乙型肝炎患者HBV DNA定量与血清标志物的关系分析

目的分析乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物与HBV DNA定量之间的关系。方法分别采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光定量PCR（FQ-PCR）对391例乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性血清进行检测,分析检出率及相关性。结果391例HBsAg阳性血清共检出7种模式,以HBV DNA含量大于5×10^2copy／mL为阳性。HBsAg阳性（＋）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）（＋）、乙型肝炎核心抗体（抗-HBc）（＋）模式的阳性检出率较高,为96．9％,HBV DNA含量也较高,其中大于10^7copy／mL的血清为53．8％。HBsAg（＋）、抗-HBe（＋）、抗-HBc（＋）模式中阳性检出率为25．3％,171例（74．7％）HBV DNA含量小于5×10^2copy／mL。HBsAg（＋）、抗-HBc（＋）模式中阳性检出率为65．4％。结论HBsAg和HBV DNA联合检测,更能反映乙型肝炎患者HBV感染、传染性及体内复制情况。     

慢性乙型肝炎患者血清免疫学指标结果分析

目的对不同乙型肝炎病毒载量的慢性乙型肝炎患者的血清免疫指标进行结果分析,为临床提供更多的实验室信息,满足临床需求。方法使用实时荧光定量PCR仪检测120例临床已确诊的慢性乙型肝炎患者及40例健康体检者血清病毒拷贝数。将患者血清HBVDNA检测结果分为A、B、C3组,其中A组(40例):103～104copy/mL,B组(40例):105～106copy/mL,C组(40例):大于107copy/mL,健康对照组(40例):小于1.00×103copy/mL;采用免疫比浊法应用日立7600全自动生化分析仪分别检测每组血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体(C3、C4)以及超敏C反应蛋白(hs-CRP)指标。结果结果显示3组(患者组)血清IgG、补体C3水平分别与健康对照组比较,差异有统计学意义(P0.01);C组血清补体C4、hs-CRP水平与健康对照组比较差异有统计学意义(P0.01或P0.05);A组与C组间血清IgA水平比较差异有统学意义(P0.05),其余组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论血清IgG、补体C3指标可以作为反映肝脏损伤的敏感指标,将有助于临床诊断、治疗;通过患者组间比较发现血清免疫学指标的变化可能与乙型肝炎病毒载量的高低及肝组织损伤的严重程度无关,同时也为研究乙型肝炎的发病机制积累资料。     

慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA定量检测的临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA（HBV cccDNA）的临床意义。方法选取经肝组织病理学诊断的慢性乙型肝炎患者57例,其中乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性37例,HBeAg阴性20例;肝组织炎症轻度33例,肝组织炎症中度24例。采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）同时定量检测其血清HBVDNA和cccDNA。结果HBeAg阳性组血清HBV cccDNA对数值和阳性率分别高于阴性组,8.1±1.3vs6.5±1.9,73.0%vs30.0%（均P〈0.01）。肝组织炎症轻度组（G1～G2）血清HBVcccDNA对数值低于中度组（G3）,7.1±0.4vs8.5±0.4（P〈0.01）。血清cccDNA与丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶呈正相关（r=0.612、0.632,均P〈0.05）。结论血清HBVcccDNA为病毒复制的标志物,与肝组织细胞损伤相关。     

乙型肝炎病毒既往感染和HBsAg阴性慢性肝病患者定性和定量检测HBV-DNA的临床意义

我国是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发区，人群HBV感染率达60％左右，其中HBV携带率约占10％，不少研究表明，乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阴性的HBV病毒标志物阳性者中仍有少部分人为低水平HBV感染。我们对113例HBV既往感染者和34例HBsAg阴性慢性肝病患者进行了HBV-DNA定性和定量检测，并探讨其临床特点，现报告如下。     

723例HBsAg阳性血清HBV DNA定量分析

<正>乙型肝炎是乙型肝炎病毒(HBV)引起的常见传染病之一,HBsAg阳性是HBV感染的1个重要标志。临床诊断HBV主要依赖于HBV血清学标志物和HBVDNA定量检测。血清学标志物反映了病毒的表达水平,间接反映病毒的复制水平,对病因分析、疾病的进展和预后判断有不可替代的作用。HBVDNA定量测定采用荧光技术的闭管检测,具有高度的灵敏性和特异性,能更直接地反映出血清中HBV的存在以     

应用荧光定量PCR检测乙型肝炎DNA的临床分析

目前,乙肝诊断试验多选用ELISA法检测HBsAg。由于免疫法HBsAg检测敏感性较低,如果血清标志物出现在窗口期,或者乙型肝炎病毒存在低水平的复制,此时HBsAg滴度较低而用免疫法不易测出。同时,因为目前各医院广泛采用一步法进行检测及高滴度时易出现的HOOK效应,导致检测结果同临床不符合。而在乙型肝炎尤其是慢性乙型肝炎的诊断和治疗过程中,必须了解病毒在体内的复制状态。肝穿刺病理结合临床是目前乙肝防治规范中判断乙肝病毒复制对肝脏损害的最确切的方法,但该项实验有危险性。而HBV—DNA的检测可以克服其不足,已用于乙肝的临床诊断和治疗效果监测、流行病学调查、发病机制研究、     

慢性乙型肝炎HBV cccDNA的研究现状

HBV cccDNA一直是国内、外肝病界研究的热点,随着分子生物PCR技术的发展,对HBV cccDNA认识更加清晰。HBV cccDNA的产生是1个极其复杂的过程,合成受免疫细胞因子及其病毒包膜蛋白等一系列因素影响,对HBV cccDNA的形成尚未完全阐明。目前认为,它能够反映HBV抗病毒药物的应答情况,同时对抗病毒药物效果评价要优于其他指标,是衡量抗病毒疗效的主要指标,且能够评估慢性乙型肝炎预后。     

聚合酶链反应检测血透患者血清中HBV DNA的临床意义

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了４２例维持性血液透析患者血清标本的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，以评价ＰＣＲ技术在调查透析中心ＨＢＶ感染的流行病学方面的应用价值。结果在４２例标本中有１７例ＨＢＶＤＮＡ阳性（４０．５％），与常规血清标志物相比较，ＨＢｓＡｇ阳性者其ＨＢＶＤＮＡ阳性率为６０．９％，而全部血清标志物均阴性者其ＨＢＶＤＮＡ阳性率为１３．３％。提示：ＰＣＲ方法是监测中心透析ＨＢＶ传染的更灵敏、更可靠手段。它也是对ＨＢＶ变异类型的鉴别及疗效评价方面的一个重要方法。     

乙型肝炎病毒感染者HBeAg模式与病毒DNA水平相关性研究

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBeAg模式与HBV DNA水平之间的关系.方法 运用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测120例乙型肝炎患者血清中的HBV DNA,同时运用ELISA方法进行HBV血清标志物的检测,并对结果进行相关性探讨.结果 HBeAg阳性组血清HBV DNA检出率为87.9%(58/66),...     

聚合酶链反应检测血透患者血清中HBV—DNA的临床意义

乙型病毒性肝炎是维持性血液透析患者严重的感染并发症之一,它可以在患者之间交叉传播,引起透析中心肝炎的流行。而血清中HBV-DNA的存在,一直被看作是病毒复制的标志物,且与活动性肝病及传染性有关。本文采用聚合酶链反应(PCR)对透析中心42例维持性血液透析患者血清中HBV-DNA进行检测,并与常规血清标志物进行比较,以评价PCR方法在调查透析中心HBV感染的流行病学意义。 1 材料和方法 1.1 标本来源 维持性血透患者42例,男28例,女14例,平均年龄为45.3±10.8岁。透析治疗时间平均为     

慢性HBV感染者肝组织HBV cccDNA的定量检测

目的建立一种肝活检组织中HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）的定量检测方法。方法待检肝组织标本共21份，来源于江苏省人民医院肝脏手术患者，包括19份慢性HBV感染，其中HBeAg（＋）标本10份，HBeAg（-）标本9份，4份非HBV感染为阴性对照组，取HBVDNA阳性的患者外周血作为rcDNA组。检测方法的主要步骤为肝组织经蛋白酶K和细胞裂解缓冲液消化后，用液相抽提法提取核酸，将提取的核酸溶液分为2等份。1份用特异性降解单链DNA的核酸酶加以消化，纯化后使用跨缺口引物和SYBR GreenⅠ荧光染料进行实时荧光定量PCR分析；另1等份则用以定量检测肝细胞看家基因（β-Globin）作为样本细胞参数。检测结果的特异性主要通过PCR反应产物的序列分析及rcDNA组结果的对照进行证实，HBeAg（＋）组和HBeAg（-）组cccDNA水平的差异通过两样本t检验进行分析。结果PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析显示扩增产物的碱基数为350bp左右，DNA测序分析提示产物与目的片段的序列符合率为99％以上，且以rcDNA为对照的结果均为阴性，排除最有可能造成假阳性的rcDNA对结果的干扰。本方法对10mg HBeAg（＋）肝组织标本的cccDNA的检测阳性率为100％。血清HBeAg（＋）的肝组织样本的平均HBV cccDNA水平高于HBeAb（＋）的肝组织标本（P〈0．05）。结论通过上述三种途径证实了本文所建立方法的特异性。应用SYBR GreenⅠ荧光染料和β-Globin作为样本细胞参数所建立的实时荧光定量PCR方法检测肝细胞内HBV cccDNA，具有较高的特异性、敏感性，且成本较低的特点。     

乙型肝炎患者血清中HBV cccDNA与HBV DNA、HBsAg和HBeAg定量关系的分析

目的定量检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）、HBV DNA、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎e抗原（HBeAg）并分析其相互关系,探讨定量检测血清中HBV cccDNA的临床应用价值。方法随机选取HBV感染者83例,采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测血清中HBVcccDNA及HBV DNA,同时采用化学发光法定量检测血清中HBsAg和HBeAg。结果 83例患者中HBV DNA阳性62例,其中HBV DNA载量≥105拷贝/mL者40例,血清HBV cccDNA阳性28例（70.00%）;HBV DNA载量〈105拷贝/mL者22例,血清HBV cccDNA阳性2例（9.09%）,不同DNA载量组HBV cccDNA差异有统计学意义（P〈0.01）。HBeAg阳性组和阴性组HBV cccDNA阳性率分别为70.00%（28/40）和4.65%（2/43）,两组差异有统计学意义（P〈0.01）。HBV cccDNA定量值与HBV DNA、HBsAg呈正相关（P〈0.01）。结论血清中HBV cccDNA水平可同时反应血清HBV DNA和HBsAg水平,血清HBV cccDNA含量可作为观察HBV复制情况和评价抗病毒疗效的相关血清指标。     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞和血清中HBV-DNA含量与HBVM间关系的探讨

目的探讨乙肝患者外周血单个核细胞和血清中HBV-DNA含量及其与HBVM之间的关系。方法67例乙肝患者为检测对象,36健康献血者为对照组,分别用FQ-PCR定量测定,内对照法定量测定血清HBV-DNA。免疫荧光定量测定HBVM。结果外周血单个核细胞HBV-DNA检出阳性率为67．2％（45／67）,与血清的符合率为80．7％,但慢性乙肝患者外周血单个核细胞HBV-DNA检出率高于血清,且与病情呈正相关。结论三个指标的联合检测有助与反映肝细胞病毒复制情况。对进一步指导抗病毒治疗有一定意义。     

初诊慢肝患者血清中乙肝病毒DNA载量与血清标志物的关系

目的探讨初诊慢性乙型肝炎血清标志物与HBV DNA的关系。对象与方法采用酶联免疫方法和荧光定量聚合酶链反应分别对512例不同乙肝病人及202例HBeAg阴性、257例HBeAg阳性慢肝病人进行血清标志物、HBV DNA定量检测并分析结果。结果慢肝组有315例(68.9%)病毒颗粒浓度高于107,肝硬化组7例(13.2%)病毒颗粒浓度高于107;HBeAg阳性慢肝组245例(95.3%)患者病毒颗粒含量高浓度,HBeAg阴性慢肝组68例(33.7%)患者病毒颗粒含量在105-7copy/mL区段。结果慢肝组与肝硬化组相比,高浓度病毒以慢肝组中最明显,病情发展至肝硬化期病毒含量多数不高;慢肝病人中不同乙肝血清标志物模式其病毒含量分布特点不同,与HBeAg阳性慢肝组相比HBeAg阴性组体内病毒复制水平低(p<0.01),传染性较前者弱。最常见前C区突变,导致HBeAg阴性CHB病情加重和病毒复制增加。     

慢性乙型肝炎患者血清中HBeAg、HBsAg与HBV-DNA的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清中HBeAg、HBsAg与乙肝病毒HBV-DNA之间的关系。方法选取655例HBsAg阳性的慢性乙型肝炎患者血清标本,用微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测HBeAg、HBsAg,用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV-DNA。结果在HBeAg阳性标本中,HBV-DNA阳性率为64.64%;HBeAg阴性标本中,HBV-DNA阳性率为36.61%,二者差异有统计学意义(P0.01)。不同浓度组HBeAg和HBV-DNA检测结果比较,差异有统计学意义(P0.01)。不同载量HBV-DNA组,HBeAg差异有统计学意义(P0.01),且随HBV-DNA含量增加而增加;HBsAg差异也有统计学意义(P0.01),但随HBV-DNA含量增加而降低。结论同时检测HBV-DNA与HBeAg能更好地用于临床诊断与疗效观察,HBeAg随着HBV-DNA拷贝数的增加而增加,而HBsAg却呈下降趋势。     

HBV感染者IL-4水平变化及与临床的相关性

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血白细胞介素4(IL-4)水平变化及与临床的相关性。方法收集60例HBV携带者(ASC组)、60例慢性乙型肝炎患者(CHB组)、60例乙型肝炎肝硬化患者(LC组)、60例原发性肝癌患者(HCC组)和50例健康对照者(健康对照组)空腹血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测血清IL-4水平;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR法)检测血清HBV DNA载量;应用全自动生化分析仪检测血清肝功能水平。结果与健康对照组[(1.64±0.17)ng/mL]比较,HBV感染者CHB组、LC组和HCC组外周血IL-4水平均显著升高[(4.18±0.48)、(4.71±0.42)、(3.62±0.31)ng/mL,P0.05],其中LC组最高,ASC组最低;与ASC组相比,CHB组、LC组和HCC组外周血IL-4水平均显著升高(P0.05);与HCC组相比,LC组外周血IL-4水平均显著升高(P0.05);LC组患者IL-4水平与总胆红素(TBIL)水平呈正相关(r=0.529,P0.01);HCC组患者IL-4水平与丙氨酸氨基转移酶(ALT)和TBIL水平均呈正相关(r=0.263、0.323,P0.05)。结论 IL-4在HBV发生、发展过程中可能起重要作用,检测其外周血水平可作为评估慢性乙型肝炎病情严重程度的重要指标。     

HBeAg转阴前后慢性乙肝患者HBV cccDNA荧光定量检测的意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)cccDNA检测的意义。方法检测乙型肝炎患者乙肝e抗原(HBeAg)转阴前后肝组织HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)、血清HBV DNA。用实时荧光定量PCR方法检测HBV DNA、cccDNA水平,通过质粒保护型的DNA酶对提取的DNA模板进行酶切处理,再分别进行HBV DNA和cccDNA的定量检测。结果HBeAg转阴前,慢性乙肝患者总HBV DNA水平和cccDNA水平呈正相关(r=0.911,P0.01);而HBeAg转阴后,血清HBV DNA水平和肝组织cccDNA水平的检测不一致。结论 HBV cccDNA可作为反映慢性乙肝患者抗病毒治疗预后的指标。     

慢性乙肝患者HBeAg和HBV-DNA载量与ALT水平相关性探讨

目的探讨慢性乙肝患者血清中乙型肝炎e抗原(HBeAg)和乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量与丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的关系,为临床诊治提供参考。方法收集380例慢性乙肝患者标本采用ELISA法进行HBeAg检测,血清HBV-DNA定量采用实时荧光定量PCR法,ALT采用全自动生化法。结果Ⅰ组与Ⅱ组HBeAg阳性率差异无统计学意义(P=0.052)。Ⅰ、Ⅱ组分别与Ⅲ组比较,HBeAg阳性率差异均有统计学意义(P<0.01)。HBV-DNA载量与ALT水平存在一定的关联(P=0.000),等级相关系数为0.398。结论慢性乙肝患者不能单靠某项检验指标来判断是否进行抗病毒治疗,在决定是否需抗病毒治疗时,需联合、动态检测这些指标。     

慢性乙型肝炎患者 HBV-DNA 水平与肝纤维化相关指标的检测与相关性分析

目的：探讨慢性乙型肝炎患者血清 HBV-DNA 水平与肝纤维化血清指标之间的关联。方法用实时荧光定量 PCR法检测 HBV-DNA 水平、用化学发光法检测肝纤维化指标：透明质酸、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白。结果110例乙型肝炎患者血清 HBV-DNA 水平（对数值）为5．32±1．37,透明质酸水平为（197．81±85．37）mg/mL,Ⅲ型前胶原水平为（142．66±30．28）μg/mL,Ⅳ型胶原水平为（90．34±20．53）μg/mL,层粘连蛋白水平为（143．96±31．79）μg/mL,均高于对照组（P ＜0．01）。患者血清 HBV-DNA 水平与肝纤维化4项血清指标之间的相关性较弱,无统计学意义（P ＞0．05）。结论慢性乙型肝炎患者肝纤维化4项血清指标上升,但患者血清 HBV-DNA 水平与肝纤维化血清指标检测值之间没有显著的相关性。