HCV实验室实验人员检测能力验证结果分析

目的通过能力验证(PT)考核,了解中国部分实验室实验人员丙型肝炎病毒(HCV)检测的能力。方法采用统一的方法、试剂、仪器,组织33家实验室利用17份样本进行PT考核,考核内容包括HCV抗体、抗原、病毒载量及基因分型实验,采用百分制对结果进行评分,并与参比实验室确定的预期结果进行比较,用SAS 9.3统计软件对得分以及结果进行分析。结果参与PT考核的33家实验室的全部抗体实验阴阳性判断正确;得分均为100分;抗原实验阴性样本中有1份结果错判为阳性,其余结果判定正确;共66份阳性样本中,有16份结果错判为阴性,错判率为24%(16/66);核酸载量实验结果均在可信区间内,得分均为100分;亚型实验结果判定全部正确,得分均为100分。结论 33家实验室的实验员HCV抗体实验、病毒载量实验、基因分型实验的检测结果与预期结果一致,而丙型肝炎病毒抗原实验结果与预期结果存在一定差异,需要重点加强。     

在中国资源有限地区进行艾滋病研究的实验室质量控制

目的通过对中国艾滋病综合研究项目在山西、云南现场实验室质量保证及质量控制实施情况的分析,总结经验,为今后在资源有限地区实验室开展质量控制的运行模式提供可借鉴经验。方法由中心实验室对现场7个实验室直接实施质控,包括标准操作程序(SOP)建立、参加能力验证(PT)、现场实时插入质控品及抽样检测等多种方式,检测数据由第三方核实比对,再由中心实验室分析判定检测结果的有效性。结果现场实验室完成百余份SOP及质量保证/质量控制(QA/QC)方案的建立,所有检测项目均参加并通过PT考核;预实验中有4份丙型肝炎病毒(HCV)插入质控品、2份HCV抽检样品,现场实验室的检测结果与预期结果相反。其余检测现场实验室与预期结果一致。结论由中心实验室直接对现场实施质控、多种质控手段并行,这种质控模式对在资源有限地区按照国际标准进行艾滋病研究是非常有效的,中心实验室的设立对结果的有效、可靠提供了保障。     

丙型肝炎病毒核酸定量检测的临床意义

目的　研究丙型肝炎患者血清中的丙型肝炎病毒核糖核酸 (HCVRNA)载量与抗丙型肝炎病毒抗体 (抗 HCV)之间的相关性。方法　用荧光定量 (FQ PCR)法检测 2 0 8例疑诊丙型肝炎患者血清中的HCVRNA ,酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗 HCV。结果　 2 0 8例血清样本中HCVRNA阳性率为 81.3 %。HCVRNA平均载量为 4.63× 10 5Copies/ml。结论　FQ PCR法检测HCVRNA是判定HCV感染的直接证据 ,是反映病毒复制与传染性的直接指标 ,有确诊价值与抗病毒治疗疗效评估价值。HCVRNA与抗 HCV具有高度正相关。HCVRNA较抗 HCV检出率有显著性差异     

丙型肝炎

血清转换样本丙型肝炎病毒核酸、核心抗原及抗体检测对比研究——张贺秋等（北京 军事医学科学院基础医学研究所1008．50）；《中国输血杂志）），2006，19（3）：177—180[目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）核心抗原酶联免疫诊断试剂检测早期HCV感染“窗口期”样本的可行性。方法：用新研制的丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）酶联免疫诊断试剂检测11份系列血浆转换样本的抗-HCV、HCV-cAg、HCV RNA，并与病毒核酸及抗体检测方法做对比研究。结果：HCV-cAg较抗-HCV检出提前14-51d，平均32．7d；HCV RNA较抗-HCV检出提前19-51d，平均36．0d。结论：HCV-cAg酶联免疫诊断试剂可用于HCV早期感染“窗口期”样本的检测，降低输血风险度。]     

我国部分地区静脉吸毒人群HCV基因型分布的探讨

目的了解静脉吸毒人群丙型肝炎病毒(HCV)感染者的基因亚型分布及影响因素,为防治静脉吸毒人群感染HCV提供依据。方法收集828份静脉吸毒人群样本,HCV抗体初筛用酶联免疫吸附试验(ELISA),有反应性的样本再用重组免疫印迹法(RIBA)进行补充试验,阳性的样本进行核酸检测;核酸阳性的样本先用HCV基因分型试剂盒进行分型,未通过分型试剂盒确定型别的样本,再用巢式聚合酶链式反应扩增HCV CORE区进行测序,以确定HCV基因型。结果 828份静脉吸毒人群样本中,HCV抗体阳性498份,核酸检测呈阳性反应的样本390份,通过HCV基因分型试剂盒确定型别的样本311份,经CORE区测序确定型别的样本70份,有9份未成功扩增出序列,共有381份样本确定了基因亚型。其主要基因亚型为3b、3a、1b、6n及6a五种型别,分别占38.6%(147/381)、20.5%(78/381)、18.6%(71/381)、10.8%(41/381)、8.7%(33/381);不同地区之间流行的HCV基因型别差异具有统计学意义(χ~2=282.23,P0.01);男性和女性之间主要基因型不太一致;各年龄段间HCV基因亚型分布的差异无统计学意义(χ~2=40.93,P0.05),但30~50岁感染者居多。不同基因型之间HCV核糖核酸含量的差异有统计学意义(F=5.85,P0.01)。结论静脉吸毒人群HCV感染者的基因亚型主要为1b、3a、3b、6a及6n,基因型分布具有地域性差异,并且病毒载量与基因型的分布具有相关关系。     

基层实验室HCV抗体检测能力验证评估

目的为了了解县级以上检测实验室HCV抗体检测能力,研发制备HCV抗体能力验证质控品,开展基层实验室HCV抗体检测能力的室间比对与评估工作。方法研发制备均一稳定的HCV抗体检测质控样品,组织全国县级以上75家HCV抗体检测实验室开展能力验证,各实验室按照要求在规定时间内完成质控品检测并按时回报结果,以全部回馈结果确定质控品预期结果,以检测水平评价标准差系数(SDI)评估各实验室检测能力。结果质控品190906～190910均一性与稳定性检验均符合要求;完成能力验证结果回报的70家实验室中,30家(42.86%)得分100分,39家(55.71%)得分80分,1家(1.43%)得分20分;使用间接ELISA法和化学发光法检测质控品的结果在不同实验室间差异较大[变异系数(CV)分别为33.92%、117.65%、125.77%、125.00%、32.09%和67.56%、129.15%、35.53%、133.72%、73.80%];间接ELISA法、化学发光法和胶体金法对弱阳性190908的检测准确性偏低(分别为47.50%、50.00%、27.27%);SDI值显示部分实验室可能存在系统误差和随机误差。结论本研究制备的HCV抗体能力验证质控品能够在能力验证工作中稳定有效地发挥作用,参加此次能力验证的实验室普遍具有HCV抗体检测能力,部分实验室可能存在系统误差和随机误差问题。     

辽宁省建平县慢性丙型肝炎患者血清病毒载量和基因分型关系的初步探讨

丙型病毒性肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）所引起,约50％～80％的患者会发展为慢性肝炎,是导致肝硬化及肝细胞癌等晚期肝病的主要病因之一。有报道辽宁省建平县丙型肝炎发病率、肝硬化和肝细胞癌死亡率水平均显著高于辽宁省同期平均水平［1］。为探讨辽宁省建平县 HCV 基因分型和病毒载量的关系,我们对2012年5月至2014年7月门诊及住院的120例丙型肝炎患者进行了 HCV 基因分型和病毒载量的检测,现将结果报道如下。     

尿液HIV-1抗体检测实验室能力验证质控品的制备及应用

目的研发制备尿液1型艾滋病病毒(HIV-1)抗体检测实验室能力验证质控品,并应用于艾滋病检测实验室的尿液HIV-1抗体检测能力的验证工作,提高艾滋病检测实验室对尿液HIV-1抗体的检测水平。方法对20份HIV-1抗体阳性和8份HIV-1抗体阴性的尿液样本,用酶联免疫吸附试验筛选后,选择3份阳性样本和2份阴性样本,制备能力验证质控品,并对能力验证质控品进行稳定性、均一性评价。将能力验证质控品分发给参加尿液HIV-1抗体检测的实验室,对其检测结果进行分析,评价各实验室的尿液HIV-1抗体检测能力。结果能力验证质控品均一性试验中,5份样本的变异系数(CV)分别为5.40%、27.96%、12.04%、20.24%、5.77%。能力验证质控品稳定性试验中,尿液质控品在37℃放置时,5份样本的CV值分别为5.62%、9.19%、7.98%、57.81%、7.43%;在20℃放置时,5份样本的CV值分别为18.57%、3.41%、5.21%、43.93%、5.58%;在4℃放置时,5份样本的CV值分别为7.67%、14.35%、9.61%、6.35%、9.43%;在-20℃放置时,5份样本的CV值分别为25.83%、17.29%、35.97%、20.73%、22.22%。共12家艾滋病检测实验室参加本次尿液HIV-1抗体检测能力验证,得分情况:11家实验室得分为100分,1家实验室对两份样本检测错误,得分为60分;检测数值(S/CO)偏离情况:4家实验室对阳性质控检测结果有偏离,3家实验室分别对3份阳性样本(164 101、164 103和164 105)检测结果有偏离。结论尿液HIV-1抗体能力验证质控品具有较好的稳定性、均一性,可以用于实验室能力验证。参加此次尿液HIV-1抗体能力验证的实验室结果判定大都正确,但是个别实验室在检测数值(S/CO)方面存在偏离。     

丙型肝炎

干扰素治疗丙型肝炎后肝硬化的临床观察；丙型肝炎病毒核心蛋白激活iNOS表达对DNA的损伤作用研究；丙型肝炎病毒核心蛋白转染HepG2细胞对其p53表达的影响；丙型肝炎病毒游离核心抗原检测试剂盒临床考核数据分析；蛋白芯片检测丙型肝炎病毒分片段抗体的临床意义……     

广州市2009年性病实验室室间质评分析

目的通过对广州市性病实验室开展室间质评活动,提高实验室检测质量,完善全市三级性病监测网络。方法发放衣原体（Ct）抗原样本、梅毒螺旋体血清样本、性病常规阅片,共计990份,要求做Ct抗原检测、梅毒血清学试验和性病常规阅片。结果 58家实验室室间质评成绩平均分90.09分,各质控项目得分由高到低分别为梅毒血清特异性抗体定性试验100分,非特异性抗体定性检验97.24分,非特异性抗体定量检验90分,衣原体抗原检测86.55分,分泌物涂片阅片86.38分。全市成绩优秀实验室39家（67.24%）,操作水平（SI）≥0有39家,占67.24%。通过性病规范化建设的实验室成绩优秀面达到90.91%。结论通过性病规范化建设的实验室,检测能力明显高于其他医疗单位。通过这次质评活动还发现,部分单位使用试剂不合理,检验报告不规范等问题,需加强专业技术人员培训和室内、室间质控,提高检测水平。     

血清学联合核酸检测在献血者血液筛查中的互补性

目的对温州地区无偿献血者的血液标本进行血清学与核酸联合检测,全面评估血清学与核酸检测(NAT)在降低输血相关传染性疾病中的互补性。方法对2014年10月至2015年6月,温州市中心血站采集的无偿献血者的血液标本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)对血液传染性指标乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒(HCV)抗体、艾滋病病毒(HIV)抗体、苍白球螺旋体(TP)抗体进行检测,丙氨酸转氨酶(ALT)采用速率法,同时采用核酸检测技术对乙型肝炎病毒(HBV)DNA、HCV RNA、HIV RNA进行6人份三项目联合检测,并对检测结果进行分析。结果 33 736份血液标本中,ELISA(+)NAT(+)95份,其中HBsAg(+)NAT(+)72份,符合率60.5%;HCV抗体(+)NAT(+)13份,符合率11.2%;HIV抗体(+)NAT(+)10份,符合率30.3%。41份ELISA(-)核酸(+)样本,且均为HBV DNA阳性。ELISA(+)NAT(-)173份。ELISA双试剂阳性样本中,HBV、HCV、HIV S/CO≥5的样本组的核酸阳性符合率高于S/CO5的样本组。结论核酸检测能有效地降低输血传播疾病的发生,但也存在漏检的可能,不能完全取代血清学检测,只有两者有机结合才能真正保证血液的安全。     

FQ-PCR和AMPLICOR HCV MONITOR 2.0方法测定HCV病毒载量的比较

目的 探讨荧光定量(FQ-PCR)和AMPLICOR HCV MONITOR 2.0试剂盒检测相同样品中丙型肝炎病毒(HCV)病毒载量值之间的关系.方法 收集84份样品,经ELISA检测抗-HCV,再分别使用两种方法测定HCV病毒载量,利用统计分析软件SPSS 15.0对病毒载量Log对数值进行统计分析.结果 当HCV病毒载量值大于1 000IU/ml时,两种方法检测结果的相关性为0.818(P<0.0001).结论 FQ-PCR和AMPLICOR HCV MONI-TOR 2.0两种方法测定的HCV病毒载量值有较高的相关性.     

云南省红河州静脉吸毒人群中HIV感染者的HCV共感染调查

目的调查云南省红河州静脉吸毒人群中艾滋病病毒(HIV)感染者的丙型肝炎病毒(HCV)合并感染率、HCV感染状况。方法采集600份红河州静脉吸毒人群中HIV感染者的血浆样本,用HCV抗体酶联免疫吸附试验在基层实验室初筛、在艾滋病参比实验室复检,初复检至少有一个为反应性结果的样本做核酸检测。结果基层实验室和艾滋病参比实验室的初复检一致率为99.3%(596/600)。HCV合并感染率53.6%(319/595),多因素分析:年龄30～40和40～50岁、退休或失业及其他职业是危险因素,比值比(OR)值分别为5.970、7.709、10.821、4.151;年龄≥60、女性、已婚(含分居)、大学及以上的学历是保护因素,OR值分别为0.036、0.224、0.474、0.082。281份核酸阳性,其中57.65%病毒载量大于106IU/mL。HCV病毒载量的分布在未服用和服用抗反转录病毒药物间差异有统计学意义(P0.05)。319份HCV合并感染样本中,11.91%核酸清除,多因素分析:服用抗反转录病毒药物是核酸清除的保护因素,OR值为0.295。结论云南省红河州静脉吸毒人群中HIV/HCV合并感染严重,中年男性、单身或离异等、低学历者、退休人员或失业者是合并感染的独立影响因素;合并感染者的HCV病毒载量较高,但服用抗反转录病毒药物可降低HCV病毒载量,使HCV核酸清除。     

HCV感染患者436例丙型肝炎病毒载量与抗-HCV及ALT异常的关系

目的 了解丙型肝炎病毒(HCV)载量与HCV抗体(抗-HCV)滴度及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平的关系.方法 采用双抗原夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗-HCV;用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测436例抗-HCV阳性者的HCV RNA定量,同时检测ALT水平.用SAS9.0软件进行分析.结果 HCV RNA阳性率随S/CO值的增大而增高,当S/CO值在11.965时,敏感性为80.83%,特异性为70%;HCV RNA载量与ALT水平呈正相关(r=0.234 10,P<0.05),HCV RNA介于104～105IU/ml时ALT异常率最高,说明异常ALT水平在不同HCV RNA分组中存在统计学差异(P<0.05);随着HCV RNA载量的升高,ALT异常率升高,但以中病毒载量组最明显(χ2=58.4480,P<0.05).结论 抗-HCV滴度越高,HCV RNA阳性率越高;HCV RNA是反映HCV复制的可靠指标,结合ALT结果可帮助了解HCV在体内的复制情况.     

丙型肝炎血清学分型

丙型肝炎病毒(HCV)具有较大的变异性,目前至少可以将其划分为3～6个基因型。HCV分型对于丙型肝炎的流行病学研究、干扰素治疗效果判定及预后的预测等均具有重要意义。目前所用的HCV基因分型方法为PCR法,因其较复杂繁琐,技术条件要求高、费用贵、     

三种丙型肝炎病毒核心抗原检测方法初步比较

目的对三种丙型肝炎病毒核心抗原(HCV cAg)的检测试剂进行初步比较。方法对72份抗体检测阳性样本进行HCV核糖核酸(RNA)、HCV核心抗原检测,其中HCV cAg分别采用A、B、C 3种试剂平行检测,实验室检测和数据统计均采用盲法。结果 A、B、C 3种HCV cAg检测试剂与核酸检测的符合率分别为97.22%、72.22%、54.16%,两两之间差异均有统计学意义(P0.05)。试剂A对HCVcAg的检出率与HCV RNA的检出率高度一致(Kappa=0.8421,95%可信区间:0.6290~1.0000)。方法B、C与核酸检测无一致性,差异有统计学意义(P0.05)。Cochran-Armitage趋势性检验表明,三种试剂对HCV cAg的检出率均随HCV RNA浓度升高而提高(Z统计量单侧P0.0001)。结论方法 A可作为条件有限时核酸检测的替代方法;三种HCV Ag检测方法的检测水平之间存在较大差距;三种方法对HCV cAg的检出能力均随核酸浓度的升高而增强。     

武汉市某医院就诊患者丙型肝炎病毒抗体与基因分型结果分析

目的:回顾性分析2017年武汉市某三甲医院就诊患者丙型肝炎病毒抗体及丙肝病毒基因分型结果,为丙型肝炎病毒的防治提供依据。方法:收集2017年1月至2017年12月在武汉市某三甲医院检验科进行丙型肝炎抗体检测和丙型肝炎病毒基因分型检测的患者资料,分析丙型肝炎抗体阳性率与年龄及性别的关系、丙型肝炎病毒抗体阳性患者在各科室的分布情况、丙型肝炎病毒基因型在接受检测的患者中的构成情况。结果:各年龄组之间丙型肝炎病毒抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=354. 869,P 0. 05),60岁～70岁人群阳性率最高;不同性别人群丙型肝炎病毒抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=12. 304,P 0. 05),女性阳性率高于男性;丙型肝炎病毒抗体阳性患者在各科室中的分布差异有统计学意义(χ2=342. 622,P 0. 05),感染科和肝脏外科阳性率最高;丙型肝炎基因分型以1b型和2a为主,占到受检人群90%以上。结论:1957年～1967年出生人群应该作为丙型肝炎病毒抗体的重点筛查对象,临床各科室中,部分科室阳性率明显高于其他科室,这些科室的医护人员应当更加注意个人防护措施,以防职业暴露的发生。在确定丙型肝炎治疗方案前进行基因分型的患者比例并不高,我们应该推广HCV治疗前的基因分型检测。     

丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒的诊断性能评价

目的：通过与国产科华丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂盒比较,分析评价意大利Dia.Pro Diagnostic Bioprobes S.r.l公司生产的HCV抗体检测试剂的诊断性能。方法：应用意大利产Dia.Pro丙肝抗体第3代酶免试剂盒（考核试剂）和国产科华丙肝抗体第3代酶免试剂盒（参比试剂）对7948份样本进行检测,检测结果不一致时,应用美国ORTHO DiaGNOSTIC公司第3代重组免疫印迹法3.0试剂盒进行确证,以对结果进行综合分析。结果：考核试剂和参比试剂灵敏度都为100%;考核试剂特异度99.76%,稍稍低于参比试剂的99.99%。考核试剂对HBV感染的病毒性肝炎、类风湿抗核抗体阳性样本检测,特异度为100%。考核试剂的总符合率为99.79%,阳性预测值为98.13%,阴性预测值为100%。用SPSS13.0分析,考核试剂的阳性样本和阴性样本的频数分布图直观效果比较理想;KAPPA值为0.989（P〈0.01）;ROC曲线下面积为0.998。结论：Dia.Pro试剂灵敏度100%,特异度99.76%,对阴阳性有较好的预知能力,与参比试剂KH试剂有很好的一致性,以及较优越的检测性能,是一种优秀的抗-HCV酶免试剂盒,适用于血液筛查和丙型肝炎诊断。     

丙型肝炎病毒肝外组织感染与肝外肿瘤的关系

目的：研究丙型肝炎病毒（HCV）在肝外组织感染及复制状况，探讨HCV与肝外肿瘤的关系。方法：采用免疫组化技术对70例慢性丙型肝炎（CHC）患者合并外科疾患的手术切除标本进行HCV抗原标记；RT-PCR检测组织中HCV正、负链RNA。结果：70例CHC合并恶性肿瘤的组织标本37份，HCV抗原阳性率为67.6％（25／37）；非恶性肿瘤的组织标本33份，HCV抗原阳性率为24．2％（8／33），两者比较差异有显著性意义（Х^2=13．14，P〈0．05）。33份HCV抗原阳性的组织中21份（63.6％）检出HCV正链RNA，10份（30.3％）检出HCV负链RNA，且组织中正链和负链HCV RNA的检出与细胞内HCV抗原表达信号呈较好的一致性。结论：HCV可以感染肝外组织，其中部分肝外组织是HCV的复制场所；在CHC患者HCV除诱发原发性肝癌外，还可能诱发其他的恶性肿瘤。     

丙型肝炎病毒感染者血清中自身抗体检测结果分析

为观察丙型肝炎病毒(HCV)感染者血清中自身抗体的变化情况,探讨自身免疫反应在丙型肝炎中的作用,我们以间接免疫荧光法对92例HCV感染者血清标本测定抗核抗体(ANA)、可提取性核抗原抗体(ENA)、抗线粒体抗体(AMA),抗平滑肌抗体(SMA),并根据荧光反应模式判定结果为:HCV感染者92例中有36例出现自身抗体,检出率为39.1%,高于慢性乙型肝炎自身抗体检出率12.8%(P<0.05),明显高于正常对照组的2.4%(P<0.01)。其中HCV感染者ENA阳性率为16.8%,由此可知,HCV感染后可出现自身免疫反应,自身免疫可能是HCV感染后组织损伤的重要因素。