纳洛酮及电针对雌性大鼠视前区GnRH释放的影响

本文用推挽灌流技术和特异性放射免疫分析法，测定大鼠视前区灌流液中GnRH和γβ-内啡肽的含量，以观察腹腔注射纳洛酮和电针对视前区GnRH和γβ-内啡肽释放的影响，结果表明，卵巢切除组大鼠GnRH的基础含量明显高于正常组大鼠（P＜0.02），腹腔注射纳洛酮30分钟后，卵巢切除组大鼠视前区GnRH含量比注射前明显升高（P＜0．01），而γβ-内啡肽含量未见明显改变，注射纳洛酮对正常组大鼠GnRH含量无明显影响。电针对卵巢切除组和正常组大鼠视前区GnRH及γβ-内啡肽含量均无明显影响，以上结果提示正常生理情况下，雌激素的反馈抑制可能是视前区GnRH释放的主要调节机制，巢卵切除后，雌激素的反馈机制被去除，中枢内阿片肽对视前区GnRH的释放抑制转为其主要的调节机制。     

滋阴泻火中药对性早熟模型大鼠促性腺激素释放激素及其受体mRNA表达的影响

目的：观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的性早熟模型大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)和垂体GnRH受体mRNA表达的影响,探讨滋阴泻火中药的作用机制。方法：将动物分为正常组、模型组、生理盐水组和中药组。模型组、生理盐水组和中药组动物5日龄时皮下注射达那唑300μg;中药组在15日龄时开始喂饲滋阴泻火中药,生理盐水组同时给予等量的生理盐水。免疫组织化学ABC法观察大鼠下丘脑GnRH的表达;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)观察下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。结果：和正常组比较,模型组和生理盐水组大鼠阴门开启和建立性周期的时间提前,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高,下丘脑GnRH免疫阳性神经元减少;中药组大鼠阴门开启和建立性周期的时间延缓,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达降低,下丘脑GnRH免疫阳性神经元增多。结论：滋阴泻火中药可能通过抑制下丘脑GnRH的合成和释放以及降低垂体对GnRH的反应性,抑制提前启动的下丘脑-垂体-性腺轴功能,这可能是滋阴泻火中药治疗性早熟的机理。     

全国中西医结合月经病与不育症学术研讨会纪要

全国中西医结合月经病与不育症学术研讨会于2 0 0 0年 10月 11～ 13日在上海召开。出席本次学术会议的代表 10 6人 ;韩国学者李泰均教授率团一行 15人参加了本次学术会议。会议共收到学术论文 177篇 ,其中月经病 72篇 ,不育症 94篇 ,其他 11篇 ,韩国送交学术论文 5篇 ,现就本次会议内容综述如下。1　中西医结合月经病的研究复旦大学医学院附属儿科医院蔡德培等研究发现 ,滋阴泻相火中药可使内侧基底下丘脑区及下丘脑视前区的促性腺激素释放激素 (ＧｎＲＨ )含量显著减少 ,使下丘脑视前区内侧核ＧｎＲＨ脉冲释放的频率及幅度明显下降 ;并可使…     

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠促性腺激素释放激素的影响

目的探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及雄激素受体(AR)mRNA 的影响。方法新生9日龄 SD 雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮,建立 ASR 模型,免疫组织化学法检测下丘脑视前区 GnRH 含量,RT-PCR 法测定下丘脑 AR mRNA 表达水平,并观察中药治疗前后上述两种物质的变化。结果 ASR 模型下丘脑视前区 GnRH 含量显著低于对照组(P<0.01),下丘脑 ARmRNA 表达水平显著升高(P<0.05),中药天癸方治疗后,下丘脑视前区 GnRH 含量上升至正常大鼠水平(P>0.05),AR mRNA 表达水平显著下降(P<0.001)。结论 ASR 模型下丘脑 AR mRNA 过度表达,视前区GnRH 含量降低,是引起该模型低促性腺激素和无排卵的原因之一,中药天癸方可使 AR mRNA 表达下降,改善低促性腺激素状态而产生促排卵作用。     

补肾中药对雌性青春期大鼠垂体GnRH受体mRNA及其受体蛋白表达的影响

目的：观察补肾中药对垂体促性腺激素释放激素（GnRH)受体及其基因表达的影响,探讨补肾中药调整下丘脑－垂体－性腺轴功能的作用环节及作用机理。方法：将青春期大鼠分为对照组、滋阴泻火组和益肾填精组,采用免疫组织化学方法检测GnRH受体的蛋白表达水平,采用原位杂交组织化学方法检测GnRH受体mRNA表达水平。结果：给予滋阴泻火中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著下调,GnRH受体蛋白合成减少;而给予益肾填精中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著上调,GnRH受体蛋白合成增多。结论：不同补肾中药可通过改变垂体GnRH受体及其mRNA表达水平,调节下丘脑－垂体－性腺轴的功能。     

滋阴泻火中药对雌性性早熟模型大鼠下丘脑生长激素释放肽及其受体GHSR1-α表达的影响

目的观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的雌性性早熟模型大鼠青春期启动时下丘脑生长激素释放肽(Ghrelin)及其受体(growth hormone secretion peptide receptor 1α,GHSR1-α)表达的影响。方法将40只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、生理盐水干预组及中药干预组,每组10只。模型组、生理盐水干预组及中药干预组于大鼠5日龄时一次性皮下注射达那唑300μg制备性早熟大鼠模型。15日龄起中药干预组、生理盐水干预组分别予滋阴泻火中药及生理盐水灌胃,给药干预7~10天,正常组不予处理。记录阴门开启情况,计算卵巢及子宫指数,检测外周血雌二醇(E2)、卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)含量、下丘脑Ghrelin及其受体GHSR1-α基因表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠阴门开启时间提前,外周血E2、LH水平、子宫指数、下丘脑GnRH含量升高,外周血FSH、下丘脑Ghrelin及GHSR1-αmRNA水平降低(P0.05,P0.01);与模型组及生理盐水干预组比较,中药干预组大鼠阴门开启时间未提前,外周血E2、LH水平、子宫指数及下丘脑GnRH含量明显降低(P0.05,P0.01),而下丘脑Ghrelin及GHSR1-αmRNA水平升高(均P0.01);4组间下丘脑Ghrelin及受体个数及活性比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论在基因转录水平上滋阴泻火中药对性早熟大鼠下丘脑Ghrelin及其受体有一定的调节作用。     

补肾中药对下丘脑GnRH、垂体FSH、LH及成骨细胞BGP基因表达的调节作用

目的:探讨补肾中药对下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、腺垂体促性腺激素卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及成骨细胞骨钙素(BGP)基因表达的调节作用。方法:采用定量的逆转录-聚合酶链式反应(定量的RT—PCR)方法,观察青春期大白鼠喂饲滋阴泻火或益肾填精中药后,下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH及成骨细胞BGP的信使核糖核酸(mRNA)表达水平的变化。结果:滋阴泻火药可使下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH及成骨细胞BGP的mRNA表达水平显著下调,而益肾填精药可使下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH及成骨细胞BGP的mRNA表达水平显著上调。结论:说明补肾中药可在转录水平调节下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH及成骨细胞BGP基因表达,这可能是补肾中药调整性早熟患儿青春发育进程和改善骨骼发育的主要作用机理之一。     

滋阴泻火中药对大鼠中枢生长相关基因的影响

目的:研究滋阴泻火中药对青春期大鼠中枢生长相关基因的影响.方法:设立对照组,采用荧光定量PCR法,检测小、中、大3组不同剂量中药对于青春期大鼠下丘脑及垂体部分生长相关基因的影响.结果:与空白组比较,用药4周、8周和停药4周,3组中药治疗组下丘脑GHRH基因及垂体GHRH受体基因表达变化无显著统计学意义(P＞0.05);而对于下丘脑SRIH基因表达,中、大剂量治疗组显著增高(P＜0.05).结论:滋阴泻火中药可能通过上调SRIH基因表达调节生长激素分泌.     

中药对大鼠下丘脑生长抑素及垂体生长激素基因表达与蛋白表达的调节作用

目的：观察滋阴泻火及益肾填精中药对大鼠下丘脑生长激素释放激素（GHRH）,生长抑素（SS）,垂体生长激素（GH）的基因表达及蛋白表达水平的影响。方法：将青春期SD雌性大白鼠分为3组。即对照组（喂饲生理盐水）,滋阴泻火组（喂饲滋阴泻火中药合剂）及益肾填精组（喂饲益肾填精中药合剂）。采用原位杂交,免疫组化技术分别检测下丘脑室周核SSmRNA及SS表达水平,弓状核GHRHmRNA及垂体GH的表达水平。结果：滋阴泻火组大鼠的下丘脑室周核SS基因表达,蛋白表达明显上调（P<0.05),垂体GH蛋白表达明显下调（P<0.05);而益肾填精组大鼠则相反,其室周核SS基因表达明显上调（P<0.05),垂体GH蛋白表达明显下调（P<0.05);而益肾填精组大鼠则相反,其室周核SS基因表达,蛋白表达明显下调（P<0.05),垂体GH蛋白表达明显上调（P<0.05)。但两组下丘脑弓状核GHRH基因表达无明显变化。结论：滋阴泻火和益肾填精中药可转录水平及蛋白合成水平,调节下丘脑室周核SS的基因表达及蛋白表达,从而调节垂体GH的合成及翻译,但对弓状核GHRH的基因表达无明显影响。     

针刺对大鼠β—内啡肽含量的影响

采用核团微穿刺和放免技术,检测针刺对大鼠β-内啡肽(B-Ep)含量。结果表明,针刺可致下丘脑室旁核(PVN)、视上核(SON)和中脑导水管周围灰质(PAG)内β-Ep含量显著降低,垂体后叶和脊髓腰段内含量升高,外侧视前区、垂体前叶和血浆内含量无明显变化。提示β-Ep参与针刺镇痛可能通过PVN、SON、PA G和脊髓等神经结构实现的。     

电针对动情周期不同阶段大鼠GnRH免疫反应表达的研究

目的:探讨电针对下丘脑-垂体-靶腺轴特异性调节规律。方法:成熟雌性SD大鼠按动情周期的4个阶段随机分为假电针组、“关元”组、“内关”组。针刺治疗在早晨9∶30开始持续30min,下午15∶00时断头取脑组织。通过免疫组织化学染色观察促性腺激素释放激素(GnRH)免疫反应在下丘脑与生殖内分泌相关核团的表达。结果:①动情周期不同阶段GnRH免疫反应表达的数量不同,动情前期和动情期较多;②针刺后在内侧视前区、弓状核、室旁核等部位动情周期的不同阶段GnRH免疫反应的表达均有不同程度的增加,尤其是“关元”组在动情间期和动情后期GnRH“强”免疫反应表达增加明显。结论:电针后下丘脑GnRH免疫反应表达明显增加的部位有内侧视前区、弓状核、室旁核等,“关元”组优于“内关”组,动情间期及动情后期表现明显。     

桂枝汤对体温双向调节作用机理探讨──对下丘脑5－羟色胺的影响

脑室注射５－ＨＴ，一小时内能诱致大鼠发热。测定发热大鼠和体温低下大鼠下丘脑组织的５－ＨＴ及其代谢产物５一羟吲哚醋酸（５－ＨＩＡＡ）的含量，发现在发热动物中５－ＨＴ含量升高，５－ＨＩＡＡ含量下降；在低体温大鼠，５－ＨＴ和５－ＨＩＡＡ含量均较正常降低。桂枝汤口饲给药，既能抑制５－ＨＴ脑室注射引起的发热反应；在解热和提高低体温动物肛温的同时，能使发热大鼠下丘脑中５－ＨＴ含量显著降低，５－ＨＩＡＡ含量升高；使低体温大鼠下丘脑的５－ＨＴ含量上升、５－ＨＩＡＡ含量下降。实验结果提示，桂枝汤对体温的双向调节，部分通过影响体温中枢神经递质５－ＨＴ实现的。     

正常和病理状态下“关元”穴的中枢神经束路示踪研究及电针的影响

目的:应用伪狂犬病毒(PRV)作为神经示踪剂研究正常和病理状态下"关元"穴针刺信号从穴位传递到神经中枢的通路,并观察电针对其影响。方法:将SD雌性大鼠随机分为正常组(NC)、正常加电针组(NC+EA)、去卵巢组(OVX)和去卵巢加电针组(OVX+EA)。OVX和OVX+EA组行双侧卵巢切除术,术后4周与NC和NC+EA组同时在"关元"穴注射10μl滴度为108plaque-formingunits(PFU)/ml的PRV。NC+EA和OVX+EA组在注射病毒后30min在"关元"穴给予电针处理(2Hz,2～3mA),每天1次,每次30min,连续3d。用免疫组化法观察PRV免疫阳性细胞在中枢神经系统的分布及数量。结果:1)4组大鼠的脊髓、脑干、下丘脑以及大脑皮层均可观察到PRV免疫阳性细胞,其主要分布为:脊髓腰、胸、颈段的腹侧和背侧角,脑干孤束核、巨细胞网状核、三叉神经脊束核、下橄榄核等,下丘脑室旁核、弓状核、腹内侧核、斜角带核、视前大细胞亚核等,以及皮层的纹状区等。2)在OVX组,与神经内分泌密切相关的核团中PRV免疫阳性细胞数量明显减少,如:隔内侧核、室旁核、弓状核、斜角带核(P<0.05);部分核团甚至无阳性表达,如:下丘脑视前大细胞亚核、腹内侧核(P<0.01)。OVX+EA组在相同核团内的阳性细胞数量与OVX组相比明显增加(P<0.05)。NC和NC+EA组相比差异无显著性意义(P>0.05)。结论:去卵巢后,机体功能发生异常,正常状态下的神经通路受到影响;针刺"关元"可促进原有神经结构的恢复。     

何首乌饮对雌性衰老大鼠下丘脑神经递质的影响

目的 探讨下丘脑衰老时神经递质的变化及何首乌饮延缓下丘脑衰老的作用机制.方法 D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老动物模型,造模后灌胃何首乌饮连续60 d后,大鼠断头取下丘脑.采用ELISA法检测各组大鼠SP,β-EP和GnRH的含量;高效液相色谱法(HPLC)以SHIMADZU-10A 高效液相色谱仪和L-ECD-6A电化学检测器检测下丘脑单胺类神经递质NA,DA,5-HT的含量.结果 同正常对照组相比,模型组大鼠下丘脑GnRH、SP明显增高,β-EP与NA、DA、5-HT含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).与模型组比较,何首乌饮组下丘脑GnRH、SP明显下降,β-EP与NA、DA、5-HT含量显著升高,呈现一定的剂量依赖性.结论 衰老时大鼠下丘脑正常功能被破坏,何首乌饮通过对神经递质紊乱的调节而延缓了下丘脑的衰老.     

Relationship between effect of acupuncture on prolactin secretion and central catecholamine and R-aminobutyric acid

This laboratory had reported that acupuncture at "Tan-Zhong" acupoint could stimulate pituitary prolactin (PRL) secretion in both lactating and non-lactating (male, female, ovariectomized estrogen-supplemented) rats. Hu et al had discovered that acupuncture could increase plasma PRL level in women of lactation deficiency. As was known, pituitary PRL secretion was under the control of prolactin inhibitory factor (PIF) and prolactin releasing factor (PRF) released from hypothalamic neurons as well as several central neurotransmitters. In the past decade, many studies in neuroendocrinology revealed that Tubero-infundibular dopamine (TIDA) neurons of hypothalamus play a major modulating role in PRL secretion. It is generally agreed that dopamine was the major PIF. The central noradrenaline (NE) is also a modulator. It was reported that NE could inhibit PRL secretion, but others obtained opposite result. The GABA has dual actions on PRL secretion: central action is stimulatory, but inhibitory on pituitary directly Using agonist or antagonist of central neurotransmitter as well as its biosynthesis blocker etc., this paper mainly observed the possible role of catecholamine and r-aminobutyric acid in prolactin-elevating effect of acupuncture. This will help further studying on and provide possible central mechanism for the effect of promoting milk yield and elevating PRL secretion by acupuncture.     

探讨服中求阳与阳中求阴对谷氨酸单钠大鼠下丘脑—垂体— …

目的：研究弓状核（ＡＲＣ）毁坏后下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺（ＨＰＡＴ）轴的变化以及与肾阴肾阳的内在联系。方法：给 出生后（第２、４、６、８、１０天）大鼠每天皮下注射左旋谷氨酸单钠（ＭＳＧ）４ＭＧ／Ｇ损毁下丘脑ＡＲＣ,成年后分别以左 右归饮灌胃（每天５ｇ／ｋｇ）结果：ＭＳＧ大鼠下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＨ）阳笥细胞及垂体前叶肿肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）分泌细胞数量明显多于生理盐水组,     

探讨阴中求阳与阳中求阴对谷氨酸单钠大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴的影响

目的：研究弓状核（ＡＲＣ）毁坏后下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺（ＨＰＡＴ）轴的变化以及与肾阴肾阳的内在联系。方法：给出生后（第２、４、６、８、１０天）大鼠每天皮下注射左旋谷氨酸单钠（ＭＳＧ）４ｍｇ／ｇ损毁下丘脑ＡＲＣ，成年后分别以左归丸与右归饮灌胃（每天５ｇ／ｋｇ）。结果：ＭＳＧ大鼠下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＨ）阳性细胞及垂体前叶促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）分泌细胞数量明显多于生理盐水组，染色较深；肾上腺束状带紊乱不齐细胞数量增多，血窦扩张充血明显；胸腺萎缩，淋巴细胞增殖反应明显低于生理盐水组；血浆皮质酮及血浆ＡＣＴＨ和下丘脑ＣＲＨ等浓度高于生理盐水组。左归丸组上述病理生理变化得到明显改善，右归饮则无此作用。结论：ＨＰＡ轴功能亢进伴细胞免疫功能低下的病理生理过程可能属肾阴虚证范畴。