决明"发根"蒽醌类化学成分的研究

我室成功地诱导了决明发根的产生,对其化学成分进行了系统地分离与鉴定,共分得12个化合物,经波谱测试鉴定其中8个化合物的结构,分别是:大黄酚、大黄素甲醚、大黄酚-8-甲醚、大黄酚-1-甲醚、芦荟大黄素、1-羟基-3-甲氧基-8-甲基蒽醌(1-hydroxy-3-methoxy-8-methylanthraquinone)、1-羟基-7-甲氧基-3-甲基蒽醌(1-hydroxy-7-methoxy-3-methylanthraquinone)和1,2,8-三羟基-6,7-二甲氧基蒽醌(1,2,8-trihydroxy-6,7-bimethoxyanthraquinone), 其中后4个化合物均为首次自决明发根中分得，其余结构正在鉴定之中.     

药用植物毛状根研究进展

利用发根农杆菌转化药用植物产生毛状根,并建立毛状根培养体系,已成为生产药用植物次生代谢产物一种新的途径。由于毛状根生长迅速,遗传稳定性强,次生代谢产物含量高,为药用植物次生代谢产物的工业化生产提供了新的思路。主要概述了发根农杆菌的转化机制、毛状根的培养、影响因素及其在药用植物中的应用,以期为药用植物毛状根培养体系的建立和次生代谢产物的生产提供参考。参考文献37篇。     

Ri质粒转化植物生产天然活性成分的研究进展（Ⅱ）

综述了影响发根生长和次生代谢产物合成的因素，用生物反应器培养植物发根的方法，提高发根次生代谢物含量的措施，以及发根培养物的次生代谢产物。     

天山大黄发根培养物中蒽醌化合物的产生

目的：探索用发根培养法生产植物次生代谢物的途径。方法：用发根农杆菌Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ９４０２所含Ｒｉ质粒遗传转化药用植物天山大黄以诱导发根用纸电泳法检测发根中冠瘿碱的存在；用高效液相色谱法测定发根中芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚８甲醚等游离蒽醌化合物的含量。结果：诱导出了天山大黄发根，并建立了发根离体培养系；从发根中检测到甘露碱、农杆碱的存在；定量分析发现，天山大黄发根中含有多种蒽醌类成分，其中大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚８甲醚的含量分别高于原植物根中的含量。结论：天山大黄发根能产生与原植物药用部位种类相似的化学成分     

决明毛状根诱导及激素与诱导子对毛状根生长和蒽醌类化合物合成的影响

目的研究激素与诱导子对决明毛状根生长和蒽醌类化合物合成的影响。方法用发根农杆菌LBA9402感染决明Gassia obtusifolia外植体，建立决明毛状根培养系统。结果NAA为决明毛状根培养的最适外源激素，培养基中添加0．05％NAA可使毛状根中5种蒽醌类化合物总和提高4倍。黑曲霉诱导子对毛状根生长影响不大，却明显促进蒽醌类化合物的形成，其中每50mL培养基加入2．0mL诱导子可使蒽醌类化合物总量增加2倍多。茉莉酸(JA)对决明毛状根中蒽醌类化合物合成具有明显的促进作用．其中10μmol/L作用最强，蒽醌类化合物总量比对照提高73％，JA对毛状根生长有抑制作用，但不太显著。结论为进一步筛选适宜的决明毛状根培养系统并调控次生代谢产物的研究奠定了基础。     

正常的与转化的羽扇豆细胞培养物中类异黄酮葡糖甙的形成

在利用基因转化改变羽扇豆属(Lupinus)植物细胞培养物次生代谢途径的过程中,作者比较了正常的(对植物激素有依赖的)细胞悬浮培养物,用根癌土壤杆菌 (Agrobacteum、tumefaciens)(DSM 30150)转化的培养物和用发根土壤杆菌(15834菌株)转化的根培养物。通过植物DNA被EcoRI消化的片段与pTiT37(根癌土壤杆菌的质粒DNA)的HindⅢ消化的片段或与pLJl(发根土壤杆菌的质粒DNA)的BamHI消化的片段进行杂交证     

掌叶大黄发根及愈伤组织、悬浮细胞中蒽醌类成分的比较研究

目的：比较Ｒｉ质粒转化的掌叶大黄发根与愈伤组织、悬浮细胞以及掌叶大黄生药中游离蒽醌成分的含量。方法：用发根农杆菌Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ９４０２野生型菌株感染掌叶大黄外植体以诱导发根，建立发根离体培养系，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定发根；分别诱导掌叶大黄愈伤组织和悬浮细胞；用高效液相色谱法测定发根、愈伤组织、悬浮培养细胞以及掌叶大黄生药中芦荟大黄素等游离蒽醌化合物的质量含量。结果：从子叶柄上诱导出了发根，并建立了培养体系；Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果证明Ｒｉ质粒ＴＤＮＡ转移并整合到植物细胞基因组中；用叶片作外植体诱导出了愈伤组织；悬浮培养细胞用叶片、叶柄外植体诱导的愈伤经液体培养获得；掌叶大黄发根中各种游离蒽醌化合物含量普遍高于愈伤组织，但低于生药和悬浮培养细胞。结论：用掌叶大黄发根培养物生产蒽醌化合物是一条值得探索的新途径。     

西蒙Ⅰ号番薯毛状根化学成分的研究(Ⅱ)

西蒙号番薯IpomoeabatatasLam.VarietySimonNo.1,是巴西联邦国立农科大学发现的药用番薯,20世纪80年代引入我国。对多种出血性疾病及胰岛素非依赖型糖尿病有疗效,并有提高免疫功能和抑制癌细胞作用[1,2]。应用发根农杆菌从该番薯叶片中诱生了毛状根,并相继从中分离得到萜类、甾醇及生物碱类成分[3,4]。为进一步研究番薯毛状根中的次生代谢产物,以寻找具有药用前景的先导化合物,采用溶剂萃取和制备性TLC的方法,从番薯毛状根中又分得2个单体化合物,鉴定为:6-甲氧基-7-羟基香豆精()和7-羟基香豆精()。2个化合物为从番薯毛状根中首次分得,在…     

稀土元素镧对掌叶大黄毛状根和非转化根生长及葸醌产量的影响

目的 研究不同浓度的稀土元素镧(La2 )对3种大黄根生物量和蒽醌次生代谢产物产量的影响。方法采用统计学分析方法,研究稀土元素La3 对两种掌叶大黄单克隆毛状根DH5c、DH7a和液体培养非转化根NOR生物量和蒽醌化合物合成的影响。结果 La3 浓度对大黄根生物量积累有显著影响,培养基中La3 为10 mg/L时,对大黄根生长表现出明显的抑制作用;La3 浓度对3种大黄根的蒽醌产量有极显著影响,当培养基中La3 1.0mg/L时,蒽醌产量最高;经稀土离子处理的3种大黄根中芦荟大黄素和大黄酸显著高于大黄素、大黄酚和大黄素甲醚。结论 培养基中添加适宜浓度的稀土离子La3 对掌叶大黄单克隆毛状根的生物量积累和蒽醌类化合物的合成具有明显的促进作用。     

决明Ri质粒转化根离体培养研究

目的:用Ri质粒转化决明,检测转化根培养物中蒽醌化合物的产生.方法:用叶盘法转化决明外植体诱导Ri质粒转化根并用Southern杂交加以鉴定,测定转化根的生长周期,用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定光培养及暗培养转化根中游离蒽醌化合物的质量分数.结果:决明转化根在第5～20天为对数生长期,Southern杂交证明了Ri质粒T-DNA转移并整合到植物基因组中,HPLC结果说明暗培养转化根中芦荟大黄素等6种游离蒽醌化合物含量为光培养的2倍多.结论:决明转化根培养周期为35 d较为适宜;暗培养有利于决明转化根的生长及游离蒽醌化合物的积累.     

短葶飞蓬毛状根的诱导及黄酮类成分测定

目的通过诱导培养短葶飞蓬毛状根产生有用次生代谢产物。方法利用发根农杆菌C58C1感染短葶飞蓬无菌苗叶盘诱导毛状根,小量提取脱农杆菌完全的毛状根DNA用于rol基因的PCR检测,经PCR检测阳性的毛状根采用4种不同液体培养基振荡扩大培养,对于获得的毛状根系测定其中总黄酮和灯盏花素的量。结果发根农杆菌感染10min共培养2d可取得较好的转化效果,继代培养约两个月后可脱菌完全,获得的毛状根PCR检测阳性率为52.9%,4种液体培养基中B5培养基更适合于毛状根的生长,毛状根中总黄酮量要明显高于正常根中的量,但灯盏乙素的量明显低于正常根中的量。结论通过短葶飞蓬毛状根大量培养可获取灯盏黄酮类药用成分。     

植物药材次生代谢产物的积累与环境的关系

许多植物药的活性成分是其所含的次生代谢物质,人工种植时其产量取决于初生产物的积累,质量取决于次生产物的积累。药材质量及有效性的基础是植物的次生代谢。次生代谢物质的产生是发育程度、组织分化及外界刺激因素通过影响生物合成基因表达而控制。对次生代谢产物在植株体内形成和积累的诱导有不同的诱导机制假说。但都认为环境胁迫时,次生代谢产物数量增加。次生代谢产物积累与生长环境条件需求方面存在矛盾,是药用植物种植的难题。     

药用植物发根培养及发根培养器△

分析了发根培养技术生产次级代谢产物及发根培养器(反应器)在中药领域的国内外研究动态,表明药用植物发根培养的基础理论研究已远远超过了发根培养器的应用研究,而药用植物发根培养生产次级代谢产物的工业化前景则主要取决于多功能发根培养器的研制成功。     

罗勒发根的诱导及不同因子对发根生长及次生代谢产物的影响

目的 探讨不同因子对罗勒Ocimum basilicum发根生长及次生代谢产物的影响。方法 用发根农杆菌1025感染罗勒叶片,建立发根培养体系,并利用紫外分光光度法测定不同培养时间及培养基中添加激素和诱导子后罗勒发根中多糖和总黄酮的量。结果 激动素（KT）为罗勒发根培养的最适外源激素;茉莉酸甲酯（MeJA）对罗勒发根的生长有抑制作用,但明显促进总黄酮的形成;水杨酸（SA）对罗勒发根的生长影响不显著,但对多糖和总黄酮的积累有明显促进作用。结论 5种外源激素和2种诱导子均能不同程度地影响罗勒发根的生长及次生代谢产物的积累,为进一步筛选适宜的罗勒发根培养系统并调控次生代谢产物的研究奠定了基础。     

远志毛状根诱导及其3,6’-二芥子酰基蔗糖酯测定

目的从远志诱导出毛状根,并检测其寡糖酯类成分的产生。方法应用发根农杆菌A4、R1600和R1000菌株分别感染远志外植体,采用高效液相色谱(HPLC)法检测诱导出的毛状根中3,6’-二芥子酰基蔗糖酯的含量。结果 3种发根农杆菌均能诱导远志外植体产生毛状根,且毛状根中都检测到3,6’-二芥子酰基蔗糖酯,A4菌株诱导远志下胚轴产生的毛状根的3,6’-二芥子酰基蔗糖酯含量高于R1600和R1000菌株(F=5 066.792,P<0.05)。结论用远志毛状根培养物生产寡糖酯类成分是一条值得探索的新途径。     

刺五加组织培养与细胞工程进展

综述了国内外对刺五加组织培养与细胞工程研究的现状。分别从体细胞胚胎发生的影响因素外植体的发育程度和类型、培养基、植物生长调节剂的种类和浓度以及作用特点、体细胞胚胎的形态发生过程与解剖学和人工种子的包埋与萌发;茎尖外植体的离体培养与快速繁殖;根癌农杆菌和发根农杆菌对愈伤组织和新生体胚的遗化转化;毛状根培养生产刺五加次生代谢产物的研究现状进行了评述,并进一步分析了其中存在的问题,提出了一些建议。     

紫苏叶中2个新木脂素及其对NO合成酶的TNF—α在鼠巨噬细胞RAW264.7中表达的抑制

金丝桃属植物中的许多次生代谢产物都是具生物活性且含酰基间苯三酚的化合物。作者从乌兹别克斯坦常用传统草药糙枝金丝桃 Hypericum scabrum 的地上部分分得9个新的带有多个异戊二烯基侧链的苯甲酰间苯三酚衍生物,拟名为 hyperibone A～I(1～     

脱落酸及其调控植物次生代谢产物生物合成的研究进展

次生代谢产物是植物长期进化过程中为了适应生态环境产生的天然有机化合物,近年来,随着生物技术的发展,植物次生代谢产物经济以及药用价值愈发引起广泛关注。但一些次生代谢产物因为其复杂的结构和合成路径以及在植物中极低的含量,使其不能低成本大量生产。脱落酸（ABA）作为调控植物生长发育过程中的重要植物激素之一,可以依靠自身的合成与分解、信号传导、激素互作等作用来调控次生代谢产物的合成。文章综述了ABA在生物合成与分解代谢以及信号转导等方面的新进展,归纳了ABA对不同类型次生代谢产物的调控作用,为合理利用植物激素提高植物次生代谢产物的产量提供依据。     

Ri质粒转化植物用于生产天然活性成分的研究进展（I）

Ｒｉ质粒子转化植物产生的发根生长迅速，能合成与原植物相同或相似的次生代谢物，在生产植物天然活性成分方面具有广阔的应用前景，作者对Ｒｉ质粒的分类及转化植物的机制，发根农杆菌感染植物的方法及发根的产生与鉴定，发根培养物的特点等方面作了较详细的综述。     

Ri质粒转化植物用于生产天然活性成分的研究进展(Ⅰ)

Ri质粒转化植物产生的发根生长迅速，能合成与原植物相同或相似的次生代谢物，在生产植物天然活性成分方面具有广阔的应用前景。作者对Ri质粒的分类及转化植物的机制，发根农杆菌感染植物的方法及发根的产生与鉴定，发根培养物的特点等方面作了较详细的综述。