缩泉丸对自然衰老大鼠逼尿肌β_3-ARmRNA定位表达的影响

目的观察自然衰老大鼠逼尿肌β3-AR mRNA定位表达的改变,探讨缩泉丸"缩尿"的机制。方法取老年大鼠(20月龄)50只,青年大鼠(3月龄)10只。设置组别为:空白对照组、模型对照组、金匮肾气丸组、缩泉丸高、中、低剂量组,每组10只。选用代谢笼法测量大鼠24h尿量,采用原位杂交法检测自然衰老大鼠逼尿肌β3-ARmRNA的表达。结果缩泉丸中、高剂量组动物24h尿量明显减少(P﹤0.05或P﹤0.01),缩泉丸低、中、高剂量均可提高自然衰老大鼠膀胱逼尿肌中β3-ARmRNA的表达(P﹤0.05或P﹤0.01)。结论缩泉丸可以上调自然衰老大鼠逼尿肌β3-ARmRNA的表达,可能是其发挥"缩尿"作用的机制。     

金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞M_3R、β_3-AR mRNA及其蛋白表达的影响

目的:观察金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞M_3R、β_3-AR mRNA和蛋白表达的影响。方法:以多尿自然衰老大鼠为"肾虚多尿"模型,给予金匮肾气丸4周,采用酶消化和组织块相结合的方法原代培养逼尿肌细胞,用实时荧光定量PCR法和Westernblotting法观察金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞M_3R、β_3-AR mRNA及其蛋白表达的影响。结果:与正常对照组比较,自然衰老大鼠逼尿肌细胞M_3R mRNA和蛋白的表达明显增加;与模型对照组比较,金匮肾气丸可以抑制自然衰老大鼠逼尿肌细胞M_3R mRNA和蛋白的表达;与正常对照组比较,自然衰老大鼠逼尿肌细胞β_3-AR mRNA和蛋白表达明显降低;与模型对照组比较,金匮肾气丸可以增加自然衰老大鼠逼尿肌细胞β3-ARmRNA和蛋白的表达。结论:金匮肾气丸可以减少自然衰老大鼠膀胱逼尿肌细胞M_3RmRNA及其蛋白的表达和增加自然衰老大鼠膀胱逼尿肌细胞β_3-ARmRNA及其蛋白的表达,使M_3R和β_3-AR之间的平衡状态维持正常的水平。     

缩泉丸含药血清对小鼠胚胎干细胞增殖、分化及Nanog基因表达的影响

目的研究缩泉丸含药血清对小鼠胚胎干细胞(ESCs)增殖、分化及Nanog基因表达的影响。方法选用129小鼠胚胎干细胞株,将培养的细胞分为空白组,金匮肾气丸组,缩泉丸低、中、高剂量组5组。空白组给予浓度为10%的空白大鼠血清;金匮肾气丸组给予浓度为10%的含药血清;缩泉丸低、中、高剂量组分别给予按0.585 g·kg~(-1)·d~(-1)、1.17 g·kg~(-1)·d~(-1)、2.34 g·kg~(-1)·d~(-1)剂量灌胃给药的大鼠的含药血清,浓度均为10%。采用流式细胞仪检测缩泉丸对ESCs增殖的影响,倒置相差显微镜观察缩泉丸含药血清对DMSO诱导的ESCs的分化情况,荧光定量PCR检测ESCs关键因子Nanog mRNA的表达,流式法检测Nanog蛋白的表达。结果与空白组比较,缩泉丸含药血清中、高剂量能够促进ESCs的增殖(P0.01),缩泉丸低、高剂量可以显著提高ESCs中Nanog mRNA的表达(P0.05,P0.01),缩泉丸中、高剂量可以显著提高ESCs中Nanog蛋白的表达(P0.05,P0.01)。与空白组比较,缩泉丸高剂量能够促进DMSO诱导的ESCs进行分化。结论缩泉丸可以促进ESCs的增殖,促进DMSO诱导的ESCs进行分化,可能与其上调关键基因Nanog的表达相关。     

缩泉丸对自然衰老大鼠皮质醇、T_3、T_4及肾上腺系数的影响

目的观察缩泉丸对自然衰老大鼠一般状态、肾上腺系数及血清中皮质醇(Cort)、T3、T4含量的影响。方法采用ELISA方法测量空白对照组、模型对照组、金匮肾气丸组、缩泉丸高、中、低剂量组血中Cort、T3、T4的含量,并称量肾上腺重量计算其系数。每天观察并记录动物的状态,包括活动、外观形态、毛色光泽、精神状态等变化。结果缩泉丸可以明显改善自然衰老大鼠的一般情况;缩泉丸中、高剂量组动物血清中Cort含量明显升高(P0.05);缩泉丸高剂量组血清中T3含量明显升高(P0.05);缩泉丸高剂量组动物血清中T4含量明显升高(P0.05);缩泉丸低、中、高剂量可以显著增加自然衰老大鼠肾上腺系数(P0.05)。结论缩泉丸可以提高自然衰老大鼠血中Cort、T3、T4含量,也可以增加自然衰老大鼠肾上腺系数,可能是其发挥温肾缩尿的作用机理。     

金匮肾气丸对实验性2型糖尿病肾病大鼠血清TGF-β1、CTGF的影响

目的:探讨金匮肾气丸对实验性2型糖尿病肾病大鼠的作用。方法:采用高糖、高脂饲料喂养动物,待模型成功后,再用金匮肾气丸治疗。48只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、罗格列酮治疗组、金匮肾气丸大、中、小剂量治疗组。第13周,收集24h尿液,测定24h尿白蛋白含量,计算尿白蛋白排泄率(UAER)。处死大鼠,取血检测各组大鼠血糖、结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)的含量。结果:金匮肾气丸大、中、小剂量组及罗格列酮组与模型组比较,血糖、尿白蛋白排泄率均降低(P0.01或P0.05),罗格列酮治疗组、金匮肾气丸大、中剂量治疗组CTGF、TGF-β1含量降低,与模型对照组相比具有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:金匮肾气丸可降低2型糖尿病肾病大鼠血糖、尿白蛋白排泄率,降低CTGF、TGF-β1含量。     

缩泉丸对肾阳虚多尿大鼠尿BUN、Cr、Na^＋、K^＋和Cl^-离子浓度的影响

目的：观察缩泉丸对肾阳虚多尿模型大鼠尿BUN、Cr、Na^＋、K^＋和Cl^-离子浓度的影响。方法：用腺嘌呤250mg/kg灌服大鼠4周,造成肾阳虚多尿模型,分别给予缩泉丸、肾气丸和去氨加压素治疗4周,检测缩泉丸对尿BUN、Cr、Na^＋、K^＋和Cl^-离子浓度的影响。结果：模型组大鼠尿量比对照组大鼠明显升高,P〈0.01,dDAVP组、缩泉丸高剂量组大鼠尿量与模型组大鼠相比明显减少（P〈0.05）。肾阳虚多尿模型大鼠尿BUN、Cr含量比正常对照组明显降低（P〈0.01）、尿K^＋排出量比正常对照组明显减少（P〈0.05）、尿Na^＋、Cl^-排出量比正常对照组明显升高,P〈0.05;dDAVP组尿BUN含量比模型组明显升高,P〈0.05;dDAVP组尿和缩泉丸高剂量组尿K^＋排出量比模型组明显升高（P〈0.05）;肾气丸组、缩泉丸低、高剂量组尿Na^＋、Cl^-排出量比模型组明显减少（P〈0.01~0.05）。结论：缩泉丸能减少肾阳虚多尿模型大鼠尿量,增加肾阳虚多尿模型大鼠尿钾排出量、降低尿钠和氯排出量。     

金匮肾气丸对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的:探讨金匮肾气丸对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、吡非尼酮组(100μg/g)、金匮肾气丸低剂量组(1.0g/kg)、金匮肾气丸高剂量组(2 g/kg),每组6只。建立UUO大鼠肾纤维化模型,造模结束即灌胃给药,各药物组灌胃相应药物,假手术组和模型对照组灌胃质量分数为5 g/L羧甲基纤维素钠,1 d 1次,连续14 d。末次给药后24 h,处死大鼠,取左侧肾组织。固定制片,采用苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)和马松三色染色法(masson-trichrome staining,Masson)观察肾组织病理学改变,采用免疫组织化学法检测Ⅲ型胶原、肌动蛋白α(alpha smooth muscle actin,α-SMA)和上皮钙黏素在肾组织的蛋白表达,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测Ⅲ型胶原、α-SMA和上皮钙黏素在肾组织的信使核糖核酸(mRNA)水平。结果:与模型对照组对比,金匮肾气丸组大鼠的肾间质损伤指数降低,间质胶原阳性面积减少,Ⅲ型胶原和α-SMA的蛋白表达减少,上皮钙黏素蛋白表达升高,Ⅲ型胶原和α-SMA蛋白的信使核糖核酸(mRNA)表达减少,上皮钙黏素蛋白mRNA表达升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:金匮肾气丸可以减轻UUO大鼠梗阻肾组织肾间质损伤,减少间质内胶原沉积,减轻肾脏纤维化程度,其作用机制可能与减少Ⅲ型胶原、α-SMA的蛋白和mRNA表达,增加上皮钙黏素的蛋白和mRNA表达有关。     

金匮肾气丸对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的影响

目的:研究金匮肾气丸对腺嘌呤致大鼠肾间质纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。方法:96只SD大鼠随机分成正常组、模型组、氯沙坦组(5 mg·kg-1)和金匮肾气丸高、中、低剂量组(2.4,1.2,0.6 g·kg-1),采用腺嘌呤灌胃(200 mg·kg~(-1)·d~(-1))诱导肾间质纤维化大鼠模型,2 h后灌胃给予相应药物,造模连续9周;给药连续16周。采用生化法测定血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理改变情况;马松(Masson)染色观察大鼠肾脏胶原沉积情况;以实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定大鼠肾脏组组转化生长因子-β1(TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),钙黏蛋白(E-cadherin),Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ),Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ),Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ),基质金属蛋白酶-1(MMP-1),基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9),基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1),基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)mRNA的表达;以免疫组化法测定大鼠肾脏TGF-β1,α-SMA和E-cadherin的表达。结果:与正常组比较,模型组中SCr和BUN显著升高(P0.01),给予金匮肾气丸干预后SCr和BUN水平降低(P0.05);HE染色和Masson染色结果显示,与正常组比较,模型组肾间质损伤严重且肾间质胶原物质大量沉积,给予金匮肾气丸干预后肾间质小管损伤减轻,肾间质胶原物质沉积减少;Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组TGF-β1,α-SMA,Col-Ⅰ,Col-Ⅲ,Col-Ⅳ,TIMP-1,TIMP-2mRNA表达上调(P0.05),模型组E-cadherin,MMP-1,MMP-2,MMP-9 mRNA表达下调(P0.05),给予金匮肾气丸干预后E-cadherin,MMP-1,MMP-2,MMP-9 mRNA的表达上调(P0.05),TGF-β1,α-SMA,Col-Ⅰ,Col-Ⅲ,Col-Ⅳ,TIMP-1,TIMP-2mRNA的表达明显下调(P0.05);免疫组化结果显示,与正常组比较,模型组E-cadherin蛋白表达下调(P0.01),TGF-β1和α-SMA蛋白表达上调,金匮肾气丸干预后E-cadherin蛋白表达上调(P0.05),TGF-β1和α-SMA蛋白表达下调(P0.05)。结论:金匮肾气丸可有效改善肾间质纤维化并对肾脏有一定的保护作用,其改善肾间质纤维化的机制可能与降低基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1,TIMP-2)活性,TGF-β1蛋白表达,α-SMA蛋白表达,升高基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-2,MMP-9)活性,E-cadherin蛋白表达,从而减少胶原物质的沉积有关。     

择时合用滋阴、益阳方对肾虚衰老模型HPAT轴的影响

目的:比较研究滋阴方六味地黄丸、益阳方金匮肾气丸单用及择时合用对肾虚衰老模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴的影响。方法:大鼠随机分为6组,除正常组外,其余组采用5%D-半乳糖100 mg.kg-1颈背部皮下注射联合糖皮质激素地塞米松0.5 mg.kg-1腹腔注射共造模6周,造模两周后,实验第15天开始各给药组分别给予动物ig 1.16 g.kg-1六味地黄丸、金匮肾气丸、六味地黄丸(早服)合金匮肾气丸(晚服)、金匮肾气丸(早服)合六味地黄丸(晚服),给药4周。比较各组血清皮质醇(COR)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量及外周全血CD4+,CD8+值。结果:与正常对照组相比,肾虚衰老模型组血清COR含量(6.35±1.65)μg.L-1显著降低(P<0.05),血浆ACTH(53.00±11.86)μg.L-1,CRH(7.04±1.37)μg.L-1含量显著升高(均P<0.05),CD8+水平(23.70±3.93)%显著降低(P<0.01),CD4+/CD8+(2.73±0.29)显著升高(P<0.01)。与肾虚衰老模型组相比,滋阴益阳组COR含量(10.76±2.09)μg.L-1显著上调(P<0.01),益阳组、益阳滋阴组ACTH(40.98±8.55),(39.55±14.67)μg.L-1含量显著下调(P<0.05),滋阴组、滋阴益阳组、益阳滋阴组CRH含量(5.39±1.00),(5.27±0.91),(5.61±1.08)μg.L-1均显著下调(P<0.05或P<0.01),各用药组CD8+水平,CD4+/CD8+无显著性差异,各组CD4+水平无显著性差异。结论:滋阴、益阳方单用及择时合用对肾虚衰老模型大鼠HPA轴的影响作用不同,其中以滋阴益阳方的作用较优,但未观察到对免疫功能紊乱的调节作用。     

金匮肾气丸对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1表达的影响

目的探讨金匮肾气丸防治肺纤维化作用机理。方法用平阳霉素复制肺纤维化模型大鼠后,用药组每天灌胃金匮肾气丸,28d后处死,观察、比较各组大鼠肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。结果模型组大鼠肺组织中TGF-β1表达均明显高于正常对照组及用药组(P<0.05)。结论金匮肾气丸能明显抑制肺组织中TGF-β1过度表达。     

肾气丸对庆大霉素致聋豚鼠线粒体凋亡通路Cyt-C的影响

目的观察金匮肾气丸对庆大霉素(GM)中毒性耳聋豚鼠线粒体凋亡通路中细胞色素C表达的影响。方法将40只健康级白色红目豚鼠随机分为正常对照组,模型(GM)组、金匮肾气丸干预高剂量、中剂量和低剂量组,GM组豚鼠每日肌肉注射庆大霉素120mg/kg连续10 d,金匮肾气丸干预高、中、低剂量组豚鼠分别每日肌注庆大霉素120mg/kg的同时以药量为20.3g/(kg·d)、13.5g/(kg·d)、6.08g/(kg·d)的金匮肾气丸制剂灌胃给药连续10 d。HE染色观察病理改变,免疫组化法检测各组耳蜗毛细胞平均光密度值并比较。结果豚鼠毛细胞Cyt-C光密度值比较,模型组较正常组有明显差异(P0.01),高剂量组和模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论金匮肾气丸可减轻GM的耳毒性反应,对GM所致的豚鼠耳中毒有一定的防治作用。     

益智仁盐炙对水负荷多尿模型大鼠缩尿作用的研究

目的:通过比较盐炙益智仁对水负荷多尿模型大鼠的缩尿作用,进一步验证益智仁盐炙人肾传统炮制理论的正确性.方法:SD大鼠按尿量、体重均匀分成正常组、模型组、缩泉丸组、益智仁石油醚部位生品(低、中、高剂量)组、盐炙品(低、中、高剂量)9组,缩泉丸组剂量为1.5 g·kg-1,益智仁石油醚部位生品和盐炙品低、中、高剂量分别为含生药4.5,9,18g·kg-1.各组按10 mL·kg-1体积灌胃给药1周后,用1％盐水造成大鼠水负荷多尿模型.采用代谢笼法测定大鼠尿量、首次排尿时间,并计算6h排泄率;放免法测定大鼠血清精氨酸加压素(AVP)含量.结果:与模型组相比,益智仁生、炙品(除生品低剂量组外)能显著降低0～1h段大鼠尿量(P＜0.01),延长大鼠首次排尿时间(生品高剂量组P＜0.05,盐炙品低、中、高剂量组P ＜0.01),显著降低大鼠6h排泄率(生品高剂量组P＜0.05,盐炙品高剂量组P＜0.01).与模型组相比,各组AVP含量均升高,其中生品高剂量、盐炙品中、高剂量组有极显著性差异(P＜0.01).结论:益智仁石油醚部位具有缩尿作用,盐炙能增强其作用.     

金匮肾气丸化裁方对良性前列腺增生大鼠前列腺组织)VEGF、IGF-1 表达的影响

目的 研究金匮肾气丸化裁方对大鼠前列腺增生模型前列腺组织VEGF和IGF-1表达的影响.方法 去势加丙酸睾酮注射法建立大鼠前列腺增生模型,免疫组化学法检测前列腺组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达,RT-PCR法检测类胰岛素生长因子-1（IGF-1）mRNA的水平.结果 金匮肾气丸化裁方中剂量组明显降低前列腺增生组织中VEGF和IGF-1 mRNA的水平.结论金匮肾气丸化裁抑制大鼠前列腺增生可能与调控生长因子表达水平有关.     

金匮肾气丸对肾阳虚证COPD大鼠瘦素水平影响的实验研究

目的根据肾阳虚COPD大鼠发病机制,研究瘦素与COPD肾阳虚证的发生相关性,论证金匮肾气丸治疗COPD肾阳虚证治疗作用。方法采用运用烟雾联合脂多糖及注射氢化可的松进行肾阳虚证COPD大鼠造模。将大鼠分为空白组,模型组,中药中剂量组、高剂量组。中药高、中剂量组灌服金匮肾气丸混悬液。光镜下检测大鼠肺叶肺组织病理变化;血清瘦素表达水平;RT-PCR法检测脂肪组织瘦素受体mRNA表达及Western Blot法检测肺组织瘦素受体蛋白表达。结果模型组大鼠肺组织可见大量淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等炎症细胞浸润,支气管柱状上皮细胞剥脱,纤毛倒伏、粘连,支气管壁,部分肺泡壁破坏、融合,肺大泡架构消失;与模型组比较,金贵肾气丸中、高剂量组大鼠肺组织病理损伤有所减轻。血清瘦素水平,模型组大鼠血清瘦素含量升高(P0.01),给予金贵肾气丸高、中剂量治疗后血清瘦素含量有明显降中(P0.01)。Western印迹检测肺组织瘦素受体蛋白表达,模型组大鼠平均灰度值显著降中(P0.01),金贵肾气丸干预后,高剂量组平均灰度值显著升高(P0.05)。大鼠肺瘦素受体mRNA含量检测,模型组大鼠肺瘦素受体mRNA表达明显增高(P0.01),干预组中瘦素受体mRNA表达强度明显降中(P0.05)。结论瘦素水平与COPD肾阳虚证的发生负相关;采用金匮肾气丸,温补肾阳,对实验模型大鼠进行干预血清瘦素、脂肪组织瘦素受体蛋白含量均有所下降,对瘦素蛋白进一步的研究将为COPD的发病机制阐明和防治提供新研究方向。     

苓桂术甘汤对急性心肌梗死后心室重构模型大鼠NF-κB的影响

目的:观察苓桂术甘汤对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后心室重构模型大鼠心肌组织核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)及NF-κB mRNA表达,血清NF-κB含量的影响,探讨苓桂术甘汤干预AMI后心室重构(ventricular remodeling,VR)的作用机制。方法:采用冠状动脉结扎法复制心室重构大鼠模型,造模2周后将模型大鼠随机分为模型组,卡托普利4.4 mg.kg-1组,苓桂术甘汤(按生药量计)低、中、高剂量(2.1,4.2,8.4 g.kg-1)组,另设假手术组,分别ig给药,连续给药4周,采用Western blot,RT-PCR及ELISA技术检测各组大鼠心肌组织NF-κB,NF-κB mRNA表达,血清NF-κB含量。结果:假手术组,模型组,苓桂术甘汤低、中、高剂量组,卡托普利组的心肌组织NF-κB相对表达量(NF-κB/β-actin)分别为:0.190±0.011,0.772±0.026,0.366±0.059,0.295±0.033,0.235±0.013,0.341±0.023;NF-κB mRNA相对表达量分别为:1.000,26.875,6.574,4.340,1.194,5.540;血清NF-κB含量分别为(125.85±14.76),(196.98±17.79),(163.89±20.08),(131.73±10.47),(141.93±10.32),(133.93±9.27)ng.L-1。模型组与假手术组比心肌组织NF-κB,NF-κB mRNA表达、血清NF-κB含量均显著升高(P<0.01);苓桂术甘汤各剂量组及卡托普利组能够显著抑制模型大鼠心肌组织NF-κB,NF-κB mRNA表达、降低模型大鼠血清NF-κB含量,与模型组比有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论:苓桂术甘汤干预AMI后VR的机制与其抑制NF-κB有关。     

加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA1区神经营养因子-3表达的影响

目的探讨加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA1区神经营养因子3(NT-3)表达的影响。方法腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,造模后以免疫组化法观察加味金匮肾气丸对大鼠脑海马CA1区NT-3表达的影响。结果加味金匮肾气丸治疗组比糖尿病组大鼠脑海马CA1区NT-3表达增加。结论加味金匮肾气丸可以有效防治糖尿病大鼠脑海马CA1区神经元退行性变化。     

金匮肾气丸对实验性2型糖尿病肾病大鼠肾脏组织NO、NOS的影响

目的:探讨金匮肾气丸对实验性2型糖尿病肾病大鼠的作用。方法:采用高糖、高脂饲料喂养动物,待模型成功后,再用金匮肾气丸治疗。48只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、罗格列酮治疗组、金匮肾气丸大、中、小剂量治疗组。第13周,收集24h尿液,测定尿白蛋白含量,计算尿白蛋白排泄率。处死大鼠,取血检测各组大鼠血糖,取肾组织匀浆检测肾脏组织中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的含量。结果:金匮肾气丸大、中、小剂量组及罗格列酮组与模型组比较,血糖、尿白蛋白排泄率均降低(P0.01或P0.05),罗格列酮治疗组、金匮肾气丸大、中、小剂量治疗组肾脏组织中一氧化氮、一氧化氮合酶的含量升高,与模型对照组相比具有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:金匮肾气丸可降低2型糖尿病肾病大鼠血糖、尿白蛋白排泄率,升高肾脏组织中NO、NOS的含量。     

肾气丸对衰老大鼠小肠干细胞及其微环境Wnt/β-catenin信号通路的调节作用

目的:探讨肾气丸对衰老大鼠小肠干细胞及其微环境Wnt/β-catenin信号通路的调节作用。方法:使用SD大鼠,根据不同发育阶段分为6月龄成年对照组、22月龄衰老模型组及肾气丸低、高剂量组。采用HE染色观察小肠基本形态及测量相应指标,采用免疫组织化学法检测各组大鼠小肠PCNA、Bmi 1、β-catenin、GSK-3β的表达情况。结果:与成年组比较,衰老模型组绒毛长度、绒毛宽度、隐窝深度、绒毛/隐窝值(V/C值)均显著降低,PCNA、Bmi 1、β-catenin表达显著降低,而GSK-3β表达显著升高。与衰老模型组比较,肾气丸各组绒毛长度、绒毛宽度、隐窝深度、绒毛/隐窝值(V/C值)均显著升高,PCNA、Bmi 1、β-catenin表达显著均升高,GSK-3β表达显著降低。结论:肾气丸可改善衰老大鼠小肠干细胞增殖功能并上调Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达。     

金匮肾气丸对肾阳虚大鼠垂体细胞增殖影响的实验研究

目的 :探讨金匮肾气丸不同浓度、不同时间对肾阳虚大鼠垂体细胞增殖的影响。方法 :造模大鼠随机分成金匮肾气丸高、中、低剂量组 ,在喂药后不同时间 (10d ,2 0d ,30d)用3H -酪氨酸掺入检测垂体细胞转化。结果 :各中药治疗组垂体细胞3H -酪氨酸掺入量均不同程度增高 ,金匮肾气丸高剂量组优于低剂量组 (P <0 0 1) ,金匮肾气丸低剂量组增高不明显 (P >0 0 5 ) ,金匮肾气丸中剂量组增高明显高于高、低剂量组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :金匮肾气丸提高肾阳虚大鼠垂体细胞增殖作用 ,是其治疗肾阳虚的机理之一。     

补肾丹对衰老模型大鼠脑海马组织超微结构及Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的:研究补肾丹对衰老模型大鼠脑海马组织超微结构及Bcl-2、Bax基因表达的影响。方法:将清洁级健康Wistar雄性大鼠,随机分为7组:正常对照组、金匮肾气丸组、补肾丹高、中、低剂量组、维生素E组及模型组。除正常对照组外,各组腹腔注射D-gal[250mg/(kg.d)]60天,采用D-半乳糖致亚急性衰老法[1],造成大鼠拟衰老动物模型。同时,正常对照组和模型对照组给等体积的生理盐水,金匮肾气丸组同时给予金匮肾气丸[0.72g/(kg.d)]灌胃,补肾丹高、中、低剂量组同时分别给予相当于生药2.7g/(kg.d)、1.35g/(kg.d)、0.675g/(kg.d)灌胃。维生素E组每日灌服维生素E0.027g/kg,每日1次,共60天。观察衰老模型大鼠脑海马组织超微结构及Bcl-2、Bax基因的表达。结论:补肾丹具有改善衰老模型大鼠海马组织病理改变的作用,还可提高Bcl-2基因的表达,抑制Bax基因的过度表达,这有可能是其延缓衰老的作用机制之一。