谷氨酰胺对急性胰腺炎大鼠肠黏膜胰岛素样生长因子表达及肠黏膜屏障的影响

目的 观察急性坏死性胰腺炎（ANP）时肠黏膜屏障的损伤情况,以及谷氨酰胺（Gln）和胰岛素样生长因子（IGF）对肠黏膜屏障的保护作用.方法 成功诱导ANP模型雄性Wistar大鼠48只,随机分为ANP组和Gln组各24只,另取假手术组24只作为对照.Gln组每日以Gln灌胃2次,剂量为1.5g/（kg·d）;ANP组和假手术组以同等量的生理盐水灌胃.分别在模型制作术后3、6、24、48 h时间点杀死大鼠,取胰头和末端回肠3～5 cm放入液氮中保存.观察胰腺和肠黏膜组织形态学改变,测定肠黏膜中IGF-1的表达、血清中二氨氧化酶（DAO）活性和内毒素浓度.结果 ANP组大鼠肠黏膜屏障功能严重破坏,肠道通透性明显增加,肠黏膜损伤评分明显增加;血清内毒素浓度、DAO活性明显升高（P均＜0.01）.与ANP组比较,Gln组动物肠黏膜损伤减轻,损伤评分有所下降,血清内毒素水平、DAO活性下降（P均＜0.05）.ANP组IGF-1表达水平明显下降（P ＜0.05）;Gln组明显升高（P＜0.05）,同时肠黏膜屏障功能得到一定的改善.结论 ANP时肠黏膜屏障结构和功能存在严重破坏;Gln能一定程度上减轻肠黏膜屏障损伤并能维护其功能;IGF-1参与Gln对ANP肠黏膜屏障损伤的修复和维持.     

重症急性胰腺炎大鼠并发肠黏膜屏障功能障碍

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜屏障功能的状况。方法 48只SD大鼠,随机分两组:假手术组(A组,n=24)、SAP模型组(B组,n=24)。用3%牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型。麻醉苏醒,即开始灌胃,6h/次,A、B组用灌胃器按1 mL/100 g/次生理盐水灌胃。制模后各组在6、12、24 h 3个时间点取材;开腹后观察腹水量及其颜色,观察胃肠道大体情况;取血用酶联免疫吸附双抗夹心法检测血清二胺氧化酶(DAO)及D-乳酸浓度;取胰腺及回肠末段组织做病理检查,并进行胰腺病理组织评分;取回肠末段部分组织做扫描电镜检查。结果A组无腹水;B组腹水多,肠道明显扩张,积液积气,部分肠管发黑。B组血清DAO、D-乳酸的浓度较A组升高(P<0.01)。B组胰腺及回肠病理损害重,胰腺病理组织评分较A组高(P<0.05);扫描电镜检查A组基本正常,B组损伤重。结论 SAP大鼠并发肠黏膜屏障功能障碍。     

乌司他丁对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的 观察乌司他丁干预急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠后血TNF-α、二胺氧化酶(DAO)及肠黏膜组织紧密连接蛋白-1( zonula occludens-1,ZO-1)表达水平的变化,探讨其可能机制.方法 按完全随机法将SD雄性大鼠随机分为假手术组、ANP组及乌司他丁组.采用5％牛磺胆酸钠逆行注入胆胰管的方法制模.制模后6、24h取血检测TNF-α、DAO活性,胰腺及回肠组织常规病理检查,RT-PCR及免疫组化法检测回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白的表达.结果 术后6h,ANP组胰腺大片坏死,大量炎细胞浸润;回肠黏膜绒毛上皮坏死、血管出血、炎细胞浸润.乌司他丁组的胰腺及回肠组织损伤较ANP组减轻.假手术组、ANP组、乌司他丁组术后6h的血TNF-α水平分别为(10.83±0.96)、( 181.89±4.93)、(128.23±2.40) ng/L;DAO活性分别为(354.79±3.67)、(117.21±5.58)、(282.98±9.12) U/L;回肠组织ZO-1蛋白表达量分别为(10.00±1.87)、(1.20±0.84)、(5.80±2.86)分;Z(O)-1 mRNA表达量为0.878±0.015、0.466±0.023、0.778±0.033.ANP组血TNF-α水平较假手术组明显升高,DAO活性、回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白表达较对照组明显降低(P值均＜0.05);乌司他丁组的血TNF-α水平较ANP组降低,DAO活性、回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白表达较ANP组明显升高(P值均＜0.05).结论 乌司他丁可能通过抑制TNF-α的过度释放、提高血浆中DAO活性,从而上调回肠组织中ZO-1 mRNA和蛋白表达,进而保护肠黏膜屏障.     

急性出血坏死性胰腺炎大鼠肠道黏膜屏障功能变化及己酮可可碱对其的保护作用

目的 研究急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肠道屏障功能改变及己酮可可碱(pentoxifylline,FTX)对肠道屏障的保护作用.方法 54只SD雄性大鼠按数字表法随机分为ANP组、PTX组和假手术组.采用逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立ANP模型.假手术组只翻动十二指肠.PTX组在制模后经阴茎静脉注射PTX 25 mg/kg体重.术后3、6、24 h分批处死大鼠.取血测淀粉酶、D乳酸及TNF-α含量,取胰腺及末端回肠常规行病理学检查,免疫组化法检测回肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1的表达.结果 建模后6 h,ANP组血清淀粉酶、TNF-α、D-乳酸含量分别为(9141±672)U/L、(347.96±79.47)pg/ml和(10.21±1.08)mg/L,显著高于假手术组的(1723±57)U/L、(134.09±31.36)pg/ml和(4.33±0.49)mg/L(P值均＜0.01);PTX组血淀粉酶、TNF-α、D-乳酸分别为(7965±318)U/L、(238.48±44.35)pg/ml和(8.75±1.28)mg/L,较ANP组显著降低,但仍显著高于假手术组(P＜0.05或＜0.01).假手术组大鼠肠黏膜上皮ZO-1阳性率为(3.29±0.36)%;ANP组为(1.91±0.32)%,较假手术组明显减少(P＜0.05);PTX组为(2.53±0.43)%,较假手术组减少,但较ANP组明显增加(P＜0.05).结论 PTX可减轻ANP大鼠肠黏膜屏障功能的损伤,其机制可能是通过减少肠黏膜上皮ZO-1的降解.     

单核细胞趋化蛋白-1与急性胰腺炎肠屏障功能呈负相关

背景:急性胰腺炎(AP)时可发生全身性炎症反应综合征,肠屏障功能障碍是导致重症急性胰腺炎(SAP)并发多器官功能衰竭的重要因素之一。目的:检测大鼠AP模型单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达和肠屏障功能指标的变化,探讨MCP-1在AP肠屏障功能障碍中的作用。方法:分别以0.5%和5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备大鼠急性水肿性胰腺炎(AEP)和急性坏死性胰腺炎(ANP)模型,行胰腺组织病理学评分,电子显微镜观察回肠组织超微结构,免疫组化染色、RT-PCR和蛋白质印迹法检测回肠组织中紧密连接蛋白occludin和MCP-1的表达。结果:与假手术(SO)组相比,AP模型大鼠尤其是ANP组大鼠胰腺组织病理学评分显著升高,回肠绒毛高度和柱状细胞指数降低,occludin表达下调(P0.05)。SO组和AEP组回肠组织中无MCP-1表达,ANP组MCP-1表达随时间延长而上调(P0.05)。回肠组织MCP-1表达与胰腺组织病理学评分呈正相关,与肠屏障功能指标(绒毛高度、柱状细胞指数和occludin表达)呈负相关。结论:ANP大鼠回肠组织中MCP-1表达上调,MCP-1在AP肠屏障功能障碍中发挥重要作用。     

重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜免疫屏障的变化及甘露糖的干预效果

目的探讨重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜免疫屏障的变化情况及甘露糖的干预效果。方法将30只大鼠随机分为假手术组、胰腺炎组(重症急性胰腺炎组)和甘露糖组(重症急性胰腺炎+甘露糖干预组),建模后12 h,胰腺和肠黏膜组织进行HE染色观察病理学变化,测定血内毒素、淀粉酶、瘦素水平和分泌性免疫球蛋白(sIg)A、甘露糖结合凝集素(MBL)、白细胞介素(IL)-4水平。结果胰腺炎组和甘露糖组胰腺病理学评分和肠黏膜病理学评分均高于假手术组(P0.05),甘露糖组大鼠胰腺病理学评分和肠黏膜病理学评分低于胰腺炎组(P0.05)。胰腺炎组和甘露糖组血清内毒素、淀粉酶、瘦素水平均高于假手术组(P0.05),甘露糖组大鼠血清内毒素、淀粉酶、瘦素水平低于胰腺炎组(P0.05)。胰腺炎组和甘露糖组血清sIgA、IL-4水平均低于假手术组(P0.05),甘露糖组血清sIgA、IL-4水平高于胰腺炎组;胰腺炎组和甘露糖组血清MBL水平均高于假手术组(P0.05),甘露糖组血清MBL水平高于胰腺炎组(P0.05)。结论重症急性胰腺炎破坏肠黏膜免疫屏障,甘露糖具有保护重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的作用,其机制可能为甘露糖能够增加血清sIgA、MBL、IL-4水平。     

急性坏死性胰腺炎肠黏膜氧化应激损伤和HIF-1α的表达

目的:探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)时肠黏膜屏障的氧化应激损伤和HIF-1α的表达, 及其与黏膜损伤的关系.方法:♂Wistar大鼠随机分为3组, A组(ANP组, n = 18), 诱导ANP模型; B组(DMSO组, n =18), 诱导ANP前, 使用二甲基亚砜(DMSO)预处理组; C组(con组, n = 10)假手术组. A和C组术前30 min皮下注射生理盐水(0.2 mL/kg体质量), B组动物术前30 min皮下注射同等剂量的DMSO(0.2 mL/kg体质量), 并且实验前30 min每只动物饲入60 mg/100 g体质量的FITC-右旋糖酐. 动物分别在手术后0, 6, 24 h点心脏取血后处死, 分别取胰头和末端回肠3-5 cm. 观察胰腺和肠黏膜组织形态学改变, 测定肠黏膜组织中DAO、SOD、GSH、MPO、MDA含量, Western-blot测定肠黏膜中HIF-1α的表达,并检测血清中二氨氧化酶(DAO)活性及FITC浓度.结果:ANP时大鼠肠黏膜屏障功能严重破坏,肠道通透性明显增加. ANP组6 h时黏膜中DAO的活性已经明显下降(0.43±0.07 U/L vs0.91±0.11 U/L, P<0.05), DMSO处理后DAO活性下降受抑. 而血清中测定DAO活性正好相反. ANP组6 h黏膜组织中SOD、GSH活性就已有明显下降, 12 h最为明显(SOD:12.12±2.24 U/mg vs 25.12±3.86 U/mg; GSH:160.75±24.25 mg/g vs 412.45±45.60 mg/g, 均P<0.01), 而MPO活性及MDA浓度明显升高(MPO:1.32±0.18 U/mg vs 0.63±0.11 U/mg;MDA:2.85±0.21 nmol/mg vs 1.34±0.12nmol/mg, 均P<0.01), 观察期限内一直处在较高水平. DMSO预处理组动物肠黏膜通透性有所改善, 但仍然高于正常( P<0.05). 使用DMSO后, 氧化应激反应及其产物有所减弱, 但仍然高于正常( P<0.05). ANP时HIF-1α表达明显增加, 而DMSO的使用可使HIF-1α高表达下调.结论:ANP时肠黏膜屏障结构和功能存在严重破坏; 氧化应激损伤是肠黏膜屏障损伤的一个重要因素, 而清除氧自由基能一定程度上减轻肠黏膜屏障损伤并能维护其功能; HIF-1α参与ANP肠黏膜屏障的修复和维持, 清除氧自由基减轻肠黏膜损伤可以调节HIF-1α表达.     

Toll样受体4在猪急性坏死性胰腺炎肠道组织中的表达及其意义

目的:探讨猪急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)回肠组织中Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)的表达及其意义.方法:选择太湖梅山猪,随机分成对照组(C,n=4)、急性坏死性胰腺炎组(ANP,n=4).诱导制备ANP模型.用分光光度法检测血清及回肠组织匀浆中二胺氧化酶(DAO)活性;动态比浊法检测血浆内毒素水平;RT-PCR检测回肠黏膜组织TLR4、TNF-α及IL-6mRNA表达.结果:ANP组回肠组织DAO水平明显低于C组,血清中DAO明显升高(P<0.05).ANP组血浆内毒素水平较C组明显升高(P<0.05);回肠黏膜组织TLR4、TNF-α、IL-6mRNA在C组表达非常低,ANP组表达明显增加;TLR4mRNA表达水平与肠黏膜DAO水平呈负相关(r=-0.762,P=0.028),与血浆内毒素呈正相关(r=0.778,P=0.023).结论:ANP时回肠组织内TLR4mRNA表达上调,可能与ANP肠黏膜屏障功能障碍有关;其可能机制与TLR4介导激活核转录因子NF-αB信号转导途径有关.     

L-精氨酸诱导小鼠急性坏死性胰腺炎肠屏障损伤的实验研究

背景:研究表明,肠屏障功能障碍与急性坏死性胰腺炎(ANP)的发生、发展密切相关。目的:探讨L-精氨酸诱导的ANP小鼠肠屏障损伤及其加重ANP的机制。方法:将30只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(SO组)和ANP组。ANP组小鼠给予腹腔注射8%L-精氨酸(4.5 g/kg)共两次,间隔为1 h; SO组则腹腔注射等体积0.9%NaCl溶液。造模24 h、48 h和72 h后处死小鼠,行HE染色评估胰腺和肠道病理学评分,检测血清淀粉酶、脂肪酶水平,以ELISA法评估炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)和肠道通透性(DAO、D-乳酸、LPS)水平,蛋白质印迹法检测胰腺组织和肠道组织TLR4、MyD88蛋白表达。结果:与SO组相比,ANP组相应时间点胰腺组织和回肠组织病理学评分显著增高(P0.05),血清淀粉酶、脂肪酶、炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)、肠道通透性指标(DAO、D-乳酸、LPS)水平均显著增高(P0.05),胰腺组织和回肠组织TLR4、MyD88蛋白表达显著增高(P0.05)。结论:L-精氨酸诱导的ANP小鼠肠道通透性增加,LPS释放增多,可能通过激活TLR4-My D88信号通路促进肠道、全身炎症反应,进而加重ANP。     

植物乳杆菌WCFS1对急性坏死性胰腺炎小鼠胰腺及回肠损伤的影响

目的探讨益生菌植物乳杆菌WCFS1(LP)灌胃对急性坏死性胰腺炎(ANP)小鼠胰腺及回肠损伤的影响。方法 24只健康雄性小鼠应用广谱抗生素持续灌胃3周以建立肠道无菌鼠, 然后随机分为正常对照组(CON组)、ANP模型组(ANP组)、LP灌胃组(LP组)和LP灌胃后再诱导ANP组(LP+ANP组), 每组6只。LP组与LP+ANP组给予1×109 CFU/ml、0.2 ml/d的LP灌胃1周, CON组与ANP组以0.2 ml/d无菌磷酸盐缓冲液灌胃1周。采用雨蛙肽(100 μg/kg)腹腔注射10次, 每次间隔1 h, 第10次注射时腹腔加注脂多糖5 mg/kg的方法构建ANP小鼠模型, 2 h后处死小鼠。采用荧光定量PCR法检测小鼠粪便及回肠黏膜中LP数量;取胰腺和回肠组织行病理学检查, 观察组织的炎症程度, 并行病理学评分;采用酶动力化学法检测血清淀粉酶水平, ELISA法检测血清炎症因子水平及肠通透性指标;荧光定量PCR法检测胰腺与回肠组织炎症因子的表达;免疫荧光组织化学法检测回肠紧密连接蛋白occludin、claudin-1、ZO-1表达量。结果 LP灌胃后小鼠粪便及回肠黏膜...     

丹参酮ⅡA磺酸钠对急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤的抗炎作用及其机制研究

背景:急性肺损伤是重症急性胰腺炎(SAP)早期最主要的死亡原因,减轻肺损伤可能降低SAP的死亡率。目的:研究丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对SAP相关肺损伤的抗炎作用及其可能机制。方法:36只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、急性坏死性胰腺炎(ANP)组和STS组,后两组予5%牛磺胆酸钠胰管注射建立ANP模型,STS组于造模前30 min予腹腔注射STS预处理。造模后12 h和24 h分批处死动物,行胰腺、肺组织病理学检查和肺损伤评分,ELISA法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量,蛋白质印迹法检测肺组织JNK、p-JNK蛋白表达。结果:ANP组肺组织实变明显,大量中性粒细胞浸润,肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-1β含量和JNK、p-JNK表达均显著高于同时间点假手术组(P0.05)。STS组肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-1β含量和p-JNK表达较同时间点ANP组显著降低(P0.05),JNK表达则无明显变化。结论:STS干预能下调ANP大鼠的肺组织炎症因子表达,降低肺损伤程度,其机制可能与抑制JNK信号通路激活有关。     

3-MA和PDTC联合应用对大鼠急性坏死性胰腺炎的协同保护作用

背景:重症急性胰腺炎(SAP)是临床上常见的急腹症之一,目前发病机制仍不十分明确。SAP自噬与炎症关系的研究尚不多见。目的:探讨自噬抑制剂3-MA和NF-κB抑制剂PDTC对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)的协同保护作用。方法:90只SD大鼠随机分为假手术组(SO组)、ANP组、3-MA组、PDTC组以及3-MA+PDTC组。采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导制备大鼠ANP模型,造模后3 h、6 h、12 h分别处死大鼠。全自动生化分析仪检测血清淀粉酶(AMY),ELISA法测定IL-1β,HE染色观察胰腺组织病理变化,免疫组化、蛋白质印迹法检测胰腺组织Beclin-1和NF-κBp65表达。结果:与SO组相比,ANP组血清AMY、IL-1β水平、胰腺组织病理损伤、胰腺组织Beclin-1和NF-κBp65表达均随时间延长而升高(P<0.05)。与ANP组相比,3-MA组和PDTC组造模后6 h、12 h血清AMY、IL-1β水平明显降低(P<0.05),病理损伤减轻,胰腺组织Beclin-1和NF-κBp65表达明显降低(P<0.05)。与单药干预组相比,3-MA+PDTC组造模后6 h、12 h血清AMY、IL-1β水平明显降低(P<0.05),造模后12 h,病理损伤明显减轻,胰腺组织Beclin-1和NF-κBp65表达明显降低(P<0.05)。结论:自噬抑制剂3-MA和NF-κB抑制剂PDTC联合干预可通过阻断自噬激活和胰腺损伤炎症级联反应而对ANP大鼠有协同保护作用。     

急性坏死性胰腺炎肠粘膜屏障功能障碍及生长激素的作用

目的 探讨急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）肠粘膜屏障形态和功能的变化及生长激素（ＧＨ）的作用。方法 采用胰胆管内逆行注射５％牛磺胆酸钠溶液诱导大鼠ＡＮＰ。实验分３组：假手术组、ＡＮＰ＋生理盐水（ＮＳ）组、及ＡＮＰ＋ＧＨ组。术后２４h取末端回肠,观察病理形态变化;应用＾１２５Ⅰ－白蛋白测定肠壁通透性;ＲＴ－ＰＣＲ检测胰岛素样生长因子（ＩＧＦ－１）mＲＮＡ表达。结果 ＡＮＰ大鼠肠粘膜间质充血水肿,炎症细胞浸     

吡格列酮对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的作用

目的 探讨吡格列酮在重症急性胰腺炎发病机制中与凋亡激活的关系.方法 将80只SD大鼠按随机表法分为急性坏死性胰腺炎组（ANP组）、假手术组、二甲基亚砜溶剂对照组（DMSO组）、吡格列酮干预组（吡格列酮组）,每组20只.采用胰胆管逆行注射5％牛磺胆酸钠1 ml/kg体质量的方法制作ANP模型,吡格列酮组在造模前30 min腹腔注射吡格列酮40 mg/kg体质量.术后1、3、6、12 h分批处死大鼠,收集胰腺组织.采用常规HE染色进行胰腺组织病理评分,采用TUNEL染色方法检测大鼠胰腺细胞凋亡,免疫组化法和蛋白质印迹法检测胰腺组织PPARγ的表达变化,同时检测胰腺组织caspase3的表达变化.结果 吡格列酮干预后大鼠胰腺组织病理损伤较ANP组大鼠有所减轻,差异有统计学意义（P＜0.05）.吡格列酮组胰腺组织PPARγ表达水平为2.69 ±0.46,显著高于ANP组的0.75 ±0.05,差异有统计学意义（P＜0.05）.吡格列酮3h组大鼠胰腺细胞凋亡指数为8.35 ±0.95,显著高于同时点ANP组的4.37±1.22;caspase 3的活性为9.24±1.78,显著高于ANP组的5.04±0.86,差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.结论 吡格列酮干预后大鼠胰腺炎症减轻,PPARγ和caspase 3表达升高,胰腺细胞凋亡率升高.     

齐留通对急性坏死性胰腺炎大鼠中性粒细胞活化的影响

背景：5-脂氧合酶（5-LOX）是将花生四烯酸、亚油酸和其他多不饱和脂肪酸转变为具有生物活性的代谢产物如自三烯类的限速酶,从而影响细胞信号转导、结构和代谢。然而关于其在重症急性胰腺炎（SAP）中作用的研究尚少。目的：研究选择性5-LOX抑制剂齐留通对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠中性粒细胞活化的作用。方法：将54只Sprague—Dawley大鼠随机分为假手术组、ANP组和齐留通组。以5％牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱导ANP模型。各组大鼠分别于6h、12h和24h处死。行胰腺组织病理学评分,以酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）、可溶性E-选择素（sE-选择素）和可溶性P-选择素（sP-选择素）水平．以免疫组化染色检测胰腺缉织ICAM-1、E-选择素和P-选择素的表达,常规方法检测胰腺组织髓过氧化物酶（MPO）活性和血清淀粉酶水平。结果：与假手术组相比,ANP组同时间点胰腺组织病理学评分、廊清sICAM-1、sE-选择素和sP-选择素水平、胰腺组织ICAM-1、E-选择素和P-选择素表达以及胰腺组织MPO活性和血清淀粉酶水平均显著增高（P＜0．05）。经齐留通预处理后,除外6h组的组织病理学评分,上述各项指标均较同时间点ANP组显著降低（P＜0．05）。结论：选择性5-LOX抑制剂齐留通能通过抑制中性粒细胞活化而有助于减轻ANP大鼠胰腺组织学损伤。     

PIAS1对重症急性胰腺炎继发急性肺损伤血气屏障影响的研究

背景:研究发现STAT活化抑制蛋白1(PIAS1)可抑制急性坏死性胰腺炎(ANP)继发急性肺损伤,但机制尚不明确。目的:探讨PIAS1对ANP大鼠继发急性肺损伤血气屏障的作用及其机制。方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-PIAS1和Ad5/F35-Null质粒。以3.5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱导大鼠ANP模型,并于造模前1 d分别经阴茎静脉注射Ad5/F35-PIAS1、Ad5/F35-Null和PBS液,设立假手术组作为对照。造模16 h后处死大鼠。观察胰腺和肺组织的病理学变化和超微结构改变。测定支气管肺泡灌洗液炎性细胞计数和肺组织湿/干重系数,以免疫组化法检测RECK定位表达,蛋白质印迹法检测肺组织RECK、MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达。结果:与ANP组和Ad5/F35-Null组相比,Ad5/F35-PIAS1组胰腺和肺组织病理学明显改善,肺组织病理学评分显著降低(P<0.01),超微结构示肺泡毛细血管间血气屏障结构破坏减轻;支气管肺泡灌洗液中性粒细胞和巨噬细胞计数、湿/干重系数均显著降低(P<0.01);肺组织RECK蛋白表达显著升高(P<0.01),MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达显著下调(P<0.01);Ad5/F35-PIAS1组上述指标与对照组相比均无明显差异(P>0.05)。结论:PIAS1可能通过增强RECK蛋白表达、抑制MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达,降低血气屏障通透性,抑制炎性细胞外渗,进而改善ANP继发急性肺损伤的炎症程度。     

Early prediction of intestinal mucosal barrier function impairment by elevated serum procalcitonin in rats with severe acute pancreatitis

ObjectivesThe aim of this study was to evaluate serum procalcitonin (PCT) levels as a prognostic indicator of intestinal barrier function impairment in rats with severe acute pancreatitis (SAP).MethodsThirty-six male Sprague Dawley rats were randomly grouped into SAP group (injected sodium taurocholate via biliopancreatic duct), Gln group (gavaged with glutamine after modeling), and control group. Blood, pancreatic, and terminal ileum tissues were obtained from the rats after 6 h of modeling. Serum amylase (Amy) levels were determined using an automatic biochemical detector, while endotoxin (ET), diamine oxidase (DAO), and PCT levels were measured by ELISA test. The pathology of pancreatic and small intestine tissues were observed. PCT protein expression in intestinal tissues were detected by immunohistochemistry and western blot.ResultPancreatic and intestinal injuries in Gln group were significantly lower than SAP group. Serum amylase, DAO, and PCT levels in SAP and Gln groups differed greatly and were significantly higher than control group. Immuno-histochemistry and western blot results showed that PCT protein expression levels in small intestine tissues of SAP group were higher than Gln group and control group. Serum PCT levels had a significant correlation with serum endotoxin, DAO levels and intestinal mucosal injury scores.ConclusionPCT expression in serum and intestinal tissues in SAP rats increased significantly in the early stages of SAP, and was closely related to the onset and degree of intestinal barrier function impairment. Thus, our results showed that measuring serum PCT can be used to predict intestinal mucosal barrier function impairment in SAP rats.