牛磺酸对小鼠电离辐射损伤的防护作用探讨

牛磺酸对小鼠电离辐射损伤的防护作用探讨窦学术，杨军，唐朝枢（淄博市第二卫生学校，２５５０１５北京医科大学）关键词牛磺酸，电离辐射损伤，防护作用，小鼠牛磺酸是体内含量比较丰富的磺酸基自由氨基酸，具有调节细胞钙稳态、平衡渗透压，维持细胞膜和溶酶体膜的稳定...     

电离辐射对小鼠胸腺细胞蛋白质表达的影响

目的：观察低剂量Ｘ射线全身照射诱导小鼠胸腺细胞蛋白质表达变化及对细胞内外蛋白质交换的影响。方法：采用双向电泳方法。结果：７５ｍＧｙＸ射线全身照射小鼠后４ｈ,细胞浆出现４个新蛋白点、４个增强蛋白点及３个减弱蛋白点,正确细胞浆中的５个蛋白点在照射后消失。照射后细胞外液出现１个新蛋白点、１个增强蛋白点及１个减弱蛋白点。正常细胞上液中的３个蛋白 在照射后消失。正常细胞浆中的２个蛋白点在照射后分别减弱和消失     

脂多糖体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡的研究

研究脂多糖（ＬＰＳ）体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡的,发现胸腺细胞ＤＮＡ凝胶电泳可出现凋亡特征的梯状带,并且胸腺细胞的凋亡与ＬＰＳ剂量呈依赖关系,苏木精、伊红染色后镜下可见胸腺皮质部分出现大量凋亡细胞,但难以计数;终末脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿嘧三磷酸腺苷原位缺口末端标记法可计数胸腺皮质凋亡的细胞,该法观察ＬＰＳ体内诱导胸腺细胞的凋亡的动力学特征表明,在注射ＬＰＳ后１２￣１８ｈ胸腺细胞凋亡的百分率迅速     

电离辐射对小鼠胸腺细胞蛋白质表达的影响

目的 :观察低剂量 X射线全身照射诱导小鼠胸腺细胞蛋白质表达变化及对细胞内外蛋白质交换的影响。方法 :采用双向电泳方法。结果 :75m Gy X射线全身照射小鼠后 4h,细胞浆出现 5个新蛋白点、4个增强蛋白点及 3个减弱蛋白点。正常细胞浆中的 5个蛋白点在照射后消失。照射后细胞外液出现 1个新蛋白点、1个增强蛋白点及 1个减弱蛋白点。正常细胞外液中的 3个蛋白点在照射后消失。正常细胞浆中的 2个蛋白点在照射后分别减弱和消失 ,而在细胞外液中出现和增强。正常细胞外液中的 2个蛋白点在照射后消失 ,而出现在细胞浆中。结论 :低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞蛋白质表达变化 ,并促进细胞内外大分子物质的交换     

陆皂苷甲对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的；研究商陆皂苷甲（EsA)对小鼠胸腺细胞的凋亡效应的影响，方法：采用电镜，DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪三种分析方法，测定EsA对小鼠胸腺细胞的凋亡效应的影响。结果：EsA在2．5－10μg/ml的浓度范围内，对小鼠胸腺细胞自发出现的细胞凋亡无影响，但能显著地促进ConA活化的胸腺细胞的凋亡，结论：EsA有促进ConA活化的胸腺细胞凋亡的作用，显示商陆皂陆甲对细胞免疫有调节作用。     

75mGyX射线诱导小鼠胸腺细胞转录因子CREB,NF—kB及AP1？…

为了解低剂量Ｘ射线全身照射对小鼠胸腺细胞基因转录调控的影响。方法：采用凝胶电泳迁移率分析和寡核苷酸竞争抑制方法检测低剂量Ｘ射线对小鼠胸腺细胞基因转录调控的影响。结果；迁移率变化证实７５ｍＧｙ射线全身照射小鼠后４ｈ，胸腺细胞核蛋白提取物的转录因子ＣＲＥＢ及ＮＦ－ｋＢ与其基因启动部位增强子控制序列的结合活性分别增强６倍及４．３倍，ＡＰｌ增强２倍。     

胸腺细胞凋亡的研究进展

就目前在胸腺细胞凋亡这一方面的国内外研究进展作一简要综述。     

氯化镧对内毒素攻击后小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的 探讨氯化镧对内毒素(LPS)攻击后小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法 通过观察氯化镧对LPS(12．5mg／kg)攻击后小鼠胸腺细胞DNA片段百分率、胸腺细胞凋亡百分率和胸腺细胞DNA片段琼脂糖凝胶电泳结果的影响，探讨其对小鼠胸腺细胞凋亡状况可能作用。结果 10mg／kg氯化镧能显降低内毒素血症小鼠胸腺细胞DNA片段百分率、胸腺细胞凋亡百分率．抑制胸腺细胞的凋亡。结论 LPS攻击后，可导致小鼠胸腺细胞发生凋亡．而氯化镧对LPS诱导的小鼠胸腺细胞凋亡具有一定的抑制作用。     

益元口服液对辐射损伤小鼠辅助防护作用

OBJECTIVE: To study the protective effect of Yiyuan oral solution against radiation injury in mice. METHODS: Yiyuan oral solution was administered in mice at 10.00, 3.33 and 1.67 ml/kg for 30 days. The mice were then exposed to (60)Co-gamma irradiation at 3 Gy once and the effect of the irradiation on the WBC, bone marrow polychromatic erythrocytes (PEC) micronuclei and serum hemolysin antibody against sheep red cells. RESULTS AND CONCLUSION: Yiyuan oral solution at 10 ml/kg significantly increased WBC counts, decreased bone marrow PEC micronucleus rate and enhanced serum hemolysin antibody in mice, suggesting the protective effect of this preparation against radiation injury.     

益元口服液对辐射损伤小鼠辅助防护作用

目的 探讨益元口服液对小鼠辐射损伤的辅助保护作用。方法 小鼠口服高剂量(10ml/kg·b.w.)、中剂量(3.33ml/kg·b.w.)、低剂量(1.67ml/kg·b.w.)益元口服液30d后接受⁶⁰Co-γ射线3Gy照射,观察对小鼠一次性全身照射⁶⁰Co-γ射线3Gy引起的小鼠外周血白细胞下降、骨髓细胞微核率增加及血清溶血素降低等损伤指标的影响。结果 益元口服液高剂量组能明显增加经一次⁶⁰Co-γ射线全身照射后小鼠的外周血白细胞总数,降低骨髓细胞微核发生率,提高血清溶血素水平。结论 益元口服液对小鼠辐射损伤有辅助保护作用。     

电离辐射对胸腺细胞周期进程的影响

本文采用流式细胞仪对小鼠Ｘ射线全身照射后胸腺细胞周期进程与Ｘ射线剂量效应关系进行了研究。４．０ＧｙＸ射线全身照射后４ｈ胸腺细胞便出现明显的ＤＮＡ合成抑制和Ｇ２阻滞，８ｈＧ２阻滞达到最高点。不同剂量全身照射的结果表明，低剂量（５０～１００ｍＧｙ）全身照射后胸腺细胞ＤＮＡ合成能力增强，而高剂量全身照射后则出现明显的ＤＮＡ合成抑制，Ｇ２阻滞和有丝分裂延迟。     

褪黑素对电离辐射诱导离体小鼠淋巴细胞凋亡的影响

目的：探讨褪黑素（melatonin,MLT）对电离辐射诱导的离体小鼠淋巴细胞凋亡的影响及其机制。 方法：采用流式细胞术（FCM）和荧光分光光度法分别检测小鼠胸腺和脾淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率。 结果：电离辐射可诱导离体小鼠胸腺、脾淋巴细胞凋亡,在0.5~6.0 Gy范围内凋亡呈剂量依赖性增加。照射前预先加入2 mmol•L^-1MLT,细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率与单纯照射组比较均显著降低,胸腺、脾淋巴细胞凋亡小体百分率分别降低为单纯照射组的86.25%和89.22%,DNA裂解率分别降低为单纯照射组的87.23%和89.16%。 结论：MLT在体外可减轻电离辐射诱导的小鼠淋巴细胞凋亡,对淋巴细胞损伤有防护作用。     

骨髓间充质干细胞在电离辐射诱发的小鼠胸腺组织损伤中的作用

目的：观察骨髓间充质干细胞（MSCs）在电离辐射诱发的胸腺组织损伤中的迁徙、定居及修复作用。方法： 体外分离培养的C57BL/6小鼠MSCs,DAPI标记,经C57BL/6小鼠（n=6）尾静脉注入后,分别于1、5及10 d处死小鼠（每次2只）,取胸腺组织在激光共聚焦显微镜下观察MSCs在小鼠胸腺组织中富集情况;另取18只C57BL/6小鼠行1.75 Gy X线全身照射,每周1次,连续4周,制备电离辐射诱发的胸腺组织损伤动物模型。实验设正常对照组、照射组、照射+生理盐水组及照射+MSCs组,每组6只。3个月后取各组胸腺组织,采用流式细胞术测定胸腺细胞凋亡率,组织学观察MSCs对胸腺组织损伤的修复作用。结果：　激光共聚焦显微镜下观察 MSCs经尾静脉注入1 d后即出现在胸腺组织内,5 d后开始弥散,10 d后广泛弥散。流式细胞术检测到照射组胸腺细胞凋亡率明显高于正常对照组（P<0.05）,照射+MSCs组胸腺细胞凋亡率明显低于照射组（P<0.05）。病理观察结果,正常对照组小鼠胸腺组织皮、髓质结构清楚,皮质内有大量的淋巴细胞,髓质内存在少量淋巴细胞;照射组和照射+生理盐水组胸腺组织皮、髓质结构不清,淋巴细胞广泛凝固性坏死;照射+MSCs组胸腺组 织皮、髓质内可见残存或新生的淋巴组织,皮质结构仍存在。结论：MSCs可以迅速地富集在损伤胸腺组织中,促进损伤胸腺再生与修复。     

吲哚硒对小鼠化学性肝损伤的保护作用

目的 探讨吲哚硒对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用及可能机制。 方法 建立CCl4诱导小鼠化学性肝损伤模型，分光光度法检测血浆中ALT、AST水平和肝匀浆MDA、SOD、GSH-Px含量，HE染色法对肝脏组织作病理检查。结果 吲哚硒(5、10、20mg／kg)灌胃给药均能降低血浆中升高的转氨酶水平。病理检查也发现其可明显减轻肝组织坏死范围及程度，减少炎细胞浸润。同时发现吲哚硒可降低肝匀浆中升高的MDA水平，使降低的肝匀浆SOD、GSH-Px酶活性升高。结论 吲哚硒对CCl4致小鼠急性化学性肝损伤具有保护作用。其机制与其抗自由基、提高抗氧化物酶的活性等有关。     

低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞DNA裂解适应性反应的剂量率效应

目的：观察低剂量辐射诱导胸腺细胞DNA裂解适应性反应的剂量率效应。方法：用X射线照射Kunming雄性小鼠,其诱导剂量（D1）及其后攻击剂量（D2）分别是75 mGy和1.5 Gy,D1剂量率为6.25、12.5、25、50、100和200 mGy•min^-1,D2剂量率为287 mGy•min^-1,D1 和D2间隔6 h。通过荧光分光光度计检测DNA裂解断片的变化。结果：D2组胸腺细胞DNA裂解率明显高于假照组（P<0.001）;当D1剂量率为6.25、12.5和25 mGy•min^-1,D1＋D2组DNA裂解率明显低于D2组（P<0.05或P<0.01）。 结论：当D1在75 mGy,剂量率为6.25～25 mGy•min^-1;D2为1.5 Gy,剂量率为287 mGy•min^-1;D1和D2间隔6 h,可在全身照射条件下诱导小鼠胸腺细胞DNA裂解的适应性反应。     

牛磺酸对60Coγ射线左半身照射小鼠脾脏造血功能的影响

目的 探讨局部电离辐射对小鼠血清中MDA、SOD的改变和脾脏指数、CFU-S等造血功能的影响以及补充牛磺酸(Tau)的保护作用.方法 将5～6周龄雄性小鼠随机分为6组,照射前后通过腹腔注射补充Tau,观察8.0 Gy γ射线半身或全身照射时小鼠脾脏指数、脾集落形成单位(CFU-S)等脾脏造血功能指标的变化和血清中DMA、SOD的改变.结果 ①在全身致死剂量照射时,小鼠脾脏指数、CFU-S下降,血清中DMA明显增高、SOD显著降低 (P＜0.01),补充牛磺酸对上述指标改变不明显;②在左半身照射条件下,脾脏区照射小鼠脾脏指数等较正常对照组有所增加(P＜0.01),血清中DMA增加、SOD降低;补充牛磺酸时,可进一步升高小鼠脾脏指数、CFU-S (P＜0.01),同时使血清中DMA下降、SOD活性增加(P＜0.01).结论 补充适量的牛磺酸可使小鼠在局部照射条件下脾脏指数、CFU-S增加,降低血清中DMA、增高血清SOD活性,对脾脏造血功能恢复具有一定促进作用.     

c-myc基因与辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤的关联性分析

目的：研究辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤c-myc基因表达的变化,为阐明辐射致癌机制提供理论依据。方法：采用X射线（剂量率0.287 Gy?min-1,总剂量7 Gy）照射BALB/c小鼠,建立小鼠胸腺淋巴瘤模型,6个月后处死小鼠,取辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤和正常胸腺,分别提取总RNA、合成cDNA和提取总蛋白,采用实时定量PCR方法和Western blotting方法分别检测辐射诱发胸腺淋巴瘤和正常胸腺组织c-myc基因mRNA和蛋白表达。结果：经实时定量PCR检测,胸腺淋巴瘤和正常胸腺组织c-myc基因mRNA相对表达量分别为9.16±4.66和1.16±0.54,两组比较差异有显著性（P<0.01）;Western blotting检测结果显示,胸腺淋巴瘤c-myc基因蛋白表达较正常胸腺组织明显增高。结论：c-myc基因与辐射诱发
小鼠胸腺淋巴瘤有关联,可能是辐射致癌的易感基因。     

褪黑素镇痛作用的依赖性及免疫增强作用

目的观察褪黑素(MT)的镇痛作用是否有耐受性和依赖性及其对免疫功能的影响.方法依赖性观察采用小鼠竖尾实验和跳跃实验;免疫功能的检测采用免疫器官称重法、碳粒廓清实验及脾淋巴细胞增殖反应等.结果MT 40mg/kg(qd×7 d,ip)产生镇痛作用而无耐受现象,并能提高ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应;小鼠scMT 350 mg/kg未出现竖尾现象;MT 350 mg/kg(bid×5 d)后,用纳洛酮(5 mg/kg)催瘾未出现跳跃现象,且对盐酸吗啡依赖小鼠的跳跃实验无明显影响;MT 350 mg/kg(bid×5 d)后,脾、胸腺指数及碳粒廓清实验中K、α值高于溶媒组,提示MT能显著增加小鼠的非特异性免疫功能;盐酸吗啡30 mg/kg(bid×5 d)对小鼠的免疫功能有抑制作用.结论MT镇痛作用无明显的耐受性及依赖性,并对免疫功能有促进作用.     

自噬在电离辐射诱导的小鼠精母细胞GC-2凋亡过程中的作用

目的 探讨自噬在电离辐射诱导小鼠精母细胞GC-2凋亡过程中的作用.方法 将小鼠精母细胞GC-2分为空白对照组和不同剂量(2、4和8 Gy)60Co辐射处理组.采用原位末端转移酶标记法(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡情况,通过蛋白质印迹实验观察自噬相关蛋白LC3(LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)和Beclin1表达水平的改变,使用荧光显微镜观察C,C-2细胞内自噬小体的变化.用5mmol/L自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理GC-2细胞2h再给予60Co辐射处理,观察自噬抑制剂联合电离辐射对细胞凋亡率的影响以及自噬相关蛋白表达水平的改变.结果 与空白对照组相比,GC-2细胞经60Co辐射处理后细胞凋亡率升高(P＜0.05),荧光显微镜下可见细胞自噬体明显增多,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表达水平增加(P＜0.05).预先用5mmol/L 3-MA处理GC-2细胞2h再给予60Co辐射处理,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表达水平与未经3-MA处理组相比降低(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05).结论 电离辐射可以诱导精母细胞发生自噬,抑制细胞自噬后可增强电离辐射对精母细胞的杀伤作用.