抑癌基因PTEN在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的探讨抑癌基因PTEN在子宫内膜癌发生、发展过程中所起的作用，分析抑癌基因PTEN在子宫内膜癌中与某些临床病理学参数之间的关系。方法采用链霉抗生物素蛋白一过氧化物酶免疫组织化学法分别检测抑癌基因PTEN蛋白在15例正常子宫内膜、15例子宫内膜癌前病变、40例原发性子宫内膜癌各组织标本中的表达情况。结果①抑癌基因PTEN在正常子宫内膜组织中的表达率最高，为93．3％（14／15）；在癌前病变组织中表达率有所下降，为66．7％（10／15）；而在癌组织中表达率最低，为45．0％（18／40），3者比较有统计学意义（P〈0．05）。②抑癌基因PTEN表达与子宫内膜癌的组织学类型有关，腺癌表达率（37．1％）明显低于其他类型子宫内膜癌的表达率（100％），2者相比差异有统计学意义（P〈0．05）。③抑癌基因PTEN表达与临床分期、肌层浸润深度、病理分化程度、淋巴结转移无关（P〉0．05）。④本研究对40例子宫内膜癌患者术后情况进行了随访，抑癌基因PTEN阳性表达者的病死率（5．6％）明显低于阴性表达者（40.9％），2者差异有统计学意义（P〈0．05）。随访5年以上18例，比较抑癌基因PTEN阳性与阴性表达者的5年生存率，阳性表达者5年生存率（100％）明显高于阴性表达者（50．0％）（P〈0．05）。结论抑癌基因PTEN在子宫内膜癌发生过程中起到重要作用，抑癌基因PTEN失表达与肿瘤的组织学类型有关。抑癌基因PTEN表达与临床分期、肌层浸润深度、病理学分级、淋巴结转移等临床病理学参数之间无明显相关性。抑癌基因PTEN表达与子宫内膜癌患者的预后有关。     

人胰岛素样生长因子-1基因的克隆及其表达

目的获得大量高纯度、具有生物学活性的人胰岛素样生长因子 1(hIGF 1) ,构建hIGF 1原核表达载体 ,并进行表达与纯化。方法以pUCIGF质粒为模板 ,PCR扩增了hIGF 1基因。经适当酶切后 ,构建表达载体pRSET IGF ,转入大肠杆菌BL2 1(DE3)进行表达 ,并经阴离子交换色谱、疏水色谱和凝胶过滤纯化。结果带有重组质粒pRSET IGF的大肠杆菌经IPTG诱导后 ,以可溶性形式表达 7.8kD大小的蛋白 ,其表达量占菌体总蛋白量的10 %～ 2 0 % ,纯化后目的蛋白纯度达 95 %以上 ,Western印迹表明重组蛋白具有hIGF 1抗原活性。结论构建了pRSET IGF重组质粒 ,并成功地在大肠杆菌中获得可溶性表达 ,为获得大量基因工程产品奠定了基础     

胰岛素样生长因子-1及其受体在肺癌中的表达

目的研究胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及其受体在各种类型肺癌中的表达。方法应用免疫组化法对非小细胞肺癌和小细胞肺癌及其癌旁组织和正常肺组织进行IGF1及其受体的检测。结果IGF-1及IGF-1受体在鳞癌、腺癌、小细胞癌和癌旁肺组织中均有不同程度的表达。在伴有淋巴结转移的肺癌组织中的表达较强。结论IGF-1及其受体在不同类型肺癌中均有表达,可能在肺癌的发生发展中发挥一定的作用。     

胰岛素样生长因子-1受体和胰岛素受体双重抑制剂类抗癌药Linsitinib

胰岛素样生长因子-1(IGF-Ⅰ)受体是一种跨膜受体酪氨酸激酶,与许多人类肿瘤的发生发展密切相关,由胞外α亚单位和含跨膜及胞内区部分的β亚单位构成,其中α亚单位负责与IGF-Ⅰ和-Ⅱ等可溶性IGF-Ⅰ受体配体结合,而β亚单位则发挥胞内受体酪氨酸激酶作用.与配体结合后,IGF-Ⅰ受体的同源二聚体和IGF-Ⅰ受体-受体酪氨酸激酶的异源二聚体便自身磷酸化,并激活下游PI3K/Akt/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和Ras/有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路,最终抑制细胞凋亡,促进细胞生长和迁移,导致肿瘤的生长和转移.     

胰岛素样生长因子1及其受体在不同程度子宫内膜组织中的表达

目的检测胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及其受体（IGF-1R）在不同程度子宫内膜组织中的表达,探讨两者在子宫内膜癌诊断中的意义。方法应用免疫组织化学技术检测两者在实验组及对照组中的表达。结果IGF-1阳性表达在各组间有相应增加趋势,并且线性趋势卡方检验差异有统计学意义（X^2=14．461,P〈0．05）,IGF-1R在正常和癌两种子宫内膜组织中的阳性表达率分别为60．0％和67．5％,差异无统计学意义（X^2=0．487,P〉0．05）;过度表达率分别为0和10．0％,差异有统计学意义（X^2=4．211,P〈0．05）。结论IGF-1／IR表达与子宫内膜病变有关,可作为子宫内膜癌的一个检测指标。     

早产儿胰岛素样生长因子-1和胰岛素样生长因子结合蛋白-3早期检测的临床意义

目的:研究早产儿早期胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平,指导围产期临床孕产妇及早产儿合理营养干预。方法:对145例早产儿生后3天内进行IGF-1I、GFBP-3测定,将其按小于胎龄儿与适于胎龄儿、小早产儿(小于34周)与晚期早产儿(大于34周)、双胞胎大体重与小体重3种方式对比分组,分别比较IGF-1I、GFBP-3水平。结果:145例早产儿生后3天内监测IGF-1I、GFBP-3值显示适于胎龄儿组明显高于小于胎适龄儿组,大于34周组明显高于小于34周组,大体重组明显高于小体重组,组间比较有极显著性差异(P<0.01)。结论:应加强围生期孕产妇管理,避免早产和胎儿宫内发育迟缓发生,早产儿、小于胎龄儿生后应尽早给予合理营养支持。     

子宫内膜癌患者手术前后血清胰岛素样生长因子检测及意义分析

目的探讨血清胰岛素样生长因子对子宫内膜癌手术前后的关系。方法利用免疫放射分析(IRMA)对我院抽取的37例子宫内膜癌患者进行术前和术后血清胰岛素样生长因子-I水平检测,并与例数相等的身体合格的正常人进行对比分析。结果①子宫内膜癌患者术前血清胰岛素样生长因子-I水平(48.73±10.59)ng/L,与体检组(45.19±11.32)ng/L对比差异无统计学意义(P>0.05);②低分化组患者术前血清胰岛素样生长因子-I水平(54.15±12.39)明显高于高分化组(45.53±11.68)(P<0.05);③低分化组患者术后30d复查血清胰岛素样生长因子-I水平比术前有显著降低(P<0.05)。结论:血清胰岛素样生长因子-I在子宫内膜癌低分化组患者中明显增高,且术后明显降低,可做为对低分化子宫内膜癌患者手术效果及复发的辅助诊断。     

胰岛素样生长因子-1在乳腺癌组织中的表达

目的探讨乳腺癌组织中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）的表达及其与乳腺癌发生发展的关系。方法应用RT—PCR方法对70例乳腺癌患者的癌、癌旁组织中的IGF-1mRNA的表达进行检测，以配对乳腺正常乳腺组织为对照。结果IGF-1mRNA在乳腺癌组织中的表达明显高于配对癌旁及正常组织，IGF-1／β—actin比值分别为0.679&#177;0．075、0．463&#177;0．085、0．305&#177;0.031，三组组间比，差异有统计学意义（P〈0.05）；IGF-1表达与乳腺癌的淋巴结转移、病理分期及ER状态显著相关（P〈0．05），与肿瘤病理分型无显著相关（P〉0．05）。结论IGF-1在乳腺癌组织中高表达与乳腺癌的发生发展及转移有关。     

乳糖诱导人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中的表达

目的以含有人源性胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因的大肠杆菌DH5a为研究对象,研究以乳糖作为诱导剂时目的融合蛋白的表达规律。方法利用可表达hIGF-1的工程菌,研究乳糖代替IPTG诱导大肠杆菌在不同条件下表达目的蛋白的一般规律．并优化表达条件,表达结果借助SDS-PAGE等方法进行分析。结果乳糖可诱导hIGF-1在大肠杆菌中的表达．最优表达条件为37℃下重组菌株生长至OD600值为0．7时加入诱导浓度为0．8％的乳糖继续诱导4h。诱导的目的融合蛋白相对表达量能够达到占总蛋白的40-60％水平,接近IPTG的诱导表达水平。结论乳糖能够代替IPTG作为诱导剂成功诱导hIGF-1在大肠杆菌中的表达。     

p27基因在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的探讨抑癌基因p27在子宫内膜癌组织中的表达及其意义.方法应用免疫组织化学方法（SP法）检测p27基因在20例正常子宫内膜及65例子宫内膜癌组织中的表达.结果 p27基因在正常子宫内膜组织中全部为阳性表达,65例子宫内膜癌组织中,33例表达阳性;病理分级为G1、G2、G3级的子宫内膜癌组织中p27基因表达阳性率分别为82%、57%、19%,两两比较差异有统计学意义（P＜0.01或0.05）;临床分期Ⅰ期的子宫内膜癌组织中p27基因表达阳性率为94%,Ⅱ期者为56%,Ⅲ期者为26%,两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）;p27基因表达阳性率与子宫内膜癌的病理分级和临床分期及肌层浸润深度呈负相关（P＜0.05）.结论p27基因的异常表达与子宫内膜癌的生长、浸润及分化密切相关.     

PinX1基因在膀胱癌中的表达及临床意义

目的分析内源性端粒酶抑制基因PinX1在膀胱癌中的表达,探讨PinX1在膀胱癌发生、发展和预后中的作用及临床意义。方法应用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测48例膀胱癌组织中内源性端粒酶抑制基因PinX1及端粒酶反转录酶hTERT的mRNA表达水平,同时应用免疫组织化学方法检测PinX1蛋白表达水平。结果PinX1表达与膀胱癌组织分化、临床分期和淋巴转移之间呈显著相关性,与hTERT表达呈负相关。结论PinX1的下调可能与膀胱癌形成、转移过程中端粒酶激活及维持机制有关。检测PinX1的表达水平对评价膀胱癌恶性程度、转移潜能和预后评估均有重要的临床价值。     

KAI1蛋白在子宫内膜癌中的表达及其意义

目的研究KAI1蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测50例子宫内膜癌、20例不典型增生子宫内膜、10例正常增生期子宫内膜组织中KAI1蛋白的表达，并分析其与子宫内膜癌的临床病理参数的关系。结果KAI1蛋白在正常子宫内膜、子宫内膜非典型增生、子宫内膜癌中的阳性表达率逐渐降低，子宫内膜癌中KAI1蛋白的阳性表达率明显低于非典型增生组及正常子宫内膜组，差异有统计学意义（P=0．016）。子宫内膜癌中KAI1蛋白的表达与临床分期、组织学分级、肌层浸润深度和淋巴结转移相关，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论KAI1蛋白在子宫内膜癌的恶性进展过程中表达逐渐下降，其可能成为估计子宫内膜癌恶性程度的生物学指标。     

人胰岛素样生长因子1前体基因的重组、表达及纯化

目的 构建含有人胰岛素样生长因子1（hIGF-1）前体编码基因的重组载体,在E.coli BL21中表达,并探讨其抗原性和应用价值。方法 用PCR法,从现有重组质粒pBakPAK 8／hIGF-1中,扩增编码hIGF-1前体的基因片段,经双酶切、纯化、连接后得到pET29a（＋）／hIGF-1重组体,再将其转化大肠杆菌BL21-CodonPlus并诱导表达。表达产物经镍柱亲和层析纯化后,用Western blot法检测重组蛋白的抗原活性。结果 重组持粒pET29a（＋）／hIGF-1经双酶切鉴定和测序分析证实构建成功。在大肠杆菌BL21-CodonPlus中经IPTG诱导表达,有一相对分子质量15000的重组蛋白hIGF-1前体,该蛋白经镍柱亲和层析获得了良好的纯化效果,具有特异的抗原活性。结论 成功地克隆并表达相对分子质量为15000的hIGF-1前体编码基因,为进一步制备抗hIGF-1抗体和后续hIGF-1生物学功能研究打下了良好基础。     

Bcl-X基因在子宫内膜癌中的表达

目的了解Bcl-X基因在子宫内膜癌中的表达情况及其意义。方法用RT-PCR方法、Western-blot方法检测32例子宫内膜癌组织中的Bcl-XmRNA及蛋白的表达情况。结果Bcl-XSmRNA及蛋白的表达与子宫内膜癌组织的肌层浸润程度、病理分级无关,P均大于0.05;与临床分期、淋巴结转移有关,P均〈0.05。而Bcl-XLmRNA及蛋白的表达量与子宫内膜癌组织的肌层浸润程度、临床分期、淋巴结转移无关,P均〉0.05;与病理分级有关（P〈0.05）。结论Bcl-X在子宫内膜癌的发生发展中有着重要的意义,其中Bcl-XL的异常表达与子宫内膜癌的病理分级有关,Bcl-XS的异常表达与子宫内膜癌的临床分期及淋巴结转移有关。     

子宫内膜癌组织中PTEN mRNA和PTEN蛋白表达

目的探讨子宫内膜癌组织中PTEN mRNA和PTEN蛋白的表达及其临床意义。方法应用RT-PCR方法检测50例子宫内膜癌和15例正常子宫内膜组织中PTEN基因外显子1—8和5-9片段mRNA的表达;应用免疫组化技术检测PTEN蛋白的表达。结果（1）子宫内膜癌组织中,PTEN mRNA的表达缺失率在外显子1-8和5-9分别为48．00％和38．00％,正常子宫内膜组织PTEN mRNA全部呈阳性表达。两者在两组中表达缺失率的差异均有显著性（P〈o．05）;PTEN mRNA的表达缺失率在不同组织学类型、FIGO分期和组织学分级有随肿瘤恶性程度的增高而增高的趋势。（2）子宫内膜癌组织中,PTEN蛋白表达缺失率为60．00％,高于正常子宫内膜组织（0,P〈0．01）;PTEN蛋白表达缺失率在G3级组织和特殊类型癌中分别高于G1～G2级组织和内膜样腺癌（P〈0．05）。（3）子宫内膜癌组织中,PTEN mRNA表达缺失和PTEN蛋白表达缺失呈正相关（P〈0．01）。结论PTEN mRNA和蛋白表达缺失在子宫内膜癌的发生发展中可起重要作用。     

人乳头状瘤病毒在子宫内膜癌组织中的检测

目的了解正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜以及子宫内膜癌组织中HPV感染情况。方法采用原位杂交法对28例子宫内膜癌、21例子宫内膜不典型增生患者的石蜡包埋组织进行HPV16／18DNA检测，以16例正常增生期子宫内膜作为对照组。结果（1）28例子宫内膜癌组织中25例检测出HPV16／18DNA，检出率均为89．3％；（2）21例子宫内膜不典型增生组织检测出2例HPV16／18DNA，检出率均为9．5％；（3）对照组16例正常子宫内膜中检出1例HPV16／18DNA，检出率6．3％。结论子宫内膜癌中HPV16／18DNA感染显著高于不典型增生子宫内膜和正常子宫内膜；子宫内膜癌的发生、发展可能与HPV感染有关。     

细胞色素P450 1B1基因多态性与子宫内膜癌易感性研究

目的研究细胞色素P4501B1基因外显子2密码子119（G-T）、外显子3密码子432（C-G）多态性与子宫内膜癌遗传易感性的关系。方法采用等位基因特异性聚合酶链反应（AS-PCR）法对72例子宫内膜癌患者和80例对照者进行CYP1B1基因密码子119（G-T）、密码子432（C-G）突变分析,用SP免疫组化法进一步研究雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的表达是否受CYP1B1基因多态性的影响。结果CYP1B1基因密码子119、432中等位基因G、T和C、G在子宫内膜癌组和对照组分布的差异有显著性（χ^2=16.817,P=0.000;χ^2=9.133,P=0.003）,其中等位基因T、G使患子宫内膜癌危险性分别增加了3.052和2.213倍。CYP1B1基因密码子119G/T各基因型分布两组间有显著性差异（χ^2=18.267,P〈0.01）,纯合突变T/T、G/G基因型、杂合突变G/T、C/G基因型与野生G/G、C/C基因型相比,患子宫内膜癌的危险度分别提高了4.258、3.871倍和3.235、2.214倍。此外,119T/T、G/T基因型、432G/G、C/G基因型者ER阳性表达率高于119G/G、432C/C野生基因型,有显著性差异（χ^2=6.750,P=0.034;χ^2=6.977,P=0.031）。结论CYP1B1基因密码子119、432突变等位基因与子宫内膜癌的发生有一定关联,突变基因型增加了子宫内膜癌的发病风险,且与ER的表达相关。