强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群的变化及意义

目的探讨强直性脊柱炎（AS）患者外周血中T细胞亚群的变化及其意义。方法采用流式细胞仪（FCM）检测外周血淋巴细胞表面CD3、CD4、CD8及其胞质内细胞因子IFN-γ和IL-4的表达。结果与正常对照组相比,As患者外周血Th细胞（CD;CD4＋）百分率无显著差异,Tc细胞（CD;CD;）明显升高（P〈0．05）;Th1细胞（CD3^＋CD4^＋IFN-γ^＋）百分率明显升高,Th2细胞（CD3^＋CD4^＋IL4^＋）无显著性差异;Te1细胞（CD3^＋CD8^＋IFN-γ^＋）百分率明显降低,T02细胞（CD3^＋CD8^＋IL4^＋）无显著性差异。结论AS患者外周血T细胞Th1／Th2、Tcl／Tc2亚群比例失衡,呈Th1、Tc2优势型。     

骨髓间充质干细胞对外周血T淋巴细胞亚群影响的体外实验研究

目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSC）在体外对T淋巴细胞亚群及其分泌的细胞内因子的影响。方法：通过Ficoll—Hypaque梯度密度离心法分离出正常人骨髓单个核细胞，体外培养扩增MSC，获取第3代细胞。将其按照不同的比例加入双向混合淋巴细胞培养（MLC）体系中，在第1，3，5天，采用MTT比色法检测各组MLC中的T淋巴细胞的增殖情况，再用流式细胞术分析各组T细胞亚群及其内因子白介素（IL）-4和干扰素（IFN）-γ的分泌变化情况。结果：加入了MSC的MLC体系中，MSC对T淋巴细胞的增殖抑制具有剂量依赖性，且随着时间延长，抑制程度增强；其中，CD4^＋T细胞亚群受抑不如CD8^＋T细胞亚群显著；而根据T细胞内因子的变化，Th1和Tc1的比率较对照组有显著降低，而Th2和Tc2的比率却有轻度上升。结论：MSC在体外能够明显抑制T淋巴细胞的增殖，尤其是CD8^＋T细胞（CTL）。除此之外，它还能降低MLC体系中的Th1Tc1，升高Th2和Te2。所以在临床上可能有减轻移植后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的发生，而保留移植物抗白血病（GVL）的潜力。     

Graves眼病患者T细胞亚群的研究

采用流式细胞仪检测早期Graves眼病（GO）组、非突眼Graves病（GD）组和正常对照组的T细胞亚群、IFN-γ^＋T细胞和IL-4^＋T细胞。结果显示早期GO存在T细胞亚群失衡，以CD4^＋Th1细胞介导的细胞免疫为主。     

脐带华通胶间充质干细胞对急性再生障碍性贫血T淋巴细胞亚群的影响

目的体外观察脐带华通胶间充质干细胞（UCWJMSCs）对急性再生障碍性贫血（AAA）患者T淋巴细胞（TLC）亚群的调节作用。方法收集21例AAA患者和10例健康志愿者外周血,制备单个核细胞（MNCs）悬液,UC-WJMSCs和MNCs以一定比例混合共育一定时间后,采用流式细胞仪检测TLC亚群并进行统计分析。结果 AAA患者TLC亚群呈Th1、Tc1极化状态。混合培养后,健康人的TLC亚群未见明显变化（P〉0.05）;AAA患者的TLC亚群除Th2与Tc2无明显变化外,CD3＋、CD8＋、CD2＋8、Th1和Tc1亚群比例明显降低,而CD4＋、CD4＋/CD8＋、CD5＋6、CD2＋5和CD1＋03亚群比例明显升高（P〈0.05）。调节作用24 h就已产生7,2 h时达高峰;调节作用随UCWJMSCs浓度的增高而增强。结论 UCWJMSCs对AAA患者的TLC亚群有明显调节作用,不同个体来源的UCWJMSCs调节作用无区别。     

成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者外周血T细胞亚群变化及意义

目的探讨T细胞亚群变化在成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA）发病中的作用。方法应用流式细胞技术测定24例LADA患者（LADA组）、18例速发性1型糖尿病（T1DM）者（T1DM组）及20例健康人（对照组）T细胞表面分子CD4^＋、CD8^＋,以百分比表示各表面分子阳性T细胞占外周血淋巴细胞的比例;测定胰岛功能相关指标[空腹C肽（FC-P）和糖负荷后2h C肽（2h—CP）、胰岛素释放指数（HOMA-IS）]的相关性。结果LADA与T1DM组C1MT细胞、CD4^＋／CD8^＋值明显高于对照组（P〈0．01）,LADA与T1DM元显著差异。CD4^＋T细胞2h-CP呈明显负相关。结论T淋巴细胞亚群失衡参与介导了胰岛β细胞的损伤和LADA的发生,     

Graves眼病患者T细胞亚群与自身免疫抗体相关关系的研究

目的通过研究早期Graves眼病（GO）患者（病程〈2年）的T细胞亚群与TRAb、TMA、TGA等自身免疫抗体之间的关系，探讨免疫机制在早期GO发病机制中的作用。方法（1）采用流式细胞仪检测早期Graves眼病和正常对照组各20例的T细胞亚群及CD4^＋／CD8^＋T细胞的百分含量。（2）检测早期GO患者的TRAb、TMA、TGA并与T细胞亚群、CD4^＋／CD8^＋T细胞之间的关系进行直线相关分析。结果（1）在早期GO患者中，CD4^＋T细胞和CD4^＋／CD8^＋T细胞比值增高（P均〈0．05）。（2）早期GO组中T细胞亚群、CD^＋／CD8^＋T细胞的百分含量与TRAb、TMA、TGA之间无显著相关关系（P均〉0．05）。结论在早期GO患者中，①存在着T细胞亚群的失衡，这在Graves眼病的发病机制中起了重要作用；②其T细胞亚群改变与甲状腺自身免疫抗体及其他自身免疫抗体之间无显著相关关系。     

rhG-CSF未经动员与动员后供者外周血淋巴细胞与干细胞采集物的细胞构成及功能比较

目的比较重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）动员后供者外周血干细胞（PBSC）采集物与未经动员供者外周血淋巴细胞采集物的细胞构成及功能。方法取异基因造血干细胞移植供者的rhG-CSF动员后PBSC采集物（A组）和未经动员的淋巴细胞采集物（B组）,以流式细胞术测定采集物组分、T细胞亚群、树突细胞（DC）及其亚群、CD14^＋细胞和CD19^＋细胞B7分子的表达、CD4^＋T细胞IL-4和IFNγ等细胞因子的分泌情况,四甲基偶氮唑盐法测定T淋巴细胞增殖能力。结果两组采集物的CD3^＋、CD4^＋、CD34^＋、CD14^＋细胞比例有明显差异,A组DC细胞及其亚群的比例明显高于B组,尤以DC2升高为著（P=0．000）,CD14^＋细胞上B7分子的表达A组明显低于B组,CD19^＋细胞上B7分子的表达无明显差异,分析两组CD4细胞内因子的分泌情况,A组的Ⅱ类细胞因子IL-4及IL-4／IFNγ均明显高于B组（P值分别为0．044,0．012）,经rhG—CSF动员后采集物的T淋巴细胞增殖能力明显下降。结论动员后的PBSC采集物较未经动员的淋巴细胞采集物富集了更多的CD34^＋、CD14^＋细胞,同时rhG—CSF动员后DC2比例的明显升高使得CD4细胞向Th2分化,PBSC含有更多的Ⅱ类细胞因子和其T细胞增殖能力的下降、共刺激分子的下调均提示PBSC较供者淋巴细胞输注更少地引起急性移植物抗宿主病的发生。     

T细胞异常活化及亚群失衡与支气管哮喘患者临床表现的相关分析

支气管哮喘(简称哮喘)与免疫功能异常密切相关。T细胞是主要的免疫细胞，其亚群可分为1型(Th1、Tc1)及2型(Th2、Tc2)两大类，两类细胞因子正常应处于一种平衡状态。我们的研究通过流式细胞仪检测哮喘患在急性发作期和稳定期时体内白细胞分化抗原(CD)226在CD3^ 、CD4^ 、CD8^ T细胞上的表达及Th1／Th2、Tc1／Tc2平衡的改变，探讨     

成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者T细胞亚群变化与胰岛β细胞功能相关性研究

目的观察成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA）患者T细胞亚群的变化,及其与胰岛β细胞功能的相关性。方法LADA组24例,经典1型糖尿病（T1DM）18例,健康对照（NC）组20例,应用流式细胞技术测定三组入选者T细胞表面分子CD4、CD8,以百分比表示各表面分子阳性T细胞占外周血淋巴细胞的比例。测空腹C肽（FC-P）和糖负荷后2h C肽（2hC-P）。测空腹血糖、空腹胰岛素、应用HOMA公式计算胰岛素敏感指数（HOMA-IS）。结果LADA与T1DM组CD4^＋T细胞、CD4^＋／CD8^＋比值明显高于NC组（P〈0．01）,LADA与TIDM对比无统计学差异。CD4^＋T细胞与反映胰岛功能2hC-P呈明显的负相关。结论T淋巴细胞亚群失衡参与并介导了胰岛β细胞的损伤和LADA的发生。     

CD4^＋CD25^＋T调节细胞参与感染弓形虫小鼠免疫应答调节的研究

目的观察弓形虫Prugniaud成囊株感染ICR小鼠后脾脏单个核细胞中不同T细胞亚群的比例在感染后不同时期的动态变化。方法用10个Prugniaud株弓形虫包囊以腹腔接种方式感染ICR小鼠，在小鼠感染前及感染后的1W，2W，3W，5W随机取6只小鼠，采用流式细胞仪对小鼠脾脏单个核细胞中Th1型和Th2型细胞及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例变化进行动态检测。结果小鼠感染弓形虫后，Th1型细胞比例在感染后第1W一过性降低，后急剧升高，进入慢性感染期后又有所下降。Th2型细胞整个试验过程中呈现和Th1型细胞大致相反的变化趋势。CD4^＋CD25^＋T细胞在急性感染期，呈现和Th1型细胞相反的比例变化。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可能参与了弓形虫急性感染期的免疫抑制。     

Th17细胞／调节性T细胞平衡与自身免疫性肝病

最新研究发现了与Th1和Th2细胞亚群不同的新的活化CD4^＋T细胞亚群——调节性T细胞（Treg细胞）和Th17细胞,两者在发育和功能上互补,Th17细胞／Treg细胞平衡在自身免疫性肝病的发生、发展中发挥重要作用。本文就Th17细胞／Treg细胞平衡在自身免疫性肝病中的作用作一综述。     

Th17细胞在自身免疫中的作用

CD4^＋细胞是免疫系统中最重要的免疫调节细胞,20世纪80年代以来,根据分泌细胞因子和功能将其分为Th1、Th2、调节性T（Treg）细胞三个亚群：Th1细胞主要介导细胞免疫应答;Th2与体液免疫应答有关;Treg细胞提高机体的免疫耐受。Th17细胞为新发现的一种CD4^＋细胞亚群,高水平分泌细胞因子白细胞介素-17,介导炎症性反应,可能与多种自身免疫性疾病的发病机制有关,对其深入的研究可能提供新的治疗靶点。     

慢性HBV感染患者外周血T淋巴细胞免疫应答及其临床意义

目的探讨Th1／Th2、Tc1／Tc2亚群比例在慢性HBV感染的临床分型中的变化,以及在慢性HBV感染免疫病理损伤中的作用。方法用PMA、Ionomycin作为刺激剂,采用流式细胞仪（FACS）胞内细胞因子法对慢性HBV感染者外周血CD3＋CD8＋T细胞和CD3＋CD8-T细胞内IFN～y和IL-4的表达进行分析,比较慢性肝炎、肝炎肝硬化（活动性）、慢性重症肝炎各组Th1／Th2、Tc1／Tc2亚群比例变化。结果慢性肝炎、肝炎肝硬化（活动性）、慢性重症肝炎患者的Th1、Tc1细胞均高于正常对照组。慢性重症肝炎组Th1、Tc1显著高于慢性肝炎、正常对照组（P〈0．01）,慢性重症肝炎组Tc1显著高于活动性肝炎后肝硬化组（P〈0．05）。肝炎肝硬化（活动性）组Tc1显著高于正常对照组（P〈0．05）。Th1、Tc1细胞随着慢性乙型肝炎肝脏炎症活动的加剧而增高。而Th2、Tc2细胞则在各组中均无显著性差异（P〉0．05）。慢性重症肝炎患者恢复期Th1和Tc1细胞显著低于治疗前水平（P〈0．01）。结论在慢性HBV感染中,机体免疫平衡偏向Th1类反应,Th1、Tc1细胞与肝脏炎症活动严重程度呈正相关。提示Th1和Tc1细胞在慢性乙型肝炎肝脏病理发生中可能起了重要作用。     

供者CD4＋CD25＋CD127-调节性T细胞与儿童异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病相关研究

目的：探讨供体移植物CD4＋CD25＋CDl27-调节性T细胞（_rreg细胞）表达水平对儿童异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的影响。方法：采用流式细胞术检测供体淋巴细胞中CD4＋CD25＋CDl27-Treg细胞比例,回顾性分析83例allo—HSCT患儿移植物Treg细胞与移植后aGVHD．其中50例恶性疾病．33例良性疾病。结果：83例患儿allo．HSCT均获造血重建,其中51例发生O～Ⅰ度aGVHD,32例发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD。发生0～Ⅰ度aGVHD与Ⅱ-Ⅳ度aGVHD患儿移植物Treg细胞比例有统计学差异（3．0％-＋0．8％比2．5％±1．O％,P=0．030）。中位随访时间286（69～496）d,50例恶性疾病患儿中8例复发,复发与非复发患儿移植物Treg细胞无显著差异（3．2％±0．8％比2．8％±0．8％,P=0．549）。结论：高水平供体移植物Treg细胞有助于降低儿童all0．HSCT后aGVHD发生率,且未增加移植后复发风险;移植物Treg细胞表达量对预测aGVHD有一定意义。     

HIV阳性并发恶性肿瘤患者T细胞亚群检测及意义

目的：观察了解HIV阳性同时亦被临床诊断患有恶性肿瘤的患者CD3^＋,CD3^＋CD4^＋,CD3^＋CD8^＋比值的变化并讨论其临床意义。方法：采用多参数流式术（FCM）检测70例HIV阳性肿瘤患者与30例健康人群进行比较。结果：HIV阳性的肿瘤患者外周血CD3^＋,CD3^＋CD4^＋细胞比例明显减少（P〈0．01）,CD3^＋CD8^＋细胞比例明显增多（P〈0．01）,CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋比值明显下降（P〈0．01）。结论：HIV阳性的肿瘤患者细胞免疫功能紊乱,观察检测其T细胞亚群水平对疾病的诊断及预后判断具有积极意义。     

NKT细胞在异基因造血干细胞移植中作用的临床初步研究

目的：初步观察NKT细胞在临床异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）中的作用。方法：检测15例allo-HSCT患者移植物中NKT细胞含量,研究输注细胞数与移植物抗宿主病（GVHD）发生的关系。结果：15例患者均获造血重建,其中13例患者发生急性GVHD（aGVHD）,包括Ⅰ度8例,Ⅱ度1例,Ⅲ-Ⅳ度4例;8例患者发生慢性GVHD（cGVHD）,其中广泛型2例,局限型6例;7例患者同时出现aGVHD及cGVHD。aGVHD发生组和无aGVHD发生组NKT细胞输注数分别为2.16（0.43-8.82）×10^6/kg、7.71（0.3-15.12）×10^6/kg（P〉0.05）;0-Ⅰ度和Ⅱ-Ⅳ度aGVHD组NKT细胞输注数分别为2.33（0.3-15.12）×10^6/kg、1.99（0.43-8.82）×10^6/kg（P〉0.05）;cGVHD发生组和无cGVHD发生组输注NKT细胞数分别为2.07（0.3-3.05）×10^6/kg、2.99（0.43-15.12）×10^6/kg（P〉0.05）。结论：输注NKT细胞数不影响aGVHD发生、aGVHD严重程度及cGVHD发生。     

香烟烟雾提取物对CD4^＋T细胞向Th17细胞和调节性T细胞分化的影响

目的观察香烟烟雾提取物（CSE）对CD4^＋T细胞向Th17细胞和调节性T细胞分化的影响,为探索香烟烟雾暴露导致气道慢性炎症的机制提供实验依据。方法采用免疫磁珠法分离纯化健康志愿者外周血CD4^＋T细胞,以1×10^6／ml细胞密度接种于96孔培养板,分为以下8个组①空白对照组;②T细胞刺激剂组：加入T细胞刺激剂抗人CD3／28抗体微磁珠;③T细胞刺激剂CSE干预组：CD3／28＋2%CSE;④细胞因子组：CD3／28＋细胞因子;⑤细胞因子CSE干预组：CD3／28＋细胞因子＋2％CSE;⑥芳香烃受体（AHR）激动剂6-甲酰基吲哚[3,2-b]咔唑（FICZ）组CD3／28＋细胞因子＋FICZ;⑦AHR拮抗剂白藜芦醇组：CD3／28＋细胞因子＋2％CSE＋白藜芦醇;⑧溶剂对照组：CD3／28＋细胞因子＋DMSO。细胞因子为含TGF-β/IL-1β／IL-6／IL～23的混合细胞因子,以诱导Th17细胞和调节性T细胞分化。培养5d后,收集细胞,采用流式细胞术检测细胞表面分子CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋细胞（Treg细胞）,以及胞内细胞因子IL-17＋的CD4^＋T细胞（Th17细胞）,计算各种刺激培养条件下,诱导生成的Th17及Treg细胞占CD4^＋T细胞的百分比。结果①CSE对Th17细胞分化的影响：空白对照组Th17细胞比例为（0．69±0．12）％,加入T细胞刺激剂后为（1．32±0．12）％,在此基础上加入CSE的干预组IL-17＋细胞比例升高为（2．17±0．24）％,（t=3．21,P〈0．01）;细胞因子组IL-17＋细胞比例为（1．35±0．08）％,而在此基础上加入CSE的干预组Th17细胞升高为（2．58±0．39）%（t=3．13,P〈0．01）。②CSE对Treg细胞分化的影响：在空白对照组中,Treg细胞占CD4^＋T细胞中的比例为（0．21±0．19）％,在加入T细胞刺激剂后,Treg细胞比例升高（3．59±0．37）％,加入细胞因子后,Treg细胞比例明显增加（5．85±0．76）％;在继续加入CSE干预后,Treg细胞比例明显减少（3．07±0．33）％（t=3．74,P〈0．01）;同样,T细胞刺激剂CSE干预组也出现Treg细胞比例减少（2．19±0．19）％,（t=2．71,P〈0．05）。③AHR活化对Treg细胞和Th17细胞分化的影响：AHR激动剂FICZ组的Treg细胞比例明显低于细胞因子组[（2．60±0．40）％,（5．85±0．76）％]（t=4．18,P〈0．01）,但Th17细胞比例升高[（2．86±0．43）％,（1．35±0．08）％]（t=3．65,P〈0．01）。AHR阻断剂白藜芦醇组中的Treg细胞比例和Th17细胞比例均低于细胞因子组,分别为[（0．33±0．14）％,（5．85±0．76）％],（t=7．71,P〈0．01）和[（0．42±0．07）％,（1．35±0．08）％],（t=8．87,P〈0．001）,并且和空白对照组接近,在细胞培养第5天通过7-AAD-AnnexinV对该组细胞检测并未发现细胞异常凋亡或死亡情况,结合该组细胞培养过程中的镜下形态推测该实验组CD4^＋T细胞的分化增殖受到白藜芦醇抑制。结论CSE可促进CD4^＋T细胞向Th17细胞分化,并抑制Treg细胞分化,这一过程可能通过AHR诱导。     

日本血吸虫感染ICR小鼠后Tc1和Tc2细胞的动态观察及其功能分析

目的 目的 观察日本血吸虫感染ICR小鼠后不同时期T淋巴细胞中杀伤性T细胞 （Tc） 亚型Tc1和Tc2比例的动态变化, 并分析两者分别与Th1和Th2细胞比例变化的相关性。 方法 方法 分别取日本血吸虫感染0、 3、 5、 8、 13周的小鼠脾脏淋巴细胞, 采用流式细胞术检测各个时期Tc1、 Tc2和Th1、 Th2细胞亚群分别占T淋巴细胞的比例。 结果 结果 与0周对照比较, 感染3、 5、 8、 13周小鼠T淋巴细胞中Tc1细胞比例显著增高 （P均< 0.01）, 感染5、 8、 13周小鼠T淋巴细胞中Tc2细胞比例显著增高 （P均< 0.01）。比较Tc1和Tc2细胞比例在相同时间点的增速发现, 感染3周时Tc1细胞比例增高最显著, 而感染5周时Tc2细胞比例的增高最显著。感染各个时间点CD3+ T细胞中的Th1细胞比例与Tc1细胞比例平行增长, 且两者呈正相关（r = 0.978, P = 0.004）; CD3+ T细胞中的Th2细胞比例与Tc2细胞比例平行增长, 且两者呈正相关 （r = 0.974, P = 0.005）。体外可溶性成虫抗原 （SWA） 刺激脾细胞可优势增加T淋巴细胞中的Tc1细胞比例 （P < 0.01）, 而可溶性虫卵抗原 （SEA） 刺激脾细胞可优势增加T淋巴细胞中的Tc2细胞比例 （P < 0.01）。 结论 结论 日本血吸虫感染不同阶段, 小鼠T淋巴细胞中的Tc1 和Tc2细胞比例均显著升高, 并分别与Th1和Th2细胞比例呈正相关。在感染3周时主要以Tc1细胞比例升高为主, 而感染 5周时主要以Tc2细胞比例升高为主。SWA可优势诱导Tc1细胞, 而SEA可优势诱导Tc2细胞。     

调节性T细胞在系统性红斑狼疮中的研究进展

系统性红斑狼疮（SEE）是一种以产生大量自身抗体为特征的自身免疫病，其自身抗体的产生呈T细胞依赖性。SLE自身耐受的破坏主要表现为T细胞免疫失调、B细胞高反应性和细胞因子产生异常。近来发现调节性T细胞（regulatory Tcells，Treg）在维持自身免疫耐受中起重要作用，Treg缺陷可引起SLE等多种自身免疫病。Treg是一类具有主动免疫调节功能的T细胞群，根据产生和表型不同分为不同亚群。目前研究最多的是天然CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（naturally occurring CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells，nTreg），该类细胞数量或功能缺陷将影响自身免疫环境的稳定。此外，诱导型调节性T细胞（induced regulatory T cells，iTreg）也具有免疫抑制功能，包括Ⅰ型调节性T细胞（type 1 regulatory T cells，Tr1）和辅助性T细胞3（T helper cells 3，Th3）等。本文将对Treg的产生、分类、特性及其在SLE中的作用作一综述。     

流式细胞仪检测急性病毒性心肌炎T淋巴细胞亚群及NK细胞的意义

目的观察急性病毒性心肌炎T淋巴细胞亚群及自然杀伤（NK）细胞的意义，探讨其发病机制。方法采用流式细胞术对急性病毒性心肌炎病人（观察组）进行CD3、CD4、CD8和NK细胞淋巴细胞亚群检测，并设正常人群作对照组。结果观察组CD8和NK明显高于对照组（P〈0．01），CD4和Th／Tc比值明显低于对照组（P〈0．01），观察组CD3的变化不明显（P〉0．05）。结论急性病毒性心肌炎病人淋巴细胞亚群中CD4、CD8和NK细胞亚群异常增殖；而且Th／Tc比例失衡，揭示细胞免疫功能紊乱与急性病毒性心肌炎有关。