白血病抑制因子与神经再生的研究进展

白血病抑制因子（LIF）是一种有着多种功能和作用的细胞因子。最近发现它在神经损伤后再生方面也有重要的功用。本文就LIF的基因、受体和信号转导机制、LIF的产生、在机体中的周围神经及中枢神经再生中的作用研究作一综述。     

白血病抑制因子在女性输卵管的表达

白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）是60年代末发现的一种多功能的细胞因子，因能抑制小鼠M1型髓样白血病细胞增殖并诱导其向正常Mφ样细胞分化而得名。研究显示，LIF在女性卵巢及卵泡液、子宫内膜及蜕膜、滋养细胞与输卯管等组织细胞均有表达，在排卵、胚泡的形成、早期发育及胚泡着床中起调节作用，人类输卵管妊娠及部分不孕症的发生可能与组织局部LIF的表达异常有关。     

急性白血病患者血清sICAM-1、TGF-β1和白血病抑制因子水平及其意义

目的探讨急性白血病(AL)患者血清可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)和白血病抑制因子(LIF)水平与急性白血病的病情、疗效和预后的关系。方法用酶联免疫夹心法(ELISA)测定44例急性白血病患者化疗前后血清sICAM-1、TGF-β1和LIF水平。结果与正常组比较,AL患者血清sICAM-1水平明显升高(P>0.05),TGF-β1水平明显降低(P<0.01),LIF水平有下降的趋势,但无显著性差异(P>0.05)。患者获完全缓解(CR)时,该三种细胞因子的水平又恢复正常;复发时,该三种细胞因子的水平又趋升高或降低,并接近治疗前的水平。结论sICAM-1、TGF-β1和LIF均参与了白血病的免疫发病机制。检测AL患者血清上述三种细胞因子的水平,为AL患者监测病情、评价疗效、指导临床用药及预后判断提供较为客观的指标。     

不同浓度胰岛素作用的Ishikawa细胞中白血病抑制因子（LIF）的表达研究

目的探寻高胰岛素（INS）对子宫内膜腺上皮细胞白血病抑制因子（LIF）表达的影响,探讨多囊卵巢综合征（PCOS）常见的胰岛素抵抗（IR）对其内膜容受性的影响。方法体外培养高分化子宫内膜腺癌细胞Ishikawa,分别采用浓度为10mU／L、30mU／L、90mU／L的INS溶液作用细胞24h,使用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各浓度组细胞培养上清液中LIF水平。结果对照组LIF表达水平均高于各INS作用组;不同浓度INS作用组间无差异。结论不同浓度INS溶液作用的Ishikawa细胞培养上清液中LIF均呈低水平表达,提示IR可能成为影响PCOS患者内膜容受性因素之一,造成PCOS患者不良的生殖结局。     

小剂量阿糖胞苷与重组人白血病抑制因子联合诱导HL-60细胞凋亡的作用

白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)是一类具有广泛生物学活性的细胞因子,对胚胎发育、神经细胞再生、关节软骨代谢、肿瘤细胞增殖等方面均有影响[1-3].阿糖胞苷(Cytosinearabinoside,Ara-c)是治疗白血病的重要药物.有研究认为,化疗药物是否能够有效地诱导白血病细胞凋亡是判断急性髓系白血病(AML)患者化疗敏感性的重要指标[4].资料显示,小剂量Ara-c及rh-LIF单用均可诱导细胞凋亡[5,6].最近,小剂量Ara-c与其它药物联合治疗白血病获得较好疗效[7,8].本文报道rh-LIF和Ara-c联合诱导HL-60凋亡的作用.     

白血病抑制因子及其受体在早孕蜕膜和绒毛组织中表达的研究

目的：探讨正常早孕蜕膜和绒毛组织白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)的表达。方法：采用原位杂交和免疫组织化学染色技术对18例正常早孕妇女蜕膜和绒毛组织LIF-mRNA、LIF和LIFR蛋白的表达进行研究。结果：全部早孕蜕膜组织和绒毛滋养细胞中有LIF-mRNA、LIF和LIFR蛋白表达，同一组织和细胞LIF和LIFR基因表达强弱基本一致，LIFR在绒毛滋养细胞的表达强于蜕膜。结论：人类蜕膜和绒毛滋养细胞LIF和LIFR基因表达可能与胚泡着床、维持胎盘功能和促进胚胎发育有关。     

白血病抑制因子受体gp190细胞内区与HL-60细胞内Cdc25B激活的关系

目的：观察白血病抑制因子（LIF）受体gp190亚基完整的细胞内区和gp190胞内区C末端片段在人白血病细胞系HL－60中与细胞周期调控因子Cdc25B表达和激活的关系，进一步了解LIF引发白血病细胞增殖抑制和分化的机制。方法：用基因重组技术将gp130的细胞内区换成gp190的细胞内区，用PCR技术扩增合成gp190细胞内区C末端的一个多肽，构成嵌合体受体基因130／190及190CT片段，并分别在HL－60细胞表达。用免疫组化和Western印迹方法，分析在LIF的诱导下，细胞生长和形态与Cdc25B表达的关系。结果：转染pcDNA3.0 130/190的HL－60细胞Cdc25B的表达量降低，细胞数量减少，细胞体积增大；转染pcDNA3.0 190末端的HL－60细胞Cdc25B的表达量增高，细胞表现为增殖，细胞体积普遍减小。结论：Cdc25B表达量降低与LIF诱导引发的白血病细胞HL－60增殖抑制有关，上述效应是由gp190亚基细胞内区介导的，而pg190C末端片段或干扰LIFα受体介导的信号转导效应。     

白血病抑制因子与生殖调节

白血病抑制因子 (ｌｅｕｋｅｍｉａｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ,ＬＩＦ)是一种具有广泛生物学功能的细胞因子。最早发现它具有促进小鼠Ｍ1型白血病细胞分化并抑制其增殖而命名。ＬＩＦ在不同的组织和细胞中具有多种生物活性 ,如促进骨髓白血病细胞系分化 ,诱导肝细胞急相反应 ,抑制正常胚胎干细胞分化 ,刺激骨中钙释放 ,以及在大鼠交感神经元中建立胆碱能表型等[1] 。自 1988年国外学者相继证实白血病抑制因子具有抑制多向生长潜能的胚胎干细胞分化并保持其增殖能力的作用以来 ,越来越多的研究发现ＬＩＦ影响生殖活动的各个环节 ,包括…     

白血病抑制因子通过JAK1/STAT3信号通路调控非小细胞肺癌细胞活性

目的：探讨白血病抑制因子（LIF）对非小细胞肺癌（NSCLC）的潜在作用及其机制。方法：采用免疫组织化学法、荧光定量PCR法、Western blot法检测LIF在NSCLC患者癌旁组织和肿瘤组织中的表达情况;采用CCK-8法和Transwell小室法检测LIF对肿瘤细胞A549细胞的增殖和侵袭作用的影响;Western blot检测JAK1/STAT3信号通路蛋白表达情况。结果：LIF在NSCLC的癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P ＜0.01）,经LIF共孵育后,肿瘤细胞的增殖和侵袭能力均明显增强（P ＜0.05）;Western blot显示肿瘤细胞中JAK1、STAT3 磷酸化水平明显提高（P ＜0.05）。结论：LIF在NSCLC中表达增加,可能通过JAK1/STAT3信号通路介导LIF的增加,并增强肿瘤细胞的增殖和侵袭能力。     

内皮抑素联合血管抑素诱导白血病细胞凋亡

目的　探讨重组人内皮抑制素因子 (rhES)联合人血管抑制素因子 (hAS)诱导白血病细胞凋亡的作用。方法　采用克隆 pCX的表达产物和用亲和层析及胰蛋白酶消化进行重组人内皮抑制素(rhES)和人血管抑制素 (hAS)的制备和纯化 ;以原代白血病细胞为靶细胞 ,应用MTT法、DNA琼脂糖电泳、流式细胞术检测白血病细胞凋亡。结果　内皮抑制素和血管抑制素联合对白血病细胞的生长、增殖有抑制作用 ,同时对白血病细胞具有诱导细胞凋亡作用 ,与单独相比有差异 (P <0 .0 1 )。结论　联合应用两种血管形成抑制因子对白血病细胞具有阻止细胞生长、增殖和诱导细胞凋亡的协同作用     

建立稳定表达猪LIF蛋白的小鼠STO细胞系

目的:在STO小鼠成纤维细胞中表达猪白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF),并尝试使用其作为饲养层培养大鼠诱导多能性干细胞(iPS细胞)?方法:通过脂质体转染的技术,将已构建的猪LIF基因真核表达载体pCAG-pLIF转染至小鼠STO细胞中,获得能够稳定表达猪LIF的转基因STO细胞(STO-pLIF细胞)?通过RT-PCR?qPCR?Western blot等方法检测STO-pLIF细胞中猪LIF基因的表达量,选择高效表达猪LIF的STO-pLIF细胞作为饲养层,培养大鼠iPS细胞?通过生长曲线检测?碱性磷酸酶染色?干细胞多能因子的RT-PCR和免疫荧光染色等方法,检验STO-pLIF细胞饲养层在大鼠iPS细胞培养方面的功能?结果:STO-pLIF细胞中LIF RNA和蛋白表达水平均上调(P < 0.05),而该细胞系作为饲养层所培养的大鼠iPS细胞在形态?多能性因子表达方面更接近于传统培养的大鼠iPS细胞,与无外源添加LIF所培养的大鼠iPS存在差异(P < 0.05)?结论:成功获得了稳定表达猪LIF基因的STO-pLIF细胞,并证明该细胞作为饲养层在大鼠iPS细胞培养中具有一定优势?     

类胚体中残留细胞分化全能性维持与外源性白血病抑制分化因子的关系

目的 研究小鼠胚胎干细胞体外类胚体分化后残留未分化细胞的分化能力,探讨其分化全能性维持与外源性白血病抑制分化因子(LIF)的关系.方法 小鼠R1胚胎干细胞体外经20 d的类胚体诱导分化后,胰酶消化为单细胞悬液,在不含LIF的DMEM培养液中贴壁培养.扩增后的细胞用流式细胞仪分析未分化及分化表面标志(CD9、 SSEA1和Flk-1)的表达情况.分别于再次类胚体诱导分化前后,RT-PCR检测Oct-4、 Nanog、Rex1、FGF5、Nestin、Brachyury、Flk-1和GATA6表达.将扩增后的残留细胞注射至裸鼠皮下,检测畸胎瘤形成能力.Oct-4/GFP 转基因小鼠胚胎干细胞在半固体培养基上作单细胞分化,20 d后统计分化残留率.结果 在不含LIF的DMEM培养液中的残留细胞呈克隆样生长,表达未分化胚胎干细胞标志CD9、SSEA1、Oct-4、Nanog和Rex1.残留细胞体外可再次诱导分化,表达3个胚层的分化标志.残留细胞裸鼠皮下注射6周后形成畸胎瘤.单细胞分化实验表明,常规培养的小鼠胚胎干细胞中约14%的细胞具有分化残留能力.结论 残留胚胎干细胞全能性维持不依赖外源性白血病抑制分化因子;常规培养的胚胎干细胞仅部分具有残留能力.     

Expression of Leukemia Inhibitory Factor in Airway Epithelial Tissue of Asthmatic Rats

In order to investigate the expression of leukemia inhibitory factor(LIF) in airway epithelial tissues of normal and asthmatic rats,the influence of dexamethasone and the role of LIF in pathogenesis of asthma,30 Sprague-Dawley(SD) rats were randomly divided into 3 groups(10 for each group):normal group,asthma model group,and dexamethasone-interfered group.In asthma model group and dexamethasone-interfered group,asthma rat models were established by intraperi-toneal(i.p.) injection of 10% ovalbumin(OVA) and challenge with 1% OVA via inhalation.Rats in dexamethasone-interfered group were pretreated with dexamethasone(2 mg/kg,i.p) 30 min before each challenge.The expression of LIF protein in lung was detected by immunohistochemistry.The results showed that LIF protein was mainly expressed in cytoplasm of bronchial epithelial cells.The expression of LIF protein in the airway epithelial tissue of asthma model group was significantly higher than that in normal group and dexamethasone-interfered group(P<0.01),but there was no sig-nificant difference between normal group and dexamethasone-interfered group(P>0.05).It was con-cluded that the expression of LIF was increased significantly in the airway epithelial tissue of the asthma rats,and dexamethasone could down-regulate the expression of LIF.It was suggested that LIF might play an important role in the pathogenesis of asthma as an inflammation regulator.     

哮喘大鼠肺组织白血病抑制因子的表达及地塞米松干预研究

目的探讨哮喘大鼠肺组织中白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的表达及其意义.方法制作卵蛋白致敏大鼠哮喘模型,采用RT-PCR和Western-blot方法观察LIF在致敏大鼠肺组织中的表达.结果LIF蛋白表达量在哮喘组为(40832±12964),均较地塞米松组(16160±2108)和对照组(23110±8018)升高,差异有显著性(P＜0.01),地塞米松组与对照组之间无显著性差异(P＞0.05).LIFmRNA的相对表达量哮喘组为(0.51±0.13),均较地塞米松组(0.18±0.05)和对照组(0.24±0.02)明显增高,差异有显.著性(P＜0.01),地塞米松组与对照组之间无显著性差异(P＞0.05).结论LIF在致敏哮喘大鼠模型肺组织中表达显著增高,LIF作为神经免疫调节因子,可能参与了哮喘的发病机制.     

LIF对人胚神经干细胞增殖和分化的影响

目的:探讨LIF对人胚神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响。方法:从孕24周流产胎儿脑组织中分离NSCs,并分4组培养。对照组用基础培养液,第1,2,3实验组分别于基础培养液中加入20μg/L EGF和B27,20μg/L LIF和B27,20μg/L LIF、20μg/L EGF及B27。观察细胞生长情况并在不同时间进行细胞计数。诱导细胞分化后,显微镜下观察。结果:培养3 d细胞开始分裂并聚集成球,后逐渐增大,培养10 d,第1,2,3实验组和对照组神经球形成数分别为(21.5±7.8),(23.8±5.4),(25.2±6.3)和(24.8±6.9),各组间差异无统计学意义。分化实验显示含LIF培养的神经干细胞分化少。结论:在体外,LIF能够促进神经干细胞的增殖并抑制神经干细胞的分化。     

白血病抑制因子mRNA在早孕期小鼠子宫内膜的表达规律和组织学定位

目的研究白血病抑制因子(LIF)mRNA在早孕期小鼠子宫内膜的表达规律及LIF蛋白的组织定位。方法用RT-PCR半定量法测定LIFmRNA的表达;用免疫组化ABC法测定LIF蛋白的组织学定位。结果LIFmRNA在早孕期小鼠子宫内膜呈时序性规律表达,孕早期升高,第4天达到高峰,比未孕期明显增高(P<0.01),此后下降,到孕第7天降到孕前水平;LIF蛋白主要定位在子宫内膜腺上皮和腔上皮,且第4天染色最深,间质细胞无LIF表达。结论LIF的表达高峰与小鼠孕卵着床时间吻合。因此,LIF可能参与了着床的启动,LIF参与着床可能是通过自分泌和旁分泌作用的结果。     

类胚体中残留细胞分化全能性维持与外源性白血病抑制分化因子的关系

目的 研究小鼠胚胎干细胞体外类胚体分化后残留未分化细胞的分化能力,探讨其分化全能性维持与外源性白血病抑制分化因子（LIF）的关系。方法 小鼠R1胚胎干细胞体外经20 d的类胚体诱导分化后,胰酶消化为单细胞悬液,在不含LIF的DMEM培养液中贴壁培养。扩增后的细胞用流式细胞仪分析未分化及分化表面标志（CD9、SSEA1和Flk-1）的表达情况。分别于再次类胚体诱导分化前后,RT-PCR检测Oct-4、Nanog、Rex1、FGF5、Nestin、Brachyury、Flk-1和GATA6表达。将扩增后的残留细胞注射至裸鼠皮下,检测畸胎瘤形成能力。Oct-4/GFP 转基因小鼠胚胎干细胞在半固体培养基上作单细胞分化,20 d后统计分化残留率。结果 在不含LIF的DMEM培养液中的残留细胞呈克隆样生长,表达未分化胚胎干细胞标志CD9、SSEA1、Oct-4、Nanog和Rex1。残留细胞体外可再次诱导分化,表达3个胚层的分化标志。残留细胞裸鼠皮下注射6周后形成畸胎瘤。单细胞分化实验表明,常规培养的小鼠胚胎干细胞中约14%的细胞具有分化残留能力。结论 残留胚胎干细胞全能性维持不依赖外源性白血病抑制分化因子;常规培养的胚胎干细胞仅部分具有残留能力。     

抑抗汤调节不明原因不孕症患者子宫内膜白血病抑制因子表达的研究

目的:通过研究抑抗汤对不明原因不孕症患者子宫内膜白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)表达的影响,了解抑抗汤治疗不明原因不孕症的作用机制.方法:不明原因不孕症患者20例,口服标准量抑抗汤2个月,首先应用RT-PCR初步了解不孕症患者服药前、后黄体晚期子宫内膜表达LIFmRNA水平的差异,然后采用实时荧光定量PCR对服药前后LIF基因转录水平定量验证,并以免疫组化鉴定其在服药前后子宫内膜蛋白水平的表达情况.结果:不孕症患者治疗前、后子宫内膜LIF荧光定量PCR的Ct值分别为9.79±0.91和4.60±1.24,两者相比差异有显著性(P<0.01),表明治疗后LIF的转录水平高于治疗前.免疫组化结果显示LIF表达在子宫内膜腺上皮细胞的细胞浆内,且治疗后蛋白水平的表达较治疗前明显增强(P<0.05).结论:抑抗汤治疗不明原因不孕症可能是通过促进子宫内膜LIF的表达来实现的.     

子宫内膜癌组织中白血病抑制因子和巨噬细胞移动抑制因子的检测及意义

目的探讨白血病抑制因子(LIF)和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)与子宫内膜癌的关系。方法收集哈尔滨医科大学附属第四医院病理科2006年5月至2008年10月存档的113例石蜡包埋子宫内膜标本进行分类,并应用免疫组织化学方法,对组织进行LIF和MIF蛋白的检测。结果在正常子宫内膜,单纯增生、复合增生、不典型增生及子宫内膜癌中,MIF表达呈上升趋势,增生性内膜及内膜癌与正常子宫内膜比较有显著性差异(P<0.005,P<0.001),增生性内膜与内膜癌比较有显著性差异(P<0.001);LIF表达呈上升趋势,增生性内膜及内膜癌与正常子宫内膜比较有显著性差异(P<0.05,P<0.05)。增生性内膜与内膜癌比较无显著性差异(P>0.05)。子宫内膜癌中,MIF表达随细胞分化程度增高而上升。结论推测MIF与子宫内膜癌的发生有关。尚不能推测LIF与子宫内膜癌的发生有关。