补肾解毒活血法对骨髓抑制小鼠造血功能的影响

目的探讨补肾解毒活血法对骨髓抑制小鼠造血功能的影响。方法取昆明小鼠60只,随机分成空白对照组、模型组和中药治疗组,每组各20只,模型组和中药治疗组腹腔注射环磷酰胺100mg/(kg·d),连续3天;造模完成后次日起,中药治疗组给予补肾解毒活血中药浓煎液灌胃,0.36g/(kg·d),空白对照组与模型组灌服等量生理盐水,连续10天。各组随机抽取10只,于造模前1天及造模后第1、3、5、7、10、14天检测小鼠外周血象;其余10只于造模后第11天,颈椎脱臼处死,检测骨髓造血祖细胞集落形成和骨髓有核细胞(Bone Marrow Nucleated Cell,BMNC)的情况。结果外周血白细胞,模型组和中药治疗组均在造模后第1天降到最低点,与空白对照组相比差异均有显著性意义(P<0.01);模型组和中药治疗组均在第3天开始回升,中药治疗组在第5天恢复正常且保持稳定,而模型组在第7天出现异常性增高后又逐渐下降至正常。外周血血小板,模型组在模后第5天降到最低然后回升至第10天恢复正常,而中药治疗组自第3天即开始回升,第7天时即与空白对照组持平,其最低值明显高于模型组(P<0.01)。造模后第11天检测粒细胞-巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)、定向体外红系集落形成单位(CFU-E)、红细胞爆裂型集落生成单位(BFU-E)和小鼠骨髓有核细胞数(BMNC),模型组和中药治疗组均低于空白对照组(P<0.05),而中药治疗组高于模型组(P<0.01)。结论补肾解毒活血法治疗骨髓抑制可通过增加骨髓造血祖细胞数量,从而促进环磷酰胺致骨髓抑制小鼠外周血白细胞、血小板的稳定恢复。     

补肾解毒活血方与益气补血方预防化疗后骨髓抑制的比较研究

目的:比较补肾解毒活血方与益气补血方预防环磷酰胺(CTX)引起骨髓抑制小鼠造血功能的效果及作用机制,为临床合理配伍提供依据.方法:清洁级昆明种小鼠80只,随机分为正常对照组、模型组、补肾解毒活血组和益气补血组,中药组分别给予25.55,17.47 g?kg-1 ?d-1中药灌胃,正常对照组和模型组给予等体积的生理盐水,每日灌胃1次,连续给药10d,第8天时采用腹腔注入环磷酰胺(100 mg?kg-1?d-1),连续造模3d.各组随机抽取10只,在第7天(造模前1d)及造模完成后的第1,3,5,7,10天做外周血象检测,剩余10只于造模后第1天进行骨髓有核细胞计数(BMNC)、粒系、红系造血祖细胞(CFU-GM,CFU-E和BFU-E)集落形成单位、细胞凋亡检测及血清粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及促红细胞生成素(EPO)检测.结果:各组小鼠白细胞和血小板数分别于造模后第1天和第5天降至最低,并分别于第5天和第10天基本恢复至正常,但益气补血组下降程度较模型组轻(P＜0.01),而补肾解毒活血组恢复明显早于模型组和益气补血组(P＜0.05);造模后模型组BMNC,CFU-GM及BFU-E显著下降(P＜0.01),且两中药组均明显高于模型组(P＜0.01),其中BFU-E以补肾解毒活血组为优(P＜0.05);造模后小鼠骨髓细胞凋亡率明显增加(P＜0.01),约是正常组的14.7倍,两中药组骨髓细胞凋亡率均明显低于模型组(P＜0.01);造模后GM-CSF较正常组显著降低(P＜0.01),但两中药组GM-CSF明显高于模型组(P＜0.05).各组血清EPO水平较正常组没有明显差异.结论:预防给予益气补血药或补肾活血解毒药均可以加快化疗后骨髓抑制白细胞的恢复,尤以益气补血方为优;益气补血方减轻血小板下降程度更好,补肾活血解毒方促使血小板恢复更佳.预防给予两组中药均可减轻小鼠环磷酰胺造成的BMNC和CFU-GM下降程度,从而有利于白细胞的恢复;两组中药不是通过提高血清促红细胞生成素的水平,而是通过减轻环磷酰胺造成的BFU-E的减少,达到保护红系造血的效果,以补肾解毒活血方为优.预防应用补肾解毒活血药与益气补血药可以明显降低环磷酰胺引起的骨髓细胞凋亡,似以益气补血组为佳.     

补肾活血法与益气补血法对骨髓抑制小鼠造血细胞作用的比较

目的比较补肾活血法与益气活血法对化疗后骨髓抑制模型小鼠造血细胞作用特点与差异。方法将SPF级ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、补肾活血组和益气补血组,灌胃1次/d,连续给药至实验结束,第8天采用腹腔注入环磷酰胺（100mg/（kg·d））,连续3d造模。造模后第1天和第7天各处死半数动物,检测骨髓有核细胞计数、骨髓CD₃₄⁺细胞及细胞周期。结果两中药组均可提高骨髓有核细胞数,增加骨髓细胞增殖指数;其中益气补血法对造血细胞动员能力更强,补肾活血法对维持骨髓造血细胞增殖效果更佳。结论补肾活血法与益气活血法均可以促进骨髓抑制小鼠造血功能恢复,其作用机制存在差异。     

补肾活血法与益气补血法对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠骨髓基质细胞生长及血清IL-6的影响

目的比较补肾活血法与益气补血法对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制小鼠血清白介素-6(IL-6)表达水平及骨髓基质细胞(BMSC)生长的影响。方法选用SPF级ICR小鼠80只,随机分为对照组、模型组、补肾活血组、益气补血组、补肾活血加益气补血(中药联合)组,分别给予相应药物灌胃21 d,给药第8天采用腹腔注射CTX 100 mg/(kg·d),连续3d,制成骨髓抑制小鼠模型。于造模后第3天、第7天检测血清中的IL-6,同时提取小鼠骨髓基质细胞分别培养14 d后进行观察。结果造模后第3天,模型组及各中药组小鼠血清中的IL-6含量较对照组均明显增多(P均0.01),但3个中药组明显低于模型组,尤以中药联合组明显(P0.05或0.01),补肾活血组次之(P0.01)。造模后第7天,模型组与中药组IL-6下降,但模型组与补肾活血组仍显著高于对照组(P均0.01),益气补血组和中药联合组IL-6水平与对照组比较无显著性差异。造模后第3天骨髓细胞经培养14 d后,模型组贴壁细胞数量减少,梭形成纤维细胞比例降低,细胞融合差;而各中药组骨髓基质细胞较模型组生长良好,胞体较大,突起丰富,且能形成少量集落,以中药联合组最佳。造模后第7天骨髓细胞经培养14 d后,各中药组贴壁细胞数量及成纤维细胞集落与对照组比较无明显差异。结论补肾活血法与益气补血法对骨髓抑制后小鼠骨髓基质细胞的坏死具有较好的防治作用,对血清IL-6分泌水平具有较好的调节作用,使其水平维持在适当的范围内,既有利于造血微环境的稳定,又可促进造血的恢复,且益气补血法优于补肾活血法,两法联合效果更优。     

补肾活血法与益气补血法对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠骨髓基质细胞生长及血清 IL -6 的影响

目的比较补肾活血法与益气补血法对环磷酰胺（CTX）所致骨髓抑制小鼠血清白介素-6（IL-6）表达水平及骨髓基质细胞（BMSC）生长的影响。方法选用SPF级ICR小鼠80只,随机分为对照组、模型组、补肾活血组、益气补血组、补肾活血加益气补血（中药联合）组,分别给予相应药物灌胃21d,给药第8天采用腹腔注射CTX100rag／（kg·d）,连续3d,制成骨髓抑制小鼠模型。于造模后第3天、第7天检测血清中的IL-6,同时提取小鼠骨髓基质细胞分别培养14d后进行观察。结果造模后第3天,模型组及各中药组小鼠血清中的IL-6含量较对照组均明显增多（P均〈0．01）,但3个中药组明显低于模型组,尤以中药联合组明显（P〈0．05或0．01）,补肾活血组次之（P〈0．01）。造模后第7天,模型组与中药组IL-6下降,但模型组与补肾活血组仍显著高于对照组（P均〈0．01）,益气补血组和中药联合组IL-6水平与对照组比较无显著性差异,,造模后第3天骨髓细胞经培养14d后,模型组贴壁细胞数量减少,梭形成纤维细胞比例降低,细胞融合差;而各中药组骨髓基质细胞较模型组生长良好,胞体较大,突起丰富,且能形成少量集落,以中药联合组最佳。造模后第7天骨髓细胞经培养14d后,各中药组贴壁细胞数量及成纤维细胞集落与对照组比较无明显差异。结论补肾活血法与益气补血法对骨髓抑制后小鼠骨髓基质细胞的坏死具有较好的防治作用,对血清IL-6分泌水平具有较好的调节作用,使其水平维持在适当的范围内,既有利于造血微环境的稳定,又可促进造血的恢复,且益气补血法优于补肾活血法,两法联合效果更优。     

补肾、健脾、活血分别对骨髓抑制贫血小鼠造血的影响

目的:观察补肾、健脾、活血法分别对红系血细胞及其造血细胞因子表达的影响,为化疗后骨髓抑制贫血的中医药治疗提供依据。方法:采用全自动血液分析仪检测实验第14、28天骨髓抑制造模小鼠外周血常规检查(RBC,HGB等);使用实时荧光定量RT-PCR检测实验第14天与第28天骨髓抑制造模小鼠脾脏EPO、EPOR mRNA表达水平的变化。结果:六味地黄汤、补中益气汤、复方丹参饮均能显著提高骨髓抑制贫血小鼠RBC、HGB;六味地黄汤组和补中益气汤组EPO、EPOR mRNA表达水平均显著升高,而复方丹参饮组EPO、EPOR mRNA表达水平与模型对照组比较差异无统计学意义。结论:补肾、健脾、活血法对骨髓抑制贫血均有稳定且可靠的提升外周血血象的作用;补肾、健脾法可通过提高EPO、EPOR mRNA的表达水平,促进骨髓造血干细胞的增殖,并促进向红系血细胞分化以升高红系血细胞;而活血法促进造血的机制尚待进一步研究。     

补肾活血法改善免疫介导型再障小鼠骨髓造血微环境的实验研究

1　材料与方法1 1　实验动物　近交系ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 (Ｈ - 2 ａ,ＭＬＳｂ) ,雌性 ,8～ 10ｗ龄 ,体重 18～ 2 0ｇ。ＤＢＡ/2小鼠 (Ｈ - 2 ａ,ＭＬＳａ) ,8ｗ龄 ,雌雄兼用。以上动物均购自中国医学科学院实验动物研究所。1 2　胸腺淋巴结细胞悬液制备　取ＤＢＡ/2小鼠断颈处死 ,常规消毒后 ,无菌取出胸腺及颈部、颌下、腋窝、腹股沟、肠系膜等处淋巴结 ,加少量生理盐水 ,轻轻磨碎后用尼龙滤血网过滤 ,使成单细胞悬液 ,台盼蓝鉴定细胞活性 ,活性细胞应达 95%以上 ,细胞计数后配成所需浓度备用。1 3　再障模型的建立　参照姚军方法[1 ] ,ＢＡ…     

精元康胶囊对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响

目的:研究精元康胶囊对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响的作用机制。方法:雄性昆明种小鼠70只,随机分为正常组、模型组、利可君片组、贞芪扶正胶囊组、精元康胶囊高、中、低剂量组等7组。用环磷酰胺(CTX)建立骨髓抑制的小鼠模型。前3 d每日上午ip CTX 100 mg.kg-1(正常组注射等量生理盐水),下午ig不同药物。3 d后,仅在下午ig不同药物。应用体内扩散盒植入的方法进行培养3系造血祖细胞,在奥林巴斯光镜下计数3系造血祖细胞集落数。结果:小鼠在注射CTX造模后,3系集落数与正常组相比均有明显降低(P<0.05);精元康胶囊各剂量组均能提升骨髓抑制小鼠3系祖细胞(粒单系造血祖细胞CFU-GM、红系造血祖细胞CFU-E/BFU-E、巨核系造血祖细胞CFU-Meg)集落产率(P<0.05),而且呈剂量依赖性,其中高剂量组对3系集落的提升作用最明显(P<0.05)。对CFU-E产率的影响,利可君片组、精元康胶囊中剂量组、贞芪扶正胶囊组均与精元康胶囊低剂量组有明显差异(P<0.05),但3组之间没有明显差异。对BFU-E的影响,精元康胶囊高剂量组优于其他药物组,其他各组间无明显差异;从CFU-GM的产率比较可知,利可君片组低于精元康胶囊高剂量组,但优于其他各组。精元康胶囊中剂量组和贞芪扶正胶囊组效果优于精元康胶囊低剂量组(P<0.05),但两者之间差异不明显。各药物组对CFU-Meg产率的影响,以精元康高剂量组集落产率最高,利可君片组次之,与其他各药物组有显著差异(P<0.05)。结论:精元康胶囊可增加3系造血祖细胞集落数,促进造血干细胞的增殖和分化。     

补肾活血法对免疫介导型再障小鼠的影响

建立免疫介导型再障小鼠模型 ,胃饲补肾活血中药 ,观察红系和粒系造血祖细胞的变化。结果 :再障模型组小鼠红系造血祖细胞CFU E、BFU E和粒 单系祖细胞CFU GM集落数均较正常对照组显著减少 (P <0 0 1) ,补肾活血中药组CFU E、BFU E和CFU GM集落数均较再障模型组显著升高 (P <0 0 1)。说明补肾活血中药能使再障小鼠受损的骨髓红系和粒单系造血干细胞继续增殖与分化 ,促进造血功能的恢复。     

黄芪当归配伍对骨髓造血功能抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响

目的研究黄芪和当归不同剂量比例配伍对骨髓造血功能抑制模型小鼠造血祖细胞增殖能力和细胞衰老的影响,探讨黄芪和当归配伍促造血作用的机制。方法 ICR雄性小鼠,随机分为对照组、模型组、阳性药对照组、黄芪组、当归组、黄芪-当归不同剂量配伍组,分别ig给予不同配伍比例的黄芪-当归药液,每天1次,连续8 d。阳性对照组于给药的第6、7、8天sc重组人粒细胞集落刺激因子(rh G-CSF)。除对照组外,其余各组于给药的第4、5、6天ip环磷酰胺(CTX)造成骨髓造血功能抑制模型。于实验第9天处死动物取骨髓细胞进行红系、粒系、巨核系3系造血祖细胞培养,并以β-半乳糖苷酶染色法检测骨髓有核细胞衰老率。结果与模型组比较,单用当归组、黄芪-当归(5∶1)组、黄芪-当归(1∶1)组、黄芪-当归(1∶5)组均能显著升高粒细胞-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)、红细胞集落形成单位(CFU-E)、红系爆式集落形成单位(BFU-E)集落产率(P0.01);黄芪-当归(10∶1)组可升高CFU-E、BFU-E、CFU-MK的集落产率(P0.05、0.01),而对CFU-GM集落产率无显著影响。黄芪-当归(1∶1)组促进造血祖细胞集落形成的作用显著强于单用黄芪、单用当归和其他比例配伍组(P0.05)。与模型组比较,单用黄芪组、单用当归组、黄芪-当归(10∶1)组、黄芪-当归(5∶1)组、黄芪-当归(1∶1)组、黄芪-当归(1∶5)组骨髓有核细胞衰老阳性率显著降低(P0.01),黄芪-当归(1∶1)组骨髓有核细胞衰老阳性率显著低于单用黄芪、单用当归和其他比例配伍(P0.05、0.01)。结论黄芪、当归和黄芪-当归10∶1、5∶1、1∶1、1∶5配伍均可不同程度地促进骨髓造血功能抑制小鼠模型骨髓造血祖细胞增殖和分化,抑制骨髓造血细胞功能衰老,以黄芪-当归1∶1配伍作用为优。提示促进骨髓造血祖细胞增殖和分化是黄芪和当归配伍促造血作用机制之一。     

益气补血、活血解毒法治疗大动脉炎血管内皮损伤的免疫研究

目的观察益气补血、活血解毒法对大动脉炎血管内皮损伤的影响。方法将40例活动期大动脉炎患者随机分为中西医结合治疗组（复脉饮＋常规西药）和对照组（常规西药）,治疗24周后观察临床疗效,并检测治疗前和治疗后第4、24周血管内皮生长因子（VEGF）、内皮素-1（ET-1）、血管紧张素II（AngII）、循环内皮细胞（CECs）水平和数量变化。结果中西医结合治疗组疗效优于对照组,治疗组治疗4周、24周后VEGF、ET-1、AngII下降优于对照组（P〈0．05）,治疗组治疗4周后CECs下降优于对照组（P〈0．05）。结论中西医结合治疗可提高大动脉炎的疗效,改善血管内皮损伤。     

解毒益气活血方抑制血管生成的实验研究

目的:探讨解毒益气活血方对体外血管形成的抑制作用。方法:采用MTT法观察解毒益气活血方对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响。结果:解毒益气活血方在10%～20%浓度范围内,具有抑制血管内皮增殖作用(内皮存活率在63.8%～58.5%),且均与对照组有显著差异。结论:解毒益气活血方(10%～20%)在体外具有抑制血管增殖作用。     

补肾活血解毒方治疗颈动脉粥样硬化症临床观察

目的：对颈动脉粥样硬化症患者采用补肾活血解毒方进行治疗,探讨和分析其治疗的效果。方法：将此次收治的90例颈动脉粥样硬化患者进行分组,分为试验组和对照组,各为45例;试验组：给患者使用补肾活血解毒方进行治疗;对照组：给患者口服辛伐他汀丁、硫酸氢氯吡格雷进行治疗。比较两组患者的治疗效果。结果：试验组：患者颈动脉IMT和粥样硬化面积以及血清低密度脂蛋白的变化情况与对照组相比,差异显著,具有统计学意义（P〈0.05）。结论：对颈动脉粥样硬化症患者采用补肾活血解毒方进行治疗,能有效地改善患者的症状,提高治疗效果。     

益气活血解毒方对肾癌小鼠免疫功能调节作用机制的研究

目的：通过研究“益气活血解毒方”对动物细胞免疫CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞数量、CD4^＋／CD8^＋的比值及血清中IFN-γ的作用变化,探索其抗癌免疫作用机制。方法：以莪术、龙葵、白芍等药为基础制定益气活血解毒方,将30只BALB／c小鼠制备荷肾癌鼠模型,随机分为生理盐水空白对照组、氟尿嘧啶实验对照组、益气活血解毒方治疗组,对三组荷瘤小鼠进行血清IFN-γ含量检测、荷瘤小鼠脾T细胞亚群检测（CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞数量、CD4^＋／CD8^＋的比值）,做统计学分析。结果：与氟尿嘧啶和生理盐水对比,益气活血解毒方能够促进荷瘤小鼠外周血中IFN-γ的分泌,提高荷瘤小鼠脾脏中CD4^＋T细胞亚群和CD8^＋T细胞亚群的百分比和CD4^＋／CD8^＋比值,差别有显著性意义。结论：“益气活血解毒方”通过促进荷瘤小鼠外周血中IFN-γ的分泌及提高荷瘤小鼠脾脏中CD4^＋T细胞亚群和CD8^＋T细胞亚群数量,调节荷瘤小鼠免疫功能,抑制肿瘤生长。     

解毒益气活血方改善严重脓毒症患者免疫功能的机制研究

目的:探讨解毒益气活血方对严重脓毒症患者免疫功能的影响及临床疗效。方法:选择ICU严重脓毒症患者63例,随机分为对照组(31例,采用西医治疗)和治疗组(32例,采用西医治疗加解毒益气活血方)。分析比较两组患者治疗前及治疗后5、10天相关免疫学指标、APACHEⅡ评分、机械通气时间、住ICU时间及28天病死率的情况。结果:与对照组相比,治疗组治疗后TNF-α、IL-6、IL-10明显下降,IgG水平、淋巴细胞计数、CD4+T淋巴细胞水平及CD1+4单核细胞HLA-DR表达明显上升,住ICU时间明显缩短,28天病死率明显下降(P0.05或P0.01)。结论:解毒益气活血方结合西医治疗能调节患者的免疫功能,改善严重脓毒症患者病情和预后。     

益气养阴补肾活血方剂治疗早期糖尿病肾病的临床分析

目的:探讨益气养阴补肾活血方剂治疗早期糖尿病肾病(DN)的临床效果。方法:将80例早期DN患者按照抽签方法随机地均分为对照组与观察组,各为40例。两组均给予积极的健康宣教、饮食控制、肌注胰岛素等常规西医治疗,观察组在此基础上给予益气养阴补肾活血方剂治疗。比较两组临床疗效及不良反应发生情况。结果:观察组疗效显著优于对照组(P<0.05);对照组不良反应发生率为30.00%,显著高于观察组(12.50%)(P<0.05)。结论:益气养阴补肾活血方剂治疗早期DN患者,效果显著,值得在临床上加以推广并应用。     

补肾益气活血方对胎儿生长受限孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响

目的观察补肾益气活血方对胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响,探讨该方治疗FGR的机制。方法采用被动吸烟法建立大鼠FGR模型,将32只孕鼠随机分为正常组、模型组、中药组(采用补肾益气活血方治疗)、西药组(采用精氨酸治疗)。运用HE染色观察各组胎盘的组织学变化,TUNNEL法检测胎盘滋养细胞的凋亡及RT-PCR、免疫组化检测胎盘滋养细胞Bcl-2、Bax的表达。结果模型组胎盘绒毛出现血液淤积及缺血,中药可明显改善FGR胎盘绒毛的微循环,而西药组则部分改善。正常组、模型组、中药组、西药组的绒毛两层合体细胞凋亡指数中位数依次为45%、75%、57%、70%,正常组和中药组的凋亡指数均低于模型组(P0.01),西药组与模型组比较差异无统计学意义。各组胎盘Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达比较,差异均无统计学意义。结论补肾益气活血方可改善FGR胎盘微循环,防止FGR胎盘滋养细胞的过度凋亡,但其并非通过经典的Bax/Bcl-2凋亡途径起作用,其作用途径仍待探讨。     

益气活血清热解毒方治疗动脉粥样硬化临床研究

目的:观察益气活血清热解毒方治疗动脉粥样硬化患者临床疗效。方法:选择动脉粥样硬化患者122例,根据随机数字表法分组,61例为基础治疗组,给予常规西医治疗;61例患者为中医方剂治疗组,在基础治疗同时给予益气活血清热解毒方治疗。检测两组患者治疗前后一氧化氮(NO)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管性血友病因子(vWF)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、白细胞介素-37(IL-37)、二肽基肽酶4(DPP4)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平,检测患者血浆黏度、纤维蛋白原、细胞沉降率,检测颈动脉收缩期峰值流速(PSV)、血管搏动指数(PI)、血管阻力指数(RI)、舒张末期流速(EDV),观察患者中医证候评分,比较两组临床疗效。结果:中医方剂治疗组患者ox-LDL、DPP4、Lp-PLA2水平较基础治疗组明显低(P<0.05),中医方剂治疗组IL-37水平较基础治疗组明显高(P<0.05)。中医方剂治疗组患者sICAM-1、VEGF、vWF含量较基础治疗组低,差异具有统计学意义(P<0.05)。中医方剂治疗组患者NO含...