妊娠期糖尿病孕妇血清Th1/Th2比值测定及分析

目的测定妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中Th1细胞分泌的细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)及Th2细胞分泌的细胞因子白介素-4(IL-4)的水平,分析Th1/Th2比值与GDM的关系。方法选取2015年10月至2016年10月间在我院住院治疗的GDM孕妇30例为GDM组,同时随机选取同一时期内在我院住院的正常孕妇30例为对照组。两组对象于早晨抽取空腹静脉血测定糖化血红蛋白,采用ELISA方法测定两组对象血清中的IFN-γ和IL-4水平。比较两组对象的上述实验室指标及IFN-γ/IL-4比值。结果两组孕妇的年龄、孕周、糖化血红蛋白水平比较,均无显著性差异(P0.05)。GDM组患者血清中IFN-γ水平显著低于对照组[(87.38±9.14)vs.(96.27±10.24)pg/ml](P0.05),IL-4水平显著高于对照组[(49.09±1.44)vs.(42.38±1.28)pg/ml](P0.05)。GDM组患者血清中IFN-γ/IL-4比值显著低于对照组[(1.78±0.11)vs.(2.27±1.07)](P0.05)。结论 GDM患者体内存在着Th1/Th2失衡的现象,Th2更加优势表达。     

Ⅲ型前列腺炎辅助性T细胞亚群的分化

目的 了解Ⅲ型前列腺炎前列腺液中CD4^＋T辅助性T细胞（Th细胞）亚群的分化情况。方法 按照美国国立卫生院（NIH）分类方法将病例分成ⅢA型／组（47例）、ⅢB型／组（29例），另设健康对照组（16例）。采用双抗体夹心酶联免疫法检测前列腺液（EPS）中Th；类细胞因子（IFN-γ）、Th2类细胞因子（IL-4）水平以及Th1／Th2比值（IFN-γ／IL-4）。结果 和对照组比较，ⅢA组、ⅢB组IFN-γ水平明显上调（P〈0．05），ⅢA组较ⅢB组升高更明显（P〈0．05）；和对照组比较，ⅢA组IL-4水平无明显变化（P〉0．05），ⅢB组IL-4水平上调（P〈0．05）：和对照组比较，ⅢA组IFN-γ／IL-4明显升高（P〈0．05），ⅢB组IFN-γ／IL-4无明显改变（P〉0．05）。结论 ⅢA型前列腺炎Th；细胞分化占优势，Th1／Th2平衡向Th1漂移，以细胞免疫反应为主；Th细胞分化也参与了ⅢB型前列腺炎的发病，但Th1／Th2处于相对平衡状态。     

巨噬细胞炎性蛋白-1α在前列腺按摩液中的表达及意义

目的:检测前列腺按摩液(EPS)中巨噬细胞炎性蛋白-1α( MIP-1 α)的mRNA和蛋白表达水平,探讨其在慢性前列腺炎分型中的意义.方法:50例临床诊断的慢性前列腺炎患者,其中慢性细菌性前列腺炎(CBP)16例,慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征(CPPS) 23例,分为ⅢA型11例,ⅢB型12例.无症状性炎症性前列腺炎Ⅳ型11例.收集EPS.同时选取15例健康自愿者做正常对照.RT-PCR法扩增MIP-1α mRNA,统计分析各组mRNA表达差异.ELISA法检测MIP-1α的蛋白表达水平,统计分析各组EPS的MIP-1α浓度差异.结果:RT-PCR半定量分析显示,MIP-1α mRNA在CPPSⅢA组和CPPSⅢB组的表达显著高于其他各组(P＜0.05).ELISA分析显示,MIP-1α蛋白浓度在CPPSⅢA组[(1 174.3±89.2) pg/ml]和CPPSⅢB组[(842.3±76 2)pg/ml]也显著高于正常组[ (198.0±37.8) pg/ml]、CBP组[(347.0 ±61.6) pg/ml]及Ⅳ型组[(292.0±56.4) pg/ml](P＜0.05).结论:从mRNA和蛋白水平检测EPS中MIP-1α可能有助于慢性前列腺炎的分型诊断.     

间质性膀胱炎与1型/2型辅助性T淋巴细胞漂移的相关研究

目的 探讨间质性膀胱炎(IC)患者血浆及膀胱黏膜1型/2型辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)与免疫调节失衡的关系.方法 女性IC患者血浆及黏膜标本16例,输尿管结石患者标本16例作为对照组.2组患者性别及年龄匹配.IC患者符合美国糖尿病、消化及肾病协会诊断标准.依据盆腔疼痛和尿急/尿频症状评分(PUF评分)结果分为低评分(0～20分)和高评分(21～35分)2组.采用酶联免疫吸附试验和免疫组化染色检测2组患者血浆和膀胱黏膜中Th1(IFN-γ和IL2)和Th2(IL-4和IL-10)细胞因子表达情况. 结果①IC患者血浆IFN-γ、IL-2表达量分别为(4.57±2.92)、(17.52±7.52)pg/ml,对照组分别为(4.11±2.27)、(20.99±5.09)pg/ml,2组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05);IC患者血浆IL-4、IL-10表达量分别为(O.34±0.22)、(4.37±2.34)pg/ml,对照组分别为(0.14±0.07)、(1.18±0.61)pg/ml,2组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).②IC患者和对照组膀胱黏膜标本中IFN-γ、IL-2表达强度比较χ2值=1.900、0.514,差异均无统计学意义(P＞0.05);2组IL-4、IL-10表达强度比较χ2值=8.237、8.209,差异均有统计学意义(P＜0.05).③IC患者PUF低评分组血浆IL-4、IL-10表达量分别为(0.16±0.11)、(2.42±1.27)pg/ml,高评分组分别为(0.53±0.12)、(6.31±1.21)pg/ml,2组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).2组膀胱黏膜标本IL-4表达强度比较χ2＝7.608,γ3＝0.467,差异有统计学意义(P＜0.05);IL-10表达强度比较χ2＝8.844,γ3＝0.517,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IC患者存在免疫调节失衡,Th2介导的体液免疫反应增强,且免疫失衡随症状程度而加重.     

肺炎支原体肺炎患儿支气管肺泡灌洗液白细胞介素-4、白细胞介素-6、干扰素-γ水平与病情和肺功能的关系

目的:分析肺炎支原体肺炎(MPP)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)水平与病情和肺功能的关系。方法:选取徐州市儿童医院2019年5月至2020年10月收治的109例MPP患儿(研究组)和102例急性支气管异物患儿(对照组),均实施支气管肺泡灌洗术。研究组MPP患儿根据病情分为轻症组(85例)和重症组(24例),并根据患儿肺功能损伤程度分为肺功能正常组(26例)、轻度损伤组(32例)、中度损伤组(30例)和重度损伤组(21例)。取入组患儿BALF,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-4、IL-6、IFN-γ水平并进行比较;比较研究组不同病情、不同肺功能损伤患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平:两组间比较采用成组设计资料t检验;多组间整体比较采用方差分析后组间两两比较采用LSD-t检验。应用Pearson相关分析研究组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平与肺功能的关系。结果:研究组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平均高于对照组[IL-4:(142.4±24.7)pg/ml vs.(73.2±13.0)pg/ml,t=25.159、P<0.001;IL-6:(56.4±10.3)pg/ml vs.(11.2±2.3)pg/ml,t=43.399、P<0.001;IFN-γ:(90.2±16.3)pg/ml vs.(41.8±6.8)pg/ml,t=27.857、P<0.001]。研究组中重症组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平分别为(200.7±36.7)pg/ml、(103.3±16.8)pg/ml和(113.5±21.9)pg/ml,均显著高于轻症组[(125.9±22.4)pg/ml、(43.1±7.8)pg/ml和(83.6±14.1)pg/ml](IL-4:t=12.378、P<0.001,IL-6:t=25.010、P<0.001,IFN-γ:t=8.035、P<0.001),差异有统计学意义。研究组中肺功能正常组患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平分别为(81.6±15.5)pg/ml、(20.4±4.2)pg/ml和(74.7±11.9)pg/ml,轻度损伤者分别为(102.5±19.9)pg/ml、(48.9±8.2)pg/ml和(89.2±11.1)pg/ml,中度损伤者分别为(145.7±25.2)pg/ml、(60.2±10.2)pg/ml和(95.4±12.8)pg/ml,重度损伤者分别为(273.7±42.1)pg/ml、(106.9±17.6)pg/ml和(103.2±13.2)pg/ml。肺功能轻度、中度、重度损伤组患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平均高于肺功能正常组(P均<0.05),肺功能中度、重度损伤组患儿以上指标水平均高于肺功能轻度损伤组(P均<0.05),肺功能重度损伤患儿均高于肺功能中度损伤者(IL-4:t=13.581、P<0.001,IL-6:t=11.956、P<0.001,IFN-γ:t=2.117、P=0.039),差异均有统计学意义。研究组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平与1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值(PEF)均呈负相关(IL-4与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF相关性:r=-0.834、P=0.025,r=-0.810、P=0.009,r=-0.901、P=0.002;IL-6与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF:r=-0.816、P=0.003,r=-0.795、P=0.012,r=-0.743、P=0.007;IFN-γ与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF:r=-0.756、P=0.012,r=-0.738、P=0.010,r=-0.725、P=0.017)。结论:MPP患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平均偏高,且3个指标水平与病情、肺功能均有关。     

巨噬细胞炎性蛋白-1α在前列腺按摩液中的表达及意义

目的:检测前列腺按摩液(EPS)中巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)的mRNA和蛋白表达水平,探讨其在慢性前列腺炎分型中的意义。方法:50例临床诊断的慢性前列腺炎患者,其中慢性细菌性前列腺炎(CBP)16例,慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征(CPPS)23例,分为ⅢA型11例,ⅢB型12例。无症状性炎症性前列腺炎Ⅳ型11例。收集EPS。同时选取15例健康自愿者做正常对照。RT-PCR法扩增MIP-1αmRNA,统计分析各组mRNA表达差异。ELISA法检测MIP-1α的蛋白表达水平,统计分析各组EPS的MIP-1α浓度差异。结果:RT-PCR半定量分析显示,MIP-1αmRNA在CPPSⅢA组和CPPSⅢB组的表达显著高于其他各组(P<0.05)。ELISA分析显示,MIP-1α蛋白浓度在CPPSⅢA组[(1 174.3±89.2)pg/ml]和CPPSⅢB组[(842.3±76.2)pg/ml]也显著高于正常组[(198.0±37.8)pg/ml]、CBP组[(347.0±61.6)pg/ml]及Ⅳ型组[(292.0±56.4)pg/ml](P<0.05)。结论:从mRNA和蛋白水平检测EPS中MIP-1α可能有助于慢性前列腺炎的分型诊断。     

自身免疫性前列腺炎大鼠模型的建立

目的:使用前列腺蛋白提纯液建立自身免疫性前列腺炎大鼠模型。方法:选用36只Wistar大鼠,随机分为对照组、低浓度组和高浓度组,每组12只。对照组注射生理盐水,低浓度和高浓度组实验大鼠于0、14 d分别注射等剂量15 mg/ml及80 mg/ml浓度的前列腺蛋白提纯液,4周后处死大鼠,前列腺组织HE染色,取大鼠外周血检测血清炎症因子IL-8、IL-10,血清免疫球蛋白IgA、IgM,辅助性T细胞Th1/Th2等指标。结果:高浓度组有3只大鼠死亡,对照组与低浓度组均无死亡。前列腺大体观察对照组无明显变化,低浓度组大鼠前列腺体积增大,质地稍硬,高浓度组大鼠前列腺质地坚硬,与周围组织粘连。实验组病理切片显示前列腺组织腺体结构破坏,有炎性细胞浸润。大鼠血清IL-8指标低浓度组[(129.07±11.48)pg/ml]、高浓度组[(147.58±17.70)pg/ml]与对照组[(94.12±7.04)pg/ml]比明显升高(P0.05);大鼠血清IL-10指标低浓度组[(227.14±18.19)pg/ml]、高浓度组[(187.14±16.32)pg/ml]与对照组[(252.48±21.72)pg/ml]相比显著降低(P0.05)。大鼠血清IgA与对照组[(0.19±0.14)mg/ml]相比,低浓度组[(0.25±0.37)mg/ml]和高浓度组[(0.31±0.42)mg/ml]明显升高(P0.05);大鼠血清IgM指标低浓度组[(0.23±0.41)mg/ml]、高浓度组[(0.34±0.58)mg/ml]与对照组[(0.17±0.33)mg/ml]相比,显著升高(P0.05)。外周血辅助性T细胞Th1/Th2未见明显改变。结论:低、高浓度组大鼠造模均获成功。使用低浓度的前列腺蛋白提纯液造模的动物死亡率低,病理改变及血清炎症因子变化符合自身免疫性前列腺炎的表现,可作为制备自身免疫性前列腺炎的可靠模型浓度。     

脾动脉缩窄对门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达及Th1/Th2平衡的影响

目的 观察脾动脉缩窄对肝硬化门静脉高压大鼠脾脏iNOS、Th1/Th2型细胞因子表达的影响,并探讨机制.方法 肝硬化门静脉高压大鼠随机分3组(n=10):假手术组(SOG)、脾动脉缩窄术组(SAC)和脾动脉结扎术组(SAL);正常大鼠10只行假手术作为对照组(NCG).免疫组化法测脾脏iNOS表达,RT-PCR法测脾脏IFN-γ、IL-4mRNA表达,对iNOS与IFN-γ、IL-4表达量作相关分析.结果 SOG脾脏iNOS明显高于NCG(P＜0.01),SAC和SAL明显低于SOG(P＜0.01).SOG脾脏IFN-γmRNA和IFN-γ/IL-4明显低于NCG(P＜0.01),IL-4mRNA明显高于NCG(P＜0.01);SAC脾脏IFN-γmRNA高于SOG(P＜0.05),SAC和SAL脾脏IL-4mRNA低于SOG(P＜0.05),而IFN-γ/IL-4高于SOG(P＜0.05).iNOS与IFN-γ负相关(r=-0.672,P＜0.01),与IL-4正相关(r=0.634,P＜0.01).结论 脾动脉缩窄术后门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达降低,IFN-γ/IL-4升高,脾脏Th1/Th2失衡改善可能与术后iNOS表达降低有关.     

悬吊式、气腹腹腔镜及不同麻醉方法对妇科患者细胞因子水平的影响

目的 比较在不同麻醉方法下妇科悬吊式或气腹腹腔镜患者术中血清细胞因子白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)水平的变化.方法 选择57例择期行腹腔镜下子宫肌瘤剔除术的患者,手术时间均短于100 min,按手术方式或患者的意愿分成3组(每组19例):Ⅰ组,于静脉全麻下行CO2气体腹腔镜手术;Ⅱ组,于静脉全麻下行悬吊式腹腔镜手术;Ⅲ组,于硬膜外神经阻滞麻醉下行悬吊式腹腔镜手术.监测3组患者麻醉前(T1)、气腹或悬吊建立后30 min(T2)、气腹或悬吊撤除后10 min(T3)和术后第2天晨8时(T4)4个时点的TNF-α、IL-6、IL-10和HSP70浓度.结果 麻醉前患者的血清IL-6、IL-10、TNF-α和HSP70水平差异均无统计学意义(P＞0.05).术后各指标的水平均升高,其中Ⅰ组在T3时达峰值,Ⅱ组和Ⅲ组在T4时达峰值.组间比较,Ⅰ组在T2时点的TNF-α水平[(31±14) pg/L)]高于Ⅱ组[(24±10) pg/L] (P＜0.05);在T3时点,Ⅰ组的IL-6[ (46±8) pg/L]、TNF-α[( 54±18) pg/L]和HSP70[ (3.18±0.58) μg/L]水平分别显著高于Ⅱ组[( 39±6) pg/L,(36±17) pg/L,(2.30±0.29) μg/L](P＜0.叭),且IL-6/IL-10比值也高于Ⅱ组(P＜0.05);此时,Ⅲ组的IL-6[(27±10) pg/L]和TNF-α[(24±7)pg/L]水平低于Ⅱ组(P＜0.05).结论 悬吊式腹腔镜技术免除了CO2气腹对机体的影响,降低了术中应激反应水平,与全身麻醉相比,硬膜外麻醉可进一步减轻此术式引起的应激反应.     

TNF-α、TGF-β_1在慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液中的表达及意义

目的探讨TNF-α和TGF-β1在慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液中的表达及临床意义。方法采用双抗体夹心法对20例炎症型慢性非细菌性前列腺炎即炎症型慢性骨盆疼痛综合征(Ⅲa型),20例非炎症型慢性非细菌性前列腺炎即非炎症型慢性骨盆疼痛综合征(Ⅲb型),10例健康对照者前列腺液(EPS)中TNF-α、TGF-β1含量进行测定。采用美国国立卫生院慢性前列腺炎症状评分(NIH-CPSI)进行相关性研究。结果①TNF-α在Ⅲa型患者EPS中表达水平[(152.44±83.06)pg/ml]明显高于Ⅲb型组[(93.15±57.26)pg/ml]和健康对照组[(78.99±53.51)pg/ml],P<0.05。但在Ⅲb型和健康对照组之间差异无统计学意义,P>0.05。②TGF-β1在Ⅲa型组[(8477.50±4612.45)pg/ml]和Ⅲb型组[(7946.50±5044.06)pg/ml]表达水平均明显高于健康对照组[(2462.50±985.31)pg/ml],P<0.01。但在Ⅲa和Ⅲb型之间差异无统计学意义,P>0.05。③前列腺液中TNF-α、TGF-β1的水平与慢性前列腺炎症状评分无相关性(r=0.23,P>0.05;r=0.31,P>0.05)。结论前列腺液中细胞因子(TNF-α、TGF-β1)在慢性前列腺炎的病理学改变中起重要作用,可作为慢性前列腺炎的诊断依据之一。     

血必净促进内毒素/脂多糖刺激调节性T淋巴细胞凋亡并介导辅助性T淋巴细胞漂移的作用

目的 了解血必净注射液促进LPS刺激CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg细胞)凋亡过程及介导辅助性T淋巴细胞(Th)漂移的调节作用.方法 免疫磁珠法分选获得大鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞,分为常规培养对照组、抗CD3/CD28组、抗CD3/CD28+LPS组、抗CD3/CD28+血必净组和抗CD3/CD28+LPS+血必净组,培养3 d后应用流式细胞术检测Treg细胞凋亡率及叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达.将CD4+CD25+Treg细胞与CD4+CD25+T淋巴细胞1:1培养,伴刀豆球蛋白A刺激68 h,检测上清液中Th1分泌的γ干扰素(IFN-γ)、Th2分泌的IL-4、Th17分泌的IL-17水平.结果 抗CD3/CD28+LPS+血必净组Treg细胞凋亡率为(45.1±2.7)%,明显高于抗CD3/CD28+LPS组[(29.4±1.6)%,P＜0.01];2组Foxp3平均荧光强度分别为95±9、140±18,差异有统计学意义(P＜0.01).同时,抗CD3/CD28+LPS+血必净组IFN-γ分泌水平显著高于抗CD3/CD28+LPS组(P＜0.01),IL-4则呈相反变化(P＜0.05),抗CD3/CD28+LPS+血必净组IFN-γ/IL-4较对照组升高(P＜0.01);抗CD3/CD28+血必净组IL-17分泌水平较抗CD3/CD28组明显下降(P＜0.05).结论 CD4+CD25+Treg细胞活化介导了Th1向Th2功能性极化;血必净对LPS诱导的T淋巴细胞免疫功能有重要调节作用,可促进CD4+CD25+Treg细胞凋亡并介导Th2向Th1漂移,从而缓解细胞免疫抑制状态.     

慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征患者前列腺液中IFN-γ、TGF-β_1的检测

目的:探讨干扰素γ(IFN-γ)和转化生长因子β1(TGF-β1)在慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征(CP/CPPS)患者前列腺液中的临床意义。方法:采用双抗体夹心法对20例炎症性慢性骨盆疼痛综合征(ⅢA)、20例非炎症性慢性骨盆疼痛综合征(ⅢB)、10例健康对照者前列腺按摩液(EPS)中IFN-γ、TGF-β1含量进行测定。并与患者的美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状指数(NIH-CPSI)进行相关性研究。结果:IFN-γ、TGF-β1在ⅢA[(14.92±7.85)、(8 477.50±4 612.45)ng/L]和ⅢB[(13.74±5.96)、(7 946.50±5 044.06)ng/L]患者EPS中水平均明显高于健康对照组[(7.47±1.49)、(2 462.50±985.31)ng/L](P<0.05和P<0.001)。但在ⅢA和ⅢB之间差异无显著性(P>0.05)。EPS中IFN-γ、TGF-β1的水平与慢性前列腺炎症状指数无相关性(r=0.02,P=0.86;r=0.31,P=0.76)。结论:前列腺液中细胞因子IFNγ-、TGF-β1在CP/CPPS的病理学改变中可能起重要作用,可作为CP/CPPS的诊断依据之一。     

慢性乙型肝炎患者DC/CIK体外经HBsAg活化后自体回输的疗效和对机体免疫的影响

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血来源的树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)自体回输治疗的疗效和对机体免疫的影响。方法 95例CHB患者随机分为3组,即A组(33例),行DC/CIK治疗;B组(22例),行核苷酸类抗病毒治疗;C组(20例),未进行抗病毒治疗。用CHB外周血培养和扩增DC和CIK,成熟前给予HBsAg刺激。自体静脉回输(DC/CIK细胞数量109/100 ml),1次/3 d,共3次。各组均于治疗前、治疗后第1、3、6、12个月分别检测肝功能、HBV DNA、IFN-γ、IL-4和IL-12水平。其中IFN-γ、IL-4和IL-12均采用双抗体夹心ELISA法进行检测。结果治疗前各组患者病毒载量无显著差异。治疗各阶段B组患者血清HBV DNA水平均低于A组和C组患者(P均<0.001);A组患者治疗后3、6个月时病毒载量显著下降(P均<0.05)。各组患者治疗前后ALT和TBil水平差异无统计学意义。治疗后1个月后,A组患者血清IL-12水平显著高于B组和C组(9.32±2.07 pg/ml vs6.96±2.17 pg/ml,9.32±2.07 pg/ml vs 7.32±2.36 pg/ml,P<0.05),其他时间阶段各组比较,IL-12水平差异无统计学意义。各组患者之间血清IFN-γ、IL-4水平差异均无统计学意义。结论 DC/CIK细胞治疗对HBV有一定的抑制作用;推测DC/CIK细胞治疗对辅助T细胞的失衡无显著影响。     

硬膜外阻滞复合全麻和硬膜外镇痛对食管癌手术患者血浆白细胞介素4及干扰素-γ的影响

目的 比较不同麻醉方法及术后镇痛对食管癌手术患者血浆白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)水平的影响.方法 择期行食管癌或贲门癌手术患者60例,随机均分为四组:Ⅰ组全凭静脉麻醉,术后行静脉自控镇痛(PCIA);Ⅱ组麻醉方法同Ⅰ组,术后行硬膜外自控镇痛(PCEA);Ⅲ组采用静脉麻醉复合胸段硬膜外阻滞,术后行PCIA;Ⅳ组麻醉方法同Ⅲ组,术后行PCEA.于麻醉前(T0)、切皮后2 h(T1)、术毕(T2)、术后24 h(T3)、术后48 h(T4)采集外周静脉血,用酶联免疫吸附法测定血浆IL-4、IFN-γ浓度,以IFN-γ/IL-4评估Th1/Th2亚群比值;于术后24、48、72 h以VAS评估术后镇痛效果.结果 Ⅱ、Ⅳ组患者在静息和活动后各时点的VAS均明显低于Ⅰ组(P＜0.05),Ⅳ组在静息和活动后各时点的VAS均明显低于Ⅲ组(P＜0.05),Ⅱ组在术后72 h的静息VAS和48、72 h活动后VAS也明显低于Ⅲ组(P＜0.05).与T0时比较,Ⅰ、Ⅱ组血浆IFN-γ/IL-4的比值在T2时明显下降(P＜0.05),Ⅲ、Ⅳ组该比值在T3时开始明显下降(P＜0.05).T2时Ⅲ、Ⅳ组血浆IFN-γ/IL-4比值均明显高于Ⅰ、Ⅱ组(P＜0.05),T3、T4时Ⅳ组该比值均高于Ⅰ组(P＜0.05).结论 食管癌开胸手术患者无论术中全麻复合硬膜外阻滞或术毕应用硬膜外镇痛均能减低疼痛,且术后硬膜外镇痛较静脉镇痛效果更明显.     

血红素氧化酶-1保护异种胰岛移植物及机制研究

目的:探讨钴原卟啉(cobalt protoporphyrin,CoPP)诱导血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)过表达对异种胰岛移植物的保护作用及其可能的机制.方法:采用大鼠对受体鼠胰岛移植模型.按术前不同处理方式将分离纯化的胰岛随机分为3组:A组胰岛体外培养36 h;B组胰岛与50 mmol/L的HO-1诱导剂CoPP共培养36 h:C组胰岛与50 mmol/L的CoPP及50 mmol/L的诱导阻断剂锌原卟啉(zinc protoporphyrin,ZnPP)共培养36 h.RT-PCR及Western印迹法检测各组胰岛HO-1 mRNA及蛋白表达.受体鼠也随机分为3组,每组11只,分别接受上述3组胰岛;比较各组受体鼠血糖维持正常之时间.ELISA法检测受体鼠血清IFN-γ、TNF-γ、IL-10及IL-1γ的含量.结果:CoPP预处理可诱导胰岛HO-1 mRNA和蛋白过表达.B组受体鼠血糖维持正常时间为(14.63±1.19)d.与A组的(9.88±2.17)d及C组的(9.38±1.60)d相比,有显著差异(P＜0.01),而A、C两组间无显著差异(P＞0.05).B组受体鼠血清IL-10含量为(72.97±9.74)pg/mL,与A组的(30.57±3.94)pg/mL及C组的(45.55±8.26)pg/mL比较,差异有统计学意义,P值分别为0.005及0.02.而3组间血清IFN-γ、TNF-γ及IL-1γ含量无显著差异(P＞0.05).结论:CoPP体外诱导HO-1过表达对异种胰岛移植物具保护作用;该作用可能与IL-10有关.     

干预协同刺激信号诱导不明原因早期复发性流产患者外周血Th1/Th2转换的体外研究

目的观察体外干预细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4)对不明原因早期复发性流产(URSA)患者外周血辅助性T细胞(Th)1/Th2转换的影响。方法用人绒毛膜癌细胞株JEG-3制备的滋养细胞抗原刺激30例URSA患者外周血单核细胞,分为实验组A:加重组蛋白CTLA-4Ig(10和1 mg/L)组,实验组B:加CTLA-4抗体(10和1 mg/L)组;对照组:加IgG(10和1 mg/L)组。采用酶联免疫吸附试验(ELISIA)测上清液中白细胞介素(IL)-2、干扰素γ(IFN-γ)和IL-4水平。结果与相应浓度的对照组相比,CTLA-4Ig组IL-4水平显著升高(P<0.05),IL-2显著降低(P<0.05),IFN-γ两组间无显著性差异(P>0.05);而CTLA-4抗体组IL-4水平均显著低于对照组(P<0.01),而IFN-γ、IL-2水平均明显高于对照组(P<0.05)。CTLA-4Ig 10 mg/L组与CTLA-4Ig 1mg/L组比较,IL-4显著升高(P<0.05),IL-2显著降低(P<0.05),IFN-γ两组间无显著性差异(P>0.05)。与同浓度的对照组及CTLA-4抗体1 mg/L组相比,CTLA-4抗体10 mg/L组IL-4较低,而IFN-γ和IL-2稍高,但两组间亦无显著性差异(P>0.05)。结论CTLA-4Ig使URSA患者Th1/Th2型细胞因子向Th2型细胞因子偏移,有利于URSA的治疗;而CTLA-4抗体可以上调Th1型细胞因子,下调Th2型细胞因子,不利于妊娠。     

下调LSD1表达对于外周血Th1/Th2分化格局的影响

目的 探讨shLSD1转染人外周血CD4+T细胞后,LSD1的脱甲基酶活性对辅助性T细胞亚群1和亚群2(Th1/Th2)分化格局的影响.方法 收集并利用磁珠分离纯化人外周血CD4+T细胞,PHA刺激活化48 h后,shLSD1和化学抑制剂TCP抑制2种方法抑制LSD1的表达,采用流式细胞术和RT-PCR对人外周血T淋巴细胞亚群及CD4+T细胞功能亚型Th1、Th2的代表细胞因子IFN-γ、IL-4进行检测.结果 体外分离培养外周血CD4+T细胞并用转染shLSD1或TCP处理48 h后,流式细胞对胞内基因表达检测显示,shLSD1和TCP组细胞IFN-γ+T细胞比例(26.13±1.89)％和(27.01±1.18)％明显高于对照组(14.67±0.65) ％(P ＜0.05),而IL-4+T细胞比例与对照组无显著差异(P＞0.05);RT-PCR检测显示,shLSD1和TCP组IFN-γ mRNA表达明显高于对照组(P＜0.05),IL-4基因表达则没有改变(P＞0.05).结论 LSD1可以引起CD4+T细胞向Th1/Th2分化方向改变,促进Th1方向分化,对Th2方向无明显影响.     

阳明腑实证患者外周血Th1/Th2细胞因子的变化

目的:观察阳明腑实证患者外周血Th1/Th2细胞因子变化情况,探讨其与肠源性内毒素血症的相关性.方法:25例患者随机分为两组,一组给予常规治疗作为对照组,另一组在常规治疗基础上给予复方大承气汤作为中药组,检测入院时及治疗后3d血浆内毒素(ET),血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)的变化,用IFN-γ/IL4比值表示Th1/Th2的变化.结果:两组患者治疗后血浆ET、血清IFN-γ白细胞介素-4(IL-4)水平均降低,尤以中药治疗组降低更具有显著性(P＜0.05).Th1/Th2比值升高.结论:复方大承气汤对阳明腑实证患者血清IFN-γ、IL-4及Th1/Th2比值具有调节作用,阳明腑实证患者血清IFN-γ、IL-4及Th1/Th2比值与肠源性内毒素血症有一定的相关性.     

环瓜氨酸多肽对类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞分泌INF-γ及IL-4的影响

目的观察环瓜氨酸多肽(CCP)对类风湿关节炎(RA)患者外周血T淋巴细胞分泌INF-γ、IL-4的影响。方法分离培养24例RA患者和16例健康人外周血淋巴细胞,分为以下3组处理,RA空白对照组:RA患者外周血淋巴细胞分离培养不加任何药物干预;RA CCP组:RA患者外周血淋巴细胞加CCP干预(CCP终浓度为20μg/ml);健康空白对照组:健康人外周血淋巴细胞分离培养不加任何药物干预。上述各组细胞培养72 h后,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清中IFN-γ及IL-4水平。结果与健康空白对照组外周血T淋巴细胞分泌的IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4相比,RA空白对照组IFN-γ水平升高(P0.05),IL-4水平下降(P0.01),IFN-γ/IL-4升高(P0.01);与RA空白对照组相比,RA CCP组IFN-γ水平进一步升高(P0.05),IL-4水平进一步下降(P0.05),IFN-γ/IL-4进一步升高(P0.01)。结论 CCP对RA患者外周血T淋巴细胞分泌Th1及Th2型细胞因子IFN-γ及IL-4有明显的调节作用,可能在RA发病机制中起重要的作用。     

肥大细胞及IL-33/ST2在复发性自然流产小鼠模型中的作用初探

目的探讨复发性流产小鼠子宫和胎盘组织中肥大细胞的数量及白细胞介素-33(IL-33)/ST2的表达变化。方法 20只雌性CBA/J小鼠随机分为两组,每组10只,分别与雄性DBA/2和Balb/c小鼠按雌雄比例2:1合笼交配,建立正常妊娠组(CBA/J♀×Balb/c/2♂)和自然流产组(CBA/J♀×DBA/2♂)模型。妊娠第13.5天处死各组雌性小鼠,计数存活胚胎数和丢失胚胎数,计算胚胎丢失率。甲苯胺蓝染色法检测小鼠子宫组织中肥大细胞的数量。ELISA检测血清中干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4的浓度,qRT-PCR和Western-blotting分别检测胎盘组织中IL-4、IFN-γ、IL-33、ST2的mRNA和蛋白表达水平。结果成功构建了复发性自然流产(RSA)的小鼠模型,RSA模型组胚胎丢失率显著高于正常妊娠组(16.2%vs.4.92%,P0.05);RSA组子宫组织中肥大细胞数显著低于正常妊娠组[(1.50±0.83)vs.(3.35±1.63)个](P0.05);ELISA结果显示,与正常妊娠组相比,RSA组小鼠血清中IFN-γ水平显著升高[(346.79±4.34)vs.(168.84±2.35)ng/L],IL-4水平显著降低[(98.46±5.81)vs.(157.56±9.35)ng/L](P均0.05);qRT-PCR和Western-blotting结果显示RSA组小鼠胎盘组织中IFN-γ表达水平显著升高,IL-4、IL-33、ST2表达水平显著降低(P0.05)。结论肥大细胞和IL-33/ST2可能参与了RSA小鼠体内Th1/Th2的调节,有助于妊娠的维持。