人体生物样本常用分析方法——方法学验证

建立可靠的和可重复的定量分析方法是进行生物等效性研究的关键之一。为了保证分析方法可靠,必须充分验证方法的可行性,对建立的生物样品分析方法学进行考察,一般应进行以下几方面的考察。     

苯磺酸氨氯地平片人体相对生物利用度和生物等效性研究

目的研究2种苯磺酸氨氯地平片在中国健康志愿者体内的相对生物利用度和生物等效性。方法采用随机、双周期、自身交叉的试验设计,22例受试者单次口服苯磺酸氨氯地平片试验制剂(浙江京新药业股份有限公司)或参比制剂(辉瑞制药公司)10 mg,血浆样品采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定,计算两者的主要药物动力学参数,进行生物等效性评价。结果氨氯地平血药浓度在0.1~10.0 ng.mL-1与峰面积线性关系良好(r=0.997 8),最低定量浓度为0.1 ng.mL-1,日内及日间RSD<15%;22名受试者口服受试制剂和参比制剂后,血浆中氨氯地平的Cmax分别为(5.14±3.30)和(5.34±3.09)ng.mL-1;tmax分别为(6.73±2.35)和(7.64±4.35)h;t1/2分别为(48.65±10.35)和(47.87±12.67)h;AUC0-∞分别为(301.37±214.33)和(294.82±216.98)ng.h.mL-1;AUC0-tn分别为(242.72±158.44)和(242.97±175.86)ng.h.mL-1;试验制剂与参比制剂比较,相对生物利用度F0-tn、F0-∞分别为(111.13±42.01)%和(114.05±46.02)%。结论试验制剂和参比制剂具有生物等效性。     

大分子生物药物生物分析方法验证--解读欧洲药品管理局指导原则

本文对生物大分子药物生物分析方法的全面验证、部分验证、交叉验证和真实样品分析等方面进行阐述。     

苯磺酸氨氯地平片在健康人体的生物等效性

目的 研究苯磺酸氨氯地平片(抗高血压药)的相对生物利用度,并求证该制剂的生物等效性.方法 24名男性健康受试者随机交叉给药,先后口服单剂量试验制剂及参比制剂苯磺酸氨氯地平片剂5 mg,采用LC-MS/MS法测定血药浓度,计算2者的药代动力学参数及相对生物利用度,并评价2制剂的生物等效性.结果 口服试验制剂及参比制剂5 mg的主要药代动力学参数如下:t1/2分别为(47.15±17.28)、(43.22 ± 16.63)h;tmax分别为(5.81±2.09)、(6.38±2.33)h;Cmax分别为(4.77±1.28)、(4.37±1.14)ng·mL-1;AUC0-t分别为(176.39±57.95)、(182.55±58.36)ng·mL-1h;AUC0-t分别为(185.65±59.01)、(192.83±62.72)ng·mL-1h;试验制剂对于参比制剂的平均相对生物利用度F值:AUC0-t为(98.1±18.5)%,AUC0-∞为(98.6±20.0)%;tmax经非参数检验无显著性差异,试验制剂的平均生物利用度(AUC0-t、AUC0-∞)均大于98%,2种制剂的Cmax、AUC0-t和AUC0-∞双向单侧t检验和[1-2α]置信区间法的等效性分析均为合格,tmax经非参数秩和检验无显著性差异.结论 2种氨氯地平片剂为生物等效制剂.     

HPLC分析方法验证中有关问题再探讨

分析方法验证以指导原则的形式被收录于《中国药典》,但在验证的执行过程中,不同业者间存在理解和操作方面的差异。本文归纳分析HPLC方法验证实际操作过程中一些亟待探讨的问题：如空白辅料峰的处理、含量均匀度的精密度验证、耐用性验证的项目等,以便在实际工作中顺利按照法规要求进行药物质量控制。     

生物药物分析方法验证体系的研究

目的:探讨生物药物分析方法验证中存在的问题及改良策略。方法:分析国内外对于生物药物分析方法验证的理念、特点及研究进展,将质量源于设计的理念同传统方法验证理念进行比较研究。结果与结论:将指标化、终点化控制的传统验证体系改良为可视化、可溯源、立体化过程控制的方法验证系统。将方法建立及验证工作有机融合一体,为高质量数据提供保障。这个体系不但可有效整理记录方法建立及验证过程,利于分析方法转移过程中有效信息的传递,也有利于生物药物分析方法的评价和研究。     

HPLC分析方法验证问题解析

方法验证虽然有包括《中国药典》在内的许多指南,但《指南》一般较为原则性,没有具体操作指导,如有关物质测定方法的线性范围如何确定？耐用性进行哪些项目较为科学？验证项目是否都需要加入样品以考察干扰？精密度误差接受标准是什么？这些都是在实际验证中非常纠结的问题,而且《指南》也未必所有内容都科学,诸如强降解试验的物料平衡问题、峰纯度测定问题等,笔者结合近30年的工作经验,对HPLC分析方法验证的实际操作的疑点和难点进行探讨。     

清洁验证中的分析方法验证

目的:论述如何验证清洁验证中所采用的分析方法.方法:制定验证方案,对方法的专属性、线性和范围、准确度、精密度、定量限等一一进行验证.结果:通过方法验证,确认可适用于清洁验证的分析方法.结论:采用经过验证的分析方法,是保证分析结果真实可靠的前提条件.清洁验证所采用的分析方法,同样也不能忽略方法验证.     

生物样品分析方法验证中的交叉验证

目的:明确交叉验证在生物样品分析方法中的作用、地位和必要性。方法:参阅国际上有关方法学验证的指导原则及文献,总结分析方法交叉验证在生物样品分析中的重要性和必要性,并通过实例建立不同实验室生物样品分析中的交叉验证流程,探讨现有操作流程的局限性。结果与结论:交叉验证结果表明,不同实验室的分析结果存在一定差异,但是符合可接受标准。交叉验证在生物样品分析中具有重要意义,需要得到重视并建立完善的操作流程及考核标准。     

苯磺酸氨氯地平分散片人体生物等效性试验研究

目的用高效液相色谱-质谱测定方法,研究受试制剂苯磺酸氨氯地平分散片在人体的生物等效性。方法 20例健康男性志愿者单剂量口服苯磺酸氨氯地平分散片受试制剂或参比制剂10mg后,用高效液相色谱-质谱测定方法测定氨氯地平的血药浓度,用DAS2.0药动学软件求算药动学参数,以双单侧t检验进行生物等效性评价。结果受试制剂与参比制剂的主要药动学参数:Tmax为(6.1±1.2)h,(6.9±1.7)h;Cmax分别为(8.0±2.2)ng/ml,(8.0±2.0)ng/ml;t1/2为(30.4±5.9)h,(26.5±6.2)h;AUC0-t为(259.1±37.8)ng/(h.ml),(270.7±53.7)ng/(h.ml),AUC0-∞为(275.4±40.1)ng/(h.ml),(283.1±56.2)ng/(h.ml)。相对生物利用度F=(97.6±14.8)%。结论两制剂为等效制剂。     

非临床研究中大分子生物分析方法验证报告审核方法

目的：掌握大分子生物分析方法验证报告审核的方法和原则,确保验证报告的科学性、合规性和完整性。方法：将完整的生物分析方法验证报告和原始记录拆分为原始记录、数据及数据处理、验证报告,分别对三部分进行全面系统性审核,最后将审核的结果进行分析和汇总。结果与结论：通过系统性的审核,熟练掌握审核的方法和要点,提高大分子生物分析方法验证报告的审核效率,提升报告质量,满足机构SOPs和国内外法律法规的要求,推进客户药物研发和申报进程。     

人体生物样本常用分析方法

目前常用的几种分析方法归纳如下。 色谱法:气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、色谱-质谱联用法(LC-MS、LC-MS-MS,GC-MS,GC-MS-MS)等,可用于大多数药物的检测。 免疫学方法法:放射免疫分析法、酶免疫分析法、     

苯磺酸氨氯地平片相对生物利用度研究

目的:研究进口苯磺酸氨氯地平片和国产片在20例健康男性志愿者体内的相对生物利用度。方法:每人每次口服10mg苯磺酸氨氯地平片后,绘制出血药浓度-时间曲线,并计算出主要药动学参数。结果:以进口苯磺酸氨氯地平片为参比,国产苯磺酸氨氯地平片的相对生物利用度为(99.3±18.8)％。结论:2种片剂具有生物等效性。     

药品微生物经典分析方法的验证探讨

本文通过研读分析药品、食品和环境微生物分析方法验证的相关规范性文件,结合药品微生物分析实践,对药品微生物经典分析方法的验证进行了研究,总结了微生物分析方法验证的考察指标,包括专属性、灵敏度、精密度、检测限和定量限、线性、范围、耐用性及方法适用性等,并阐述了各指标在药品微生物分析中的含义、测量方法、影响因素和可接受标准。为规范经典微生物分析方法的验证,获得可靠的微生物检验结果及建立相关指导原则,提供了参考依据。     

国产苯磺酸氨氯地平片的生物等效性

目的：研究国产和进口苯磺酸氨氯地平片在健康人体的相时生物利用度和生物等效性。方法：采用两制剂双周期交叉试验设计。20名男性健康志愿者随机分别服用10mg苯磺酸氨氯地平试验药（国产）或时照药（进口），采用LC-MS测定血浆中氨氯地平质量浓度。并计算药动学参数和相对生物利用度，据此时两种制剂作出等效性评价。结果：单剂量口服10mg苯磺酸氨氯地平试验药和对照药的药动学参数：AUC0-120分别为（306．0±60．7）μg·h·L^-1和（315．1±62．7）／μg·h·L^-1；AUC0-∞。分别为（330．3±59．8）μg·h·L^-1和（341．7±67．2）μg·h·L^-1。分别为（7．6±1．7）／μg·L^-1和（7．8±1．6）μg·L^-1；分别为（7．7±2．2）h和（7．4±2．1）h；t1.2分别为（35．4±6．3）h和（36．4±5．1）h；国产苯磺酸氨氯地平片的相时生物利用度为（98．3％±13．2％）（F0-120）和（98．0％±12．5％）（F0-∞）。结论：经统计学分析，两种制剂具有生物等效性。     

分析方法验证、转移和确认概念解析

分析方法验证、转移和确认的目的是证明分析方法的适用性,对保证检测结果的一致性、可靠性和准确性具有重要作用。方法验证、转移和确认的概念不同,适用范围不同,在实际工作中存在一些模糊概念,而且也存在使用不当的情况。鉴于上述情况,本文详细阐述药品方法验证、方法转移、方法确认的联系、区别、适用范围,为药品检验检验相关工作提供参考。     

对药物研发中分析方法验证的几点考虑

本文对分析方法验证的内涵进行了进一步阐述,指出了 目前药物研发中在分析方法验证方面存在的问题以及误区,给出了作者的见解和建议,并提出了更高的要求和期望.     

生物分析方法确认策略

本文介绍了葛兰素威康研究实验室药物代谢研究部门对生物分析方法进行确认的策略。阐述了设计一个恰当生物分析方法的基本原理，以及建立一个适当的方法之前必须对实验数据进行评估，评估参数包括选择性、专属性、定量检出限、线性、准确度、精密度和回收率等。本文还讨论了药物各发展阶段确认设计前必须考虑的一些要点，如生物基质、分析工作标准、样品分批量大小及组成、分析仪器、初始方法确认、临床前方法确认、临床方法确认、方     

生物标志物免疫分析方法学验证难点：稳定性

在生物标志物分析方法学验证项中,稳定性验证是难点。与药动学分析不同的是,生物标志物分析待测物为内源性物质,其稳定性与标准品（一般为重组蛋白）有很大不同。所以,生物标志物稳定性验证样品应采用内源性真实样本。但是受分析方法变异影响,内源性真实样本的准确浓度无法得知,而且难以获取新鲜的未冻存过的样本,最终导致稳定性的接受标准难以界定。运用趋势控制图和计算机分析等手段可以更准确地判断生物标志物的稳定性。