基础理论

050434　衰老对小鼠睾丸结构和精子发生的影响 /陈秋菊…∥生殖与避孕 —2004, 24 ( 6 ) —326 ~329昆明小鼠分为 18月龄老龄组 15只和 6月龄青年对照组 15只,取睾丸称重,H·E染色,观察睾丸组织结构,计数萎缩曲细精管的比例,定量分析睾丸精子发生的状态。结果:老龄小鼠睾丸有部分曲细精管萎缩,多为局灶性,管内生精细胞减少,生精阻滞常发生在初级精母细胞阶段,或有生精细胞脱落至管腔。老龄组萎缩管的比例高于对照组 (P<0 01)。定量分析显示老龄组曲细精管横截面内球形精子细胞和延长精子细胞与支持细胞的比例均显著低于对照组 (P<0 01 ),…     

小鼠实验性睾丸炎期间生精细胞凋亡的观察

目的:观察睾丸炎期间生精细胞凋亡的情况.方法:Giemsa染色、TUNEL及流式细胞术测定.结果:经Giemsa染色可见一些生精细胞及巨大核细胞的细胞核染色致密,形状不规则.流式细胞仪测定发现正常小鼠睾丸内亚单倍体很少,模型小鼠睾丸内亚单倍体增多.TUNEL阳性细胞在模型小鼠睾丸内增多,主要为精原细胞、精母细胞及管腔中的巨大核细胞.结论:正常小鼠睾丸中可见少量凋亡的生精细胞.睾丸炎期间凋亡的生精细胞增多.此时出现的一些巨大核细胞也是凋亡中的细胞.     

低剂量电离辐射对小鼠睾丸生精细胞P53和Bcl-2蛋白表达的影响

目的：研究低剂量X射线对小鼠睾丸生精细胞P53和Bcl-2蛋白表达的影响。方法：采用免疫组织化学方法（SABC法）观察不同低剂量X射线照射后各类生精细胞P53和Bcl-2蛋白表达的剂量及时程效应关系。 结果：低剂量照射后各类生精细胞不同程度表达P53和Bcl-2。P53蛋白表达主要见于精原细胞和精母细胞,前者阳性率高于后者,并且随照射剂量增加而逐渐升高,而精子细胞和精子阳性率较低;Bcl-2蛋白主要表达于精子细胞和精子,并且随照射剂量增加而逐渐降低,而精原细胞和精母细胞Bcl-2蛋白表达阳性率较低。 结论：低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸各类生精细胞p53和Bcl-2蛋白表达具有一定规律性,两者在生精细胞表达的结果相反。     

两种鬼臼脂素衍生物的2DNMR研究

观察睾丸炎期间生精细胞凋亡的情况。方法：Ｇｉｅｍｓａ染色、ＴＵＮＥＬ及流式细胞术测定。结果：经Ｇｉｅｍｓａ染色可见一些生精细胞及巨大核细胞的细胞核染色致密,形状不规则。流式细胞仪测定发现正常小鼠睾丸内亚单倍体很少,模型小鼠睾丸内亚单倍体增多。ＴＵＮＥＬ阳性细胞在模型小鼠睾丸内增多,主要为精原细胞。精母细胞及管腔中的巨大核细胞。结论：正常小鼠睾丸中可见少量凋亡的生精细胞。睾丸炎期间凋亡的生精细胞增多。此时出现的一些巨大核细胞也是凋亡中的细胞。     

正常小鼠睾丸的酶组织化学及氯化镍对其影响

用6O只LACA纯系成年雄性小鼠的睾丸,研究一组酶的代谢特点和分布规律及不同剂量氯化镍对其各种酶活性的影响。结果表明I型黄递酶主要见于间质细胞和晚期精子细胞;琥珀酸脱氢酶和细胞色素氧化酶见于晚期精子细胞;非特异性酯酶见于间质细胞;而5’-核(艹廿)酸酶主要见于围腔小室细胞。一次性腹腔注射不同剂量的氯化镍对睾丸酶活性未见显著影响。     

微波对大鼠脾脏超微结构的影响

用功率密度10mW/cm~2、20mW/cm~2和40mW/cm~2的微波,全身1次照射大鼠,见到各实验组淋巴细胞显示不同程度的变性和坏死。其中40mW/cin~2组尤甚。淋巴细胞多趋退变坏死,核质外溢,胞质溶解等。浆细胞各实验组也有不同程度的变化,尤以40mW/cm~2组更明显,核变形,异染色质普遍浓缩,分布异常,核膜局部缺失,粗面内质网扩大。网状细胞10mW/cm~2组变化不明显,20mW/Cm~2和40mW/cm~2组可见核变形,线粒体肿胀,嵴溶解或局部空化等。实验表明一定功率密度的微波对大鼠脾脏超微结构有一定影响。     

小鼠生精细胞的体外双室无血清培养

目的 探讨无血清条件下应用插入式细胞培养皿( Transwell 小室)对小鼠睾丸间质细胞 - 支持细 胞 - 生精细胞的双室培养技术。方法 取 60 日龄 C57BL / 6 雄性小鼠睾丸间质细胞和 15 日龄雄性小鼠睾丸支持细 胞与生精细胞混合细胞团双室共培养,不添加血清。每日在倒置显微镜下观察生精细胞的形态和生长情况,苏木 精染色观察生精细胞形态,染色体倍性分析检测细胞分化情况。结果 在培养 1 周后,可见圆形精子细胞出现, 2 周 后可见长形精子细胞, 3 周后可见较短鞭毛,生精细胞可存活 8 周;培养 1 周时,流式细胞术可检测出单倍体细胞, 单倍体细胞百分比随培养时间延长而增加。结论 应用双室无血清培养体系体外培养小鼠生精细胞可获得精子且 生精细胞存活时间较长。     

环磷酰胺对小鼠精子发生的影响

观察雄性小鼠经腹腔注射环磷酰胺后,在不同时期其精子及睾丸组织学的变化。结果;第３４,３６ｄ,精子计数下降,畸形率增高;第２１,２８,３４,３６ｄ,生精细胞数均减少;睾丸超微结构的变化主要表现为各级生精细胞核膜的溶解,核的破坏及精子细胞顶体囊泡的异常,但紧密连接不受影响。提示ＣＹ通过对精原细胞及细线前期初级精母细胞产生毒害作用而影响精子发生。     

新生期脂多糖暴露对大鼠睾丸发育及波形蛋白表达的影响

目的探讨新生期脂多糖暴露对睾丸发育及波形蛋白表达和分布的影响。方法选取新生雄性SD大鼠150只,随机分为对照组和实验组,实验组于生后第4～12d期间,隔日皮下注射脂多糖（75μg/kg）,共5次,对照组在相同时间皮下注射等容生理盐水。常规饲养至生后14d、21d、28d、包皮分离日、60d、77d分批取材,采用组织学和免疫组化技术,观察脂多糖对大鼠睾丸发育、波形蛋白的表达与分布的影响。结果①与同龄对照组相比,实验组大鼠生精小管横径变小,生精上皮变薄,细胞排列紊乱,生精细胞与支持细胞分离,脱落至管腔,性成熟以后,管腔内精子生成减少;②对照组波形蛋白阳性染色从基膜围绕支持细胞核形成棕黄色的环,并呈辐射状延伸至管腔;实验组支持细胞变矮、变圆,波形蛋白仅见于核周或核的基部胞质,伸向管腔的辐射状条带变短或消失。结论新生期脂多糖暴露,可改变支持细胞波形蛋白的有序分布,造成生精细胞脱落,干扰生精细胞的发育成熟,这种影响可延续至成年期,导致成年期精子生成减少。     

小鼠实验性睾丸炎期间生精细胞凋亡的观察

目的：观察睾丸炎期间生精细胞凋亡的情况。方法：Ｇｉｅｍｓａ染色,ＴＵＮＥＬ及流式细胞术测定。结果;经Ｇｉｅｍｓａ染色可见一些生精细胞２及巨大核细胞的核染色致密,形状不规则。流式细胞仪测定发现正常小鼠睾丸内亚单倍体很少,模型小鼠睾丸内亚单倍体增多。ＴＵＮＥＬ阳性细胞在模型小鼠睾丸内增多,主要为精原细胞,精母细胞及管腔中的巨大核细胞。     

三硝基甲苯急性中毒对小鼠睾丸超微结构的影响

三硝基甲苯急性中毒后,小鼠睾丸的各级生精细胞,支持细胞及睾丸间质细胞的超微结构均有不同程度的改变,精子细胞的损伤较重,精原细胞的损伤较轻.生精细胞的损伤较支持细胞及睾丸间质细胞为重.     

双氢青蒿素治疗实验大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的透射电镜观察

目的 观察双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫超微结构的影响。方法 Wastar大鼠皮下注射地塞米松磷酸钠7周诱导建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型，用双氢青蒿素治疗大鼠，并用透射电镜观察大鼠肺切片中卡氏肺孢子虫的超微结构变化。结果 双氢青蒿素治疗后，卡氏肺孢子虫胞质内出现大量空泡，线粒体、内质网肿胀，核膜破裂。结论 双氢青蒿素主要破坏卡氏肺孢子虫的膜系结构。     

红外线对大鼠生精上皮超微结构的影响

目的观察红外线对大鼠睾丸生精上皮超微结构的影响。方法采用不同波段的红外线对大鼠的睾丸局部照射,并与对照组进行比较,采用透射电镜观察睾丸生精上皮超微结构变化。结果与对照组比较,实验组大鼠电镜下生精细胞排列紊乱,精原细胞内细胞器变性多见;支持细胞线粒体空泡化,嵴消失,内质网肿胀。结论红外线可导致大鼠睾丸生精上皮超微结构损伤。     

精子发生过程中线粒体的变化

借电子显微镜观察正常人精子发生过程中线粒体的变化以及成年和幼龄大鼠睾丸SDH和LDH组化反应,见不同程度增强,并对精子发生过程中线粒体结构变化与酶的变化作了讨论。     

~(32)P-玻璃微球局部给药治疗裸鼠人肝癌移植瘤的实验研究和电镜观察

探讨32P-玻璃微球（32P-GMS）局部注射对裸鼠人肝癌移植瘤的治疗作用和超微结构影响。建立裸鼠人肝癌移植瘤模型后用32P-GMS进行治疗,取治疗后瘤组织用透射电镜观察。结果：实验组癌细胞大量坏死（35％～70％）,残留的瘤细胞在分化上出现了一些差异,部分癌细胞出现了高分化肝癌的形态特征;肿瘤间质见淋巴细胞浸润和纤维结缔组织增生,但无强烈的急性放射性炎反应;瘤体周围肌纤维和皮肤均无改变。对照组肿瘤示低分化肝癌,其中有少量死亡瘤细胞（4％）。研究表明,32P-GMS抗肝癌作用明显,并有一定的免疫调节和促分化功能,对治疗区周围组织亦无损伤。     

强次声对豚鼠耳蜗毛细胞超微结构的影响

目的:观察强次声对豚鼠耳蜗毛细胞超微结构的影响。 方法:将30只豚鼠分5组,1组作对照, 其余4组分别暴露于8和12 Hz, 声压极为120及130 dB SPL的次声声场中, 每日持续5 h,连续给声4 d。 应用透射电镜观察次声对豚鼠耳蜗毛细胞超微结构的损伤。 结果:强次声暴露后的4组动物耳蜗毛细胞出现一些损伤变化:表现为线粒体空泡样变性,线粒体嵴紊乱,细胞核膨胀或固缩等。 损伤特点为外毛细胞损伤, 而内毛细胞正常;130 dB SPL组比120 dB SPL组损伤明显;12 Hz组与8 Hz组损伤无明显差别。结论:强次声波对豚鼠耳蜗毛细胞造成不同程度的损伤。     

Effect of Phosphorus-32 Glass Microspheres on the Human Hepatocellular Carcinoma in Nude Mice

Ｒｅｃｅｎｔｌｙａｎｕｃｌｉｄｅｌａｂｅｌｅｄｎｏｎｔｏｘｉｃａｎｄｕｎｄｅ ｇｒａｄａｂｌｅｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ 32ｇｌａｓｓｍｉｃｒｏ ｓｐｈｅｒｅ(3 2 Ｐ ＧＭＳ)ｈａｓｂｅｅｎｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｄｅｖｅｌｏｐｅｄａｎｄｇａｉｎｅｄｍｕｃｈａｔｔｅｎｔｉｏｎａｓａｎｅｗｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅｍｅｄｉｃｉｎｅｆｏｒｔｒｅａｔｉｎｇｍａｌｉｇｎａｎｔｌｉｖｅｒｎｅｏｐｌａｓｍ[1] .Ｈｏｗｅｖｅｒ,ｆｅｗｒｅｐｏｒｔｓｈａｖｅｂｅｅｎｍａｄｅａｂｏｕｔｔｈｅｒｅ ｓｅａｒｃｈ…     

补肾滋阴法对肾上腺皮质激素型肾阴虚大鼠睾丸组织超微结构的影响

目的探讨补肾滋阴法对肾上腺皮质激素型肾阴虚大鼠睾丸组织超微结构的影响。方法30只大鼠,随机分为正常对照组、模型组、二地鳖甲煎治疗组,每组10只。建立糖皮质激素型肾虚大鼠模型。在光学显微镜及透射电镜下观察大鼠睾丸组织结构及超微结构的变化。结果模型组光学显微镜下睾丸曲细精管生精上皮变薄,生精细胞减少;睾丸间质水肿,间质细胞数量减少,胞质淡染。透射电镜下曲细精管生精上皮细胞结构松散;睾丸间质细胞胞浆内线粒体变性,溶酶体增多,胞质内有大量空泡,可见染色质边聚和细胞核固缩现象。二地鳖甲煎治疗组病理改变明显减轻。结论补肾滋阴药二地鳖甲煎能拮抗糖皮质激素诱导的大鼠睾丸病理改变。     

服棉酚者睾丸活检的免疫组织学观察

对48例服棉酚者睾丸活检组织进行了常规组织学及免疫组织学研究,电镜下可见除生精细胞形态发生明显改变外,还发现多种异常的曲细精管基膜结构,如接膜增厚、分层、断裂,出现大泡样颗粒和异常膜样结构及电子致密颗粒沉积等现象,免疫组织学检测见26例标本有免疫复合物沉积。另外,部分服药者睾丸组织中可见肥大细胞数目明显增多。最后,对服棉酚后产生不可逆性生精障碍的原因及其可能机制进行了讨论。     

豚鼠冲击波负压暴露后耳蜗毛细胞扫描电镜和透射电镜观察

目的 探讨冲击波负压(BUP)暴露后豚鼠耳蜗毛细胞的超微结构变化特点.方法 将豚鼠暴露于不同强度的实验性BUP 1次,8h～7d后应用扫描电镜和透射电镜技术观察耳蜗基底膜毛细胞的超微结构变化.结果 负压峰值为-22.4 ～-63.3kPa的BUP暴露后,豚鼠耳蜗毛细胞的超微结构变化发生了不同程度的病理性改变,主要表现为第2、3排外毛细胞散在性缺失,甚至节段性外毛细胞缺失、纤毛融合甚至巨纤毛形成及胞浆溢出,纤毛内微丝解聚、线粒体肿胀、溶酶体数量增多和胞浆内空泡形成.结论 不同强度的BUP暴露可导致豚鼠耳蜗毛细胞的超微结构病变,且BUP强度越高,病变越重.