知母宁抗乙肝病毒作用的实验研究

目的 观察知母宁抗乙肝病毒的作用.方法 观察不同浓度知母宁对体外培养的2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用及对乙肝模型鸭DHBV-DNA的影响.结果 知母宁浓度为4mg/ml时对2.2.15细胞分泌HBeAg有明显的抑制作用;以200mg/kg治疗乙肝模型鸭10d后DHBV-DNA水平明显降低.结论 知母宁有抗乙肝病毒的作用,其机制可能与抑制HBV-DNA的复制有关.     

三叶青提取物抗乙肝病毒活性的研究

目的 研究三叶青4个提取部位对乙肝病毒的抑制作用.方法 运用mT法检测样品药物导致50%细胞死亡的数值浓度为CC50;用ELISA方法检测样品药物达到抑制HbsAg、HbeAg分泌,以及运用荧光定量PCR法检测样品药物抑制病毒DNA复制量的50%时的浓度数值为IC50.结果 三叶青4个提取部位对乙肝病毒分泌的HbsAg、HbeAg均有抑制作用.结论 三叶青乙酸乙酯部位对乙肝病毒具有较强活性,能明显降低HBV的DNA复制水平,可进一步从中提取分离具有更强生物活性的物质,为新药开发提供物质基础.     

知母宁的体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型作用

目的 检测知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)作用。方法 以Vero细胞为宿主细胞，阿昔洛韦为阳性对照药物，采用中性红染色法测定不同药物加入方式下知母宁的体外抗HSV-Ⅱ有效率，并检测其抑制病毒作用的时效关系及对病毒感染性的影响。结果 知母宁表现出对HSV-Ⅱ 333的综合抑制作用和抑制病毒吸附后的后续复制增殖作用，其抗病毒有效率(ER％)最高达80％，这两种作用的半数有效浓度(EC50)均约为0．8mg／ml。知母宁浓度≥2．08mg／m1时能显著抑制HSV-Ⅱ，ER％最高达95％。知母宁还有较弱的预防病毒吸附作用。知母宁抗病毒作用的时效关系研究表明，随药物作用时间延长，低浓度药物抗病毒有效率呈减小趋势，在高浓度时(≥2．08mg／ml)其病毒抑制强度基本维持稳定。随药物作用时间延长，知母宁可明显削弱病毒的感染性，知母宁组病毒的-lg TCID50值较病毒对照组的下降值呈增大趋势，其下降百分比维持稳定，约为40％。结论 知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型效果好，且其抗病毒作用具有多个作用点。     

利用2.2.15细胞株筛选抗乙肝病毒中草药的体外实验研究进展

抗病毒治疗是慢性乙型肝炎治疗的关键所在，但HBV宿主范围狭窄，缺少体外病毒繁殖系统。HBV转染细胞系2．2．15细胞株的建立为抗HBV药物的筛选提供了一个细胞模型，本文就2．2．15细胞株近十年来抗HBV中草药筛选情况作一综述。     

乙肝病毒体内外感染模型研究进展

乙肝病毒是威胁人类健康的重要病原体之一。目前,利用针对乙肝病毒和宿主分别建立的细胞模型和动物模型,广泛应用于乙肝病毒的基础研究、新药研发和新疗法的探索。但是,这些模型仍然存在某些方面的缺陷,如感染率低、感染期短,与人存在较大的种属差异等,最重要的是,这些模型无法完全模拟乙肝病毒自然感染人的过程及产生病理变化。本文对近十五年来主要乙肝病毒体内外感染模型及其最新的研究进展进行简要综述,为今后建立新型乙肝病毒感染模型提供参考。     

肝得宁片的体外抗乙肝病毒作用研究

抗病毒药物的研究，一直受到国内外医药界的普遍重视。在我国，传统中草药治疗乙型肝炎病毒感染的临床应用，已取得令人满意的效果，积累了丰富的经验。肝得宁片是以五味子等常用中药组成的复方制剂，多年来在我院用于急、慢性乙型肝炎治疗中取得了较好疗效。为了验证其对病毒性肝炎的治疗作用，我们应用Sureau等建立的能够体外复制     

中药抗乙肝病毒的实验研究

乙型肝炎是我国的一个高发病，乙肝病毒感染率在我国部分地区大约为10％左右，为了在中药中寻找抗乙肝病毒药物，我国的医药工作者进行了数十年的努力，取得了大量的研究成果。现综述如下。     

复方虎杖方体内外抗乙肝病毒的活性评价

目的 研究复方虎杖方体内外抗乙肝病毒作用.方法 体外实验采用CCK-8染色法检测复方虎杖方水提物、醇提物对HepG2.2.15细胞株的抗增殖活性,采用化学发光微粒子免疫检测法测定HBsAg、HBeAg含量,采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量;体内实验采用血清斑点杂交法(Dot blot)测定给药5、10 d...     

吉西他滨促进HepG2.2.15细胞系中乙肝病毒pgRNA转录和病毒复制及相关分子机制研究

目的：探讨吉西他滨对HepG2.2.15细胞中乙肝病毒前基因组RNA（pregenomic RNA,pgRNA）转录以及乙肝病毒复制的影响及其可能的作用机制。方法：使用不同浓度吉西他滨处理HepG2.2.15细胞,分别使用CCK-8法、流式细胞术、实时定量聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）、酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）法检测细胞活性、细胞凋亡、细胞周期、细胞内乙肝病毒pgRNA、细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原（hepatitis B sur－face antigen,HBsAg）、乙型肝炎e抗原（hepatitis B e antigen,HBeAg）、乙肝病毒DNA（hepatitis B virus DNA,HBV DNA）;实时定量PCR法检测吉西他滨作用下HepG2.2.15细胞中与pgRNA转录有关的调控基因肝细胞核因子4α（hepatocyte nuclear factor 4,HNF4α）、P38蛋白激酶（P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK）、环磷酸腺苷效应元件结合蛋白1（CAMP responsive element binding protein 1,CREB1）、核转录因子 p65（nuclear factor-kappa B p65,NF-?资b p65）、组蛋白去乙酰化酶1（histone deacetylase 1,HDAC1）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α（peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha,PGC-1α）、叉头转录因子O1（forkhead box protein O1,FOXO1）、相关调控基因沉默信息调节因子2相关酶1（sirtuin 1,SIRT1）、P53 mRNA水平以及pgRNA的表达量,分析这些基因随吉西他滨浓度变化与pgRNA随浓度变化的相关性,找出与pgRNA变化相关性最高的基因,并使用Western blot在蛋白质水平验证吉西他滨对此基因蛋白质表达量的影响。结果：吉西他滨对HepG2.2.15细胞的生长显示出浓度以及剂量依赖性的抑制作用;吉西他滨使细胞凋亡率增高;吉西他滨使细胞更多的细胞停滞在G0G1期,而处于S期细胞比例降低;吉西他滨明显增加HepG2.2.15细胞内乙肝病毒 pgRNA,72 h之内呈现明显的时间与剂量依赖性;吉西他滨作用细胞24 h会使细胞培养上清液中的HBeAg增加;吉西他滨促进HNF4α mRNA、HNF4α蛋白质表达量增加,且在所检测的与乙肝病毒转录调节有关的基因中,HNF4α mRNA变化趋势与HBV pgRNA变化趋势相关性最高。结论：吉西他滨可在细胞水平促进乙肝病毒pgRNA转录以及乙肝病毒的复制,其机制为通过促进乙肝病毒转录因子HNF4α的表达实现的。     

Adefovir抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的在体外细胞培养研究中,观察Adefovir抗HBV的作用.方法以乙型肝炎病毒(HBV)DNA转染的细胞株2.2.15细胞为靶细胞,给药后通过检测细胞培养液中HBsAg、HBeAg和HBV DNA,对Adefovir抗HBV效果进行评价.在2.2.15细胞培养基中分别加入不同浓度的药物,培养数天后检测上清液中HBsAg和HBeAg滴度,细胞DNA抽提液检测HBV DNA;用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测药物对细胞的毒性.结果 Adefovir加入细胞培养12d,最大无毒浓度为20μg/ml,对HBsAg抑制率为52.44%,对HBeAg抑制率为54.87%,对HBV DNA抑制率为45.68%,并有剂量依赖效应.结论 Adefovir在体外细胞培养的实验中有抗HBV病毒作用.     

Antiviral Effect of Chinonin against Herpes Simplex Virus

In order to investigate the antiviral effect of chinonin against Herpes simplex virus (HSV), the encephalitis model in mice and skin infection model in guinea pigs were established by HSV-Ⅰ and HSV-Ⅱ infection respectively. Acyclovir was used as the positive reference drug to evaluate the antiviral capacity of chinonin. Chinonin showed an obvious therapeutic effect on encephalitis in mice at doses of 25 and 50 mg/kg. At both dosages, chinonin demonstrated stronger protection than acyclovir (1 and 5 mg/kg) to the infected mice from death. It was also found that chinonin could treat the skin infection in guinea pigs effectively. The therapeutic effect of chinonin was similar to that of acyclovir (5 mg/kg) at 25 mg/kg but obviously better than that at 50 and 75 mg/kg. In conclusion, chinonin is a potential candidate for the treatment against HSV.     

苦参素体内抗乙型肝炎病毒作用研究

目的观察苦参素对鸭乙型肝炎病毒感染的治疗效果。方法采用一日龄麻鸭静脉注射鸭乙型肝炎病毒，7天后开始给鸭口服苦参素75、150和300mg／kg3个剂量，每天2次，给药10天，观察药物对鸭的毒性和鸭血清乙肝病毒DNA（DHBV—DNA）的影响。结果苦参素在150mg／kg组对鸭乙型肝炎病毒感染有可重复的显著治疗效果。300mg／kg组有较好的效果，75mg／kg组无抑制作用。结论苦参素有良好的抗鸭乙肝病毒效果。     

盐酸阿比朵尔抗腺病毒7型的实验研究

目的:明确抗病毒新药盐酸阿比朵尔体外抗腺病毒7型(ADV-7)的作用方式。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性、病毒滴定3种方法从药物抗病毒生物合成、药物直接杀伤病毒以及药物抗病毒吸附3方面检测盐酸阿比朵尔的作用方式。结果:盐酸阿比朵尔对ADV-7无直接杀伤作用,也不能阻止ADV-7的吸附和穿入,各用药组均出现典型的CPE,但盐酸阿比朵尔能明显抑制ADV-7的生物合成作用,对细胞的半数毒性浓度(CC50)为85.37 mg/L,对ADV-7的半数有效浓度(IC50)为15.39 mg/L,治疗指数(TI)为5.55,且随着药物浓度的增加,病毒所致的CPE效应逐渐减弱,培养液中的病毒滴度也逐渐降低,而病毒抑制率则明显升高。结论:盐酸阿比朵尔在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗ADV-7的作用,其具体作用机制有待进一步研究。     

台湾细叶油柑体内外抗乙肝病毒作用研究

为研究叶下珠属植物台湾细叶油柑内外抗乙肝病毒的作用,应用２１１５细胞株及雏鸭乙型肝炎模型,对台湾细叶油柑水提取和醇提取物进行了体内外抗乙肝活性实验。结果：台湾细叶油柑水提取物和醇提取物对ＨＢｓＡｇ分泌均有一定抑制作用,但其醇提物对ＨＢｅＡｇ的分泌无抑制作用。在体外抗鸭乙肝病毒实验中,台湾细叶油柑水提物１０ｇ．ｋｇ＾－１和５ｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１剂量组于给药５ｄ、给药１０ｄ和停药３ｄ时有显著体内抑     

清解防感颗粒体内外抑菌作用实验研究

目的 :研究清解防感颗粒的体内外抑菌作用。方法 :采用标准试管二倍稀释法测定清解防感颗粒的最低抑菌浓度(MIC)和平板转种法测定最低杀菌浓度(MBC),并观察其在小鼠体内外对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和乙型溶血性链球菌的抑菌作用。结果 :体外抑菌试验显示:清解防感颗粒对上呼吸道常见细菌有不同程度的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和乙型溶血性链球菌的作用较强,对铜绿假单孢菌和白色念珠菌也有一定的抑制作用。体内抑菌作用显示:清解防感颗粒8、4 g/kg剂量组有抑菌作用,可明显降低金黄色葡萄球菌感染小鼠的死亡率并延长生存期。结论 :清解防感颗粒具有一定的体内外抑菌作用。     

氧张力对原位和培养的血管内皮细胞内过氧化氢酶活性的影响

目的：研究氧张力对原位的和培养的血管内皮细胞内过氧化氢酶活性的影响，探讨缺血再灌注损伤机理。方法：用碱性DAB－H2O2法检测原位的和在不同氧张力条件下培养的人脐血管内皮细胞内CAT的活性。结果：原位的脐静脉内皮细胞内CAT的活性高于脐动脉内皮细胞；高氧张力下培养的脐血管内皮细胞内CAT的活性比在低氧张力下培养的高。结论：氧张力调节生理条件下和培养的血管内皮细胞内CAT的活性。     

人抗黏液病毒A基因重组腺病毒体外抗乙型肝炎病毒的作用

目的:研究人抗黏液病毒A(MxA)基因重组腺病毒AdMxA体外抗乙型病毒性肝炎病毒(HBV)的作用效果.方法:以1倍感染复数(MOI)(1倍MOI感染组)及5倍MOI(5倍MOI感染组)的重组腺病毒AdMxA分别转染HepG2.2.15细胞,以未感染HepG2.2.15细胞为对照(未感染组).利用RT-PCR检测3组H...     

空心莲子草微乳体外抗柯萨奇病毒B3的实验研究

目的:观察空心莲子草微乳在体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用,为将纳米技术应用于该药的研发提供理论依据。方法:提取空心莲子草抗病毒活性成分并制备成微乳制剂,以高效液相法测定微乳中空心莲子草浓度,测定微乳的粒径及其分布,考察微乳的稳定性,通过细胞实验评价药物的抗病毒作用。结果:微乳的平均粒径为32 nm,具有很好的稳定性,有明显抑制CVB3的作用,治疗指数27.31。结论:空心莲子草微乳有显著的抗CVB3的作用,微乳化的空心莲子草安全性比未经微乳化的高。     

妇科再造丸对正常和妊娠大鼠在体及离体子宫平滑肌收缩的影响

目的：探讨妇科再造丸对正常及妊娠大鼠在体及离体子宫平滑肌收缩的影响,为其临床应用提供药理学实验依据.方法：采用常规方法制备大鼠在体及离体子宫标本,通过BL-420型生物机能实验系统,以子宫收缩的幅度、频率及收缩力作为评价指标,观察不同剂量的妇科再造丸对正常及妊娠大鼠子宫平滑肌收缩的影响.结果：妇科再造丸高剂量组能抑制大鼠子宫平滑肌的收缩幅度、频率及收缩力,与正常对照组比较差异有显著性（P＜0.01）.妇科再造丸中、低剂量组也能不同程度抑制大鼠子宫平滑肌的收缩（P＜0.01,P＜0.05）.结论：妇科再造丸能显著抑制大鼠子宫平滑肌的收缩,并随剂量加大抑制作用加强.     

茶多酚主要成分EGCG体外抗流感病毒FM1株作用

【目的】研究茶多酚主要成分EGCG体外抗甲型流感病毒FM1株感染及抑制病毒复制的作用。【方法】细胞培养测定抗病毒效价,采用细胞病变抑制(CPE)法和空斑减少试验法,在不同试验策略(治疗、保护)下,评价其体外抗流感病毒作用。【结果】CPE法观察及四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测结果显示:在治疗及保护模式下,4～32 mg/mL EGCG均有显著抑制病毒、提高细胞存活率的作用(P<0.01)。空斑减少试验结果显示:2种模式下EGCG治疗指数(TI)分别为39.31及43.48,能有效抑制流感病毒,符合CPE法的结果。【结论】EGCG具有一定的体外抗甲型流感病毒FM1株的作用。