L-左旋肌肽对人口腔鳞癌干细胞增殖及凋亡作用的实验研究

目的研究L-左旋肌肽对人口腔癌细胞Tca8113的凋亡作用及机制。方法体外培养Tca8113细胞,将对数生长期的Tca8113细胞分为L-左旋肌肽(5、20、50 mmol/L)处理组和空白对照组。按照分组条件分别用L-左旋肌肽5、20、50 mmol/L和生理盐水处理各组对应细胞。采用MTT法检测处理24 h和48 h后各组Tca8113细胞增殖情况;干预48 h后流式细胞仪检测各组Tca8113细胞凋亡和细胞周期情况;Western blot方法检测各处理组48 h后AKT、p-AKT和p38、p-p38蛋白的表达情况。结果 MTT和流式结果显示,L-左旋肌肽对Tca8113细胞的抑制作用依赖于浓度和时间。Western blot结果显示,L-左旋肌肽干预细胞48 h后,随着L-左旋肌肽浓度的提高,p-AKT和p-p38的蛋白表达量降低。结论 L-左旋肌肽通过抑制AKT和MAPK信号通路,抑制Tca8113细胞的增殖,并促进其凋亡。     

骨碎补柚皮苷对炎症及骨作用的相关研究进展

柚皮苷广泛存在于各类植物中,是中药骨碎补的重要组成成分,目前柚皮苷还处于实验研究阶段,已有的实验结论证实了柚皮苷可通过降低炎症因子的表达,实现抑制包括骨关节炎症在内的各种炎症反应的作用,并认为其作用的分子机制是抑制NF-κB通路。此外,柚皮苷通过提高BMP-2蛋白和抑制RANKL的表达实现促进成骨细胞增殖分化和抑制破骨细胞活性的作用。动物实验中柚皮苷对骨质疏松症的治疗有效,其相关机制研究正在深入。     

淫羊藿苷纳米微粒对大鼠成骨细胞成熟与矿化的影响

目的观察淫羊藿苷纳米微粒(ICA-NS)对出生48 h内的大鼠乳鼠颅骨成骨细胞成熟与矿化的作用。方法显微镜观察淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞形态的影响; Hoechst 3342/PI双染色法检测淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞的毒性反应;碱性磷酸酶检测试剂盒检测成骨细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性;茜苏红染料对淫羊藿苷纳米微粒处理过的细胞进行染色,观察钙化结节的数量和面积;检测成骨细胞中与成骨相关的特异性蛋白表达情况。结果与淫羊藿苷组相比,淫羊藿苷纳米微粒组细胞形态无明显变化,且Hoechst 3342/PI双染色法结果进一步显示淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞无明显毒副作用;碱性磷酸酶活性测定结果显示淫羊藿苷纳米微粒显著提高了成骨细胞中碱性磷酸酶水平,而且淫羊藿苷纳米微粒组茜苏红钙化结节染色面积明显增大,颜色显著加深,成骨性相关蛋白的表达量也显著高于对照组。结论淫羊藿苷纳米微粒能显著促进成骨细胞的矿化与成熟,且对成骨细胞无明显毒副作用。     

淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠阴茎海绵体压力、平均动脉血压的影响及其作用机制的研究

目的 淫羊藿次苷Ⅱ是淫羊藿中提取分离的单体,为了解淫羊藿次苷Ⅱ对阴茎性功能障碍(ED)的疗效,通过体内试验观察其对阴茎海绵体压力和平均动脉血压的影响及作用机制.方法 麻醉下游离大鼠左侧颈总动脉和左侧阴茎海绵体,允别插管与电生理仪连接;游离左侧海绵体神经(CN),采用电生理仪刺激器连接双极电极刺激;检测不同浓度的淫羊藿次苷Ⅱ在刺激CN后对阴茎海绵体压力(ICP)和平均动脉血压(MAP)影响,淫羊藿苷、西地那非、罂粟碱作为对照组.同时观察可溶性环鸟苷酸(sGC)抑制剂H-[1,2,4]噁二唑[4,3.A]喹喔啉(ODQ)、一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N~ω硝基-L-精氨酸(LNNA)及一氧化氮生成抑制剂亚甲蓝(methylene blue,MB)对淫羊藿次苷Ⅱ(10~(-4)mol/L)诱发ICP/MAP变化的影响.结果 4组药物均剂量依赖性显著提高ICP(P<0.01),淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿苷和西地那非对MAP无显著影响(P>0.05),而罂粟碱浓度达10~(-4)mol/L后,即可显著降低MAP(P<0.01).在受试浓度下,LNNA、MB和ODQ可显著抑制淫羊藿次苷Ⅱ诱发的ICP变化(P<0.01),对两地那非诱发的ICP变化无影响(P>0.05).结论 淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿苷呈剂量依赖性地提高大鼠阴茎勃起功能(ICP),淫羊藿次苷Ⅱ效价强度为淫羊藿苷的2.44倍,对平均动脉血压没有显著影响,其机制可能与增强阴茎海绵体NO-cGMP通路的活性有关.     

红景天苷现代药理作用概述

红景天（Rhodiola）是景天科（Crassulaceae）红景天属多年生草本或亚灌木植物,多生长在海拔较高的山坡林下或灌木丛林,因生长环境较为恶劣,红景天具有很强的生命力和适应性.早在《四部医典》就记载到了红景天的药理作用,随着科研技术的不断发展和提高,红景天中的主要成分也逐渐被确认,目前已明确的成分包括红景天苷、酪醇等,其中得到研究最多的就属红景天苷,近些年研究证实,红景天苷对肾脏、心血管等器官及系统具有保护作用,现就其主要药理作用综述如下.     

尿苷代谢在炎症相关疾病中的研究进展

尿苷是一种嘧啶核苷, 参与细胞内多种生物大分子的合成, 如遗传物质、糖原等。此外, 尿苷及其衍生物可通过多种作用机制调节细胞内的生理过程。越来越多的研究结果显示, 尿苷具有重要的抗炎和抗衰老作用。本文就尿苷的代谢、尿苷的作用机制以及其对急慢性炎症疾病的作用展开讨论, 强调其作为一种内源性抗炎代谢物的作用, 并为后续尿苷相关研究提供依据和参考。     

大豆苷原防治去卵巢大鼠骨质疏松症的量效作用

目的 观察不同剂量大豆苷原对去卵巢大鼠血清骨代谢生化指标、骨密度、骨生物力学和骨形态学的影响.方法 选用4月龄Sprague-Dawley 雌性大鼠60只,随机分6组:假手术组(Sham)、去势组(OVX)、戊酸雌二醇手术组(E2)、高剂量大豆苷原手术组(H-Dai)、中剂量大豆苷原手术组(M-Dai)和低剂量大豆苷原手术组(L-Dai).于术后4周开始分别给予相应的药物灌胃,治疗3个月后处死大鼠,进行相关的检测.结果 去卵巢大鼠的雌二醇水平显著低于其余各组,而碱性磷酸酶和骨钙素活性明显高于其余各组(P<0.05、P<0.01).去卵巢后大鼠腰椎的骨密度、最大压缩载荷、骨小梁与椎体总面积比值以及股骨骨密度和最大三点弯曲载荷均比Sham组降低,经过大豆苷原治疗后各项指标有不同程度的提高,但是50和200/(kg·d)的大豆苷原组不及10/(kg·d)大豆苷原组效果显著(P<0.05、P<0.01).结论 大豆苷原对去卵巢大鼠骨质疏松有防治作用,呈现剂量依赖性方式,低剂量时作用更为显著.     

柚皮苷抑制骨关节炎软骨细胞凋亡实验研究

目的研究柚皮苷在炎症环境下对人骨关节炎（OA）软骨细胞凋亡的影响和可能的作用机制。方法采用不同浓度（0、0．1、1、10、100 mg／L）柚皮苷对 OA 软骨细胞进行预处理2 h 后,加入或不加入炎症因子混合液（白细胞介素-1β5 ng／ml 和肿瘤坏死因子-α20 ng／ml）共作用24 h。首先检测柚皮苷对炎症环境下软骨细胞活性和凋亡的影响,然后检测软骨细胞在柚皮苷作用下的一氧化氮（NO）水平及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（caspase）-3、caspase-8活性变化情况。结果柚皮苷预处理后软骨细胞在炎症因子刺激下发生凋亡显著减轻,且其抑制细胞凋亡作用具有浓度依赖性。进一步分子生物学检测显示,柚皮苷对 NO 生成及激活的 caspase 信号转导通路具有明显抑制作用。结论柚皮苷能有效抑制人 OA 软骨细胞凋亡,其作用机制可能是柚皮苷阻断了 NO 产生并抑制了下游的 caspase 信号通路,有望应用于 OA 治疗新药的研发。     

替比夫定联合复方甘草酸苷片治疗慢性乙型肝炎52周临床观察

目的:观察替比夫定联合复方甘草酸苷治疗慢性乙型肝炎临床疗效.方法:选择20例慢性乙型肝炎患者应用替比夫定联合复方甘草酸苷片治疗52周,观察治疗前及治疗4、12、24、52周检测血清肝功能、HBV-DNA、乙肝五项、乙肝病毒基因变异情况.结果:HBV-DNA定量显示患者4周内转阴4例,均为转氨酶明显异常者,且观察52周时HBeAg均阴转,其中2例转为小三阳.未出现耐药.结论:替比夫定与复方甘草酸苷联合应用治疗慢性乙肝患者疗效能提高HBVDNA阴转率,降低耐药发生率,提高HBeAg血清学转换,从而达到治疗终点.     

淫羊藿苷通过OPG/RANKL信号途径 调节骨吸收的机理研究

目的探讨淫羊藿苷抑制骨吸收的机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质干细胞,流式 检测细胞纯度。加入10原缘酝淫羊藿苷12 h、24 h、36 h、48 h后用ReaUime-RT-PCR检测OPG和 RANKL基因表达,WesLern bloLLing检测蛋白表达。结果第2代培养细胞的纯度达到95%_以上。OPG基因和蛋白表达水平在24 h时明显升高,与对照相比有显著差异。OPG和RANKL的比值显著 高于对照组。结论淫羊藿苷主要通过提高OPG及OPG和RANKL的比值来发挥抑制骨吸收的作 用。     

雷公藤多苷诱导生精障碍大鼠模型的建立

<正>雷公藤多苷(又称雷公藤多甙、雷公藤总苷),是从卫矛科雷公藤属植物根木质部经提取和分离所得到的混合物,在临床上主要用于治疗各种皮肤病、肾炎及类风湿性关节炎等疾病。近年来,我国学者发现长期口服雷公藤多苷会导致男性患者精子数量减少、活动力下降,严重者甚至造成不育。雷公藤多苷这一毒副作用为研究人类生精障碍型不育的病因、发病机制和病理生理改变提供了一种方法。雷公藤多苷会诱导大鼠形成一种类似于少弱精子型不     

柚皮苷抑制PMMA颗粒诱导的破骨细胞形成及骨溶解

目的从体外和体内实验2个方面评价柚皮苷对聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）诱发的破骨细胞性骨溶解的作用。方法培养破骨细胞前体细胞RAW264.7,使用PMMA颗粒刺激细胞,观察柚皮苷的治疗作用。检测抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色、Ca2＋释放实验以及TRAP、组织蛋白酶（CPK）、NF-κB的基因表达。采用小鼠膝关节置钉模型评价柚皮苷对PMMA诱发骨吸收的作用,对实验标本采用生物力学拔出试验进行评价。结果柚皮苷可以有效地抑制破骨细胞的形成并下调骨吸收基因标记物的表达,剂量为10μg/ml时表现出对TRAP活性的最大抑制作用。在颗粒刺激培养液中柚皮苷降低了钙的释放。柚皮苷缓解了膝关节置钉模型中PMMA颗粒刺激所造成的长期的骨吸收,表现为骨体积分数的增加和最大钉拔出力的增加。300 mg/kg的灌胃剂量可达到最好的疗效。结论柚皮苷抑制PMMA诱导的破骨细胞形成,降低PMMA颗粒刺激的钙释放。在观察慢性骨吸收的长期模型中,柚皮苷也有效抑制PMMA诱发的骨吸收,并保留了置入物的稳定性。     

淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ通过BMP/Runx2/Osx信号通路促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

目的观察淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化过程中BMP-2/Runx2/Osx信号通路的影响,探讨其可能的作用机制。方法贴壁筛选法体外培养BMSCs,随机分为空白对照组、阳性转化液组、抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅰ+抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅱ组及淫羊藿次苷Ⅱ+抑制剂组。通过茜素红染色,对各组促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用进行药效学评价; ELISA法检测各组ALP活性、BGP、COL-Ⅰ、BMP2蛋白分泌量;RTReal-TimePCR法检测各组ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA基因表达。结果茜素红染色结果表明,淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅱ组均可明显观察到大量的矿化结节的形成;ELISA实验结果表明,与空白对照组比较,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均能明显促进ALP细胞活性及BGP、COL-Ⅰ、BMP-2蛋白分泌量,并且差异具有统计学意义(P0.05);两组药物作用强度均已达到阳性转化液组的80%以上。同时,淫羊藿次苷Ⅰ对ALP活性、 BGP蛋白表达均明显强于淫羊藿次苷Ⅱ,并且差异具有统计学意义(P0.05);对COL-Ⅰ、BMP-2的蛋白表达量,两者差异无统计学意义(P0.05)。RT-PCR实验结果表明,与空白对照组相比,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均可显著上调成骨相关转录因子ALP、BGP、RunX2,并进一步调节其下游基因Osterix的转录表达,差异具有统计学意义(P0.05);与阳性对照液组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对ALP、Osterix的mRNA表达无明显差异(P0.05);淫羊藿次苷Ⅰ与淫羊藿次苷Ⅱ组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对Osterix mRNA的表达明显强于淫羊藿次苷Ⅰ,并且差异具有统计学意义(P0.05)。对ALP、BGP、RunX2 mRNA的表达二者无显著性差异(P0.05)。结论淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ均能促进BMSCs定向成骨转化,其作用机制可能与激活BMP/Runx2/Osx信号通路有关。淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ作用差异可能与淫羊藿次苷Ⅰ在体内生物转化为淫羊藿次苷Ⅱ有关。     

大豆苷元干预Hedgehog信号通路调控去卵巢骨质大鼠基质金属蛋白酶代谢

目的 探究大豆苷元对骨质疏松（osteoporosis,OP）模型大鼠Hedgehog信号通路的调控作用,分析大豆苷元对OP大鼠基质金属蛋白酶代谢的影响。方法 随机将60只雌性SPF级Wistar大鼠分为假手术组、模型组、大豆苷元低、中、高剂量治疗组5组,每组12只。除假手术组,其他4组均采用去卵巢法建立OP模型。造模成功后开始干预治疗,假手术组、模型组等剂量生理盐水灌胃,其他给予大豆苷元低、中、高剂量治疗,连续干预12周。酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清雌激素（E2）、骨钙素（BGP）、血清碱性磷酸酶（ALP）含量水平;免疫组化法检测各组大鼠股骨组织中基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）和基质金属蛋白酶-7（MMP-7）免疫蛋白的表达情况;TUNEL染色法检测各组骨细胞凋亡情况;RT-PCR法和WB法检测各组骨组织中Shh、PTC1、Gli1 mRNA及蛋白表达水平。结果 大豆苷元能显著提高OP大鼠大鼠E2、TIMP-1水平,降低细胞凋亡及 BGP、ALP、MMP-7水平;显著改善股骨组织中Shh、PTC1、Gli1 mRNA及蛋白表达水平（P＜0.05）,且大豆苷元不同组具有剂量依赖性（P＜0.01）。结论 大豆苷元可有效调控OP模型大鼠基质金属蛋白酶代谢水平,这可能与大豆苷元能够有效调节Hedgehog信号通路表达相关。     

大孔树脂纯化蓝莓果中花色苷的研究

比较了10种大孔树脂对蓝莓花色苷的吸附和解吸效果,研究了AB-8型大孔树脂对蓝莓花色苷的吸附与解吸条件.结果表明,AB-8型大孔树脂是纯化蓝莓花色苷效果较好的树脂;蓝莓花色苷在AB-8型树脂上的吸附平衡时间为4 h,解吸平衡时间为2 h,吸附的最适质量浓度为750 mg/L;30 ℃,pH 3.0时吸附能力比较强,解吸时宜选用体积分数60 %乙醇溶液.该工艺生产的花色苷产品为紫黑色粉末,色价为54.10,回收率为88.20 %.     

蓝莓混汁加工中的防酶促褐变工艺

蓝莓含有大量的多酚氧化酶（PPO）,在果汁加工过程中易与酚类物质发生酶促褐变反应,影响果汁品质.榨汁前对蓝莓进行防褐变处理可以明显改善蓝莓混汁的品质,本文主要讨论了添加酶抑制剂和蒸汽热烫直接灭酶两种方法及其对果汁品质的影响.榨汁前添加0.05%VC可以抑制PPO与酚类物质反应,但不能使酶完全失活,且不能促进花色苷和多酚类物质的溶出;热烫2 min能使蓝莓的内源性PPO完全失活,防止酶促褐变,并且明显提高了果汁中的花色苷和总酚含量,提高果汁的色泽稳定性.     

柚皮苷促进成骨细胞分化并有效改善卵巢切除所致的骨质疏松

目的 评价柚皮苷对成骨细胞增殖与分化的作用,并采用大鼠骨质疏松模型评价柚皮苷的治疗效果.方法 采用不同浓度的柚皮苷处理大鼠骨髓基质细胞,观察其增殖、分化与功能的改变.采用低、中、高三种不同剂量的柚皮苷作为治疗组,磷酸缓冲液(PBS)作为对照组,对卵巢摘除诱发骨质疏松的大鼠灌胃2个月.应用骨质疏松大鼠右侧股骨的X线照片和显微CT扫描测量骨矿密度以及骨体积分数,使用骨质疏松大鼠左侧胫骨的病理切片检测组间骨小梁厚度和骨小梁间隙的变化.结果 体外研究表明柚皮苷可有效增加骨髓基质细胞的增殖和成骨分化,浓度为10 μg/ml时对骨钙素的表达具有最显著的作用.骨髓基质细胞对柚皮苷的治疗呈现一种延迟反应模式.柚皮苷并有效逆转了卵巢切除导致的骨质疏松,增加了骨密度、骨容量和骨小梁厚度.300 mg/kg(中剂量)是具有满意治疗效果的最优剂量.结论 柚皮苷促进骨髓基质细胞的分化与增殖,增加骨钙素的表达,它能有效逆转卵巢切除大鼠的骨质疏松过程.本研究表明柚皮苷是治疗骨质疏松的潜在有效药物.     

在体周围神经直接转基因的实验研究

目的探讨将外源性基因直接转染入在体周围神经并得以表达的可行性。方法构建含有大肠杆菌β－半乳糖苷酶结构基因（ｌａｃＺ基因）的ＰＣＭＶβ质粒。对照组行兔坐骨神经内注射ＰＢＳ溶液,实验组注射ＰＣＭＶβ质粒溶液。术后分期分批取出注射部位的神经组织,进行β－半乳糖苷酶活性检测及应用５－溴－４－氯－３－吲哚－β－Ｄ－半乳糖苷的β－半乳糖苷酶组织化学染色。结果对照组术后各期注射部位神经组织中均未检测到β－半乳糖苷酶活性,β－半乳糖苷酶组织化学染色呈阴性。实验组术后各期注射部位神经组织中均可检测到β－半乳糖苷酶活性,β－半乳糖苷酶组织化学染色呈阳性。结论外源性基因可直接转染入在体周围神经并得以表达。     

复方甘草酸苷与雷公藤多苷治疗银屑病的效果

目的 分析雷公藤多苷联合复方甘草酸苷治疗银屑病的效果。方法 选择2019年3月-2022年9月邹 城市人民医院收治的100例银屑病患者,随机分为对照组和研究组,每组50例。对照组予以单用复方甘 草酸苷治疗,研究组联用雷公藤多苷与复方甘草酸苷治疗,比较两组中医证候积分、临床疗效、不良 反应发生情况。结果 研究组总有效率为90.00%,高于对照组的72.00%（P ＜0.05）;研究组治疗后中 医证候各项积分低于对照组（P ＜0.05）;研究组不良反应发生率与对照组比较,差异无统计学意义 （P ＞0.05）。结论 联用复方甘草酸苷、雷公藤多苷治疗银屑病的效果确切,可有效改善皮损状况,缓解 中医症状,且不增加不良反应发生率,应用安全性较高。     

红景天苷对低氧环境下大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞缝隙连接蛋白43表达的影响

目的:探讨红景天苷对低氧环境下SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:体外培养SD大鼠CCSMC,免疫组化法鉴定细胞;设常氧对照组(21%O_2)、低氧组(1%O_2)、低氧+红景天苷8μg/ml组、低氧+红景天苷16μg/ml组、低氧+红景天苷32μg/ml组和低氧+红景天苷64μg/ml组,分别培养48 h;Western印迹测定Cx43相对表达量。结果:体外培养CCSMC生长良好,抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和抗desmin抗体免疫组化染色阳性,CCSMC占比90%以上。MTT法结果显示,红景天苷浓度≤64μg/ml时,对CCSMC无明显毒性;而128μg/ml和256μg/ml红景天苷对CCSMC有一定的抑制作用。未加红景天苷干预时,与常氧对照组相比,低氧组Cx43总蛋白和磷酸化蛋白表达均显著升高(P0.01和P0.05),磷酸化比例未见明显变化(P0.05);与低氧不加药组相比,不同浓度红景天苷干预后Cx43表达量仍显著升高,但Cx43蛋白磷酸化比例显著降低,差异均有显著性(P均0.05)。结论:低氧促进大鼠CCSMC Cx43表达升高,红景天苷浓度≤64μg/ml无法逆转上述缺氧改变,但降低了Cx43磷酸化比例。推测红景天苷能通过降低Cx43磷酸化比例抑制缺氧引起的缝隙连接通道形成,保护平滑肌细胞功能。