江苏省单纯疱疹病毒2型分子流行病学分析

目的 了解江苏省性病门诊就诊者中单纯疱疹病毒(HSV-1、HSV-2)感染流行状况和主要流行病毒株进化特征。方法 选取江苏省苏南、苏中、苏北3个地区16家性病门诊就诊者116例,采集生殖器疱液标本,采用聚合酶链反应(PCR)扩增HSV-1和HSV-2 TK基因,对阳性样品进行序列分析,与国际参考株进行对比,构建进化树。结果 116例性病就诊者中,HSV-1阳性4例,感染率为3.5%;HSV-2阳性36例,感染率为31.0%;PCR扩增到1130 bp大小的目的基因片断;进化树分析结果显示,苏南地区HSV-2流行毒株全部聚集形成1个病毒簇;苏中地区流行株除1株外,其他也聚集成簇;苏北流行株差异较大,形成>4个独立流行簇,其中2株在核酸序列上与苏南株更接近。结论 HSV-2是江苏省生殖器疱疹主要病原体,HSV-2流行株具有明显的地域特点,并已形成不同地区间传播。     

上海市闵行区性病门诊病人生殖器疱疹患病率和2型单纯疱疹病毒感染率研究

目的了解上海市闵行区性病门诊病人生殖器疱疹临床患病率和2型单纯疱疹病毒（HSV-2）感染率及其影响因素。方法对2007年7—9月间前往闵行区所属3个规范化性病门诊就诊的患者进行问卷调查、生殖器疱疹临床诊断和HSV-2的血清学IgG抗体检测。结果 3个性病门诊共有291例就诊者,全部接受了调查,其中29例经临床诊断为生殖器疱疹,患病率为10.0%,男性为14.4%,女性为4.6%。HSV-2感染率为19.2%,男性为13.8%,女性为26.0%。经多因素Logistic回归分析显示,在女性、民工中,HSV-2感染率显著高于其他群体。HSV-2感染的临床漏诊率较高,女性较男性更容易漏诊。结论在性病门诊病人中,HSV-2感染率较高,临床漏诊率高,HSV-2抗体检测应作为性病门诊常规检测手段。     

疱疹合剂2号对生殖器疱疹患者外周血IL-2表达的调控

目的 观察疱疹合剂2号治疗生殖器疱疹复发的临床疗效及其对患者外周血白细胞介素2(IL-2)表达的调控.方法 将60例非发病期生殖器疱疹患者随机分为两组,治疗组30例,口服疱疹合剂2号;对照组30例口服阿昔洛韦片;观察两组患者的临床疗效.采用EUSA方法检测两组患者治疗前后外周血IL-2的表达水平.结果 治疗组用药后6个月内10例患者复发,20例患者无复发,对照组患者用药后6个月内22例患者复发,8例患者无复发,两组比较差异有统计学意义(p<0.01).治疗组患者治疗前后IL-2表达差异有统计学意义(p<0.05),对照组患者治疗前后IL-2表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 疱疹合剂2号抗生殖器疱疹复发的疗效显著,其作用机理可能是通过调节机体的免疫功能,提高患者免疫力.     

276例疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒Ⅱ型检测结果分析

目的用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测我院皮肤性病门诊生殖器疱疹疑似患者的单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)感染情况。方法用FQ-PCR对276例生殖器疱疹疑似患者进行检测。结果①276例生殖器疱疹疑似患者检测HSV-Ⅱ阳性患者145例,阳性率为52.53%(145/276),其中男性患者阳性率59.76%(101/169),女性患者41.12%(44/107),男性患者与女性患者的发病率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。②三个年龄段患者即<20岁,20～55岁,>55岁的阳性率分别为31.25%(5/16),62.62%(129/206),20.37%(11/54),三个年龄段患者发病率比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论①生殖器疱疹疑似患者中HSV-Ⅱ感染率高,感染率有性别差异,男性发病率高于女性。②在不同的年龄发病率不同。③FQ-PCR在单纯疱疹病毒检测中具有快速,简便,灵敏度高等优点,适用于临床检测。     

生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒抗体分布与人乳头瘤病毒及沙眼衣原体感染的相关性研究

目的探讨生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒(HSV)抗体分布、人乳头瘤病毒(HPV)与生殖器沙眼衣原体(Ct)感染的相关性,为性传播疾病的临床预防诊治提供参考。方法选取2013年1月-2016年6月在医院诊断为生殖器疱疹的患者253例,检测血HSV 1型、HSV 2型特异性IgG及IgM,同时检测宫颈分泌物中HPV及Ct。结果 HSV特异性抗体检测阳性率为100.00%,其中14例为HSV 1型单一感染、204例为HSV 2型单一感染、35例为HSV 1型+2型混合感染;HSV 2型特异性IgG及IgM单纯阳性、IgG+IgM阳性患者分别为236例、1例、2例,HSV 1型特异性IgG及IgM单纯阳性、IgG+IgM阳性患者分别为35例、12例、2例;HPV、Ct阳性患者分别有72例、60例,HPV阳性患者中高危型50例、低危型12例、高危型+低危型混合感染10例;HPV阳性患者与HPV阴性患者、Ct阳性患者与Ct阴性患者比较,差异有统计学意义(P<0.05),pearson相关性分析显示HPV与Ct检测阳性率之间有正相关性(P<0.05)。结论生殖器疱疹患者HSV抗体以HSV 2型IgG阳性率最高,合并HPV及Ct感染现象多见,两者在生殖器疱疹患者中感染明显存在密切相关性。     

深圳登革热患者血清中2型病毒株的分离鉴定

目的:对深圳市2004年-2006年登革热病原体进行分离鉴定。方法:采用酶链免疫吸附试验和胶体金免疫层析法检测疑似登革热患者血清中的特异性IgM、IgG抗体。用C6/36细胞对早期病例血清进行病毒分离,以MGB荧光PCR方法鉴定。并用逆转录-半套式PCR(RT-semi-nested-PCR)方法和荧光PCR方法对其进行型别鉴定。结果:从10份抗体阳性的病人血清标本中成功分离到一株登革病毒,经鉴定为登革2型病毒,将其命名为DEN2-SZ0521。结论:首次从深圳市登革患者血清中分离到一株登革2型病毒,为进一步研究和控制该地区登革热提供了科学依据。     

我国单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)感染与宫颈癌关系的Meta分析

[目的]探讨我国妇女单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)感染与宫颈癌发病的关系.[方法]采用Meta分析的方法,检索中国知识资源总库、万方全文数据库、重庆维普数据库,对学者自1986年3月～2007年12月公开发表的有关HSV-2感染与宫颈癌发病关系的研究文献进行综合定量分析,应用Review Manager 4.2软件计算优势比值(OR).[结果]入选的15篇文献包括了865个病例,1105个对照.HSV-2感染与宫颈癌发病之间关联明显,其OR=6.15,95%CI为(4.37,8.66).[结论]感染单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)会增加宫颈癌的发病风险.     

单纯疱疹病毒性角膜炎治疗方法研究进展

单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus 1, HSV-1）是一种普遍存在的病原体,感染角膜可引起单纯疱疹病毒性角膜炎（herpes simplex keratitis, HSK）。HSV-1可潜伏于三叉神经胞体,易形成复发感染。多次反复恶化可造成角膜免疫-炎症反应损伤,促进新生血管形成,进一步导致角膜浑浊、视力障碍甚至失明,是导致角膜盲的首要病因之一。目前,临床使用的抗病毒药物不能根除HSV-1,本文将汇总有关HSK的最新治疗进展,主要从抑制HSV-1入侵、增殖以及减少新血管生成两方面进行综述,以期为临床研究提供理论依据。     

单纯疱疹病毒2型感染与缺血性脑卒中不良预后的关系

目的 探讨单纯疱疹病毒2型（herpes simplex virus 2,HSV-2）感染与缺血性脑卒中发病后14 d（或出院）时不良预后的关系。方法 2011年6月~2013年12月,本研究采用队列研究的方法,从国内14家医院纳入确诊的缺血性脑卒中病例1 150例,检测入院时血清HSV-2 IgG水平,以发病后14 d（或出院）发生死亡或心血管事件为不良预后,采用Logistic回归方法分析HSV-2 IgG水平与不良预后的关系。结果 依HSV-2 IgG四分位数将病例分为4组,以第1分位组为参照组,经多因素调整后第4分位组发生不良预后的风险是参照组的4.32倍（95% CI：1.33~14.03,P=0.015）,且随不同组间HSV-2 IgG水平的增加,不良预后的发生风险有增加的趋势。亚组分析发现,病例为女性、或不饮酒、或伴有糖尿病、或伴有高血压时,高水平HSV-2 IgG可增加14 d（或出院）时不良预后的发生风险（均有P<0.05）。结论 缺血性脑卒中伴HSV-2感染时,高水平的HSV-2 IgG能增加病后14 d（或出院）时不良预后的发生风险,且随HSV-2 IgG水平的增加,不良预后的发生风险有增加的趋势。     

白介素—2对预防生殖器疱疹复发的效果

目的研究白介素-2(IL-2)对预防生殖器疱疹(GH)复发的效果.方法应用IL-2治疗复发性GH患者26例,与16例采用聚肌胞治疗患者作对比,随访8个月.结果治疗组的复发率为30.77%而对照组的复发率为68.75%.治疗组的复发率低于对照组(X2=5.78,P＜0.05).结论IL-2是防治GH复发的-种有效的细胞因子,能减少GH复发及消除单纯疱疹病毒潜伏感染.     

重组免疫优势肽段为抗原的ELISA法在检测2型单纯疱疹病毒感染中的应用

目的 表达2型单纯疱疹病毒(HSV-2)糖蛋白G免疫优势片段gG321-580,探讨重组gG321-580作为检测HSV-2特异性IgG诊断抗原的可行性,为进一步开发诊断试剂盒奠定基础.方法 整合有gG321-580基因的重组杆状病毒接种Sf9昆虫细胞,NTA-Ni2+纯化表达His-gG321-580融合蛋白.应用HSV-2感染Vero细胞,制备HSV-2病毒抗原.将gG321-580蛋白和HSV-2病毒抗原分别作为包被抗原,建立间接ELISA法(gG321-580-ELISA和病毒抗原-ELJSA).分别用gG321-580-ELISA和病毒抗原-ELISA检测105份临床样本,两者的检测结果以HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒作为金标准,在特异性、灵敏性和符合率等方面进行比较.结果 SDS-PAGE和Western印迹结果显示,表达的gG321-580蛋白相对分子质量约为60000,具有良好的免疫学活性.与HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒相比,gC321-580-ELISA的灵敏度、特异度、符合率分别为83.3％、81.8％、82.9％,病毒抗原-ELISA的灵敏度、特异性和符合率分别为20.8％、93.9％、43.8％.gG321-580-ELISA敏感度和符合率高于病毒抗原-ELISA.结论 表达的HSV-2重组gG321-580蛋白作为包被抗原的ELISA法是一种敏感、特异的方法,具有较大的应用价值.     

上海市闸北区性病门诊患者HSV-2感染率及其影响因素研究

目的了解上海市闸北区性病门诊患者2型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 2,HSV-2)感染率及其影响因素。方法抽取2008年7~8月间前往闸北区中心医院规范化性病门诊就诊的患者,进行问卷调查和HSV-2、HIV血清学抗体检测。结果共有256例就诊者接受调查,平均年龄(36.86±11.82)岁,大多数为男性(178人,占69.5%)、在婚(179人,占69.9%)、外地户籍(150人,占58.6%)、高中及以上文化程度(141人,占55.1%)。初次性行为年龄范围为13~39岁,平均年龄在(22.37±3.67)岁。222例(86.7%)调查对象目前有固定性伴,145例(56.6%)调查对象最近3个月有过商业性行为,7例(2.7%)调查对象有吸毒行为,1例(0.4%)HIV检测呈阳性。HSV-2感染率为30.1%,男性为25.8%,女性为39.7%。多因素Logistic回归分析显示,在控制了其他变量的混杂影响后,女性HSV-2感染率显著高于男性,差异有统计学意义(P=0.027);最近3个月有商业性行为者HSV-2感染率高于无商业性行为者,差异有统计学意义(P=0.048)。...     

性传播疾病患者单纯疱疹病毒2型检测结果分析

目的了解性传播疾病(sexually transmitted disease,STD)患者单纯疱疹病毒2型(herpes simples virus type 2,HSV-2)的感染情况,为STD的临床诊治提供依据。方法 2010年1月—2011年12月选择临床确诊的STD患者486例作为观察组,随机选择同期门诊就诊的非STD患者118例为对照组,分别采集血液标本,分离血清,ELISA法检测HSV-2 IgG抗体。结果观察组HSV-2 IgG抗体阳性率40.95%(199/486),对照组16.10%(19/118),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不同性别SHV-2阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论患生殖器疱疹、尖锐湿疣、梅毒、念珠菌性龟头炎、阴道炎等的患者HSV-2感染率高,应将HSV-2感染检测纳入实验室常规项目,同时加强STD患者的健康教育,倡导安全性行为。     

单纯疱疹病毒2型新发感染率及其危险因素的Meta分析

目的 描述全球单纯疱疹病毒2型(HSV-2)新发感染率水平,探讨其新发感染的危险因素.方法 运用Meta分析方法对全球范围内1990-2010年发表的HSV-2新发感染率相关研究结果进行汇总和定量综合分析;采用Stata软件进行异质性检验及合并新发感染率、发病风险比、计算发表偏倚和敏感性分析.结果 不同国家地区和不同人群间HSV-2新发感染率相差较大,自1.0/100人年至23.1/100人年之间不等.非洲、美国为HSV-2高发地区;女性和既往HIV感染是HSV-2新发感染的危险因素,但既往HSV-1感染对HSV-2的新发感染无影响.结论 不同国家地区和不同人群HSV-2新发感染率水平差异较大,需采取有针对性的防控策略.我国也应尽快在不同地区和人群中开展HSV-2新发感染率的相关研究.

Abstract：

Objective To determine the global incidence and risk factors of herpes simplex virus type 2 (HSV-2). Methods Meta-analysis was performed to systematically and quantitatively review all the original research papers and reports that were published in 1990-2010 on the global incidence of HSV-2. Pooled incidence, pooled hazard ratios, publication bias, heterogeneity and sensitivity analysis for those studies were calculated or conducted using Stata 10.0. Results HSV-2incidence varied considerably across different countries, regions and/or populations, with a range from 1.0 to 23.1/100 person-years (PYs). Africa and United States were highly epidemic with HSV-2 while females and HIV-infected people were at higher risk of HSV-2 infection, whereas HSV-1 infection status was not significantly associated with acquisition of HSV-2 infection. Conclusion HSV-2incidence varied considerably among countries, regions and populations, which called for different and tailored control strategies. More research was also needed in China to examine the HSV-2 incidence and risk factors in different regions and populations.     

Construction and properties of a herpes simplex virus 2 dl5-29 vaccine candidate strain encoding an HSV-1 virion host shutoff protein

The replication-defective herpes simplex virus 2 (HSV-2) dl5-29 mutant virus strain with deletions in the U_L5 and U_L29 genes has been shown to protect mice and guinea pigs against challenge with wild-type (wt) HSV-2 and to protect against ocular disease caused by HSV-1 infection. The dl5-29 strain is currently being prepared for clinical trials as a herpes vaccine candidate. As a possible approach to improve the efficacy of dl5-29 as a genital herpes vaccine, we replaced the U_L41 gene encoding the virion host shutoff function (vhs) with the U_L41 gene from HSV-1. While the HSV-2 U_L41 and HSV-1 U_L41 gene products have analogous functions, vhs-1 is 40-fold less active than vhs-2. Previously, it was shown that disruption of the U_L41 gene can increase the efficacy of dl5-29 as a vaccine against HSV-2. These properties led us to hypothesize that replacement of vhs-2 by vhs-1 would decrease cytopathic effects in infected host cells, allowing longer survival of antigen-presenting cells and induction of stronger immune responses. The new recombinant dl5-29-41.1 virus shows nearly the same immunogenicity and protection against HSV-2 challenge as the parental dl5-29 virus or a triply deleted mutant virus, dl5-29-41, in the murine model of infection, and grows to higher titers than the parental strain in complementing cells, which is important for GMP production. The results have implications for the design of future HSV-2 vaccine candidates and mechanisms of induction of protective immunity against genital herpes.     

杆状病毒和分批补料发酵联用高效表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D

目的利用Bac-to-Bac表达系统和分批补料式培养技术在草地夜蛾昆虫细胞(Sf9)中高效表达重组单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2 gD2)。方法 以HSV-2基因组DNA为模板克隆全长gD2基因,利用Bac-to-Bac表达系统构建含目的基因的重组杆状病毒。同时采用分批补料式培养技术高密度培养Sf9细胞实现重组gD2蛋白的高效表达。构建豚鼠生殖器疱疹模型,研究重组HSV-2 gD2蛋白的免疫活性。结果在一个5 L生物反应器内,在15 mmol/L葡萄糖、0.4 g/L谷氨酰胺以及45%溶解氧的培养条件下,重组gD2蛋白的产量高达192 mg/L。此外,纯化后的重组gD2免疫能显著降低豚鼠生殖器疱疹模型的外阴皮损症状。结论 重组HSV-2 gD2蛋白利用杆状病毒和分批补料发酵联用得到高效表达,并表现出良好的免疫原性,为发展HSV-2疫苗奠定了基础。     

单纯疱疹病毒II型gD糖蛋白在真核细胞中的表达

目的:构建真核表达质粒pcDNA3/gD,并在体外COS-7细胞中进行表达。方法:体外PCR扩增出gD糖蛋白基因,克隆入真核表达质粒pcDNA3中。PCR、酶切和测序证实插入的gD基因正确后,转染COS-7细胞,用原位ELISA鉴定表达蛋白。结果:构建了pcDNA3/gD真核表达质粒,经原位ELISA证实,转染COS-7细胞表达的gD蛋白能和gD单克隆抗体ID3和DL11结合,证明该蛋白具有天然gD蛋白的抗原性。结论:构建的重组真核表达质粒pcDNA3/gD能够在COS-7细胞中表达。