BM210955抗骨吸收细胞药效与作用机制

目的 研究ＢＭ２１０９５５延缓骨量丢失、抑制骨吸收的细胞药效和作用机制。方法 由１０日龄新西兰兔四肢长骨分离破骨细胞接种于象牙片和盖玻片上培养,应用ＴＲＡＰ（抗酒石酸酸性磷酸酶）、ＴＢ（甲苯胺蓝）和吖啶橙荧光染色等技术,观察不同浓度ＢＭ２１０９５５药物对破骨细胞生存率、骨吸收功能和凋亡率等细胞药效评价指标的影响。结果 ＢＭ２１０９５５降低ＴＲＡＰ（＋）多核细胞数目,１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ组较对照组减     

BM210955抗骨吸收细胞药效与作用机制

目的研究BM     

白细胞介素1刺激破骨细胞性骨吸收作用的实验研究

目的：了解白细胞介素1β（IL－1β）在破骨细胞性骨吸收中的刺激作用及其相应的作用机制。方法：分别将新生大鼠破骨细胞单独以及和成骨细胞联合接种于预置象牙片的培养板中。24h后培养液中加入不同浓度的IL－1β。继续培养48h,然后取出象牙片,超声处理后行甲苯胺蓝染色,光镜下观察骨吸收陷窝的数目并计算其部面积。结果：IL－1β能够明显增加坡骨细胞和成骨细胞联合培养组象牙片上吸收陷窝的数目和面前,且刺激作用呈剂量依赖性,但对单独培养的破骨细胞无明显刺激作用。结论：IL－1β的刺激骨吸收作用由成骨细胞所介导,而非直接作用于破骨细胞。     

氟对兔体外破骨细胞性骨吸收影响的研究

目的:探讨不同剂量氟化钠 (Na F)对兔体外破骨细胞功能的影响。方法:从新生兔四肢长骨中分离破骨细胞 ,采用体外培养破骨细胞的方法 ,用倒置相差显微镜和计算机图像分析技术 ,测量在含有不同浓度 (1.0 0×10 - 7～ 1.0 0× 10 - 4m ol/ L )的 Na F培养液中骨吸收陷窝数和表面积。结果:染氟 1.0 0× 10 - 6 、1.0 0× 10 - 5和 1.0 0×10 - 4m ol/ L 组骨片上骨吸收陷窝数量和表面积与对照组比较均减少 (P <0 .0 1) ,而且骨吸收陷窝数及表面积随氟浓度的增加而减少。 结论 :氟对体外培养的破骨细胞有直接的损伤作用。     

骨吸收机理与破骨细胞分子生物学研究的进展

口腔牙齿与牙槽骨和颌骨的吸收是口腔临床医学中的一个极其重要的问题。骨的修复，改建和形态学发生是一个生理控制过程，它包括由成骨细胞作用的骨基质的合成和由破骨细胞作用下的骨的协同吸收，破骨细胞（osteoclast)与成骨细胞（osteoblast)是骨组织形成和吸收的关键性生物活性细胞，在骨组织再生与修复方面，也是矛盾与对立的统一体，近十年来，在破骨细胞与骨吸收机理的分子生物学领域研究方面，已有着长足的进展，在此重点讨论骨吸收机理与破骨细胞分子生物学研究的进展。     

银杏叶提取物对破骨细胞分化和骨吸收的作用及其机制

目的：探讨不同浓度银杏叶提取物（GBE）对破骨胞分化和骨吸收的作用,并阐明其作用机制。方法：体外培养RAW264.7细胞,采用核因子κB受体活化因子配体（RANKL）和不同浓度GBE处理细胞,分为空白对照组（0μg·L^-1 RANKL）、RANKL组（100 μg·L^-1RANKL）和RANKL+75mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组。抗酒石酸酸性染色（TRAP）法观察各组破骨细胞的形态及数量,骨吸收陷窝面积评估GBE对破骨细胞骨吸收能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,RT-PCR法检测RAW264.7细胞中破骨细胞相关基因活化T细胞核因子c1（NFATc1）、树突状细胞特异性跨膜蛋白（DC-STAMP）、组织蛋白酶K （Cathepsin K）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、B淋巴细胞瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、P27和细胞周期蛋白D1（Cyclin-D1）的表达水平。结果：与空白对照组比较,RANKL组破骨细胞的数量明显增加（P < 0.05）;与RANKL组比较,RANKL+75 mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组破骨细胞数量明显降低（P < 0.05）。与空白对照组比较,RANKL组骨片中骨吸收陷窝面积明显升高（P < 0.05）;与RANKL组比较,RANKL+75 mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组骨片中骨吸收陷窝面积明显降低（P < 0.05）。与空白对照组比较,75和150 mg·L^-1 GBE组RAW264.7细胞凋亡率升高（P < 0.05）,RAW264.7细胞中Bcl-2基因表达水平明显降低（P < 0.05）,Bax基因表达水平明显升高（P < 0.05）。与RANKL组比较,RANKL+75 mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组RAW264.7细胞G₀-G₁期阻滞明显缩短（P < 0.05）;RAW264.7细胞中P27基因表达水平明显降低（P < 0.05）,Cyclin-D1基因表达水平明显升高（P < 0.05）。与空白对照组比较,RANKL组RAW264.7细胞中破骨细胞相关基因NFATc1、DC-STAMP、Cathepsin K和MMP-9表达水平明显升高（P < 0.05）;与RANKL组比较,RANKL+75 mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组RAW264.7细胞中破骨细胞相关基因NFATc1、DC-STAMP、Cathepsin K和MMP-9表达水平明显降低（P < 0.05）。结论：GBE可抑制破骨细胞分化和骨吸收能力,其机制可能与促进RAW264.7细胞凋亡、缩短RANKL诱导的RAW264.7细胞的G₀-G₁期有关。     

血小板衍生生长因子-B的表达与根尖周骨吸收的关系

目的：观察血小板衍生生长因子B链（PDGF-B）在大鼠根尖周炎中的表达情况,探讨PDGF-B与根尖周骨吸收的关系。方法：将24只SD大鼠开髓,分别于术后7,14,21,28 d取下颌骨,制备组织切片,用免疫组织化学的方法测定PDGF-B在大鼠根尖周炎中的表达,酶组织化学方法检测抗酒石酸酸性磷酸酶,观察破骨细胞。结果：在根尖周炎的急性期,即术后7 d和14 d,PDGF-B阳性细胞和破骨细胞都增多,二者存在明显正相关;在根尖周炎的慢性期,即术后21 d和28 d,PDGF-B表达继续增高,而破骨细胞数却迅速下降,二者为负相关。结论：PDGF-B在根尖周炎早期可能主要发挥促骨吸收作用,而在慢性期,PDGF-B可能主要与根尖周炎的修复相关。     

血小板衍生生长因子-B的表达与根尖周骨吸收的关系

目的:观察血小板衍生生长因子B链(PDGF-B)在大鼠根尖周炎中的表达情况,探讨PDGF-B与根尖周骨吸收的关系。方法:将24只SD大鼠开髓,分别于术后7,14,21,28 d取下颌骨,制备组织切片,用免疫组织化学的方法测定PDGF-B在大鼠根尖周炎中的表达,酶组织化学方法检测抗酒石酸酸性磷酸酶,观察破骨细胞。结果:在根尖周炎的急性期,即术后7 d和14 d,PDGF-B阳性细胞和破骨细胞都增多,二者存在明显正相关;在根尖周炎的慢性期,即术后21 d和28 d,PDGF-B表达继续增高,而破骨细胞数却迅速下降,二者为负相关。结论:PDGF-B在根尖周炎早期可能主要发挥促骨吸收作用,而在慢性期,PDGF-B可能主要与根尖周炎的修复相关。     

老鹳草素对破骨细胞体外骨吸收功能的影响

目的 观察老鹳草素(geraniin,Ge)对体外培养破骨细胞(OC)的形成及其骨吸收功能的影响.方法 由1日龄SD大鼠四肢长骨分离OC,和象牙骨片共同培养,或直接接种于培养板中,分别采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)和甲苯胺蓝染色技术观察不同浓度的Ge对体外培养OC形成及OC性骨吸收功能的影响.结果 Ge呈浓度依赖性减少体外培养的TRAP染色阳性多核细胞即成熟破骨细胞(mature osteoclast,mOC)数目;与空白对照组比较,Ge各浓度组均使OC性骨吸收陷窝个数和面积减少、灰度变浅.结论 Ge减少体外培养OC的形成并抑制体外培养OC的骨吸收功能.     

成骨细胞在破骨细胞性骨吸收中的调节作用

骨组织中含有3种固有的细胞成分,分别是成骨细胞(Osteoblast,OB)、破骨细胞(Osteoclast,OC)和骨细胞(Osteocyte)。它们与骨组织的生成和成熟过程密切相关,其中OB和OC是骨重建中维持骨量的两种主要细胞。本文就成骨细胞在破骨细胞性骨吸收中的调节作用,综述如下。     

载阿仑膦酸钠骨水泥抑制骨水泥微粒诱导的骨吸收

目的　观察载阿仑膦酸钠骨水泥对骨水泥微粒诱导的骨吸收的抑制作用。方法　将制作的载阿仑膦酸钠骨水泥微粒和骨水泥微粒分别加入鼠骨髓单核细胞培养体系中 ,经 10 -8mol/L 1α ,2 5 (OH) 2 D3 和 10 -7mol/L地塞米松诱导培养 ,于培养 9、 12d时观察多核、抗酒石酸酸性磷酸酶 (tartrate resistantacidphosphatase,TRAP)染色阳性的破骨样细胞和形成的骨吸收陷窝数量。结果　鼠骨髓单核细胞培养体系中 ,加入载阿仑膦酸钠骨水泥微粒后 ,形成的破骨样细胞以及骨吸收陷窝数量明显少于不加或仅加入骨水泥微粒组 (P <0 0 1)。结论　载阿仑膦酸钠骨水泥能够释放出阿仑膦酸钠 ,抑制骨水泥微粒诱导的破骨样细胞的形成和骨吸收作用。     

上颌全口义齿下骨组织吸收的有限元分析

采用有限元法模拟上颌全口义齿下的骨吸收情况，观察义齿在某一负荷条件下，其下骨组织的吸收发展过程，并通过改变负荷的位置，大小，方向及方式，对骨组织吸收的影响进行比较分析。结果表明骨吸收部位和程度与义齿咬合面的负荷位置关系密切，负荷位置不同，吸收发生部位，发展过程及吸收多少均不相同，其中负荷均匀作用于咬合面吸收程度最小，吸收程度还与负荷斩和方向等有关，侧向力作用下骨吸收严重。     

橄榄苦苷对破骨细胞的分化以及骨吸收功能的影响

目的 探讨橄榄苦苷(oleuropein)对破骨细胞分化成熟以及骨吸收功能的影响及其可能机制.方法 把不同浓度的橄榄苦苷(12.5、25、50 μmol/L)分别加入由核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)诱导的体外破骨细胞培养体系中,用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resist ant acid phosphatase,TRAP)染色方法观察呈TRAP阳性的多核细胞;RAW264.7细胞也用RANKL诱导,用流式细胞仪分析橄榄苦苷对破骨细胞凋亡的影响;在扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)下观察骨吸收陷窝,并用图像分析软件统计其面积.采用Western blot法检测橄榄苦苷对破骨细胞特异性蛋白组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)、激活T细胞核因子1(nuclear factor of activated T-cells 1,NFATC1)及相关信号通路蛋白表达的影响.结果 TRAP染色结果显示,橄榄苦苷能显著抑制RANKL诱导的破骨细胞的形成,且呈浓度依赖性(P＜0.05);橄榄苦苷能下调破骨细胞特异性蛋白CTSK的蛋白表达水平(P＜0.05);橄榄苦苷对破骨细胞的凋亡无明显影响(P＞0.05);橄榄苦苷能显著减少骨吸收陷窝的面积(P＜0.05);橄榄苦苷能够下调NFATC1及磷酸化p38(p-p38)的表达(P＜0.05).结论 橄榄苦苷可以抑制由RANKL诱导的破骨细胞分化以及破骨细胞的骨吸收功能,可能和橄榄苦苷能够下调p38/MAPK信号通路有关.     

破骨细胞对不同底物的吸收活性比较

目的:比较破骨细胞对牛皮质骨片及牙本质片的吸收活性。方法:采用25 ng/ml 巨噬细胞集落刺激因子+30 ng/ml核因子κB受体活化因子配体诱导 RAW264.7细胞分化获取破骨细胞,并分别与牛皮质骨片及牙本质片共培养。通过检测抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性细胞数、骨吸收陷窝面积,比较破骨细胞在不同底物上的骨吸收活性。结果:与不同底物共培养形成的TRAP阳性细胞数差异无统计学意义(P>0.05),而牛皮质骨片吸收陷窝的面积显著大于牙本质片(P结论:破骨细胞对牛皮质骨片的吸收活性强于牙本质片。     

组织块法与传统破骨细胞培养方法对骨吸收功能的比较研究

目的：比较组织块法与传统破骨细胞培养方法对破骨细胞骨吸收功能的影响。方法：用组织块法与传统破骨细胞培养方法进行破骨细胞培养,抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP）染色鉴定破骨细胞,超声去除骨片上细胞后,骨片经1%甲苯胺蓝染色,光镜下观察骨片上吸收陷窝。根据骨片上陷窝数目、面积以及深度定量比较两组破骨细胞骨吸收功能。结果：吸收陷窝经甲苯胺蓝染色后光镜下可清晰识别,组织块法在骨片上的吸收陷窝数目比传统法明显少,而且骨片上陷窝面积及深度也比传统法小而浅（P〈0.05）。结论：组织块法培养的破骨细胞无论从数量上还是从功能上均没有传统法培养的好。数量大的成骨细胞对共培养破骨细胞骨吸收功能起到负面作用。     

骨吸收抑制剂帕米膦酸二钠的合成

以β－氨基丙酸溶液直接与三氯化磷反应合成帕米膦酸二钠,免用无水亚磷酸,避免了反应对试剂及溶剂的无水要求,反应条件更容易控制。     

L-苏糖酸盐对破骨细胞骨吸收功能影响的体外研究

目的　观察 L -苏糖酸盐对体外兔破骨细胞 (OC)骨吸收功能的影响。方法　制备骨磨片 ,培养 OC,并分别加入高中低浓度 (10 - 5、10 - 7、10 - 9m ol/L )的 L -苏糖酸钙、L -苏糖酸钠、阿仑膦酸钠、17β-雌二醇、葡萄糖酸钙 ,实验设以上各浓度组及对照组 (共 16组 ,每组 n=8) ,甲苯胺蓝染色 -光镜观察分析骨片上骨吸收陷窝面积 ,EL ISA测定上清液 型胶原 C-末端肽 (CTx或 Crosslaps)浓度。结果　 1L -苏糖酸钙各组陷窝面积及 CTx浓度均较葡萄糖酸钙组及对照组减少 (P<0 .0 0 1) ;L -苏糖酸钠各组作用较对照组显著 (P<0 .0 5 ) ;而葡萄糖酸钙组与对照组无显著差异 (P>0 .0 5 )。 2同浓度 L -苏糖酸钙较 L -苏糖酸钠组陷窝面积、CTx浓度减少显著 (P<0 .0 5 ) ;按 CTx水平 ,低、中浓度 L -苏糖酸钙组达到或超过中、高浓度 L -苏糖酸钠组作用 (P<0 .0 5 )。 3高浓度 L -苏糖酸钙组作用介于中、低浓度 17β-雌二醇组之间 (P<0 .0 5 ) ,但无阿仑膦酸钠各组显著 (P<0 .0 0 1) ;4上清液 CTx浓度与陷窝面积高度相关 (r=0 .876 )。 5 CTx在多个组间比较时显示比陷窝面积更敏感、更稳定 (平均变异系数分别为 10 .0 1%vs14 .6 6 %)。结论　 L -苏糖酸盐尤其是 L -苏糖酸钙在体外有一定的抑制破骨细胞骨吸收的作用 ,其     

阿仑膦酸钠对人工关节磨损微粒刺激破骨细胞分化形成的影响

目的:观察二磷酸盐类药物阿仑膦酸钠对人工关节磨损微粒刺激破骨细胞分化形成的影响,探讨二磷酸盐防治人工关节无菌性松动的可能机制.方法:体外用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导小鼠骨髓造血干细胞分化为破骨前体细胞(osteoclast precursors,OCPs),然后用核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)和M-CSF两种细胞因子协同诱导OCPs向成熟破骨细胞分化,同时在培养体系中加入高分子聚乙烯微粒(103/ml)和不同浓度的阿仑膦酸钠(0.4、2.0、10.0、50.0 μg/ml),对获得的各组破骨细胞行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色计数阳性破骨细胞(核≥3)的数目;提取总RNA用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TRAP mRNA的表达.结果:高分子聚乙烯微粒组TRAP阳性破骨细胞数目和TRAP mRNA的表达显著高于空白对照组(P＜0.05);阿仑膦酸钠组TRAP阳性破骨细胞数目和TRAP mRNA的表达均显著低于高分子聚乙烯组(P＜0.05),且随着阿仑膦酸钠浓度增高TRAP阳性破骨细胞数目和TRAP mRNA的表达呈递减趋势,组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:阿仑膦酸钠可以抑制人工关节磨损微粒刺激破骨细胞分化形成.