TRIM58通过抑制WNT/β-catenin通路参与脂多糖诱导的足细胞损伤

目的探讨TRIM58在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的足细胞损伤中的作用及其分子机制。方法将体外培养的永生化人足细胞分成4组:正常对照组(Control),LPS刺激组(LPS),TRIM58过表达+LPS组(OE-TRIM58+LPS),空载体+LPS组(OE-NC+LPS)。通过ELISA检测炎性分子IL-1β、TNF-α的表达;通过real-time PCR、Western blot、免疫荧光检测足细胞Desmin、ZO-1的表达;通过Transwell检测足细胞迁移能力;通过real-time PCR、Western blot检测TRIM58的表达;通过Western blot检测调控TRIM58对β-catenin表达的影响。结果 LPS刺激后,炎性因子IL-1β、TNF-α的表达明显升高,足细胞Desmin蛋白和mRNA表达明显上调,ZO-1蛋白和mRNA表达明显下调,TRIM58的蛋白和mRNA表达下调,同时伴有β-catenin的表达升高。Transwell结果表明,LPS刺激下足细胞迁移能力明显增强。过表达TRIM58可明显减轻LPS诱导的炎性细胞因子IL-1β、TNF-α的释放,抑制上皮间充质转化和足细胞迁移能力,缓解足细胞损伤。此外,TRIM58过表达可下调LPS诱导的β-catenin的表达。结论 LPS刺激可下调TRIM58的表达,而过表达TRIM58可能通过抑制WNT/β-catenin通路,减轻LPS诱导的足细胞炎性反应和EMT,从而缓解足细胞损伤。     

PLK1靶向β-catenin介导慢性肾脏病炎症状态下足细胞转分化

目的探讨慢性肾脏病微炎症状态下PLK1(polo-like kinase 1)在足细胞上皮-间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用机制。方法以条件永生化小鼠足细胞系为研究对象进行分组:正常对照组;脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导组;PLK1 shRNA组(PLK1 shRNA+LPS)及Scramble shRNA组(Scramble shRNA+LPS)。利用Real-time PCR、Western blot检测足细胞中PLK1、结蛋白(desmin)mRNA及蛋白表达水平;Western blot检测PLK1对β-链蛋白(β-catenin)的作用;Western blot检测EMT相关分子E-钙粘素(E-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达;Western blot检测糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的水平;Transwell迁移实验检测足细胞迁移能力。结果 LPS诱导炎症状态下,足细胞PLK1 m RNA及蛋白表达升高伴随β-catenin上调,同时,GSK-3β表达降低,vimentin呈现高表达,而E-cadherin呈现低表达;PLK1 shRNA转染足细胞可特异性敲低PLK1表达,下调β-catenin,伴随GSK-3β表达增加,逆转足细胞EMT的发生;且炎症状态下,足细胞Desmin表达增加;Transwell显示足细胞迁移能力增强。结论 LPS刺激可导致足细胞PLK1高表达,其可能通过负向调控β-catenin降解复合物(axin/GSK-3/APC)从而稳定β-catenin的表达,继而下调Vimentin,导致足细胞损伤及EMT的发生。     

突触孔蛋白和细胞色素C在棕榈酸诱导足细胞损伤中的表达及意义

目的探讨细胞骨架蛋白突触孔蛋白(synaptopodin)和细胞色素C(Cyt C)在棕榈酸所致足细胞损伤中的表达及意义。方法体外培养小鼠肾足细胞,分为正常对照组和棕榈酸组。各组细胞分别培养24h、72h和120h。应用MTT方法检测棕榈酸干预后足细胞活性的变化。应用免疫荧光及免疫印迹法检测棕榈酸干预后足细胞中synaptopodin和Cyt C蛋白的表达变化。结果与正常对照组相比,棕榈酸组足细胞活性明显下降,且呈时间依赖性。棕榈酸可上调足细胞中Cyt C蛋白的表达,并下调synaptopodin的表达。结论棕榈酸可诱导足细胞中Cyt C蛋白释放以及细胞骨架蛋白synaptopodin异常表达,可能参与了足细胞损伤。     

miR-155 在TGF-Ｂ1 诱导足细胞损伤中的表达及其与synaptopodin、 CD2AP 表达的相关性

目的:探讨TGF-β1诱导的足细胞损伤中miR-155的表达变化及其与足细胞损伤的关系。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞,用TGF-β1刺激足细胞构建足细胞损伤模型,用CCK8法检测各浓度梯度(0、4、8、12 ng/ml)、时间梯度(0、24、48、72 h)的细胞增殖活性。实时荧光定量PCR技术检测足细胞损伤模型中synaptpotodin、CD2AP mRNA及miR-155的表达。Western blot法检测足细胞损伤模型中synaptpotodin、CD2AP蛋白的表达。结果:一定浓度的TGF-β1可抑制足细胞增殖,降低细胞存活率(P 0. 05)。TGF-β1诱导的足细胞损伤模型中miR-155表达水平上调(P 0. 05),TGF-β1诱导足细胞损伤后,可引起synaptpotodin、CD2AP mRNA和蛋白表达水平下调,且与miR-155表达水平呈负相关(P 0. 05)。结论:miR-155表达上调与TGF-β1诱导的足细胞损伤有关,可能作为足细胞损伤诊断和治疗的靶点。     

TRPC6 突变致足细胞病变机制的研究进展

瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 (transient channel receptor potential cation 6, TRPC6) 是肾脏足细 胞裂孔隔膜 (slit diaphragm, SD) 的重要组成蛋白之一, 与肌动蛋白、 足细胞表面蛋白以及其他裂孔隔膜 蛋白分子相互作用, 共同维持足细胞的正常功能。 TRPC6 过表达或过度活动导致细胞内钙超载而损伤足细 胞。 目前报道 TRPC6 基因致病突变可导致局灶节段性肾小球硬化症。 近来研究发现, TRPC6 与以蛋白尿为 主要表现的肾小球疾病的发生发展密切相关, 但尚无特效靶向药物应用于临床。 文章主要对 TRPC6 基因突 变致足细胞病变的分子机制以及 TRPC6 基因型与临床表型之间的关系进行了综述。     

TLR与足细胞损伤

TLRs是一类重要的模式识别受体家族,主要调节天然免疫反应.研究发现在肾脏固有细胞及间质细胞都有TLR表达,其介导的炎症反应参与了许多肾脏疾病的发生.多种足细胞标志蛋白的发现加快了足细胞表面分子的研究进程.目前已发现足细胞表面有TLR的表达,且TLR的表达与足细胞的损伤有关.文章综述了已经发现的TLR成员及其与足细胞损...     

一氧化氮合酶在高脂足细胞损害中的作用及辛伐他汀的保护作用

目的： 探讨高脂对肾小球足细胞的损害作用及这种损伤作用是否与NOS活性降低、NO合成障碍有关，明确辛伐他汀对高脂足细胞的保护作用。方法: 高脂饲料喂养大鼠建立高脂模型，观察不同时点正常组、高脂组、吗多明组、辛伐他汀组大鼠血脂、尿蛋白、肾组织病理学改变；运用免疫组化技术检测足细胞损伤标志-结蛋白表达，并进行相关性分析；运用免疫印迹检测nNOS蛋白表达。结果: 于4周时高脂组、吗多明和辛伐他汀干预组大鼠血脂水平明显高于正常组（P<0.01），辛伐他汀组于各时点较高脂组有显著降低（P<0.01），而吗多明组其血脂水平与高脂组差异无显著（P>0.05）；电镜下高脂组4周时已有足细胞发生足突融合，且随时间延长损伤加重，而辛伐他汀组损伤明显减轻；4周时高脂组大鼠desmin蛋白表达明显增加（P<0.01），随时间延长desmin蛋白表达逐渐增加，而辛伐他汀组表达明显低于高脂组，高于正常组（P<0.01）；高脂组、吗多明和辛伐他汀干预组尿蛋白在6周起才出现明显增加（P<0.01），且辛伐他汀组又显著低于高脂组（P<0.01）;nNOS蛋白表达在高脂组和辛伐他汀组明显低于正常组（P<0.01），而辛伐他汀组表达又显著高于高脂组（P<0.01）。结论: 高脂血症可在蛋白尿发生前导致足细胞损伤,高脂状态下足细胞这种损伤，与NOS活性降低、NO不足有关，而外源性NO供体和辛伐他汀能保护足细胞，减轻这种损伤。     

足细胞自噬与蛋白尿

终末期分化的足细胞,也称肾小球脏层上皮细胞,是一种高度特殊的细胞,起关键性机械及电荷屏障作用,阻止蛋白尿的发生。在肾疾病中足细胞受损,其标志性的临床特征即蛋白尿。然而,足细胞损伤的发生机制尚未完全阐明,本文对足细胞自噬与足细胞损伤及所致蛋白尿的可能机制作一综述。     

硫化氢对高糖诱导的小鼠足突细胞损伤的影响*

 目的： 观察硫化氢对高糖诱导的小鼠足突细胞损伤的影响并探讨其作用机制。方法: 将体外培养的小鼠足突细胞系MPC5分为高糖组、正常糖组、正常糖+DL-炔丙基甘氨酸(PPG)组和高糖+NaHS组。处理后,用Western blotting检测各组细胞胱硫醚γ-裂解酶（CSE)、紧密连接蛋白2（ZO-2）、裂孔蛋白（nephrin）及β-连环蛋白（β-catenin）蛋白水平表达差异。结果: （1）高糖显著降低CSE、nephrin和ZO-2表达（P＜0.05）,而β-catenin的水平明显增高（P＜0.05）,4种蛋白变化均表现出时间依赖性;（2）正常糖培养加不同浓度PPG可显著抑制ZO-2和nephrin的表达（P＜0.05）,显著提高β-catenin的水平（P＜0.05）,3种蛋白变化呈浓度依赖性;（3）高糖诱导的足突细胞加NaHS培养后,ZO-2和nephrin表达可部分恢复（P＜0.01）,β-catenin表达可被部分抑制（P＜0.01）。结论: 本研究结果提示高糖诱导的足突细胞CSE表达降低可能是足突细胞损伤的重要机制之一。而外源性硫化氢对高糖诱导的足突细胞损伤具有一定保护作用,其机制可能与增加ZO-2表达、抑制Wnt/β-catenin通路有关。     

突发性成批伤、灾害伤的早期救治

突发性成批伤、灾害伤是一个群体性事件,是指在没有准备的情况下,同一时间、同一地点、同一致伤原因引起的多人伤害,具有突发性、人数多、病情复杂、救治难度大等特点。近年来各类突发事件不断发生,全球每年死伤人数在数千万人以上。对于此类灾害的医学救援,笔者认为专业技术力量前伸至受灾现场、协助拣伤分类及现场急救;区域性灾害救援网络及通讯网络的组建;急救现场及运输途中早期救治的详实记录;入院后的再次伤情甄别,频繁和持续地复查和再评估;对危重伤员实行专组管理、责任到人;实施灾后早期心理干预及提升灾前备灾阶段医疗资源的储备能力等措施,可以更好地应对突发灾害事故,提高救治效率和质量。     

踝关节Logsplitter损伤的影像学特征与损伤机制的研究

目的 总结高能量踝关节骨折Logsplitter损伤的影像学表现及踝关节周围各解剖结构的损伤特征,探讨Logsplitter损伤的发生机制。方法 回顾性分析2009年4月-2018年12月西安交通大学附属红会医院足踝外科62例Logsplitter损伤患者的影像资料。其中男44例、女18例,年龄21~69(42.3±11.7)岁,左侧27例、右侧35例。提取术前X线和CT影像,分析腓骨损伤、胫骨损伤、下胫腓联合损伤、踝关节内侧损伤及外侧韧带损伤的特征及其不同损伤类型在本组Logsplitter损伤中的占比;结合踝关节骨折的Lauge-Hansen分型,分析不同踝关节骨折类型在本组Logsplitter损伤中的占比。结果 腓骨损伤特征:横行或短斜形骨折占61.3%(38/62),存在蝶形骨块占25.8%(16/62),粉碎性骨折占11.3%(7/62),腓骨无骨折占1.6%(1/62)。胫骨损伤特征:外侧关节面压缩占38.7%(24/62),合并后侧压缩占6.5%(4/62);内侧损伤包括内踝骨折占87.1%(54/62),三角韧带断裂占12.9%(8/62)。下胫腓联合损伤特征:单纯韧带断裂占11.3%(7/62),合并Tillux结节撕脱骨折占8.1%(5/62),合并Volkmann结节撕脱骨折占43.5%(27/62),同时合并Tillux结节与Volkmann结节撕脱骨折占37.1%(23/62);合并踝关节外侧副韧带完全断裂占12.9%(8/62)。根据Lauge-Hansen分型显示,其中旋前外展损伤占87.1%(54/62),旋前外旋损伤占8.1%(5/62),旋后外旋损伤占1.6%(1/62),无法分类的占3.2%(2/62)。结论 Logsplitter损伤的影像学特征多样化,在严重骨折脱位的同时,可合并侧副韧带损伤;损伤机制以外展位垂直暴力最为多见,部分也可为外旋位垂直暴力所致。     

Iatrogenic hepatic injury

Liver injury produced by therapeutic drugs is common, and has been increasing in incidence. Drug induced injury can mimic almost all varieties of liver disease. These conditions include cholestasis, steatosis, granulomas, acute and chronic hepatitis, cirrhosis, vascular disorders, and tumors. When confronted with a patient suffering from liver disease, it is imperative for the physician to obtain an accurate history of drug administration.