enzymatic hydrolysis than in acid hydrolysis. Conclusion: These results indicated that unknown factors in tissues reduced the enzymatic hydrolytic efficiency for releasing isoflavone aglycones even in op optimized condition. This would underestimate isoflavone tissue concentrations up to 60%.     

大豆异黄酮对雌鼠初情期等生殖性状的影响

目的 通过研究大豆异黄酮对雌鼠初情期等生殖性状的影响,为母鼠的安全饲喂提供实验依据.方法 本实验选用210只21日龄ICR雌鼠随机分成3组,饲喂含不同浓度大豆异黄酮(0 mg/kg、50 mg/kg、400 mg/kg)的饲料.每日检查母鼠阴道开张和阴道栓情况.采集母鼠45和65日龄时血清,利用ELISA方法检测血清中雌激素含量,并统计45、65日龄体重和子宫重.利用免疫组织化学方法检测子宫上皮雌激素受体的表达分布情况.结果 雌鼠阴道开张的平均日龄分别为27.2 d、26.1 d和25.8 d,400 mg/kg组显著早于剂量为0mg/kg的对照组(P＜0.05);雌鼠平均初次配种时间各组间差异不显著(P＞0.05);饲养到45日龄和65日龄时400mg/kg组雌鼠体重显著高于对照组(P＜0.05).喂养8周后两个试验组在子宫间质细胞上雌激素受体的阳性细胞表达率显著高于对照组;在腺上皮中400 mg/kg组显著高于50 mg/kg组和对照组(0 mg/kg);但是在腔上皮中,各组间受体的阳性细胞表达率差异不显著(P＞0.05).结论 饲喂每公斤含400 mg大豆异黄酮的饲料可以刺激初情期前母鼠阴道的开张,提高雌鼠的体重,降低65日龄时血清雌激素含量,并在饲喂8周后影响子宫间质和腺上皮上雌激素受体的表达分布;而饲喂每公斤含50 mg大豆异黄酮的饲料仅对小鼠45日龄体重及饲喂8周后子宫间质上雌激素受体的表达分布有所影响.     

LC-MS/MS法测定大鼠口服缩泉胶囊后胆汁中的代谢物（Ⅲ）

目的：研究大鼠灌胃缩泉胶囊后益智中二芳基庚烷类成分（益智酮甲、益智酮乙、益智醇）在大鼠胆汁中的物质形式。方法雄性Sprague Dawley大鼠胆管插管手术完毕经灌胃给予缩泉胶囊（1.64 g/kg）后收集0～4 h胆汁。同体积（100μl）的两份胆汁样品分别经蛋白沉淀和β-葡萄糖醛酸水解酶（1000 U/ml,pH为5的乙酸钠缓冲液）处理后,所得样品利用液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）进行分析。结果在大鼠胆汁中几乎检测不到益智二芳基庚烷类成分的原形物质形式,而是以葡萄糖醛酸结合物的形式存在。这些二相代谢物经酶水解处理后代谢物的色谱峰消失,释放出二芳基庚烷类成分的原形物质。结论大鼠灌胃给药后经肠道吸收的二芳基庚烷类成分在胆汁中形成葡萄糖醛酸结合产物,酶水解可以释放出原形物质形式。本研究可以帮助我们理解这类物质的体内转运过程,也为后期的定量分析工作奠定基础。     

基于UPLC—Q—TOF/MS的大鼠体内茵芋苷代谢特征分析

目的：应用超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF/MS）鉴定并分析大鼠茵芋苷给药后的代谢途径及其在胆汁、血浆、尿液、粪便中的代谢产物。方法：通过UPLC-Q-TOF/MS分析大鼠给药前、灌胃和静脉注射给药后得到的不同时间段的生物样品,并在电喷雾正负离子模式下获取生物样品的质谱数据;使用MassLynx V4.1软件处理UPLC-Q-TOF/MS数据;鉴定茵芋苷在胆汁、血浆、尿液、粪便中的代谢产物。结果：在大鼠的血浆、胆汁、尿液、粪便样品中除原型外共鉴定得到10种代谢产物,其中有8种代谢产物均通过肾脏途径代谢。结论：水解、葡萄糖苷酸结合、氧化、羟基化等是茵芋苷在体内代谢的主要途径;根据尿液中广泛代谢的结果,应重视茵芋苷经肾途径代谢的临床用药指导。     

杠柳毒苷在大鼠体内排泄的初步研究*

[目的]研究杠柳毒苷在大鼠体内的排泄情况.[方法]建立了液-液萃取后用高效液相色谱测定大鼠尿液、粪便和胆汁中杠柳毒苷含量的方法,并对大鼠静注及灌胃杠柳毒苷后的排泄情况进行分析.[结果]大鼠按12mg/kg剂量灌胃给予杠柳毒苷后,72 h尿中杠柳毒苷和其代谢物的累积排泄量占给药剂量的0.44%,粪中杠柳毒苷和其水解代谢物的累积排泄量占给药剂量的12.39%;按0.74 mg/kg剂量尾静脉注射给予杠柳毒苷后,72 h尿中杠柳毒苷及其代谢物的累积排泄量占给药剂量的6.24%,粪中杠柳毒苷及其水解代谢物的累积排泄量占给药剂量的7.33%;按0.74 mg/kg剂量尾静脉注射给予杠柳毒苷后,21 h内累积经胆汁排泄的杠柳毒苷占给药总量的76.13%.[结论]杠柳毒苷原形药物主要经胆汁排泄,但从尿液和粪便排泄则很少,尿液中可能存在结合代谢物,粪便中主要以肠菌代谢物(杠柳次苷)的形式排泄.     

大豆异黄酮对胰岛素抵抗大鼠抵抗素基因表达的影响

目的探讨大豆异黄酮(SIF)改善高脂高蔗糖膳食诱导大鼠胰岛素抵抗(IR)状态的作用及可能机制。方法选用高脂高蔗糖饲料诱导的IR雄性SD大鼠,根据胰岛素抵抗指数(IRI)随机分为模型对照组和3个SIF组(50mg/kg·bw、150mg/kg·bw及450mg/kg·bw)。各组给予相应受试物1月后,酶法检测各组动物空腹血糖、放免法检测空腹血胰岛素、酶免法检测血抵抗素含量,实时定量RT-PCR法检测肾周脂肪组织抵抗素基因的mRNA水平。结果与模型对照组比较,450mg/kg·bwSIF组能明显降低大鼠肾周脂肪组织抵抗素基因mRNA的表达及血清抵抗素的含量。150mg/kg·bwSIF和450mg/kg·bwSIF组能显著降低空腹血胰岛素水平及IRI。3个SIF组的血糖与对照组比较差异无统计学意义。IRI与血清抵抗素水平存在着明显的正相关(r=0.355,P<0.05)。结论SIF可能具有通过下调抵抗素基因mRNA表达及降低血清含量而提高胰岛素敏感性的作用。     

对液化石油气燃烧产物接触者尿致突变性的研究

应用鼠伤寒沙门菌株ＴＡ９８及其新的衍生菌株ＹＧ１０２１和ＹＧ１０２４检测了液化石油气（ＬＰＧ）燃烧产物接触者尿的致突变性。吉果表明，在有大鼠Ｓ_９已β－葡萄糖醛酸酶存在时，尿样显示较强的致突变性。尿样对ＹＧ１０２４的致突变性明显高于ＴＡ９８，而对ＹＧ１０２１的致突变性与ＴＡ９８相近。提示ＬＰＧ燃烧产物接触者尿中致突变物主要是以葡萄糖醛酸贰结合状态存在的芳香胺类物质。同时也证明ＹＧ１０２４在检测该尿样的致突变性上比ＴＡ９８更为敏感。     

LC-MS/MS法测定大鼠口服缩泉胶囊后胆汁中的代谢物（Ⅱ）

目的 研究大鼠灌胃缩泉胶囊后,益智黄酮（杨芽黄素、伊砂黄素、白杨素、山奈素和芹菜素-4＇,7-二甲氧醚）二相结合产物的酶水解。方法 雄性Sprague-Dawley大鼠胆管插管手术完毕后经灌胃给予缩泉胶囊（1.64 g/kg）后收集0~4 h胆汁。胆汁样品经β-葡萄糖醛酸水解酶（1 000 U/ml,pH为5的乙酸钠缓冲液）处理后,利用液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）进行分析。结果 益智黄酮的葡萄糖醛酸结合物在酶水解处理后,代谢物的色谱峰消失,释放出黄酮的原形物质形式。虽然脱甲基反应后形成葡萄糖醛酸结合物也被水解,但并未能检测到脱甲基产物。结论 β-葡萄糖醛酸水解酶处理可进一步确定益智黄酮在大鼠胆汁中的物质形式,也为定量分析奠定基础。     

大豆异黄酮对代谢综合征大鼠胰岛素抵抗及脂联素水平的影响

目的研究大豆异黄酮(SIF)对膳食诱导型代谢综合征(MS)大鼠胰岛素抵抗(IR)及脂联素(ADPN)水平的影响及可能的作用机制。方法采用高脂、高糖、高盐饲料喂养复制MS大鼠模型。成模的47只MS大鼠再随机分为4组:模型组、西药组、大豆异黄酮低剂量组、大豆异黄酮高剂量组,药物干预4周。用生化法测大鼠血脂;用试纸法检测大鼠血糖;用放免法检测药物干预前后血浆脂联素水平。结果药物干预4周末,模型组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR较空白组显著升高(P<0.01)。与模型组比较,西药组与SIF高剂量组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR均降低(P<0.01或P<0.05),两组治疗效果相似,无显著性差异(P>0.05);SIF高剂量组大鼠TG、TC均显著降低(P<0.01);西药组大鼠TG、TC、HDL-C无显著性变化(P>0.05)。SIF低剂量组大鼠仅TC降低(P<0.05),余代谢指标无显著性差异(P>0.05)。药物干预4周末,与MS模型组相比,SIF高剂量组大鼠血清脂联素浓度增高(P<0.01)。结论 SIF具有调节MS模型大鼠血脂、胰岛素抵抗及血清脂联素的作用。