哮喘患者血清中IL-4，IL-12，IL-13，IFN-γ，IgE水平的测定及其临床意义

目的 探讨哮喘发作期和缓解期血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-13(IL-13)和干扰素(IFN-γ)与免疫球蛋白E(IgE)的浓度变化及其意义.方法 采用生物素亲合素双抗体夹心和间接ELISA法分别对60例哮喘急性发作期和缓解期患者进行血清IL-4,IL-12,IL-13,IFN-γ和IgE水平的测定.结果 60例哮喘急性发作期和哮喘缓解期患者血清IL-4,IL-13水平均高于正常对照组(P<0.01);而血清IFN-γ,IL-12水平均较对照组(40例)显著下降(P<0.01);哮喘急性发作期患者血清IL-4,IL-13水平高于哮喘缓解期患者(P<0.01),而IFN-γ,IL-12水平均较缓解组显著下降(P<0.01);在哮喘发作期患者血清中IL-4,IL-13水平与IgE含量呈显著正相关,而IL-12,IFN-γ水平与IgE呈显著负相关.结论 细胞因子分泌紊乱、网络失衡是哮喘病急性发作的重要因素,而细胞因子IL-4,IFN-γ,IL-12,IL-13等在其发生、发展中起着重要的调控作用.     

白细胞介素-25与支气管哮喘小鼠发病的关系

目的探讨IL-25与支气管哮喘发病的关系。方法将30只健康雌性Balb/c小鼠随机分为3组：分别为卵白蛋白（OVA）致敏并激发的哮喘模型组（A组）,OVA）致敏、激发并予糖皮质激素治疗组（B组）及正常对照组（C组）,每组10只。于末次激发后24h后各组小鼠摘眼球取血,ELISA法检测其血清IL-25、IFN-γ及IL-4水平。收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,行嗜酸性粒细胞（EOS）计数,HE染色观察各组肺组织病理改变。RT-PCR法检测各组肺组织IL-25mRNA和IL-4mRNA表达。结果 1、B组多数小鼠未见明显行为学异常反应,肺组织病理损害较A组明显减轻,BALF中EOS计数（126.2±10.8）×103/L亦显著低于A组（324.7±13.6）×103/L（P〈0.01）。2、A组小鼠血清IL-25、IL-4水平[（80.66±3.06）pg/ml,（124.7±4.13）pg/m]均高于C组[（46.25±1.90）pg/ml,（32.73±2.20）pg/ml],IFN-γ水平[（45.25±5.34）pg/ml]低于C组[（80.56±2.49）pg/ml]其差异均有统计学意义（P〈0.01）。3、A组小鼠肺组织IL-25mRNA和IL-4mRNA表达均高于C组（P〈0.01）,B组小鼠肺组织IL-25mRNA和IL-4mRNA表达均低于A组（P〈0.01）。A组小鼠肺组织IL-25mRNA表达量与BALF中EOS计数呈正相关（r=0.901,P〈0.01）。结论 IL-25参与了哮喘小鼠的发病,在哮喘的发病中起促炎作用,其促进哮喘发病的作用可以被激素抑制。     

黑大蒜提取物对小鼠过敏性哮喘的治疗作用

目的 观察黑大蒜提取物对小鼠过敏性哮喘的治疗作用.方法 BALB/c小鼠随机分为空白组、阴性组、药物组、鲜大蒜组和黑大蒜组.阴性组及各治疗组用鸡卵蛋白(OVA)和氢氧化铝致敏,用OVA诱发,建立小鼠哮喘模型,空白组用PBS代替.其中各治疗组分别于激发后注射富马酸酮替酚溶液、鲜大蒜提取物溶液和黑大蒜提取物溶液.空白组和阴性组于激发后注射相同体积的PBS.末次治疗后采集小鼠血液,ELISA法检测血清中的IFN-γ、IL-4、IL-33和IgE水平,显微镜下直接计数全血中嗜酸粒细胞数量.结果 与空白组比较,阴性组IL-4、IL-33、IgE水平和嗜酸粒细胞数明显升高,而IFN-γ明显降低;各治疗组可有效降低IL-4、IL-33、IgE水平和嗜酸粒细胞数量,同时可升高IFN-γ的水平,与阴性组相比有统计学差异;黑大蒜组小鼠的各项检测指标(IL-33除外)均与鲜大蒜组有统计学差异(P<0.05).结论 黑大蒜提取物对哮喘具有一定疗效,其机制除通过调整Th1/Th2型应答平衡外,也可能通过抑制IL-33-ST2信号途径达到治疗目的.     

变应性鼻炎患者3种血清的表达及其与IgE相关性分析

目的探讨变应性鼻炎患者血清白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素12（IL-12）、干扰素γ（IFN-γ）的表达及其与免疫球蛋白E（IgE）相关性。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定40例变应性鼻炎患者及20例健康人血清中IL-4、IL-12、IFN-γ及IgE水平,并对变应性鼻炎患者的IgE分别与IL-4、IL-12、IFN-γ作相关性分析。结果变应性鼻炎患者血清IL-4、IgE水平显著高于对照组（P〈0．01）,血清IL-12、IFN-γ水平显著低于对照组（P均〈0．01）。变应性鼻炎患者血清IgE水平与IL-4呈正相关（r=0．683）,与IL-12、IFN-γ呈负相关,相关系数分别为r=-0．721,r=-0．579。结论变应性鼻炎患者体内IgE升高与IL-4分泌过多及IL-12、IFN-γ分泌受抑制,即Th1／Th2细胞失衡有关。     

糖皮质激素吸入治疗对哮喘患者血清白细胞介素-4、白细胞介素-8、干扰素-γ和肺功能的影响

目的探讨糖皮质激素吸入治疗对哮喘患者血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)、干扰素-γ(IFN-γ)以及肺功能改善的影响。方法 50例急性发作期哮喘患者设为哮喘组,给予普米克(布地奈德气雾剂)及喘康速(硫酸特布他林气雾剂)吸入治疗,症状缓解后停用喘康速。分别检测治疗前后患者血清IL-4、IL-8、IFN-γ水平和1 s用力呼气容积占预测值百分比(FEV1%),并与对照组(同期健康体检者30例)比较。结果哮喘组治疗总有效率为90.00%;哮喘组治疗前IL-4、IL-8水平显著高于对照组(P0.05或P0.01),IFN-γ水平和FEV1%显著低于对照组(P0.01);治疗后IL-4、IL-8均下降,但仍高于对照组(P0.05或P0.01),IFN-γ和FEV1%升高,但仍低于对照组(P0.05或P0.01)。结论糖皮质激素吸入治疗哮喘疗效确切,可有效降低患者血清IL-4、IL-8水平,升高IFN-γ水平,改善肺呼吸功能。     

慢性乙型肝炎患者血清中干扰素-γ、白细胞介素-4和白细胞介素-10水平检测与病毒载量的关系

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者血清中干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-10（IL-10）与HBV-DNA载量关系,为CHB治疗提供理论依据。方法采用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定血清中IFN-γ、IL-4和IL-10的水平,荧光定量PCR法测血清HBV-DNA载量。结果 IFN-γ水平与HBV-DNA载量呈负相关（r=-0.290,P〈0.01）;IL-4和IL-10水平与HBV-DNA载量正相关（r=0.320,r=0.352,P〈0.05）。结论血清中细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-10与HBV-DNA复制密切相关。     

平喘固本合剂对哮喘小鼠气道急性炎症的影响

目的 探讨平喘固本合剂对哮喘小鼠气道急性炎症的影响及可能的机制。方法 健康雌性昆明小鼠40只,随机分为空白对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、平喘固本合剂治疗组（C组）。用卵清清蛋白致敏建立哮喘小鼠气道急性炎症模型,各组分别给予相应药物治疗10 d。对各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞进行分类与计数,苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织的病理变化,同时应用ELISA法测定BALF中白细胞介素4（IL-4）、干扰素γ（IFN-γ）水平的变化。结果 与A组比较,B组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞明显增多（F=85.70-127.69,P＜0.05）,哮喘模型制作成功;C组细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞较B组均明显减少,但较A组升高,差异有显著性（q=2.15-10.08,P＜0.05）。与A组比较,B组中IL-4含量、IL-4/IFN-γ明显升高,IFN-γ明显降低,差异有统计学意义（F=186.17-378.06,q=17.02-21.46,P＜0.05）;与B组比较,C组IL-4、IL-4/IFN-γ降低,IFN-γ升高,差异有显著性（q=4.80-7.18,P＜0.05）。HE染色显示,C组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及肺组织黏膜水肿等炎症表现较B组明显减轻。 结论 平喘固本合剂对急性哮喘小鼠气道炎症有明显的抑制作用,其作用机制可能与其抑制IL-4的表达、抑制炎性细胞聚积及促进IFN-γ的表达有关。     

中国延边地区与日本东北地区重症哮喘患者肺功能和血清中IL-4 IL-5 INF-γ水平的对比研究

目的 阐明中国延边地区重症哮喘患者病情反复、肺功能差的主要原因,为进一步开展本地区的重症哮喘防治工作提供参考依据.方法 对2007-04～2008-03到延边大学医院就诊的50例重症哮喘患者和同一期间内到日本岩手医科大学附属医院就诊的50例重症哮喘患者进行血清中总IgE、特异性IgE及肺功能检查,了解用药情况,测定血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、干扰素-γ(INF-γ)水平并进行对比研究.结果 ①两个地区70%以上的重症哮喘患者血清中总IgE高于200 IU/mL,对户内、户外花粉、尘螨的特异性IgE阳性反应者占50%以上;②肺功能改变:中国延边地区重症哮喘患者用力肺活量(FVC)为(64.8±4.66)%、一秒量(FEV1) (48.9±3.78)%,与日本东北地区重症哮喘患者比较差异有统计学意义.③合并COPD者中国延边地区重症哮喘患者50%,日本东北地区重症哮喘患者13%.④用药情况:中国延边地区重症哮喘患者用吸入糖皮质激素甚少,而日本东北地区重症哮喘患者用吸入糖皮质激素100%.⑤血清中IL-4、IL-5和IFN-γ水平:中国延边地区重症哮喘患者血清中IL-4、IL-5水平明显高于日本东北地区重症哮喘患者(P＜0.01),而IFN-γ两组比较差异无统计学意义.结论 中国延边地区重症支气管哮喘患者病情反复、肺功能差的主要原因可能是气道慢性炎症的持续存在,应积极推广以吸入糖皮质激素为主的规范化治疗.     

血必净注射液对卵蛋白致敏小鼠气道MUC5AC及Th1／Th2细胞因子表达的影响

目的研究血必净注射液对卵蛋白（OVA）致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响,探讨干预气道黏液高分泌的机制。方法卵蛋白腹腔注射致敏小鼠,32只小鼠随机分组为：对照组、哮喘组、地塞米松治疗组和血必净治疗组,每组8只,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ的水平变化,实时RT-PCR检测小鼠肺组织MUC5AC mRNA表达变化。结果 （1）与对照组小鼠气道MUC5A mRNA表达（0.377±0.021）相比,哮喘组（1.103±0.087）明显增多（P〈0.01）;地塞米松治疗组（0.403±0.038）及血必净治疗组（0.437±0.031）小鼠气道MUC5A mRNA表达较哮喘组明显降低（P〈0.01）;（2）与对照组小鼠BALF表达IL-4[（22.812±1.978）ng/L]及IFN-γ[（101.232±9.664）ng/L]比较,哮喘组BALF表达IL-4[（87.234±6.901）ng/L]水平升高（P〈0.01）,而IFN-γ表达[（47.231±3.887）ng/L]明显降低（P〈0.01）;与哮喘组比较,地塞米松治疗组（[36.289±3.012）ng/L]及血必净治疗组IL-4水平[（38.112±2.761）ng/L]均显著降低（P〈0.01）;结论血必净注射液降低IL-4和MUC5AC的表达,提示在抑制气道黏液高分泌及控制哮喘方面具有意义。     

重组γ-干扰素调节哮喘鼠血清IL-4和IgE水平的实验观察

目的：探讨IFN-γ治疗对哮喘鼠血清IL-4及IgE水平的影响。方法：制备20只小鼠哮喘模型,随机分为治疗组、哮喘组,前者使用IFN-γ治疗,后者未予治疗,以10只健康小鼠为对照组,用ELISA双抗体夹心法测定各组血清IL-4和IgE的水平。结果：治疗组的血清IL-4、IgE的水平明显低于哮喘组水平,其差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：IFN-γ能够降低哮喘小鼠血清的IL-4和IgE水平,可望在治疗人类哮喘中发挥一定的作用。     

肺炎支原体肺炎患儿外周血Th1/Th2表达及肺功能变化的临床意义

目的探讨外周血Th1细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、Th2细胞因子白细胞介素-4(IL-4)及TIgE的水平在肺炎支原体肺炎患儿发病中的作用以及肺功能变化的临床意义。方法选择肺炎支原体肺炎患儿64例,其中喘息组27例,非喘息组37例,健康体检儿童20例为研究对象。用ELISA法测定Th1细胞因子IFN-γ、Th2细胞因子IL-4。荧光酶标法测定血清中TIgE的水平,肺炎支原体肺炎患儿行肺功能检测。结果 (1)肺炎支原体肺炎喘息组、非喘息组与对照组三者比较应用方差分析,血清IL-4、IFN-γ、IFN-γ/IL-4及TIgE水平比较差异均有显著性(P均<0.05)。(2)肺炎支原体肺炎喘息组与非喘息组常规肺功能及小气道功能比较差异均有显著性(P均<0.000)。(3)肺炎支原体肺炎患儿血清IL-4与IFN-γ水平经Pearson相关分析呈正相关(r=0.780,P=0.000)。(4)肺炎支原体肺炎患儿血清IL-4与TIgE水平经Pearson相关分析呈正相关(r=0.531,P=0.000)。(5)肺炎支原体肺炎患儿血清IL-4、IFN-γ水平经Pearson相关分析与肺功能FEV1/%、PEF%及V50%、V25%均呈负相关(r分别为-0.490、-0.377、-0.296、-0.407,P均<0.05)。结论肺炎支原体肺炎患儿Th1/Th2值下降,Th2细胞占优势,患儿存在免疫失调;肺炎支原体肺炎患儿肺功能改变主要表现为阻塞性、限制性或混合性通气功能障碍。     

肠道病毒中枢神经系统感染病儿免疫功能紊乱与神经元损害的相关性

目的通过检测肠道病毒（EV）中枢神经系统感染病儿脑脊液中白细胞介素-10（IL-10）、γ-干扰素（IFN-γ）及神经元特异性烯醇化酶（NSE）的水平,探讨EV引起病儿免疫功能紊乱的机制。方法收集2008年1月—2009年1月青岛大学医学院附属医院和滨州医学院附属医院临床诊断为无菌性脑膜炎、脑炎病儿的急性期脑脊液标本100例。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,检测标本中的EV RNA;应用双抗体夹心ELISA法检测EV感染组和对照组脑脊液中IL-10、IFN-γ及NSE的表达水平。结果 100例急性期病儿脑脊液中,经RT-PCR和二次PCR共获得阳性结果78例（78.0%）;EV感染组IFN-γ的表达水平高于对照组（t=4.24,P〈0.01）,重症组高于轻症组（t=4.13,P〈0.01）;IL-10表达水平低于对照组（t=7.89,P〈0.01）,重症组低于轻症组（t=2.97,P〈0.01）;NSE表达水平高于对照组（t=7.02,P〈0.01）,重症组高于轻症组（t=2.79,P〈0.01）。EV感染组NSE与IFN-γ水平呈正相关（r=0.673,P〈0.05）,与IL-10水平呈负相关（r=-0.587,P〈0.05）。结论 IL-10和IFN-γ参与EV对中枢神经系统免疫损害的过程,并与神经元的损害程度密切相关。     

翡翠贻贝多糖对衰老模型小鼠的抗氧化和免疫功能调节作用

目的观察翡翠贻贝多糖(PVPS)对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化和免疫功能调节作用。方法小鼠背部皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,同时给药组灌服高、中、低3个剂量的PVPS溶液,6周后检测各组小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、脾淋巴细胞增殖反应刺激指数等抗氧化和免疫功能指标。结果衰老模型小鼠血清和脑组织SOD、GSH-PX,血清IL-2、IFN-γ和及脾淋巴细胞增殖反应率均显著性降低,同时血清MDA水平显著性升高差异有统计学意义(P0.01)。PVPS各剂量组均可不同程度地升高SOD、GSH-PX、IL-2、IFN-γ和脾淋巴细胞增殖反应率,同时降低MDA水平差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 PVPS具有抗衰老作用,其机制可能与提高机体抗氧化酶活力和免疫功能有关。     

T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1对卵蛋白致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的 研究T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1（TIM-1）对卵蛋白（OVA）致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响,探讨气道黏液高分泌的机制.方法 OVA腹腔注射致敏小鼠,随机分组为：正常对照组（A组）、哮喘组（B组）和哮喘＋ TIM-1抗体处理组（C组）,每组8只,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALD中IL-4、IFN-γ的水平变化,实时RT-PCR检测外周血单个核细胞（PBMCs） TIM-1 mRNA及气道MUC5AC mRNA表达.结果 （1）与A组小鼠外周血PBMCs表达TIM-1 mRNA（0.618±0.043）相比,B组（1.129±1.101）及C组（0.898±0.071）TIM-1 mRNA表达明显增多（P＜0.01）,且C组明显低于B组（P＜0.01）;（2）B组和C组小鼠BALF中IL-4表达分别为（67.123±3.341） ng/L和（44.217±2.201）ng/L,较A组[（23.211±2.142） ng/L]明显增多（P＜0.01）,且C组明显低于B组（P＜0.01）;B组及C组小鼠BALF表达IFN1分别为（53.475±4.776） ng/L和（87.116±5.611）ng/L,均低于A组[（124.624±9.292） ng/L] （P ＜0.01）,而C组与B组相比,有所增加（P＜0.01）;（3）B组（1.004±0.081）及C组（0.673±0.029）小鼠气道MUC5A mRNA表达与A组（0.314±0.027）相比,明显增加（P＜0.01）,且C组低于B组（P＜0.01）;（4）小鼠外周血PBMCs TIM-1 mRNA表达与IL-4、MUC5AC表达呈正相关,而与IFN-γ表达呈负相关.结论 抑制TIM-1表达可减少IL-4和MUC5AC的分泌,提高IFN-γ表达,提示在调节黏液高分泌及哮喘治疗中具有意义.     

胃内灌服卡介苗对哮喘小鼠外周血Th1/Th2平衡的影响

目的探讨胃内灌服卡介苗（BCG）对哮喘小鼠Th1/Th2平衡的影响。方法32只BABL/c小鼠分为正常对照组、哮喘组、皮内注射卡介苗＋哮喘组、胃内灌服卡介苗＋哮喘组,以卵蛋白（OVA）致敏激发建立哮喘模型。用ELISA方法测定外周血中IL-4和IFN-γ水平,并采用三色流式细胞法测定外周血Th1/Th2细胞之比。结果哮喘组及外周血中IL-4较正常对照组明显升高,而IFN-γ水平明显降低（P均〈0.05）;与哮喘组相比,卡介苗皮内注射组与胃内灌服卡介苗组外周血中IL-4水平明显下降,IFN-γ水平明显升高（P均〈0.05）;而卡介苗干预两组之间无明显差异（P〉0.05）;哮喘组外周血Th1/Th2比值（0.69±0.39）较正常对照组（1.23±0.29）明显下降（P〈0.05）;与哮喘组比较,皮内注射卡介苗组（1.84±0.50）与胃内灌服卡介苗组（1.60±0.39）明显升高,差异具有显著性（P均〈0.05）;而卡介苗干预两组外周血Th1/Th2比值无显著性差异（P〉0.05）。同时Tc1/Tc2比值哮喘组（0.64±0.36）较正常对照组（1.16±0.45）明显下降（P〈0.05）;与哮喘组比较,皮内注射卡介苗组（1.34±0.55）与胃内灌服卡介苗组（1.26±0.48）明显升高,差异具有显著性（P均〈0.05）;而卡介苗干预两组外周血Tc1/Tc2比值无明显差异（P〉0.05）。结论Th1/Th2失平衡是哮喘发病的重要机理,小鼠胃内灌服卡介苗操作简单、方便、副作用小,并且能够获得与皮内注射相同的免疫效力。     

地塞米松对肺纤维化小鼠细胞因子及羟脯氨酸的影响

目的观察肺纤维化小鼠血清中IFN-γ、IL-4、TNF-α的含量、生化指标,探讨地塞米松干预治疗肺纤维化的作用机理。方法昆明小鼠30只随机分为空白组、博莱霉素（BLM）组、地塞米松（DXM）组。采用气管内注入BLM复制肺纤维化模型,造模后第2天使用地塞米松药物干预治疗,第14天采用酶联免疫吸附法测定血清IFN-γ、IL-4、TNF-α及羟脯氨酸（HYP）含量。结果与空白组相比较,BLM组大鼠血清IFN-γ含量降低,IL-4、TNF-α的含量升高（P〈0.05）,BLM组各时间点Hyp含量有明显增加（P〈0.01）。DXM与BLM组Hyp相比较,Hyp含量于第14天和第28天有明显下降（P〈0.05）。结论应用地塞米松可以明显减轻大鼠肺纤维化进程,不仅降低Ⅱ型细胞因子（IL-4）含量,而且升高Ⅰ型细胞因子（IFN-γ）及TNF-α含量,从而调整Ⅰ型/Ⅱ型细胞因子平衡及TNF-α表达抗纤维化作用。     

儿童支气管哮喘血清IL-4、IFN-γ、TGF—β1和IL-10的变化及临床意义

[目的]探讨与T淋巴细胞失衡相关的血清炎症因子IL4、IFN-γ和TGF-β1、IL-10在支气管哮喘患儿中的变化及其临床意义。[方法]采用酶联双抗夹心法（ELISA）检测50例支气管哮喘患儿和30例健康儿童血清中IL-4、IFN-γ和TGF-β1、IL-10水平。[结果]与对照组比较,哮喘组IL4水平[（72．33±34．74）vs（38．17±17．12）pg／mL]．显著升高（P〈0．01）,而IFN-γ[（8．36±4．25）vs（10．57±3．58）ng／mL]、TGF-β1[（12．42±4．34）vs（26．14±6．32）ng／mL]和IL-10[（22．76±15．28）VS（38．28±15．17）pg／mL]水平显著降低（P〈0．05）;TGF-β1和IL-10明显正相关（r=0．465,P〈0．01）。[结论]支气管哮喘患儿IL,4、IFN-γ和TGF-β1、IL-10紊乱可能因Th1／Th2功能失衡和Treg发育分化缺陷所致,调节气道T淋巴细胞失衡及相关炎症因子表达将是哮喘防治的一个重要靶点。