双PCR检测丙型肝炎病毒RNA

本文报告了丙型肝炎病毒RNA检测方法的建立及临床初步应用结果。应用该方法的特点是:(1)微量,可从100μl血清中提取RNA;(2)操作程序精简,不用超速离心机等特殊设备;(3)快速,从提取HCV RNA-逆转录可在4小时内完成,1～2天可报告结果。临床初步应用结果表明,在14例输血后肝炎血清中13例检出HCV RNA,此结果表明输血后肝炎主要为HCV感染引起发病,提示供血员筛选的重要性。     

PCR和ELISA法检测献血员HCV携带者对比研究

笔者对４６份献血员的血清标本和ＰＣＲ法进行了检测，结果发现，ＰＣＲ阳性与ＥＬＩＳＡ法检测时的ＯＤ值有一定的关系。ＯＤ值在１．０００以上的，特别是超过阳性对照标本的ＯＤ值时，ＰＣＲ法的检测结果为阳性；ＯＤ值在ｃｕｒ ｏｆｆ值以下２３份标本之中全为阴性。通过实验结果和一些资料的分析，认为在目前我国血站对献血员检测ＡＬＴ和抗－ＨＣＶ情况下，在血站系统不应盲目引进ＰＣＲ检测技术。     

丙型肝炎HCV RNA检测的临床意义

目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）RNA检测在HCV单独感染和HCV、乙型肝炎病毒（HBV）合并感染中的临床意义。方法：对135例HCV感染者检测抗-HCV、HCVRNA,并对其中的HCV、HBV合并感染（HBV＋HCV组,30例）和HBV单独感染患者（HBV组,50例）检测HBVDNA。结果：135例中,抗-HCV和HCVRNA同时阳性91例,抗-HCV阳性而HCVRNA阴性38例．抗-HCV阴性而HCVRNA阳性6例。肝硬化和肝癌组HCVRNA阳性率（80．0％）较慢性肝炎组（64．2％）升高（P〈0．05）。在HCV和HBV合并感染组,HCVRNA阳性率（50．0％）低于单纯HCV感染组（76．5％）,差异有统计学意义（P〈0．05）,HBVDNA阳性率（26．7％）低于单纯HBV感染组（76．0％）,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：在以HCVRNA为重要检测指标诊断HCV时,应联合检测分析抗-HCV、HBVDNA,这对HCV感染的临床诊治有重要的指导意义。     

血液病患者丙肝病毒RNA检测结果分析

应用逆转录套式ＰＣＲ检测６１例血液病患者血清中的ＨＣＶ－ＲＮＡ，结果其阳性率明显高于正常人群。因此建议筛选献血员时除检测乙肝外，应联合检测抗－ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ，提高丙肝的检出率，以降低需要长期输入血制品的易感染人群的丙肝感染率，减少输血后肝炎的发生。     

PCR法检测尿毒症病人血清HCV—RNA结果分析

应用ＰＣＲ技术检测尿毒症病人血清ＨＣＶ—ＲＮＡ１６５例，结果显示：ＥＩＡ检测病人血清抗ＨＣＶ阳性率为６３．０％；抗ＨＣＶ阳性病人ＨＣＶ—ＲＮＡＰＣＲ检出阳性率为６５．３％；抗ＨＣＶ阴性病人检出率为９．８％；ＰＣＲ总阳性检出率为７５．１％。提示：ＣＲＦ病人抗ＨＣＶ和ＨＣＶ—ＲＮＡ检出率与输血呈正相关。ＣＲＦ病人接受透析与输血次数愈多，感染ＨＣＶ的机会就愈大。在血清中单独出现抗ＨＣＶ或同时检出抗ＨＣＶ和ＨＣＶ—ＲＮＡ者，表明与早期输血感染ＨＣＶ者已产生抗ＨＣＶ，ＨＣＶ—ＲＮＡ阳性与近期输血再次感染者关系极为密切。用ＰＣＲ法直接检测病毒毒粒要早于ＥＩＡ检出抗ＨＣＶ的阳性结果，有利于早期诊断。     

间接ELISA检测结果分析

间接ＥＬＩＳＡ试剂盒检测丙型肝炎病毒抗体 (抗 -ＨＣＶ)和艾滋病病毒抗体 (抗 -ＨＩＶ) ,具有灵敏度高、特异性好、快速简便的特点 ,因而广泛应用于对肝炎的鉴别诊断、献血员的筛选、防止输血后肝炎、艾滋病的感染等。间接ＥＬＩＳＡ试剂应用于临床检测时 ,经常遇到个别标本出现肉眼观测显色现象 ,而酶标仪打印却为阴性或时阴时阳的现象。给人们对检测结果的判读带来了困惑。医院也曾发生过要求血站退血的事件 ,给血站及检验工作人员带来负面影响和心理压力。作者经过大量实验数据统计及查阅相关资料 ,总结归纳出现上述现象的原因如下。1…     

荧光定量PCR检测1000例丙型肝炎RNA结果分析

目的：分析荧光定量PCR检测1 000例丙型肝炎RNA结果,了解不同年龄组HCV-RNA的病毒复制情况。方法：使用荧光定量PCR法检测不同年龄组、不同性别的HCV-RNA拷贝数。结果：根据临床用药不同将其分三个阶段,第一阶段为阴性,第二阶段为1.0E＋3-1.0E＋5,第三阶段为1.0E＋5-1.0E＋8。在（20~30）岁三阶段共54人。在（31~40）岁三阶段为共177人。在（41~50）岁三阶段共411人。在（51~60）岁三阶段共197人。在60岁以上三阶段共161人。合计：第一阶段为469人,第二阶段为93人,第三阶段为438人,共1 000人。2=37,P〈0.005,丙肝RNA的检测结果与发病年龄两者之间有关联性。阳性率为53.1%,男占52%,女占48%,比为10.92。结论：分析结果认为本组资料较准确的反映了不同年龄组HCVRNA的病毒复制情况,为临床诊断治疗提供了依据。     

不同基因型丙型肝炎病毒RNA定量分析

目的　根据定量 PCR检测结果 ,了解血清不同基因型 HCV- RNA的含量 .方法　采用荧光定量 PCR和逆转录巢式定性 PCR同时检测 16 6例丙肝患者的血清 HCV- RNA,再进行酶切分型 .计算各型 HCV- RNA平均含量 .结果　定量 PCR阳性血清 (131例 ) HCV- RNA含量在 1× 10 4 .0 4～ 1×10 8.1 1拷贝· m L- 1 .HCV- 型 (10 6例 )、HCV- 型 (18例 )和 / 混合型 (3例 ) RNA平均滴度分别为 1× 10 6 .88± 2 .0 1拷贝· m L- 1 ,1× 10 5.79± 1 .82 拷贝· m L- 1 和 10 5.50± 1 .6 2 拷贝· m L- 1 .结论　定性和定量检测结果有很好的一致性 .HCV- 型病毒含量显著高于 HCV- 型 .     

抗-HCV与HCV-RNA在丙型肝炎诊断中的观察

目的 探讨早期检测抗-HCV和HCV-RNA对诊断丙型肝炎的价值。方法 通过用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录PCR法，对198例丙型肝炎患者检测其抗-HCV和HCV-RNA。结果 抗-HCV总阳性率为84％，抗-HCV、HCV-RNA同时阳性为58％，抗-HCV单项阳性为26％，抗-HCV阴性而HCV-RNA阳性为16％。结论 HCV-RNA对早期HCV感染的诊断以及抗-HCV阴性的慢性丙肝的诊断有重要意义。对怀疑HCV感染者应同时检测抗-HCV和HCV-RNA，才能对不同时期的HCV感婆作出准确及时的诊断。     

逆转录—多聚酶链反应检测丙型肝炎病毒RNA方法的建立及实…

对逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＲＮＡ）的方法学进行了探讨，逆转录与多聚酶反应是否在同一反应管内进行，对ＨＣＶＲＮＡ检测结果没有明显影响，但在操作难易程度，ＴａｑＤＮＡ聚合酶的选择等方面有差别，在防止污染的前提下，套式ＰＣＲ可提高ＨＣＶＲＮＡ检出率（７．８３％）这对于极低水平ＨＣＶ感染的诊断十分重要，本文对受检标本的贮存方法也进行了初步探讨。     

1561例肝炎病人的血清HCV—RNA PCR检测

丙型肝炎是一种由丙型肝炎病毒引起的传染病。为提高丙型肝炎检测的准确性,我们于1995年引进了套式HCV-RNA PCR试剂盒,对肝炎病人的血清进行检测。本文报道我院1995年7月至1996年6月间1561例肝炎病人使用套式HCV-RNAPCR技术检测丙型肝炎的情况。     

PCR和ELISA法在检测HBV—DNA、HCV—RNA和结核分杆杆菌中的作用

目的；探讨PCR技术和ELISA法在检测HBV-DNA、HCV-RNA和结核分枝杆菌中的作用，以及与直接涂片法的对比结果。方法：分别用两法对临床确诊的感染病例和非感染者同时进行检测，并进行对比分析。结果：HBeAg阳性者HBV-DNA阳性，检出率为96.8%，HCV-RNA阳性检出率为19.4%。不同标本TB-DNA平均阳性检出率为39.98%。结论：PCR法灵敏度和特异度分别高于ELISA法和涂片查菌法。     

血清第三代抗—HCV与第二代抗—HCV及HCV—RNA检测结果的比较分析

对一组２５４例排除了甲型、乙型及戊型肝炎病毒感染的病毒性肝炎患者的血清同时检测第三代抗－ＨＣＶ、第二代抗 －ＨＣＶ及ＨＣＶ－ＲＮＡ，并对第三代抗－ＨＣＶ与第二代抗－ＨＣＶ及ＨＣＶ－ＲＮＡ之间的头等比较及分析。     

定量PCR与EIA法检测血液透析患者HCV比较

目的 探讨血液透析患丙型肝炎病毒（HCV）的检测方法。方法 对79例尿毒症长期血液透析患,采用荧光定量PCR法测定血清HCV-RNA水平,及第二代酶免疫试验（EIA）检测丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）。结果 血液透析患抗-HCV阳性率22.8%(18/79),荧光定量PCR法HCV-RNA检出率39.2%(31/79）。在抗HCV阴性的患中,HCV-RNA的检出率为42.6%(26/61)。两种方法检测结果的符合率为50.6%(40/79)。结论 荧光定量PCR技术可弥补EIA检测的不足,在抗-HCV阴性的血液透析患中检测HCVRNA具有重要意义。     

抗-HCV IgM与抗-HCV IgG、 HCV RNA间关系的探讨

目的　探讨丙型肝炎IgM抗体测定与抗-HCVIgG、HCVRNA间的关系及意义。方法　收集临床上送检抗-HCVIgG、HCVRNA的血清144份，采用间接酶联免疫吸附法检测抗-HCVIgM，并将三者结果进行比较分析。结果　在抗-HCVIgG与HCVRNA的四种组合中均有抗-HCVIgM阳性存在。抗-HCVIgM、抗-HCVIgG在HCVRNA阳性组的检出率(84.8%、60.6%)明显高于其各自在HCVRNA阴性组的检出率(35.9%、35.9%)，P＜0.05。抗-HCVIgM、抗-HCVIgG与HCVRNA的相关系数分别为0.49、0.25。抗-HCVIgM与抗-HCVIgG两种方法检测的结果相互关联(χ     

RT—PCR检测HCV—RNA及基因分型的研究

目的研究HCV基因分型的临床意义。方法应用RT－PCR方法检测HCV－RNA。结果150例献血员中抗-HCV6例阳性占40％，应用RT－PCR方法检测HCV－RNA10例阳性占6．6％，对其进行基因分型，其中HCV－Ⅱ型占89％，HCV-Ⅲ型占11％。结论说明我国人群HCV感染以Ⅱ型为主。12例抗-HCV阳性母亲及新生儿的HCV基因分型同属Ⅱ型，证明HCV母婴垂直传播存在。基因分型诊断为选择药物治疗提供科学依据。     

ELISA法与胶体金吸附法检测丙肝抗体特异性比较

目的 比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与胶体金吸附试验检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体的特异性.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测480例临床手术前患者血清.如酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测为阳性者,再采用肢体金吸附试验方法重新检测抗HCV.结果 480例样本中,抗HCV酶联免疫吸附试验法(ELISA)阳性10例,阳性率2.10%.胶体金吸附试验法阳性6例,阳性率1.25%.结论 酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测抗HCV检出率高出肢体金检测法0.85%.