酶联免疫印渍法检测脑囊虫病人循环抗原的研究

用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测脑囊虫病人血清中ＣＡｇ，并与ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ进行了比较，其阳性率分别为８９．２％和８１．１％，４０例正常人，３０例单纯绦虫病患者及２９例包虫病人血清，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测囊虫ＣＡｇ除１例包虫病患者呈轻度交叉反应外均为阴性，结果表明本方法具有高特异性与敏感性，对５７例接受阿苯达唑治疗的脑囊虫病人，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ及ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ于治疗后１年内检测血清中ＣＡｇ     

单克隆抗体Dot-ABC-ELISA检测包虫病人循环抗原

作者用活化生物素标记抗细粒棘球蚴抗原单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１Ｄ８，以聚氯乙烯（ＰＶＣ）白色薄膜凹孔板为载体，建立了ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ检测包虫病人循环抗原的方法。测定人源包虫囊液抗原的灵敏度为６ｎｇ／３μｌ样品．９２例确诊包虫病人血清循环抗原检出率为７６．１％（７０／９２），在抗体阳性者中循环抗原检出率为８１．６％（６２／７６），抗体阴性者中检出率为５０％（８／１６）。１００份正常人和１２２份羹虫病等其它寄生虫病人血清，仅１份囊虫病人血清出现交叉反应．测定循环抗原对包虫病人，尤其是血清抗体阴性者的免疫诊断有重要价值．本法简便、快速，适于推广．     

识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用于检测循环抗原的研究

作者获得１株特异的抗血吸虫成虫２０－２４ｋＤａ蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株（ＳｊＡ１１１）。分泌ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１,腹水效价１．２×１０６。将ＳｊＡ１１１ＭｃＡｂ－ＨＲＰ结合物用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测４９９例慢性血吸虫病患者的循环抗原（ＣＡｇ）,阳性者３９０例（７８．１６％）;２５例肺吸虫病人,３６例华支睾吸虫病人及１３２例正常人血清中,仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。ＣＡｇ的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值（ＧＭＲＴ）随着每ｇ粪便虫卵数（ＥＰＧ）的增加而递增。吡喹酮治疗后各期病人粪孵阴性者ＣＡｇ的转阴率：半年为７５．５０％（１１４／５１）,１年为７３．６８％（８４／１１４）,１年半为８８．０４％（１０３／１１７）。     

金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫…

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针，以抗猪囊尾蚴抗原的ＭｃＡｂ为联桥，建立了非常规Ｄｏｔ－ＩＧＳ用于检测脑囊虫病患者ＣＡｇ的方法，用４Ｇ２ＭｃＡｂ检测８４例脑囊虫病人，１３例检出ＣＡｇ，阳性率为９２．８６％。检测其他疾病患者３６例，均为阴性。用４Ｇ２与１Ｆ１１株ＭｃＡｂ可分别检出最小抗原量为１ｎｇ／ｍｌ和０．２５ｎｇ／ｍｌ。本法敏感、特异、操作简单，可用于脑囊虫病的诊断。     

检测血清和脑脊液中囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫 …

目的：用抗血清检测脑囊虫病患者血清和脑脊液（ＣＳＦ）中囊尾蚴循环抗原（ＣＡｇ）诊断脑囊虫病。方法：用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ提纯的蛋白质分子量为６４ｋＤａ、５３ｋＤａ、３２ｋＤａ～３０ｋＤａ的囊尾蚴抗原分别免疫家兔,制备相应的抗血清,以双夹心ＥＬＩＳＡ 检测患者血清和ＣＳＦ中ＣＡｇ。结果：抗原体５３ｋＤａ抗原抗血清对３２例脑囊虫病活动型患者血清和ＣＳＦ中ＣＡｇ的检出率分别为９３．８％和９１．７％,１６例脑     

识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用…

作者获得１株特异的抗血吸虫成虫２０－２４ｋＤａ蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株，分泌ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，腹水效价１．２×１０＾６。将ＳｊＡ１１１ ＭｃＡｂ－ＨＲＰ结合物用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测４９９例慢性血吸虫病患者的循环抗原，阳性者３９０例（７８．１６％）；２５例肺吸虫病人，３６例华支睾吸虫病人及１３２例正常人血清中，仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。ＣＡｇ的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值（ＧＭＲＴ）     

单克隆抗体Dot－ELISA检测包虫病人循环抗原的研究

用单克隆抗体－斑点酶联免疫吸附试验（ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测４６例确诊包虫病患者血清循环抗原,３５例呈阳性反应,阳性率为７６．０９％。１４例猪囊虫病人,５０例健康人血清均为阴性,上述结果表明本方法具有较好的敏感性和特异性,而且操作简便,试剂用量少,肉眼判断结果,可用于包虫病的诊断和疗效考核。     

Dot-IGSS,Dot-IGS和Dot-ELISA检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的比较研究

应用自制的直径２０ｎｍ的胶体金标记ＧＡＲ－ＩｇＧ，以斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）、斑点免疫金染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种方法，同时检测９９例脑囊虫病人脑脊液（ＣＳＦ）中循环抗原（ＣＡｇ），阳性率分别为９４．９５％、９３．９４％和９２．９３％。检测５１份非囊虫病患者和６２例其他脑部疾病患者的ＣＳＦ，三种方法均为阴性。诊断指数分别为１９４．９５％、１９３．９４％和１９２．９３％。检出ＣＡＳ的最小量Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为２４４ｎｇ／ｍｌ．Ｄｏｔ－ＩＧＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为４８８ｎｇ／ｍｌ。试验表明三种方法诊断脑囊虫病具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行．有希望用于脑囊虫病的临床诊断。     

应用McAb法检测包虫病人尿液抗原

用ＭｃＡｂ－Ｓａｎｄｗｉｃｈ－ＥＬＩＳＥ（夹心法）及ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（点免疫法）同步检测了４６例包虫病人及４２例正常人的不同抗原样品,结果表明：ＭｃＡｂ夹心法对患血清,尿液抗原阳性检出率分别为：８０．４３％、７８．２６％,明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）,且血清与尿液抗原检测结果无差别（Ｐ〉０．０５）,具有相关性（Ｐ〈０．０５）;点免疫法抗原检出率分别为７３．９１％、５８．７９％。两法     

western blot 法诊断囊虫病的应用研究

目的：探讨四种猪囊尾蚴（Ｃｙｓｔｉｃｅｒｃｕｓｃｅｌｕｌｏｓａｅ）特异性抗原ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１、ｃＨ１（分子量分别为２８ｋＤａ、１８ｋＤａ、１４ｋＤａ、３４ｋＤａ）混合应用诊断人囊虫病的价值。方法：以猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷酶－猪囊虫特异性抗原ｃＤＮＡ编码的融合蛋白（ｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＦＰ）为抗原，作简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ（ｉｍｐｒｏｖｅｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ＩＷＢ）分析，检测１０７例囊虫病、４０例华支睾吸虫病、２４例包虫病和３４例健康人血清对融合蛋白的反应。同时应用粗制抗原（ｃｒｕｄｅａｎｔｉ－ｇｅｎ，ＣＡ）进行ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ对比检测。结果：在简化Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测中，ＦＰ被１０７例囊虫病患者血清中９４例（８７．９％）血清所识别，与华支睾吸虫病、包虫病患者及健康人血清无交叉反应，特异性为１００％。以粗制抗原作ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ检测囊虫病人血清中的ＩｇＧ抗体阳性率分别为８４．１％和７４．８％，与华支睾吸虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为２．５％、１２．５％；与包虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为８．３％、１６．７％；与健康人血清也存在交叉反应, 假阳性率分别为8. 8%、11. 8% 。结论: β－半乳糖苷酶2猪囊尾蚴FP 诊断囊虫病具有较高敏感性和高度的特异性。     

脑脊液中弓形虫循环抗原的组分分析

本文在国内首先应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ对弓形虫循环抗原（ＣＡｇ）阳性脑脊液标本进行抗原组分分析，并用正常人脑脊液、ＲＨ株弓形虫速殖子的代谢抗原（ＭＡ）及细胞质抗原（ＣＡ）作为平行对照。结果显示，脑脊液及ＲＨ株ＭＡ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白区带范围均在１４～１０８ｋＤ处，在３８～６７ｋＤ处有明显的电泳区带。ＥＬＩＢ反应后均在５０ｋＤ处出现明显的反应区带。从而证实，脑脊液标本中的ＣＡｇ为弓形虫虫体在宿主体内增殖的代谢及裂解产物。同时提示，酶联免疫印迹技术（ＥＬＩＢ）可代替弓形虫的病原学检查，以作为弓形虫病急性、活动性感染的确诊指标。     

包虫病患者循环抗原检测中血清不同处理方法的比较研究

本文比较了在包虫病人循环抗原检测中，数种血清不同处理方法。结果证实，在检测包虫病人循环抗原时，预先用胰蛋白酶消化可以使血清免疫复合物中的循环抗原较彻底地游离。用３．５％聚乙二醇沉淀血清中的免疫复合物，再以１％胰蛋白酶消化，较不处理组敏感性提高６倍，较传统的酸解组增加４倍多。另外，将处理血清的稀释液中氯化钠浓度加大，或将血清用１０％牛血清白蛋白孵育，可明显降低本底值，Ｐ／Ｎ值可分别提高１．２倍和１．３倍。     

231例脑囊虫病患者脑脊液中循环抗原检测分析

本文报告应用抗猪囊尾蚴单克隆抗体４Ｆ８－ＥＬＩＳＡ对２３１例脑囊虫病患者脑脊液中循环抗原检测的结果。经与患者病史、临床分型和脑ＣＴ检查结果比较，发现脑脊液中ＣＡｇ与有无绦虫史无关。脑型合并皮下结节患者脑脊液中ＣＡｇ的阳性率明显高于单纯型脑囊虫病和皮下结节消失组的患者。ＣＡｇ检测的结果与囊尾蚴和脑部寄生的数量，病灶的新旧与部位等病理情况有关。表明ＭｃＡｂ（４Ｆ８）－ＥＬＩＳＡ不仅可用于脑囊虫病的诊断     

单克隆抗体检测囊虫病人循环抗原及其在疗效考核中的应用

用单克隆抗体致敏绵羊红细胞作反向间接血凝试验，检测７７例囊虫病人血清循环抗原，阳性率为６４．９％；３０例正常人血清的假阳性率为０；２２例华支睾吸虫病人、２４例包虫病人和１７例弓形虫病人的交叉反应率分别为４．６％、４．２％和１１．８％。结果表明，该法较为敏感、特异，且稳定可靠、简单易行，尤适于在基层医疗单位推广应用。检测经治疗１～１０个疗程囊虫病人血清中循环抗原和抗体，发现随着疗程的增加循环抗原的消失明显快于抗体，且大部分患者的循环抗原和其临床症状、体征同时消失。表明循环抗原的检测对囊虫病的诊断和疗效考核有一定的实用价值。     

Relevance of circulating antigen detection to follow-up experimental and human cystic hydatid infections

We analysed specific antibody (Ab) and circulating antigen (CAg) profiles along experimental mouse infection using as control a group of mice immunized with intact but dead parasites. Results from this experiment showed an early major CAg peak followed by a larger Ab peak which partially overlaps with other minor CAg peaks. These results suggest that CAg may be a marker of early mouse infection. In order to study the relevance of these findings in humans we similarly analysed by ELISA 148 sera provided by retrospective post-surgical follow-up of 19 patients. Available records showed that 14 patients developed new cysts one to ten years after surgery while no new disease was observed in the other five. Some of the former patients showed CAg as early as two months after surgery while no CAg was observed in the other five patients at any time. In addition, a collection of 38 sera obtained before surgery were similarly tested and five of them showed only CAg, while 18 showed only Ab and 12 sera showed Ab&CAg. These results in humans are consistent with the findings in the mouse experimental model and suggest that CAg may be an early marker of hydatid infection, thus being relevant for post-surgical follow-up.     

双抗体夹心-ELISA用于旋毛虫活动性感染的诊断及疗效考核

目的检测宿主血清中旋毛虫循环抗原 ( CAg)以诊断本病和考核药物疗效。方法双抗体夹心 -ELISA法。结果 94只实验感染旋毛虫小鼠 ,受染 3d后 ,即有 7%的小鼠显示阳性反应 ,受染 30 d,无论受染幼虫数目多寡 ( 50、1 50及 30 0条幼虫 /只 ) ,全部受染鼠 ( 1 0 0 % )均显示阳性反应。给予丙硫咪唑治疗后的第 1周 ,CAg的阳性率仍为 1 0 0 % ,但在治疗后第 2、3及 4周 ,则分别降为 60 %、2 0 %及 1 0 %。检测 61头感染旋毛虫猪血清中 CAg,4 0头 ( 65.6%± 6.1 % )呈阳性反应。 1 0 0头正常猪均为阴性 ,30头感染囊尾蚴和 30头感染弓形虫的猪 ,仅 1头感染弓形虫的猪出现轻度交叉反应。检测 36例旋毛虫病人血清中 CAg,2 6例 ( 72 .2 % )呈阳性反应。 50例正常人皆为阴性。 1 4 2例其他 9种寄生虫病人 ,仅 1例囊尾蚴病人出现轻度交叉反应。结论旋毛虫 CAg的检测具有早期诊断和考核药物疗效的价值。     

中枢神经系统弓形虫病的快速诊断方法的探讨

本文取ELISA检测弓形虫循环抗原（CAg）、特异性IgM及IgG抗体阳性者的脑脊液样本13例，作弓形虫的病原学对比检查，个别样本同时进行ELIB分析。结果，CAg与IgM双阳性2例、IgM阳性1例，采用涂片法查见弓形虫；CAg阳性2例、CAg与IgM双阳性1例，经接种分离而获得3株弓形虫；其余7例CAg阴性而IgM阳性或IgM与IgG双阳性的脑脊液样本，均卡检获病原体。1例CAg与病原学均为阳性的脑脊液样本，与弓形虫速落子代谢抗原同步进行ELIB，前者在50kD处出现明显的反应区带，后者分别在50、97和108kD处出现3条反应区带。从而表明，脑脊液中弓形虫CAg检出率与病原阳性率相符合，ELISA—CAg可作为中枢神经系统弓形虫病的快速诊断方法；而ELIB技术，对确定及区别弓形上现症患者，均具进一步探讨的价值。     

棘球蚴病CAb、CAg与CIC检测结果的评价

对棘球蚴病患者用ABC-ELISA法检测CAb,ABC-夹心双抗体法和Pernice法分别检测CAg和CIC,阳性率分别为87.0％(40/46)、15.6％(7/45)和17.8％(8/45)。在检测CAb阴性的6例中CAg阳性者4例,表明CAb与CAg同时检测可提高阳性检出率达95.6％(43/45)。 CAb阴性病例主要是肺棘球蚴病,占83.3％(5/6)。CAg的检出率仅15.6％,但特异性高,未出现交叉反应和假阳性反应。检测CIC不但检出率不高,而且非特异性反应与检测CAb时相似。     

棘球蚴3种抗原在包虫病斑点酶联免疫吸附试验中特异性和敏感性比较

用羊源细粒棘球蚴囊液、原头蚴及生发层３种抗原,用酶标记羊抗人ＩｇＧ,对９４例包虫病患者、４４例非包虫患者及５０例健康人血清进行了斑点酶联免疫吸附试验。结果用囊液、原头蚴、生发层３种抗原的敏感性分别为９２．６％、９３．６％和９３．６％,５０例健康人血清均未出现假阳性反应,与各种肿瘤、各种炎症、各种肝病及结核患者血清有一定的交叉反应     

双抗体夹心ELISA检测循环抗原在血吸虫病控制流行地区应用的研究

对血吸虫病已控制流行地区1099名10岁以上的人群,应用抗血吸虫成虫抗原多克隆抗体(PcAb)为捕捉抗体,抗血吸虫虫卵抗原单克隆抗体(McAb)MG_2-HRP为覆盖抗体的双抗体夹心ELISA,检测血吸虫循环抗原(CAg),并以ELISA检测抗体(CAb)作平行对照.结果CAg和CAb的阳性检出率分别为4.55%和4.64%,两者的差异无显著意义(P>0.05).在50例CAg阳性者中,无血吸虫病治疗史者31例,而51例CAb阳性者中,无血吸虫病治疗史者仅6例.CAg和CAb联合检测能提高检出率.