血管紧张素原基因突变与高血压病之间的关系

本研究旨在探讨ＡＧＴ的Ｍ235Ｔ基因与Ｔ174Ｍ基因在高血压病(ＥＨ)发病中的作用及不同性别基因相互作用对血压的影响。一、资料与方法1.对象:ＥＨ组90例[收缩压>160ｍｍＨｇ(1ｍｍＨｇ=0.133ｋＰａ),舒张压>95ｍｍＨｇ],其中56例有高血压家族史,6例家族史不详。95例健康体检者为对照组,均无高血压家族史。2.方法:基因组ＤＮＡ的提取:经ＡＣＤ抗凝的全血4ｍｌ,用饱和盐析法常规提取ＤＮＡ。ＡＧＴ174引物5′ＣＧＴＴＴＧＴＧＣＡＧＧＧＣＣＴＧＧＣＴＣＴＣ3′,ＡＧＴ174引物5′ＡＧＧＧＴＧＣＴＧＴＣＣＡＣＡＣＴＧＧＡＣＣＣ3′采用ＰＥ9…     

冠心病患者载脂蛋白CⅡ微卫星DNA多态性的研究

冠心病 (ＣＨＤ)是多基因遗传病。本研究检测湖北地区正常人群和ＣＨＤ患者载脂蛋白ＣⅡ (ＡｐｏＣⅡ )微卫星ＤＮＡ基因型与等位基因频率分布 ,以探讨ＡｐｏＣⅡ微卫星ＤＮＡ多态性与ＣＨＤ的关系。1 资料与方法 :健康对照组 2 31例 ,男性 16 7例 ,女性6 4例 ,平均年龄 (5 2± 17)岁 ,经临床、心电图和实验室检查确认。ＣＨＤ患者 10 8例 ,男性 6 3例 ,女性 45例 ,平均年龄 (5 7±6 )岁 ,均符合ＷＨＯ冠心病诊断标准。ＮａＩ法提取基因组ＤＮＡ。采用常规ＰＣＲ扩增体系与循环参数引物序列为 :Ｐ1:5′ ＡＧＣＣＣＧＴＧＴＴＧＧＡＡＣＣＡ…     

一种在台湾地区新发现的感染病原SEN病毒的阳性率和临床意义

为了调查台湾地区最新发现的ＳＥＮ病毒(ＳＥＮＶ)的阳性率及其与临床的关联 ,作者对肝病高危人群、肝病患者和健康成年人感染ＳＥＮ病毒的两个变种 (ＳＥＮＶ Ｄ和ＳＥＮＶ Ｈ)的阳性率作了研究。方法　血清标本来自 61 5例研究对象 ,共分为 1 1组 :静脉吸毒者 50例 ;血友病 50例 ;多次输血的地中海贫血 41例 ;尿毒症透析者 50例 ;抗ＨＡＶＩｇＭ阳性的甲肝病毒感染者 2 5例 ;非Ａ Ｅ暴发性肝炎 (抗ＨＡＶＩｇＭ、抗ＨＢＣ、抗ＨＤＶ、ＨＢｓＡｇ、抗ＨＣＶ、抗ＨＥＶ均阴性 ,肝炎病毒基因ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＣＶ ＲＮＡ、ＨＤＶ ＲＮＡ、Ｈ…     

初探血管紧张素Ⅱ1型受体基因多态性与老年高血压及心脏结构功能的关系

血管紧张素Ⅱ1型受体 (ＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡｔｙｐｅ 1ｒｅｃｅｐｔｏｒ ,ＡＴ1 Ｒ)是肾素 血管紧张素系统 (ＲＡＳ)的重要介质 ,已发现其基因的 3’端非编码区 116 6ｂｐ处存在Ａ→Ｃ碱基置换 ,且Ａ/Ｃ1166多态性可能与原发性高血压 (ｅｓｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ,ＥＨ)有关〔1〕。本研究对老年ＥＨ患者行心脏超声检查 ,并分析ＡＴ1 Ｒ基因多态性对ＥＨ引起心脏结构功能改变的影响。　　一、资料与方法　　 1.对象 :(1)ＥＨ组 :入选 87例老年患者均符合 1999年ＷＨＯ的ＥＨ诊断标准 ,男 5 3例 ,女 34例 ,年龄 6 0～ 8…     

晚期血吸虫病患者三种细胞因子mRNA的检测及其临床意义

本研究用逆转录 (ＲＴ) ＰＣＲ加ＥＬＩＳＡ法对晚期血吸虫病(晚血 )患者外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)内的干扰素γ(ＩＦＮγ)、白细胞介素 (ＩＬ) 4和转化生长因子 β1(ＴＧＦβ1)的ｍＲＮＡ水平进行检测 ,探讨它们与肝纤维化程度、机体免疫功能的关系。一、对象与方法本组晚血患者 2 35例 ,男 112例 ,女 12 3例 ,平均年龄(6 0 5± 7 8)岁 ,按中华人民共和国卫生部疾病控制司编写的第 3版《血吸虫病防治手册》晚血标准诊断。病人由嘉兴市血吸虫病防治医院提供 ,并经我所做ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ及ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＣＶ等多项检查…     

佛山地区存在经输血传播病毒(TTV)感染

我们应用Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ法检测了４５例甲到戊型标志物均阴性的肝炎患者和４４例献血员血清中的ＴＴＶＤＮＡ。资料与方法：４５例肝炎患者均为我院传染科或门诊病人,血清经ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ均阴性,ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ,ＨＣＶＲＮＡ均阴性。４４例某院献血员检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ为阴性,肝功能正常。抽提标本血清ＤＮＡ进行Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ：以ＲＤ０３７和ＲＤ０３８为引物进行第一次ＰＣＲ,再以Ｒ…     

临床诊断为"非甲～戊型肝炎"患者血清乙型肝炎病毒 DNA测定

为了解目前临床诊断为“非甲～戊型肝炎”病人中ＨＢＶ感染所占的比例 ,本研究应用巢式ＰＣＲ法 (ｎＰＣＲ) ,对北京地坛医院 6 0例临床诊断为“非甲～戊型肝炎”患者进行了ＨＢＶＤＮＡ测定。现将结果报告如下。一、资料与方法1 血清标本 :血清标本采自 6 0例于 1997年 3月至 1999年 3月在北京地坛医院住院和门诊病例 ,临床诊断为“非甲～戊型肝炎” ,具有肝炎的症状和体征 ,ＡＬＴ异常 (>4 0Ｕ) ,经 2次甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒 (ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＤＶ、ＨＥＶ)抗原或抗体 (ＥＩＡ法 ,美国Ａｂｂｏｔｔ公司生产 )及ＥＢ病…     

肝硬化癌变者抗氧化维生素和抗氧化酶的变化

维生素Ｃ(ＶｉｔＣ)、维生素Ｅ(ＶｉｔＥ)、β 胡萝卜素 (β ＣＡＲ)、超氧化物歧化酶 (ＳＯＤ)、过氧化氢酶 (ＣＡＴ)和谷胱甘肽过氧化物酶 (ＧＳＨ Ｐｘ)是人体内最重要的抗氧化剂和抗氧化酶 ,为探讨其在肝硬化癌变患者中的变化及其意义 ,我们检测了2 0例肝硬化癌变者、30例肝硬化非癌变者和 5 0例正常对照者的血浆ＶｉｔＣ、ＶｉｔＥ、β ＣＡＲ和乳过氧化物酶 (ＬＰＯ)含量 ,及红细胞ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＧＳＨ Ｐｘ活力 ,现将结果报告如下。一、对象和方法1.对象 :肝硬化患者共 5 0例 ,肝硬化按照“1990年全国肝硬化专题学术研讨会”制订…     

HBV反义全基因真核细胞表达载体的构建及在肝癌细胞内的表达

１．材料与方法：乳哺动物细胞表达载体ｐＢＫ－ＣＭＶ,长约４．５ｋｂ,带有Ｔ_７公用序列。ｐＣＰ１０是ｐＢＲ３２２ＥｃｏＲＩ位点中插入双拷贝头尾相接的ＨＢＶａｙｗ亚型全基因ＨＢＶＤＮＡ重组质粒。ＰＣＲ引物ＸＩ１：１４２８－１４４８ｎｔ５'ＣＧＴ　ＣＣＣＧＴＣ　ＧＧＣＧＣＴＧＡＡＴＣＣ３',ＸＩ_２：１６７２－１６５３ｎｔ５'ＡＧＴＣＣＡＡＧＡＧＴＣＣＴＣＴＴＡＡＧ３'。人肝癌细胞系ＳＭＭＣ－７７２１,出上海细胞所提供。将ＥｃｏＲＩ酶切后回收的全基因ＨＢＶ片段。在Ｔ_４ＤＮＡ连接酶作用下,与ＥｃｏＲＩ酶切…     

血管紧张素原基因5′调控区部分序列基因变异与高血压病的关系

目的 血管紧张素原基因（ＡＧＴ）５′端调控区分子变异规律以及与中国汉族人高血压病的关系。方法 末研究纳入来自山东,西安两地工的１２１例高血压患（ＥＨ组）和９５例血压正常（对照组）。采用从人体外周血细胞中提取ＤＮＡ,进行ＰＣＲ,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ,ＰＣＲ产物直接测序和亚克隆测序等分子生物学技术对ＡＧＴ基因进行分子扫描和筛选,结果 发现在ＡＧＴ基因－６４０位点存在的Ｇ→Ａ核苷酸替换,在人群中存在ＧＧ     

腺病毒介导血管紧张素Ⅱ2型受体基因转染表达抑制血管平滑肌细胞迁移

血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ)内膜下迁移是血管成形术后再狭窄主要成因之一 ,血管紧张素Ⅱ 2型受体 (ＡＴ2Ｒ)可能介导抑制ＶＳＭＣ迁移的作用。本研究用腺病毒介导方法使ＶＳＭＣ转染表达ＡＴ2Ｒ ,并研究ＶＳＭＣ迁移所受到的影响。一、材料与方法1 ＡＴ2ＲｃＤＮＡ的腺病毒载体采用同源重组的方法构建。ＡＴ2ＲｃＤＮＡ(1 0 9ｋｂ)与穿梭质粒载体ｐＡＣＣＭＶｐＬｐＡ连接构成重组子ｐＡＣＣＭＶ ＡＴ2Ｒ ,用脂质体介导其与ｐＪＭ17一起转染 2 93细胞 ,进行同源重组产生带有ＡＴ2Ｒ基因的重组腺病毒载体 (ＡｄＣＭＶ ＡＴ2Ｒ) ,用该载体再转…     

非甲～庚型肝炎患者血清中TTV的检测及序列分析

我们采用套式ＰＣＲ技术对 5 0例非甲～庚型肝炎患者进行ＴＴＶ ＤＮＡ检测 ,并对ＴＴＶ ＤＮＡ序列进行比较。　　对象与方法1.对象 :5 0例血清样本采自传染科诊断为急慢性非甲～庚型肝炎患者 ,血清病毒标志经ＥＬＩＳＡ和 (或 )ＰＣＲ法检测排除甲～庚型肝炎病毒、ＥＢ病毒及ＣＭＶ感染 ,并排除药物性、酒精性、自身免疫性肝炎及脂肪肝 ,无输血及血制品史。男性 41例 ,女性 9例 ,年龄 ( 30± 13)岁。2 .方法 :ＴＴＶ ＤＮＡ检测 :ＴＴＶ引物位于ＯＲＦ1区 ,外引物按ＮｉｓｈｉｚａｗａＴ报道序列合成 ,引物序列为 :正义链 (Ｐ1)ＡＣ ＣＧ…     

充血性心力衰竭患者血浆内皮素及心钠素测定的临床评价

探讨充血性心力衰竭 (ＣＨＦ)时血浆内皮素 (ＥＴ)与心钠素 (ＡＮＰ)的变化及其相关性 ,我们检测了 41例各种不同病因与不同心功能状态的ＣＨＦ患者 ,并与正常健康组进行对照分析 ,现将结果报道如下 :一、资料与方法1 研究对象 :门诊与住院的ＣＨＦ患者 41例 ,男 2 8例 ,女13例 ,平均年龄 5 8 3岁。心功能 (ＮＹＨＡ分级 )分为三组 :Ⅱ级 9例 ,Ⅲ级 15例 ,Ⅳ级 17例。正常对照组 2 0例 ,男 9例 ,女 11例 ,平均年龄 5 3 4岁 ,均为健康体检者。2 测定方法 :采集清晨空腹静脉血 3ｍｌ,采用放射免疫分析法同时测量ＥＴ、ＡＮＰ浓度 ;ＥＴ放免药…     

含CD44 cDNA片段细胞系的构建及在肝癌中的应用

目的构建含ＣＤ４４ｃＤＮＡ质粒ＰＧＥＸ２Ｔ和ＰＡＺ的单克隆细胞系．并利用此细胞系合成特异的ＣＤ４４ｃＤＮＡ探针，原位检测肝癌中ＣＤ４４ｍＲＮＡ的表达．方法应用常规的质粒转化方法将质粒ＰＧＥＸ２Ｔ和ＰＡＺ转入ＤＨ５菌株中得到单克隆细胞系．并以从此细胞系中提取的质粒为模板，应用ＰＣＲ法合成ＣＤ４４ｃＤＮＡ探针．应用原位杂交法检测肝细胞癌中ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ的表达．结果从ＤＨ５１菌株中提取的质粒含ＣＤ４４（２ｖ－１０ｖ）ｃＤＮＡ（１１ｋｂ），从ＤＨ５２菌株中提取的质粒含全长的ＣＤ４４ｃＤＮＡ（１８ｋｂ），ＰＣＲ合成的ＣＤ４４ｖ６ｃＤＮＡ探针长１４０ｂｐ．ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ的阳性检出率：转移高危组为８００％（８／１０），转移低危组为２１７％（５／２３），两者相差非常显著（Ｐ＜００１）．结论从单克隆细胞系ＤＨ５１和ＤＨ５２中提取的质粒，经ＰＣＲ扩增可得到特异的ＣＤ４４ｃＤＮＡ探针．肝细胞癌中ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ的表达与肿瘤的转移倾向呈正相关．     

Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体基因多态性与高血压病及其并发症的关系

血管紧张素Ⅱ (ＡｎｇＩＩ)在高血压发病机理中有重要作用 ,由Ｉ型ＡｎｇⅡ受体 (ＡＴ1Ｒ)介导其绝大多数生物学作用。国外发现ＡＴ1Ｒ基因Ａ116 6Ｃ多态性与欧洲白人高血压病有关。本研究旨在探讨ＡＴ1Ｒ基因多态性与中国人高血压病及其并发症的关系。一、资料与方法1.对象 :12 0例高血压病患者 (ＥＨ组 ) ,均为排除冠心病、糖尿病及继发性高血压本院心内科住院患者。 86例为健康体检者 (对照组 )。2 .方法 :(1)临床指标 :测定血压、身高、体重、空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯。 (2 )尿微量白蛋白 (ＵＡ)测定 :采用Ａｒｒａｙ 36 0ｓｙｓｔ…     

原发性肝癌患者血清HBV-DNA状态的观察

原发性肝癌 (ＰＨＣ)与乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染的关系极为密切[1] 。自 1999年 6月～ 2 0 0 0年 12月 ,我们应用ＥＬＩＳＡ法检测 2 7例ＰＨＣ患者乙肝标志物(ＨＢＶ Ｍ) ,应用斑点杂交法检测ＨＢＶ ＤＮＡ ,以探讨ＰＨＣ患者血清ＨＢＶ ＤＮＡ的状态及与ＨＢＶ前Ｃ区变异的可能关系。1　资料与方法1 1　病例选择 :2 7例ＰＨＣ为我院传染科住院患者 ,均经彩超或ＣＴ检查确诊。男 2 6例 ,女 1例 ;年龄 2 7～ 75岁 ;2 4例有明确的肝硬化病史 ,另 3例为慢性乙型肝炎患者。1 2　检测方法 :乙肝标志物ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｇ、Ｈ…     

应用半重叠TCRγ引物扩增TCRγ基因重排检测淋巴细胞白血病的…

采用更加敏感的半重叠式Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）γ链特异性引物的多聚酶链反应（ＰＣＲ）法，对２８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）初治，完全缓解（ＣＲ）及骨髓移植（ＢＭＴ）患儿的骨髓标本进行检测，用消化煮沸及酚抽提法分别对所有骨髓标本进行ＤＮＡ提取，将ＰＣＲ结果进行比较，结果表明，消化煮沸法用于微量标本的ＤＮＡ提取优于酚抽提法，２８例ＡＬＬ患儿１６例检出ＴＣＲγ特异性条带，其中微小残留病（ＭＲＤ）组１８例，     

多重聚合酶链反应检测乙型肝炎和丙型肝炎病毒

在同一反应体系中同时快速检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ），探讨多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）在临床中的应用价值。方法自行设计了ＨＢＶ和ＨＣＶ各一对引物，应用多重ＰＣＲ对临床标本进行检测。结果５例ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体均阳性者，其ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性；２０例单ＨＢｓＡｇ阳性标本，１１例单ＨＢＶＤＮＡ阳性，５例ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性；２０份单ＨＣＶ抗体阳性者，ＨＣＶＲＮＡ均阳性，３例合并ＨＢＶＤＮＡ阳性；１０例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢ）抗ＨＣＶ阴性肝炎标本８份ＨＣＶＲＮＡ阳性，１例ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ阳性。结论多重ＰＣＲ一次反应即可完成多次常规ＰＣＲ检测，是一种值得临床应用的方法。     

冠心病合并高血压病、糖尿病与载脂蛋白E基因多态性

目的　载脂蛋白Ｅ(ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＥ ,ＡｐｏＥ)是低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白和部分高密度脂蛋白的结构蛋白 ,在脂质代谢中起重要作用。ＡｐｏＥ基因存在多态位点 ,检测 2 5 0例不同组合患者及 90例对照组ＡｐｏＥ基因型 ,研究ＡｐｏＥ基因多态性与高血压病 (ｅｓｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ,ＥＨ )、2型糖尿病(ｔｙｐｅ 2ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ ,Ｔ2ＤＭ )及冠心病 (ｃｏｒｏｎａｒｙｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅ ,ＣＨＤ)的关联。方法　对照组 90例 ,年龄 (6 5± 9)岁。无ＣＨＤ ,ＥＨ和Ｔ2ＤＭ以…     

慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒准种特点的初步研究

一、资料与方法1.血清来源和ＤＮＡ分离 :血清来源 :其一为乙型肝炎肝硬化患者 ,其二为病毒性肝炎患者 ,均为女性 ,临床检测ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｃ阳性。其他肝炎病毒标志检测阴性。静脉采血 5ｍｌ,提取血清中的ＤＮＡ。2 .ＰＣＲ扩增目的片段 :以Ｇａｎ等[1] 发表的序列为依据 ,参照其他ａｄｒ亚型[2 4 ] 的基因序列设计引物。ＰＣＲ扩增产物 ,按ＴＡ克隆方法亚克隆目的片段。3 .重组质粒提取和限制片段长度多态性 (ＲＦＬＰ) :将所有阳性菌落重新划线增殖后 ,提取质粒 ,ＥｃｏＲＩ酶切质粒 ,以观察酶切片段长度多态性。4.Ｄ…