铜绿假单胞菌感染动态及所致院内感染的危险因素分析

本院12年来检出的铜绿假单胞菌,数量居各种细菌首位,且有逐年增多趋势。药敏结果:氧哌嗪青霉素最敏感,丁胺卡那霉素、庆大霉素敏感率逐年下降。各类送检标本中以痰的分布最多。铜绿假单胞菌所致院内感染危险因素调查表明,与住院时间、原发病生存期、用过呼吸机等器械、气管切开或留置导尿管诸因素密切相关。     

宽嗜性铜绿假单胞菌噬菌体的生物学特性及对临床菌株的嗜性覆盖研究

【目的】研究宽嗜性铜绿假单胞菌（PA ）的生物学特性,为临床控制PA感染提供思路。【方法】对5家医院下水道中分离出的PA噬菌体,采用双层琼脂噬菌斑形成法纯化后筛选出宽嗜性噬菌体,观察宽嗜性噬菌体的特征,绘制一步生长线,提取核酸行酶切分析。【结果】共分离出8株PA噬菌体,筛选出3株宽嗜性噬菌体,其中PAp-3表现出较宽的噬菌谱。电镜下PAp-3呈透明、圆形、边界清晰的菌斑;PAp-3基因组为23 kb ,当感染复数（MOI）为0．001时,其感染宿主产生子代PA噬菌体滴度最高,为6．4×10^10 PFU/mL ,感染宿主菌的潜伏期30 min ,爆发时间55 min ,裂解量100。3株宽嗜性噬菌体交叉组合对临床分离出的20株PA吞噬覆盖率为95．00％（19/20）。【结论】宽嗜性噬菌体具有较广的噬菌谱,潜伏期较短,裂解量大,交叉组合吞噬覆盖率高,可为噬菌体作为抗菌生物制剂提供依据。     

291株铜绿假单胞菌的分离及耐药性分析

目的分析导致临床感染的291株铜绿假单胞菌的来源分布及其耐药情况,为临床预防感染以及合理用药提供依据。方法采集来自我院各临床科室的送检标本,进行细菌学培养鉴定及药敏试验。结果铜绿假单胞菌以呼吸道和伤口分泌物为主要临床感染来源,抗感染药物中耐药率最高的是复方新诺明（89．69％）、替卡西林／克拉维酸（45．36）、奈替米星（41．92）,其耐药情况较严重。结论铜绿假单胞菌耐药情况均较严重,需高度重视,合理谨慎使用抗生素是延缓其耐药株快速升高的最好办法。     

临床分离铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌的耐药性及变化趋势。方法对2000年~2004年分离出的1405株铜绿假单胞菌选用16种抗生素采用K irby-Bauer纸片扩散法进行药敏试验,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准判断。结果铜绿假单胞菌最敏感的抗生素为美罗培南(总耐药率为15.3%),抗菌作用最差的抗生素为头孢曲松(总耐药率为64.1%)。铜绿假单胞菌对抗生素的耐药性呈逐年上升的变化趋势。结论加强耐药性监测,合理应用抗菌药物十分重要。     

临床分离铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌的耐药性及变化趋势。方法对2000年～2004年分离出的1405株铜绿假单胞菌选用16种抗生素采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行药敏试验,按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准判断。结果铜绿假单胞菌最敏感的抗生素为美罗培南（总耐药率为15．3％）,抗菌作用最差的抗生素为头孢曲松（总耐药率为64．1％）。铜绿假单胞菌对抗生素的耐药性呈逐年上升的变化趋势。结论加强耐药性监测,合理应用抗菌药物十分重要。     

铜绿假单胞菌的分离鉴定及药敏试验结果分析

目的探讨铜绿假单胞菌感染的标本来源、菌株分布及药敏情况。方法对本院自2004年8月至2006年7月期间送检的1875例标本进行细菌分离鉴定及药敏试验,选取其中的129株锕绿假单胞菌进行分析。结果在各种送检标本中,痰标本的铜绿假单胞菌检出率较高。药敏结果分析,对亚胺培南、头孢哌酮／舒巴坦、奈替米星较敏感。结论在临床治疗中,要合理使用抗菌药物,严格按照药敏试验结果用药。     

临床分离的铜绿假单胞菌耐药性检测

目的了解医院临床分离的铜绿假单胞菌的耐药情况,为合理使用抗菌药提供参考依据。方法采用琼脂扩散试验法,对临床分离的263株铜绿假单胞菌的耐药性进行了检测。结果 263株铜绿假单胞菌有63.12%分离自病人呼吸道标本,有21.67%分离自病人的尿和胸腹水标本。临床分离的铜绿假单胞菌对妥布霉素等14种常用抗生素不同程度耐药,对哌拉西林.他唑巴坦、环丙沙星等8种抗生素耐药率达到59%~85%。结论临床分离的铜绿假单胞菌主要来自病人呼吸道标本,对临床常用抗生素不同程度耐药,且耐药性日趋严重,应加强抗生素应用管理。     

侏儒型铜绿假单胞菌的鉴定

正铜绿假单胞菌为条件致病菌,是医院内感染的主要病原菌之一。多重药耐药铜绿假单胞菌在各地均有爆发和散发报道[1]。患代谢性疾病、血液病和恶性肿瘤的患者,以及术后或某些治疗后的患者易感染本菌。该菌在麦康凯琼脂平板上,可形成5种不同的菌落:(1)典型型;(2)大肠菌样型;(3)粗糙型;     

铜绿假单胞菌的分布及其药敏分析

选取2015年1月~2016年6月我院临床送检样本进行分离的铜绿假单胞菌感染357例。细菌鉴定应用VITEK-2Compact微生物鉴定仪及鉴定卡片,并且进行相应的药敏试验,对药敏结果做相应的归纳分析。结果铜绿假单胞菌在重症监护病房中分布最多,其次为神经外科病房,其比率分别为22.13%、17.09%,在感染部位的分布中呼吸道和泌尿系统分布较多,比率分别为58.26%、20.73%,其对头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星、头孢他啶的耐药率不足20%,对其他抗生素的耐药率均高于20%,其中替卡西林/克拉维酸耐药率最高为44.26%。铜绿假单胞菌在重症监护病房和神经外科病房较为多见,主要分离于下呼吸道痰标本和泌尿系统尿标本,药敏结果替卡西林/克拉维酸耐药率最高为44.26%,且出现了碳青霉烯类耐药情况,临床应加强对铜绿假单胞菌感染的监控和管理。     

铜绿假单胞菌感染现状及其耐药性分析

目的 了解铜绿假单胞菌在临床感染标本中的分离率及科室分布特征,并调查其耐药性变化趋势,为临床抗感染治疗提供科学依据.方法 细菌鉴定依据〈全国临床检验操作规程〉第三版进行.药敏试验采用（K-B法）纸片扩散法,并对208株铜绿假单胞药物敏感试验采用回顾性分析及汇总.结果 在分离的208株铜绿假单胞菌中,以痰液及支气管吸出物分离率最高,其次是脓液及尿液,临床科室分布以ICU为主,其次是呼吸内科及综合治疗病房,铜绿假单胞菌对常用抗菌药物耐药率均较高,对头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低（14.4%）,其次是亚胺培南（16.8%）,左氧氟沙星（37.9%）.结论 铜绿假单胞菌临床分布广泛,是常用抗菌药物耐药率较高,应加强预防感染及药敏检测.     

铜绿假单胞菌临床分离株耐药性监测

目的对临床分离的铜绿假单胞菌的分布情况及耐药特点进行统计分析,为临床合理选用抗菌药物及控制院内感染提供依据。方法采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏检测,资料用WHONET5.3软件进行统计分析。结果共分离获得144株铜绿假单胞菌,主要分离自痰液、创面分泌物和脓液标本中;对临床常用抗菌药物敏感性较好的分别是环丙沙星(85.4%)、美洛培南(85.2%)、亚胺培南(83.2%)、头孢他啶(80.6%)、阿米卡星(80%)和哌拉西林/他唑巴坦(80%)。结论本院铜绿假单胞菌是临床呼吸系统及创面分泌物重要感染源,其对临床常用抗菌药物耐药性逐年缓慢上升;对氟喹诺酮类、碳青霉烯类药物及阿米卡星仍维持较高的敏感性。在严重铜绿假单胞菌感染患者的治疗中,β-内酰胺类抗假单胞菌药加氨基糖苷类仍是较好的联合用药组合。应加强对耐药菌株的监控,尤其是耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的医院内感染,防止其流行扩散。     

Susceptibility of Pseudomonas aeruginosa strains isolated from hospitalized children

Pseudomonas aeruginosa strains, 1285 in total, were isolated from hospitalized children in the period 1981-1984. Serotypes 011 and 06 and nontypable strains were the most frequently identified. 44.6% of serotype 011 strains and between 12.4 and 37.7% of other serotypes were resistant to gentamicin, or carbenicillin, or both agents. The aminoglycosides with the highest activity against P. aeruginosa isolates were amikacin and netilmicin. Among the seven beta-lactam antibiotics tested the most active were cefsulodin, piperacillin and azlocillin.     

Genotypic analysis of Pseudomonas aeruginosa isolated from ocular infection

Pseudomonas aeruginosa is the causative pathogen of keratitis, conjunctivitis, and dacryocystitis. However little is known about their clinical epidemiology in Japan. In this study we investigated the genotypic characterization and serotype of P. aeruginosa isolates from ocular infections. Thirty-four clinical P. aeruginosa isolates were characterized according to infection type, the type III secretion system (TTSS), serotype, and multilocus sequence typing (MLST). We divided the isolates into four clinical infection types as follows: Contact lens (CL)-related keratitis (CL-keratitis; 15 isolates), non CL-related keratitis (non CL-keratitis; 8 isolates), conjunctivitis (7 isolates), and dacryocystitis (4 isolates). Regarding the TTSS classification and serotyping classification, no significant differences were found among the infection types. Two clusters (I, II) and three subclusters (A, B, C) were classified according to MLST. CL-keratitis isolates with exoU positivity were clustered in II-B, and conjunctivitis was clustered in cluster I. Some linkage was found between the genetic background and CL-keratitis or conjunctivitis.     

Serotyping of Pseudomonas aeruginosa isolated from clinical specimens.

Serotyping of 168 clinical isolates by the slide agglutination test using TIBS (Toshiba Institute of Biological Science) serotyping sera, which were prepared from Homma's serotype strains at the request of Pseudomonas aeruginosa Serotype Committee in Japan, was performed and the results were compared with serotyping using IMSUT (Institute of Medical Science, University of Tokyo) serotyping sera by the tube agglutination test. When heat-killed antigen from clinical isolates were used, both sets of serotyping sera showed similar results and the slide agglutination test using TIBS serotyping sera could be substituted for the tube agglutination test using IMSUT sera. It was also discovered that serotyping by the slide agglutination test with TIBS serotyping sera could be carried out using live bacteria. However, in serotyping with live bacteria, there is some difficulty in observing the agglutination time. To solve this problem, we propose that positive agglutination should be determined within 60 sec. The authors also performed serotyping of the clinical isolates using Difco serotyping sera prepared by the Difco Company based on Liu's serotyping system, and the results were compared with those obtained with serotyping sera prepared with Homma's serotype strains. The results indicated that in serotyping of clinical isolates using Difco serotyping sera more cross reaction occurred than in serotyping with sera obtained from Homma's serotype strains.     

Genotyping of Pseudomonas aeruginosa isolated from cockroaches and human urine

Molecular-epidemiological analysis of Pseudomonas aeruginosa isolated from cockroaches captured in hospitals and from patient urine was performed, employing randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis to investigate the usefulness of RAPD analysis. Four specific bands at positions of 993, 875, 521, and 402 bp were commonly detected using primer 272 in 16 of 45 cockroach-derived strains (35.6%), but not in 21 urine-derived strains. On analysis using primer 208, 4 specific bands at positions of 1,235, 1,138, 1,068, and 303 bp were commonly detected in 15 of the 45 cockroach-derived (33.3%) and 10 of the 21 patient urine-derived (47.6%) strains, in a total of 25 of 66 strains (37.8%). On cluster analysis, 12 (48.5%) and 16 (66.7%) clusters were grouped based on a homology of 89% or greater, using primer 272 and primer 208, respectively, showing that primer 208 was suitable for the confirmation of diversity. Seven patterns were clustered based on 100% homology using either primer, and 6 of these consisted of only cockroach-derived strains. In the individual groups with 100% homology, all strains in the group were isolated at an identical site during the same period. P. aeruginosa isolated from cockroaches showed diverse genotypes suggesting several sources of contamination, indicating the necessity for investigating infection control targeting cockroaches inhabiting hospitals.     

3株分离自内蒙古自治区的布鲁氏菌噬菌体生物学特性研究

目的 对3株分离自内蒙古自治区的布鲁氏菌噬菌体A1、NMY-1和NMY-2生物学特性展开分析,获取生物学信息。方法 采用双层平板法纯化、增殖噬菌体,观察噬斑特征及测定效价;使用透射电镜观察噬菌体形态;用双层平板法和点滴法测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线和理化稳定性。结果 经电镜观察,3株噬菌体均为二十面体结构,头部直径61.0 nm～65.6 nm,具有一个长为16.5 nm～19.2 nm短尾;在常规检测浓度(RTD)和10⁴×RTD下,噬菌体A1和NMY-1可以裂解光滑型牛种、羊种、猪种和沙林鼠种布鲁氏菌,NMY-2能够裂解粗糙型犬种、牛种和羊种布鲁氏菌,且在高浓度(10⁴×RTD)时可裂解的菌株数量增加;A1、NMY-1和NMY-2的MOI分别为0.1、0.001、0.01;一步生长曲线结果显示A1和NMY-2潜伏期约为30～60 min,暴发期20～40 min,暴发量分别为2 210蚀斑形成单位(PFU)/cell和6 000 PFU/cell,NMY-1的潜伏期和暴发期较长,分别为600 min和420 mi...     

神经外科病房铜绿假单胞菌流行株分析

目的：分析从本院神经外科病人临床标本中分离得12株铜绿假单胞菌的同源性；结合病史，了解铜绿假单胞菌的流行情况。方法：用Etest检测8种抗菌药物对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)值；通过WHONET5软件分析实验数据；抽提菌株DNA；采用以ERIC2为引物，随机引物扩增DNA片段长度多态性分析方法(RAPD)对菌株进行了同源性分析。结果：12株铜绿假单胞菌均呈现对多种抗生素的耐药性，RAPD分析显示，除11号标本外，其余菌株均有相同的条带数且在相同的位置上。结论：本院神经外科病人标本中分离的12株铜绿假单胞菌中右11株具有同源性。     

北京市昌平区农村饮用水中铜绿假单胞菌耐药性及分子流行病学特征研究

目的 了解北京市昌平区农村饮用水中铜绿假单胞菌耐药谱分布、致病性及分子流行病学特征,为该菌污染生活饮用水而引起介水传染病暴发及流行的防控提供参考。方法 按照GB/T 8538-2008进行菌株分离和鉴定,并对菌株进行药物敏感性试验、毒力基因检测及脉冲场凝胶电泳分型（PFGE）。结果 36株铜绿假单胞菌多分离于出厂水（27株）,对哌拉西林（PIP）、哌拉西林/他唑巴坦（TZP）、头孢他啶（CAZ）、头孢吡肟（FEP）、氨曲南（ATM）、亚胺培南（IPM）、美罗培南（MEM）、阿米卡星（AN）、庆大霉素（GM）、妥布霉素（TM）、环丙沙星（CIP）、左氧氟沙星（LEV）12种抗生素完全敏感。36株铜绿假单胞菌共有4种毒力基因谱（T1~T4）,T1型（lasI、lasR、rhlI、rhlR、toxA、plcH、rhlAB、lasB）为主要毒力基因谱（25株,69.44%）。36株菌有11个PFGE型别,其中0003、0010为本地区优势PFGE型别。结论 昌平区农村生活饮用水中铜绿假单胞菌主要分离于出厂水,无耐药性,主要PFGE型别为0003和0010,主要毒力基因谱为T1型。     

1414株铜绿假单胞菌临床分布与耐药性分析

目的：了解铜绿假单胞菌（PAE）感染的临床分布及耐药情况。方法采用VITEK2-compact检测系统对分离菌株进行鉴定和药敏试验检测,回顾性分析 PAE菌株临床分布特点及耐药性。结果共检出1414株PA E ,以痰液检出最多[1126株（79．63％）],其次为伤口分泌物[88株（6．22％）]。PA E对头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、哌拉西林／他唑巴坦、亚胺培南的耐药率分别为31．61％、22．98％、33．73％、14．07％、31．40％、31．61％、34．23％,对氨苄西林、呋喃妥因、头孢替坦、头孢唑啉、氨苄西林／舒巴坦、复方磺胺甲噁唑均高度耐药,耐药率大于95．00％。2012年妥布霉素、哌拉西林／他唑巴坦耐药率较2011年明显下降（ P＜0．05）。结论氨基糖苷类、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林／他唑巴坦、亚胺培南可作为治疗PA E感染的经验用药。