钠氢交换蛋白1在肿瘤侵袭转移中的研究进展

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病,尽管现代医学技术不断进步,但肿瘤发病率、病死率仍居高不下。肿瘤发病机制目前仍不明确,侵袭、转移是其重要特性,也是患者治疗失败的主要原因,因此深入研究肿瘤侵袭、转移的机制对临床治疗大有裨益。钠氢交换蛋白1(NHE1)是广泛表达于哺乳动物细胞膜表面的离子转运体,近年来研究发现其在肿瘤细胞中过表达,通过改变肿瘤细胞内外p H、降解细胞外基质、改变细胞侵袭性结构等促进肿瘤的侵袭转移,并涉及多种细胞信号通路的改变。随着研究深入,NHE1将为肿瘤的治疗提供新策略。     

MiR-218通过调控Robo1抑制胃癌细胞的侵袭和转移

本研究首先用反复的Transwell迁移和侵袭实验分别筛选、获得了高转移潜能（MKN28-M,SGC7901-M）和低转移潜能（MKN28-NM,SGC7901-NM）的胃癌细胞亚系,并对其生物学特性进行了鉴定。     

蛋白酪氨酸磷酸酶H 型受体的生物学功能及其在肿瘤中的研究进展

蛋白酪氨酸磷酸酶H型受体(protein tyrosine phosphatase H receptor,PTPRH)基因是一种编码胃癌相关蛋 白的基因,通过翻译后COOH-末端区域的酪氨酸磷酸化修饰发挥其生物学功能。PTPRH在多种肿瘤中呈异常表达, 其生物学功能与肿瘤的发生、发展及预后密切相关。     

HMGB1、VEGF和MMP-7的相关性及其与结直肠癌侵袭转移关系

目的 探讨HMGB1、ⅦGF和MMP-7的相关性及其与结直肠癌侵袭转移关系,寻求某些检测指标作为结直肠癌侵袭转移及预后的标志物.方法 用免疫组化法监测20例结直肠正常组织、癌旁组织及70例结直肠癌组织中HMGB1、VEGF、MMP-7的表达情况.多因素分析三项指标与结直肠癌的关系并作相关性分析.结果 正常组织、癌旁组织不表达或低表达,结直肠癌组织高表达(P＜0.05),三项指标的表达与性别、年龄、直径无关,随恶化程度、转移呈递增性,与肿瘤侵袭转移有关(P＜0.05),且三者具有正相关性.结论 HMGB1、VEGF、MMP-7可作为结直肠癌侵袭转移、预后的标志物.     

bFGF生物蛋白海绵体外生物学活性检测方法的建立及其稳定性评价

目的：建立碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）生物蛋白海绵体外生物学活性测定方法观察bFGF生物蛋白海绵常温放置的稳定性。方法：bFGF生物蛋白海绵供试品融于稀释液中,离心后获得浸提液,以bFGF标准品为对照,与NIH3T3细胞共培养,MTT法检测bFGF生物蛋白海绵浸提液对NIH3T3细胞的促增值作用,用bFGF标准品计算bFGF生物蛋白海绵的相对百分效价,对该方法进行验证;以常温储存2、3和4年的bFGF生物蛋白海绵为供试品,以低温储存30 d的bFGF生物蛋白海绵为标准对照,以不含bFGF生物蛋白海绵和bFGF的培养液为空白对照,测定各组生物学活性效价,比较不同储存时间bFGF生物蛋白海绵的体外生物学活性效价的稳定性。结果：bFGF生物蛋白海绵供试品浸提液随浓度增加其吸光度（A值）增高,即NIH3T3细胞增殖作用增加,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01),与bFGF标准品比较差异无统计学意义（P>0.05）;bFGF标准品和bFGF生物蛋白海绵在该方法中均存在量效关系,且符合四参数方程式：y=（A－D）∕［1+（X／C）B］+D;常温条件下储存2、3和4年生物蛋白海绵体与低温储存30 d比较,其生物学活性效价(U?mL-1)下降率分别为0.5%、0.6%和0.8%,均低于15%的国家标准。结论：bFGF生物蛋白海绵在体外能够促进NIH3T3细胞增殖,具有良好生物学活性;应用NIH3T3细胞检测bFGF生物蛋白海绵体外生物学活性可作为常规检测方法;bFGF生物蛋白海绵常温储存2~4年稳定性良好。     

TGF-β1、VEGF表达和微血管密度与结直肠癌侵袭转移的关系

目的研究转化生长因子-β1（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）在结直肠癌侵袭转移中的作用及其相互关系。方法应用免疫组化技术检测52例结直肠癌手术标本TGF-β1、VEGF表达水平,分析以CD105标记的MVD计数和上述两种因子的表达及与结直肠癌临床病理因素的关系,Log—Rank时序检验MVD计数与生存时间的关系。结果52例结直肠癌中,以CD105标记的MVD均值为（11．27&#177;1．55）,MVD均值在Dukes分期C、D期组（17．86&#177;2．07）和淋巴结有转移组（16．85&#177;2．08）分别显著高于A、B期组（6．43&#177;1．78）和淋巴结无转移组（7．78&#177;1．93）,差异均有高度统计学意义（均P〉0．01）,与患者性别、年龄、肿瘤部位、大小及分化程度均无关（均P〉0．05）。TGF-β1阳性表达41例,VEGF阳性表达38例,分别与CD105标记的MVD计数明显相关（P〈0．05）。本组病例3年生存率为39．1％,而MVD低于平均值组和高于平均值组的3年生存率分别为44．5％和30．1％,生存分析显示两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论以CD105标记的肿瘤新生血管计数可评估结直肠癌的侵袭转移,而TGF-β1、VEGF作为两种促血管生成因子,可能共同参与了肿瘤新生血管的形成。     

CHI3L1通过KLF6介导的Warburg效应促进结直肠癌细胞增殖和侵袭

目的:探讨几丁质酶3样蛋白1(Chitinase 3-like-1,CHI3L1)通过KLF6(Kruppel-like factor 6)介导的Warburg效应对结直肠癌细胞增殖和侵袭的。方法:从TCGA数据库中下载808例结直肠癌患者的临床信息,根据CHI3L1表达水平的高低分为高表达组(n=306)和低表达组(...     

葡萄糖酸锑钠对NK92mi细胞杀伤和蛋白酪氨酸磷酸酶-1活性的影响

目的:探讨葡萄糖酸锑钠(SSG)对NK92mi细胞的杀伤活性和蛋白酪氨酸磷酸酶-1(SliP-1)活性的影响.方法:取对数生长期的NK92mi细胞,随机分为SSG处理组和未处理组,SSG处理组在含有不同质量浓度SSG的培养基中培养16 h,用乳酸脱氢酶释放法检测NK92mi细胞对K562细胞的杀伤活性,并用蛋白酪氨酸磷酸酶活性分析法检测经SSG处理后NK92mi细胞中SHP-1的活性.结果:未处理组NK92mi细胞的杀伤活性为(163.12±35.42)Lu,经过与1 mg/L,10 mg/L和100 mg/L SSG共同培养后,NK92mi细胞的杀伤活性分别为(210.53±38.35),(353.25±31.99)Lu和(771.03±24.80)LU,NK92mi细胞的杀伤活性随SSG质量浓度的增加而显著增高(F=210.16,P<0.05);经1 mg/L,10 mg/L和100 mg/L的SSG处理后,NK92mi细胞中的SHP-1的活性分别降低到未处理组的(57.9±6.3)%,(23.1±5.7)%和(5.2 4-2.8)%,SHP-1活性随着SSG质量浓度的增加而显著降低(F=81.12,P<0.05).结论:SSG可能通过降低NK92mi细胞内的SHP-1活性来提高其杀伤活性.     

CD3AK细胞治疗头颈部恶性肿瘤的近期疗效观察*

目的:观察CD3AK在头颈部恶性肿瘤的综合治疗中的效果.方法:81例头颈部恶性肿瘤分成CD3AK治疗组(n＝42)和对照组(n＝39),治疗组有术前、术后单用CD3AK细胞治疗,亦有术前化疗加用CD3AK细胞治疗;对照组有术前、术后单用LAK细胞治疗,有术前单用化疗.治疗前后检查肿瘤缩小情况,并检测外周血T细胞亚群和血清可溶性白细胞介素2受体水平.结果:CD3AK对舌癌的治疗效果最好,治疗组与对照组比较有显著性差异(P＜0.01);其次为喉癌与甲状腺癌,与对照组相比,有显著性差异(P＜0.05);再次为腮腺腺癌.各项免疫指标:CD3、CD4、CD8及CD4/CD8均有不同程度的提高;sIL-2R水平有所下降.结论:CD3AK细胞治疗作为新的肿瘤过继免疫治疗,在头颈部恶性肿瘤的综合治疗中,毒副反应较少,疗效满意,有很好的推广前景.     

ELF3mRNA在淋巴结转移非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 ELF3(E74-like factor 3,ESE-1)是ETS家族的一员,研究发现其与多种肿瘤的发生和发展存在密切关系.本文主要通过研究ELF3mRNA在非小细胞肺癌组织和淋巴结中的表达,进而探讨ELF3与非小细胞肺癌组织及淋巴结转移之间的关系.方法 收集临床肺癌组织30例、对应淋巴结组织60例及20例正常肺组织和40例正常淋巴结组织,通过RT-PCR的方法来检测ELF3mRNA在非小细胞肺癌组织和淋巴结中的表达.结果 与正常肺组织和正常淋巴结组织相比,ELF3mRNA在非小细胞肺癌组织及对应淋巴结组织中表达均明显上调,两者之间均差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ELF3基因的激活参与到非小细胞肺癌的发展过程中,并且其高表达与淋巴结转移存在一定关联性.     

胃癌患者红细胞C3b受体与自然杀伤细胞活性的相关性研究

为研究胃癌患者的红细胞Ｃ３ｂ受体（ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲ）与自然杀伤（ＮＫ）细胞活性之间的关系，利用酵母菌 环试验及ＭＴＴ比色法对３０例胃患者有３８例健康对照者的ＲＢＣ－Ｃ３ｂ受体及ＮＫ细胞活怀进行了测定。结果表明胃癌患者的这两项免疫指标均比正常对照显著低下（Ｐ〈０．０１）。经统计学相关性分析显示，这两项免疫指标间呈明显的正相关（ｒ＝０．６０７，Ｐ〈０．００１）。     

CED方案加CD3AK治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的探讨CED方案加CD3AK细胞治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效.方法对23例晚期NSCLC采用CEC方案加CD3AK进行治疗(A组);同时对17例相同患者单纯进行CED方案化疗(B组).结果①A组临床有效率为78.26%(18/23),B组临床有效率为35.29%(6/17),两组相比有显著差异(P=0.015);②A组1年生存率为82.61%(19/23),B组为47.06%(8/17)(P=0.042);③化疗反应A组较B组轻,但两组相比无显著差异(P＞0.05).结论CD3AK细胞与CED化疗协同治疗晚期非小细胞肺癌可以明显提高效果.但不能减少化疗反应.     

用~3H-胸腺嘧啶核苷掺入抑制试验检测人外周血NK细胞活性

作者用~3H-TdR掺入抑制试验检测40例健康人(男18例,女22例)外周血NK细胞活性,结果显示:抑制百分率男性为45.6±9.1％,女性为43.2±9.0％,平均为44.3±9.1％,男女之间无显著性差异(P>0.20)。本法操作简便、重复性好,与常用的~(51)Cr释放试验比较,所需标本量少,~3H半衰期较~(51)Cr长,二者结果呈良好的正相关(r=0.873,P<0.01),是一种有应用价值的检测人外周血NK细胞活性的新方法。     

GM_3促进人白血病J6-2细胞分化时蛋白激酶C活性的变化

本研究用自行提纯的GM_3观察了它对人单核样白血病细胞的促分化作用,以及促分化前后蛋白激酶C活性的影响。根据电镜观察、吞墨试验及NBT还原试验的结果,表明GM_3确能促使J6-2细胞分化;另外GM_3在促分化后,J6-2细胞的总PK-C活性下降。作者讨论了GM_3抑制蛋白激酶C的可能机理。     

用原位杂交对HBV和AFB_1与树鼩肝癌发生关系的研究

用生物素标记的HBV DNA探针对经83～158周实验的55只树鼩肝组织的福尔马林固定、石蜡包埋的切片进行原位杂交研究。有45只树鼩接种过HHBV,在肝细胞检出HBV DNA的有30只,另15只肝内HBV DNA阴性。这55只树鼩,有41只摄入了AFB_1,其中肝HBV DNA阳性的A组22只有10只发生PLC;19只HBV DNA阴性的B组,只发现2例PLC。两组差别显著(P<0.05)。未接触过AFB_1的14只树鼩中,肝内HBVDNA阳性的8只(C组),有1例出现PLC;而HBV DNA阴性的6只(D组)无PLC发生。结果表明:HHBV和AFB_1在PLC发生中起协同作用,支持了HHBV感染与PLC存在病因学关系的观点。     

CONSTRUCTING ADENO-ASSOCIATED VIRUS-TGFp3 AND COMPARING ITS BIOLOGICAL EFFECT ON PROTEOGLYCAN SYNTHESIS IN DEDIFFERENTIATED NUCLEUS PULPOUS CELLS WITH ADENOVIRUS-TGFβ1

Objective To construct adeno-associated virus (AAV) expression system for transforming growth factor β3 (TGFβ3) and detect its biological effect on proteoglycan synthesis of the earlier and later dedifferentiated rabbit lumbar disc nucleus pulpous (NP) cells, which was compared with that of adenovirus (AV) expression system for TGFβ1.Methods TGFβ3 gene was obtained using PCR. Its upstream contained restriction enzyme site Kpn Ⅰ, and its downstream contained restriction enzyme site Sal Ⅰ. Using the restriction enzyme sites of PCR product of TGFβ3 and the corresponding multiple cloning site (MCS) in plasmid AAV, TGFβ3 was subcloned into AAV. The recombinant plas-mid AAV-TGFβ3 was transfected into H293 cells with Lipofectamine(tm) 2000, and the expression of TGFβ3 gene was detected using immunofluorescent analysis. After AAV-TGFβ3 virus particle with infectious activity was packaged, TGFβ3 expression in NP cells was detected by immunoblotting, and its biological effect on proteoglycan synthesis was detected by antonopulos method and compared with that of AV-TGFβ, in the earlier and later dedifferentiated NP cells.Results For the earlier dedifferentiated NP cells, AAV-TGFβ slowly and stably enhanced proteoglycan synthesis, but AV-TGFβ, rapidly and transiently enhanced its synthesis. For the later dedifferentiated NP cells, AAV-TGFβ3 stably enhanced proteoglycan synthesis, but AV-TGFβ, inhibited its synthesis.Conclusion AAV expression system can mediate TGFβ3 gene to be expressed stably, and AAV-TGFβ3 can enhance proteoglycan synthesis of the earlier and later dedifferentiated NP cells.