CDK6 在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨CDK6在鼻咽癌中的表达及临床意义。方法利用免疫组化检测CDK6在鼻咽以及鼻咽癌组织中表达,并利用
统计学方法分析CDK6在鼻咽与鼻咽癌中表达差异。利用统计学方法分析CDK6与鼻咽癌患者临床参数之间的相关性。结果
分析了101例鼻咽癌组织和30例鼻咽组织中CDK6表达。免疫组化结果显示,CDK6是一个核浆共表达因子。在鼻咽组织中,
CDK6主要在胞浆表达。而在鼻咽癌组织中,主要为核浆共表达。与非癌鼻咽组织相比,CDK6 蛋白在鼻咽癌组织中表达明显
上调（P=0.009）。此外,CDK6调的表达与鼻咽癌组织大小（P=0.020）及临床分期（P=0.039）呈明显的正相关。CDK6表达越高,
患者肿瘤越大,临床分期越晚。结论CDK6表达下调作为不利因素促进了鼻咽癌的发生发展。
     

P27蛋白在胞浆中的表达与鼻咽癌临床病理学特征的关系

目的评估p27蛋白在胞浆中表达与鼻咽癌患者临床病理学特征的关系。方法利用免疫组化检测P27蛋白在鼻咽癌组织
与鼻咽组织之间的表达。利用统计学方法分析P27蛋白在鼻咽癌与鼻咽组织胞浆中表达差异以及P27蛋白在胞浆中表达与与
鼻咽癌患者临床病理参数之间的相关性。结果免疫组化结果显示,P27蛋白是一个核浆表达蛋白。与正常鼻咽组织相比,P27
蛋白在鼻咽癌组织胞浆中的表达明显下调（P=0.047）,且下调表达与T分级（P=0.033）呈负相关。此外,P27蛋白在鼻咽癌组织
胞浆中的表达与淋巴结转移和临床分期虽然无显著意义,但也展现了明显负相关趋势（P=0.157,P=0.090）。结论P27蛋白在细
胞胞浆中过低表达可能促进鼻咽癌的发生发展,且其可作为预测鼻咽癌患者预后的不利因素之一。
     

Mus81基因在中国汉族结直肠癌中的表达及其临床意义

目的了解Mus81基因在中国汉族结直肠癌中的表达水平并分析其临床意义。方法收集43例手术切除的中国汉族结直
肠癌及相应的癌旁组织标本,采用巢式荧光定量PCR技术检测标本中Mus81基因的表达水平,并分析Mus81基因表达与结直
肠癌临床病理特征及常规肿瘤指标的相关性。结果Mus81基因在结直肠癌中的表达水平低于相应的癌旁组织（114.6±68.0 vs
202.5±109.0,P<0.001）。Mus81 基因在74.4%（32/43）的病例中表现为表达下调,且其表达下调与结直肠癌的远处转移（P=
0.043）、TNM分期（P=0.022）及P53蛋白高表达（P=0.011）密切相关。结论Mus81基因的表达水平在中国汉族结直肠癌中明显
下调,且其表达下调与结直肠癌的转移潜能及进展相关,提示Mus81是中国汉族结直肠癌的一个潜在分子指标物。
     

鼻咽癌患者血浆miR-24异常表达的临床意义

目的探讨miR-24在鼻咽癌患者血浆中的表达及临床意义。方法收集2007年12月~2011年6月在南方医院耳鼻喉科住
院的初诊鼻咽癌患者血浆217例,以同期住院的慢性化脓性中耳炎或慢性鼻窦炎患者血浆73例作为对照,利用荧光定量PCR的
方法进行miR-24 表达的检测并结合临床资料分析其临床意义。结果血浆miR-24 在鼻咽癌组的相对表达水平为对照组的
4.808倍,差异具有显著统计学意义（P<0.001）;血浆miR-24在不同T分期之间有统计学差异（P=0.007）,miR-24与N分期呈负
相关（P=0.028）;鼻咽癌病人血浆EBV-DNA与血浆miR-24呈负相关（P=0.048）;治疗后血浆miR-24含量较治疗前下降差异有
显著统计学意义（P=0.001）。结论血浆miR-24可作为肿瘤分子标志物用于鼻咽癌早期诊断及预后分析。
     

基于表达谱分析识别鼻咽癌血管生成及淋巴管生成的调控通路

目的探讨鼻咽癌是通过调节哪些靶基因的表达影响血管生成和淋巴管生成。方法以Sengupta等通过基因芯片数据（其
中含10例正常鼻咽组织,31例鼻咽癌组织）分析所得的831个鼻咽癌与正常鼻咽组织差异表达基因为基础,根据最新的基因组
信息以及设定差异表达值的最小阈值260,筛选出246个有效基因。对这246个基因进行基于文献挖掘的基因功能分析和网络
构建,最后进行通路分析。结果246个基因与鼻咽癌、EB病毒、转移、血管生成、淋巴管生成、侵袭等关键词特异相关。其中,52
个基因已知与血管生成相关（P=0.00001）,19个基因构成了血管生成基因网络（P=0.0042）;21个基因已知与淋巴管生成相关
（P=0.00001）,6个基因构成了与淋巴管生成相关基因网络（P=0.0226）。包含PTGS2在内的8个基因参与NFκB信号通路已知
在小细胞肺癌中与血管生成密切相关（P=7.87E-07）。包含STAT1及CXCL10等在内的5个基因参与了Toll样受体通路（P=
0.00176）。结论PTGS2和NFκB共同调控鼻咽癌血管生成,Toll样受体信号通路可能与淋巴管生成密切相关。它们的相互作
用方式值得进一步研究。
     

蛋白激酶CK2β在食管癌中的表达及其临床意义

目的探讨蛋白激酶CK2β在食管癌组织中的表达及其在食管癌发生发展中的临床意义。方法采用免疫组化方法检测含
60对食管癌及其癌旁正常粘膜组织芯片中CK2β的表达水平。同时收集南方医院胸外科2012年2~4月期间手术切除的食管组
织标本10例,并提取蛋白和RNA,通过Western blot和实时荧光定量PCR的方法检测其CK2β的表达变化。结果CK2β在食管
癌组织中表达为：1.79%表达阴性,1.79%表达弱阳性,10.71%表达中阳性,85.71%表达强阳性;而正常粘膜组织96.67%表达阴
性,3.33%弱阳性。CK2β在肿瘤及癌旁正常组织中阳性表达的分布有显著差异（P<0.001）。CK2β蛋白在食管癌中的表达水平
与TNM分期显著相关（P=0.010）。Western blot及荧光定量PCR同样证实了食管癌组织中的蛋白激酶CK2β的表达水平明显升
高。结论蛋白激酶CK2β的表达与食管癌的发生发展及其恶性程度显著相关。
     

C-IAP2在肝细胞肝癌中的表达及与临床预后的关系

目的探讨C-IAP2 mRNA和蛋白在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的关系。方法采用荧光定量PCR和免疫组化方
法检测肝细胞癌组织及对应的非癌组织中C-IAP2 mRNA和蛋白的表达水平并分析肝癌组织中C-IAP2的表达和临床病理特征
之间的关系。结果肝细胞肝癌中C-IAP2 mRNA的表达是非癌组织的2.70倍（P<0.001）。C-IAP2蛋白在肝癌组织阳性表达率
为70.8%,显著高于非癌组织中的阳性表达率27.8%（P=0.001）。C-IAP2 mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达与术前有无癌栓、
有无淋巴结转移、甲胎蛋白水平、肿瘤病理分化类型、TNM分期以及术后复发转移时间有关（P<0.05）,而与患者性别、年龄、乙型
肝炎表面抗原、肿瘤大小、肿瘤数目、肝硬化以及包膜完整性无关（P>0.05）。结论C-IAP2表达水平与原发性肝癌的转移、复发
有关,可作为原发性肝细胞癌预后的新生物学指标。     

miR-199a在肾细胞癌中的表达与临床病理特征及预后的关系

目的检测miR-199a在肾细胞癌及癌旁相对正常肾组织中的表达量,分析其相对表达量和肾细胞癌相关的临床病理特征
及其对肾细胞癌预后判断的意义。方法采用RT-qPCR检测67例肾细胞癌及癌旁正常组织miR-199a表达,分析表达的差异与
临床病理特征间的关系。结果在肾细胞癌和癌旁相对组织中均有不同程度的表达,在肾细胞癌的表达显著低于癌旁相对正常
组织,均值13.7倍（P=0.003）。miR-199a的表达在不同肿瘤浸润程度及复发程度之间存在差别（P<0.05,χ2=4.215）,
而与年龄、组织学类型、淋巴结转移、远处转移、Fuhrman分级等无统计学关联（P>0.05）。miR-199a下调组生存期明显低于对照组（Log-rank
test,P=0.017）。结论miR-199a表达下调与肾癌患者原发肿瘤浸润程度、复发及预后不良有关,可作为评估肾癌预后有价值的
一种指标。
     

FHIT基因和蛋白在鼻咽癌组织及正常鼻咽组织中的表达

目的：研究FHIT基因和蛋白在鼻咽癌组织以及正常鼻咽组织中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR （RQ-RT-PCR）方法和免疫组织化学染色法分析检测54例鼻咽癌组织和28例正常鼻咽组织FHIT基因和蛋白表达水平。结果鼻咽癌组织中FHIT基因和蛋白的表达显著低于正常鼻咽组织（P〈0.050）,且FHIT基因和蛋白的表达与病理分化程度、临床分期密切相关（P〈0.05）,与患者的年龄、性别、癌组织的浸润深度无关（P〉0.05）。结论 FHIT基因和蛋白可能有助于鼻咽癌的诊断,它可作为鼻咽癌的预后因子。     

机械通气所致大鼠急性肺损伤对核内激素受体表达的影响

目的研究机械通气所致急性肺损伤对大鼠肺组织中核内激素受体（Nr1d1）表达的影响,探讨其在机械通气肺损伤中可能
的作用机制。方法72只大鼠分成4个时间点（1:00AM,7:00AM,1:00 PM,7:00 PM）,每个时间点随机分成3组（FB组、LV组、HV
组）,通气3 h 后,提取肺组织RNA,应用大鼠全基因组芯片和荧光定量实时PCR检测机械通气对Nr1d1 表达的影响。结果
基因芯片结果显示HV组Nr1d1表达下调,荧光定量实时PCR结果与芯片结果吻合;余弦分析Nr1d1基因在FB组具有节律性
（P<0.05）,余未见明显节律性。结论Nr1d1表达随潮气量的增大而节律消失;Nr1d1表达下降与机械通气所致急性肺损伤密切
相关。
     

PTHLH在鼻咽癌细胞系及组织中表达上调

目的检测PTHLH在鼻咽癌细胞系及组织中的表达水平,从理论上初步探讨其在鼻咽癌发生发展过程中所起的作用。方法实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测PTHLH在7个鼻咽癌细胞系的表达情况,RT-PCR检测PTHLH在鼻咽癌及非癌鼻咽组织中的表达,免疫组化鉴定其在鼻咽癌及鼻咽上皮组织中蛋白水平的表达。结果PTHLH在鼻咽癌细胞系中的表达上调,以HONE1细胞中表达最高。RT-PCR分析显示PTHLH mRNA在鼻咽癌组织中表达明显上调(61.1%),免疫组化检测鼻咽癌石蜡标本(49例)发现,PTHLH蛋白在鼻咽癌组织中表达明显高于鼻咽上皮组织(12例)(P<0.001)。结论PTHLH基因在鼻咽癌细胞及组织中表达增高,提示其可能参与了鼻咽癌的发生发展,有望成为分子生物学诊断的靶点。     

转酮酶样基因TKTL1在人类鼻咽癌发生和转移中的作用

目的 探讨转酮酶样基因TKTL1在人类鼻咽癌发生和转移中的作用.方法 对65例鼻咽癌和9例鼻咽部慢性炎症组织中转酮酶活性进行检测;实时定量PCR检测鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中转酮酶基因家族(TKT、TKTL1和TKTL2)mRNA表达水平的变化,并分析TKTL1的表达与鼻咽癌发生和转移的关系.结果 鼻咽癌组织中转酮酶活性较鼻咽部慢性炎症组织明显增强(t=4.12,P=0.00);实时定量PCR结果 示鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中TKT和TKTL2 mRNA的表达水平差异无统计学意义(t=1.28、1.62,P=0.32、0.26).然而,鼻咽癌组织中TKTL1的表达水平比鼻咽部慢性炎症组织明显上调(t=6.23,P=0.00),且有淋巴结转移的鼻咽癌组织中TKTL1的表达水平较尤淋巴结转移者明显增强,差异有统计学意义(t=3.28,P=0.00).结论 转酮酶样基因TKTL1在人类鼻咽癌的发生和转移中可能起重要作用,TKTL1有望成为肿瘤治疗研究的新靶点.     

鼻咽癌中ABC转运蛋白基因表达的研究

目的 探讨10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义.方法 采用实时荧光定量PCR,检测10种耐药相关的ABC转运蛋白在25例鼻咽癌组织中的表达水平,并与其在正常鼻咽组织中的表达进行比较分析.结果 10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中均有不同程度的表达,其中ABCA2、ABCC3在鼻咽癌组织及鼻咽正常组织中均高表达;ABCC1、ABCC5及ABCG2在鼻咽癌组织中的表达高于其在正常鼻咽组织中的表达.并有统计学差异;而ABCB1、ABCC2、ABCC3、ABCC4、ABCC6及ABCC11在两类样本中均为低表达.结论 在鼻咽组织中高表达的转运蛋白与鼻咽癌的天然耐药性有关;在鼻咽癌组织中高表达,而在正常鼻咽组织中表达显著降低的ABC转运蛋白很可能在鼻咽癌对化疗的耐药中起着重要作用,在鼻咽癌组织及正常鼻咽组织中均低表达的转运蛋白的转运药物则可能是鼻咽癌化疗的敏感药物.     

鼻咽癌肿瘤组织中IgM 的表达及其临床意义

目的 检测鼻咽癌（NPC）组织中免疫球蛋白M（IgM）的表达,结合患者临床病理特征及生存预后,探讨其相互关系。方法 采用免疫组织化学SABC 法检测92 例NPC 组织中IgM 的表达,选取同期50例病理诊断为鼻咽部炎症组织作为对照,结合NPC 患者临床病理资料和预后情况进行分析。结果 NPC 组织中IgM 阳性表达率为68.48%,高于鼻咽部炎症组织的24.00%（P <0.05）。NPC 组织中IgM 表达多位于细胞浆,鼻咽部炎症组织则主要在细胞膜,且胞浆表达者多为低分化鳞癌,细胞膜表达者多为高、中分化磷癌。IgM表达与NPC 患者T 分期、临床分期有关（P <0.05）,与鼻咽部或颈部复发及全身转移无关（P >0.05）。IgM表达阳性组的NPC 患者总体生存率（57.14%）高于IgM 表达阴性组（27.59%）（P <0.05）,但两者无瘤生存率比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 IgM 高表达于人NPC 组织;IgM 高表达可能参与NPC 早期发病过程,其是否表达可作为患者生存预后的指标。     

桥粒芯糖蛋白3基因在鼻咽癌中表达的初步研究

目的 从纯化鼻咽组织全基因组表达谱数据中筛选出鼻咽癌发病相关的候选靶基因桥粒芯糖蛋白3（DSG3）,利用半定量逆转录（sqRT）-PCR进一步研究DSG3基因在纯化鼻咽部组织中反义RNA（aRNA）中的表达。方法采用RNA保护技术保存组织标本（22例鼻咽癌患者及12例鼻咽部正常或存在炎性黏膜上及组织者）,显微切割获得鼻咽癌组织标本中的癌细胞、鼻咽部非癌组织标本中的黏膜上皮细胞,提取每一例纯化组织标本RNA,线性扩增获得足量aRNA,通过sqRT-PCR进一步研究候选靶基因DSG3在两种不同鼻咽纯化细胞aRNA中的表达。结果在纯化鼻咽癌组织和鼻咽部非癌组织全基因组表达谱中,DSG3基因表达值分别为2、06±1、60和0．48±0．23,表达相差4．24倍,两组比较差异有统计学意义（df=16,t=2．145,P=0．048）。sqRT-PCR检测纯化鼻咽癌组织及非癌组织aRNA中DSG3基因的表达,分别为3．54±2．69和0．95±0.23,两组差异亦有统计学的意义（df=32,t=3．307,P=0．002）。结论 利用全基因组芯片构建基因表达谱结合sqRT-PCR等实验研究,可筛选出与鼻咽癌发病相关的候选靶基因,DSG3基因高表达是鼻咽癌发生发展过程中的再要促瘤因素。     

鼻咽癌中p73基因启动子甲基化状态及转录表达的研究

目的探讨鼻咽癌组织中p73基因启动子区甲基化状态及其对转录表达影响。方法运用甲基化特异性PCR和半定量反转录PCR法检测20例正常鼻咽上皮组织、54例鼻咽癌组织中p73基因启动子甲基化状态及其转录表达水平,分析鼻咽癌组织中p73基因甲基化与临床资料的关系以及p73基因甲基化对转录表达的影响。结果 54例鼻咽癌组织中p73基因启动子甲基化阳性率为38.89%(21/54),而正常鼻咽上皮组织中未检测到p73基因启动子甲基化;两组间p73基因启动子甲基化阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。鼻咽癌组织中p73基因启动子甲基化与临床资料无关。21例甲基化鼻咽癌组织p73基因相对转录表达水平为1.04±0.64,33例非甲基化鼻咽癌组织p73基因相对转录表达水平为1.51±0.75,两者间有统计学差异(P<0.05),20例正常鼻咽上皮组织p73基因相对转录表达水平为1.12±0.31。结论鼻咽癌组织中p73基因甲基化与转录表达相关,是基因表达调节的一种重要方式,p73基因甲基化具有肿瘤特异性,p73基因甲基化与鼻咽癌发生发展有关。     

鼻咽癌中Ptch1和Ptch2基因的表达及关系

目的 探讨Sonic Hedgehog信号通路Ptch1和Ptch2(Ptch1/2)成员在鼻咽癌组织中的表达及其关系.方法 应用免疫组化EnVision两步法检测60例鼻咽癌标本及15例正常鼻咽黏膜中Ptch1/2蛋白的表达,比较Ptch1与Ptch2表达的差异,分析Ptch1和(或)Ptch2与鼻咽癌患者临床病理特征之间的关系.结果 鼻咽癌组织中Ptch1/2蛋白表达的综合评分分别为4.70±3.59、3.58±3.47,明显高于正常鼻咽黏膜上皮组织的2.93±1.98、2.07±1.10(均P＜0.05);肿瘤或正常鼻咽黏膜上皮组织中Ptch1的表达水平均稍高于Ptch2;不同Ptch1及(或)Ptch2蛋白表达水平的鼻咽癌临床病理特征的比较均差异无统计学意义(P＞0.05);Ptch1与Ptch2蛋白表达在正常组织中呈显著相关(r =0.592,P＜0.05),而在肿瘤组织中则无相关性(r=0.114,P＞0.05).结论 鼻咽癌组织中Ptch1/2表达上调可能共同参与鼻咽癌的发生及发展,其中尤以Ptch1占主导地位.     

鼻咽癌P53基因点突变研究

（1）目的：探讨P53基因突变与鼻咽癌的关系。（2）方法：采用聚合酶链式反应－直接测序方法,对30例鼻咽癌和4例鼻咽部正常组织,6例慢性炎症组织的活检标本进行P53基因外显子5、6、7、8序列分析。（3）结果：慢性炎症和正常组织标本未发现;30例鼻咽癌患中,发现8例P53基因点突变,突变率26．67％,突变均分布在外显子8。（4）结论：鼻咽癌在其发生、发展过程中存在基因突变,因此,开展P53基因测序对鼻咽癌的诊断具有参考价值。