化妆品中大肠埃希菌的固定底物酶底物检测法

目的比较酶底物定量法(Colilert法)与标准平板计数法用于化妆品中大肠埃希菌检测时的等效性。方法选用乳剂、霜剂、粉剂三种不同性状的检测合格的送检化妆品,用大肠埃希菌ATCC25922分别加标于三种化妆品中,用生理盐水和添加Colilert试剂的生理盐水进行稀释后检测,结果采用《化妆品卫生规范》(2007)中规定的化妆品菌落总数的检验方法进行计数分析。结果通过对60件化妆品样品的检测,大肠埃希菌两种稀释液检测计数结果差异无统计学意义(t=1.421,P0.05),且相关性较高(r=0.97);乳剂化妆品(t=0.136,P0.05)、霜剂化妆品(t=1.163,P0.05)、粉剂化妆品(t=0.036,P0.05)中大肠埃希菌两种稀释液检测计数结果差异均无统计学意义;通过对30株大肠埃希菌的检测,两种方法的检出限差异无统计学意义(t=1.031,P0.05);酶底物定量法(Colilert法)对10株非大肠埃希菌检测的特异性为100%。结论大肠埃希菌酶底物定量法具备快速灵敏等优点,可以用作评价化妆品大肠埃希菌污染的一种快检方法,但后续研究应加大化妆品样本量并进行检测。     

卵磷脂和吐温80中和化妆品中防腐剂及影响细菌生长研究

目的 检验《化妆品卫生规范》(2007)中卵磷脂和吐温80的用量对化妆品中细菌生长的影响及是否具有中和防腐剂的作用.方法 选用三种不同性状的检测合格的送检化妆品,用铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌分别加标于三种化妆品中,用生理盐水和添加卵磷脂和吐温80的生理盐水进行稀释后检测,结果用《化妆品卫生规范》(2007)中规定的菌落总数的检验方法进行计数分析.结果 用两种稀释方式对铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌计数差异均无统计学意义(P＞0.05);膏剂化妆品所含防腐剂对两种细菌均有抑制作用,1 g/L卵磷脂和7g/L吐温80可以完全中和防腐剂对铜绿假单胞菌的影响,但不能完全中和其对金黄色葡萄球菌的影响;霜剂化妆品所含防腐剂对加标的两种细菌均无抑制作用;未添加防腐剂的粉剂化妆品性状不影响对加标细菌的检测.结论 卵磷脂和吐温80对加标于化妆品中两种细菌的生长无影响,对化妆品中的防腐剂起到明显的中和作用,但在化妆品防腐剂允许添加剂量内,1g/L卵磷脂和7g/L吐温80尚不能完全中和部分防腐剂对细菌生长的影响.     

ICU多重耐药铜绿假单胞菌感染肺炎的治疗及降钙素原对抗菌药物使用的指导意义

目的探讨ICU多重耐药铜绿假单胞菌感染肺炎的临床治疗对策,以及降钙素原对临床抗菌药物使用的指导意义。方法选取2012年1月至2017年12月温州医科大学附属第二医院ICU病房收治的经痰液样本分离出的铜绿假单胞菌感染肺炎患者142例,根据药敏试验结果分为非多重耐药菌种和多重耐药菌,每组71例,对两组患者分别使用抗菌药物进行治疗,对其临床效果进行探讨。同时,在治疗前及治疗后7 d、 14 d、21 d对71例ICU多重耐药铜绿假单胞菌感染肺炎患者降钙素原进行检测,对比使用一种抗菌药物和两种及以上抗菌药物在治疗前后的降钙素原,以及治疗后炎性指标的情况。结果非多重耐药菌种采用一种抗菌药物治疗的效果低于两种及以上抗菌药物治疗效果,两组相比差异无统计学意义(χ~2=0.137,P0.05),多重耐药菌种采用一种抗菌药物治疗的效果低于两种及以上抗菌药物治疗效果,两组相比差异有统计学意义(χ~2=21.384,P0.05);观察组与治疗组患者治疗前PCT检测结果差异无统计学意义(t=0.259,P0.05);治疗后,两组PCT检测结果均有改善,观察组改善优于对照组,两组相比差异有统计学意义(t=4.572、6.839、11.287,P0.05);治疗结束后,观察组CRP、白细胞计数、IL-6均低于对照组,两组差异有统计学意义(t=19.652、7.384、28.391,P0.05)。结论 ICU铜绿假单胞菌感染肺炎患者应选用两种及以上抗菌药物进行治疗,PCT的检测对ICU多重耐药铜绿假单胞菌感染肺炎抗菌药物的使用起到指导性的作用。     

黏液型铜绿假单胞菌K-B法药敏试验不同报告时间段结果分析

目的探讨黏液型铜绿假单胞菌药敏试验(K-B法)结果的报告时机,了解黏液型铜绿假单胞菌的分离及耐药性,为临床抗感染治疗提供依据。方法对所分离出的20株黏液型铜绿假单胞菌进行体外药敏试验(K-B法),记录不同时间段(24 h、48 h、72 h)的结果。再将此菌进行转种数代,使其黏液消失。将上述2次结果进行对比分析。结果黏液型铜绿假单胞菌24 h抑菌环直径与48 h、72 h差异有统计学意义(P0.05)。黏液消失后的铜绿假单胞菌24 h、48 h、72 h的抑菌环直径差异无统计学意义(P0.05),并与未转种前的黏液型铜绿假单胞菌48 h、72 h的结果差异无统计学意义(P0.05)。结论黏液型铜绿假单胞菌的体外药敏试验(K-B法)结果应该尽量在48 h后报告,该菌对常用抗菌药物的体外药敏试验耐药性较低,但在临床用药时必须考虑黏液型铜绿假单胞菌在体内存在有生物膜的影响因素。     

成都市生活饮用水中铜绿假单胞菌的污染调查

为了解成都市生活饮用水中铜绿假单胞菌的污染情况,于2012年采集成都市城区内生活饮用水样进行检测。结果显示,共检测水样756件,检出铜绿假单胞菌21株,检出率为2.8%。管网水的检出率为0.4%,二次供水的检出率为6.4%,二次供水中铜绿假单胞菌的检出率[6.4%(19/296)]高于管网水[0.4%(2/460)],差异有统计学意义(P0.05);不同季节二次供水和管网水中铜绿假单胞菌的检出率间比较,差异无统计学意义(均P0.05)。提示成都市生活饮用水存在铜绿假单胞菌污染,且以二次供水较为严重。     

化妆品中微生物检测能力验证结果与分析

目的提高实验室检测能力,增强实验室竞争力。方法 2016年参加国家认证认可监督委员会组织的化妆品中微生物检测能力验证(CNCA-16-A11)。依据能力验证作业指导书和国家标准《化妆品卫生规范》(2007年版),对样品进行化妆品中菌落总数、霉菌及酵母菌计数、铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌检测。并采用全自动微生物生化鉴定系统对分离出的疑似菌进行鉴定。结果定量项目菌落总数、霉菌和酵母菌计数的∣Z∣均2.0;定性项目金黄色葡萄球菌均为检出、铜绿假单胞菌均为未检出,与指定值一致。结论结果均为满意,实验室能很好的应用《化妆品卫生规范》(2007年版)开展微生物检测。     

金山区中小学校学生饮用水铜绿假单胞菌污染状况调查

目的了解金山区中小学校学生饮用水铜绿假单胞菌污染状况,探索方便、卫生、适宜的饮水模式。方法采用分层随机抽样的方法抽取直饮水学校12家和桶装水学校14家,在2016年采集直饮水24份,经饮水机桶装水29份和同批次未开封的桶装水29份,开展铜绿假单胞菌检测。结果金山区中小学校供学生饮用水铜绿假单胞菌检出率为16.98%,桶装水和直饮水铜绿假单胞菌检出率差异有统计学意义(P0.05);经饮水机桶装水铜绿假单胞菌检出率为31.03%,未经饮水机桶装水检出率为6.90%,差异有统计学意义(P0.05)。结论学生在校饮用水直饮水铜绿假单胞菌污染状况优于桶装水,饮水机为桶装水铜绿假单胞菌污染的主要原因,建议加强管理、监督和监测。     

COPD稳定期与急性发作期患者铜绿假单胞菌感染的研究

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期与急性发作期患者铜绿假单胞菌感染状况,为COPD患者铜绿假单胞菌感染的防治提供参考。方法选取2015年1月-2017年12月于医院内诊治的COPD急性发作期伴感染患者设为急性期组与COPD稳定期设为稳定期组,各60例,采集患者痰液行细菌培养、分离及菌种鉴定,观察铜绿假单胞菌感染状况,同时分析其耐药情况。结果急性期组患者痰液均培养出感染病原菌,稳定期组患者中24例培养出感染病原菌,差异有统计学意义(P<0.001);急性期组37例患者培养出铜绿假单胞菌(37株),检出率为61.67%,稳定期组患者8例培养出铜绿假单胞菌(8株),检出率为13.33%,两组铜绿假单胞菌检出率差异有统计学意义(P=0.019);急性期组铜绿假单胞菌感染患者中24例患者为多药耐药株感染(24株),稳定期组铜绿假单胞菌感染患者中2例患者为多药耐药株感染(2株),差异有统计学意义(P=0.038);铜绿假单胞菌对氨苄青霉素、氨苄青霉素/舒巴坦、氯霉素的耐药率均>90%,对阿莫西林/克拉维酸、头孢曲松、哌拉西林耐药率介于50%～90%间,对妥布霉素较敏感。结论引起COPD急性发作的感染病原菌以铜绿假单胞菌为主,急性发作期患者铜绿假单胞菌检出率及多药耐药株检出率均高于稳定期患者。     

临床分离铜绿假单胞菌对5种β-内酰胺类抗菌药物的耐药性分析

目的了解临床分离铜绿假单胞菌对5种临床常用β-内酰胺类抗菌药物的耐药性,以指导临床用药。方法琼脂稀释法检测2005年分离自安徽省不同地区的218株铜绿假单胞菌对头孢曲松、头孢噻肟、氨曲南、头孢他啶、哌拉西林的耐药性。结果铜绿假单胞菌对头孢曲松、头孢噻肟、氨曲南、哌拉西林、头孢他啶的耐药率分别为59.2%、57.3%、56.0%、51.8%、39.0%;头孢曲松、头孢噻肟、氨曲南、哌拉西林耐药率之间差异无统计学意义（P〉0.05）,但它们与头孢他啶耐药率差异有统计学意义（P〈0.01）;其中分离自合肥地区的73株铜绿假单胞菌的耐药率与全省平均水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论临床分离铜绿假单胞菌对头孢曲松、头孢噻肟、氨曲南、哌拉西林耐药显著,对头孢他啶较为敏感。     

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的了解医院耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶(MBL)情况及其对临床常用抗菌药物的耐药性,为临床抗感染治疗提供依据。方法采用E-test检测铜绿假单胞菌是否产生MBL,用BD Phoenix 100全自动微生物测定铜绿假单胞菌对常用15种抗菌药物的耐药性。结果在分离的189株铜绿假单胞菌中耐碳青霉烯类的有54株(28.6%),其中产MBL的有13株(24.1%);耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌与碳青霉烯类敏感铜绿假单胞菌对大多数常用抗菌药物的敏感性差异有统计学意义。结论医院耐碳青霉烯类的铜绿假单胞菌检出率较高,多药耐药现象较严重,产MBL是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物耐药的主要原因之一,临床医师应参考微生物实验室的药敏结果,合理选用抗菌药物。     

桶装饮用水中铜绿假单胞菌的检测分析

目的对2013年-2014年连云港市市区内桶装饮用水进行铜绿假单胞菌检测,了解市区内桶装饮用水污染情况,分析检测结果,为保证桶装饮用水的水质安全提供决策依据。方法按GB/T 8538—2008《饮用天然矿泉水检验方法》进行铜绿假单胞菌的检验。结果 2013年-2014年采集的市区范围内桶装饮用水150份,有39份水样检出铜绿假单胞菌,检出率为26.0%,其中饮用纯净水、饮用天然矿泉水、饮用矿物质水的检出率分别为22.6%、57.1%、16.7%。细菌总数的合格率为62.0%,与铜绿假单胞菌检出率比较,差异有统计学意义(χ~2=21.82,P0.001);大肠菌群的合格率为86.0%,与铜绿假单胞菌检出率比较,差异无统计学意义(χ~2=0.084,P0.05)。结论桶装饮用水中存在铜绿假单胞菌的污染,有关部门应加强对桶装饮用水水质的监管。加强国家标准规定范围外的条件致病菌的检验,以便保证水质安全。     

耐多药铜绿假单胞菌感染临床特征及相关因素分析

目的研究耐多药铜绿假单胞菌感染的临床特征、预后与相关因素。方法回顾性分析2013年2月-2018年1月医院耐多药铜绿假单胞菌感染患者213例为研究对象,采用1∶4病例-对照研究,纳入852例非耐多药铜绿假单胞菌感染患者,分析患者临床资料,归纳耐多药铜绿假单胞菌感染的相关因素。结果耐多药铜绿假单胞菌以呼吸道感染为主,主要分布在ICU和神经外科;机械通气、入住ICU、氨基糖苷类、3~4代头孢菌素、碳青霉烯类、多药联类、培养前经验使用抗菌药物是耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌感染的相关因素(P0.05),耐多药铜绿假单胞菌组治疗有效率为68.54%(146/213)低于非耐多药铜绿假单胞菌组89.91%(766/852),且两组患者疗效差异有统计学意义(P0.001)。结论耐多药铜绿假单胞菌感染率高,预后较差;临床应减少不必要机械通气与入住ICU,提高微生物培养送检率,尽量减少经验使用抗菌药物,根据培养与药敏试验结果合理使用抗菌药物,减少耐多药铜绿假单胞菌感染,提高疗效。     

白假丝酵母合并铜绿假单胞菌感染呼吸机相关性肺炎临床特点与血清学及预后分析

目的分析白假丝酵母合并铜绿假单胞菌感染呼吸机相关性肺炎(Ventilator-associated pneumonia,VAP)患者临床特点、血清学及预后情况,以期为白假丝酵母合并铜绿假单胞菌感染VAP的临床诊治提供参考依据。方法选取绍兴文理学院附属医院自2013年1月-2017年12月收治的白假丝酵母合并(或)铜绿假单胞菌感染VAP患者;其中单纯白假丝酵母感染VAP患者31例、单纯铜绿假单胞菌感染VAP患者33例,白假丝酵母合并铜绿假单胞菌感染36例,分别纳入白假丝酵母组、铜绿假单胞菌组、合并感染组;比较三组临床特点、血清学指标及预后情况。结果合并感染组白细胞计数(WBC)低于白假丝酵母组,降钙素原(PCT)高于铜绿假单胞菌组,(1,3)-β-D葡聚糖(G)试验、血肌酐(Scr)高于白假丝酵母组、铜绿假单胞菌组,差异有统计学意义(P0.05);合并感染组气管切开比例、总住院时间高于白假丝酵母组,机械通气天数、ICU住院时间及住院费用高于白假丝酵母组、铜绿假单胞菌组(P0.05);合并感染组好转率为38.89%,低于白假丝酵母组67.74%、铜绿假单胞菌组60.61%,差异有统计学意义(P0.05)。结论较单纯白假丝酵母感染、或单纯铜绿假单胞菌感染的VAP患者,白假丝酵母合并铜绿假单胞菌感染VAP患者炎症反应更严重,并具更大的真菌负荷量,预后也相对较差。     

铜绿假单胞菌耐药性与抗菌药物用量变化的相关性分析

目的了解医院铜绿假单胞菌耐药性的变迁和现状,并探讨其发展与抗菌药物用量之间的关系。方法采用回顾性调查方法,对5年中10种抗菌药物的年用量进行汇总,计算抗菌药物的年用药频度(DDDs),并用SPSS17.0版统计软件对铜绿假单胞菌的耐药率与抗菌药物年用量进行相关性分析。结果10种抗菌药物的耐药率均呈波动下降趋势;其中只有哌拉西林和头孢他啶的年用药频度呈逐年增长趋势;庆大霉素、左氧氟沙星、美罗培南、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦年用药频度与铜绿假单胞菌耐药率差异有统计学意义(P0.01);哌拉西林、亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦(P0.05)有相关性;头孢他啶和环丙沙星差异无统计学意义;左氧氟沙星的用药频度与环丙沙星耐药率之间差异有统计学意义(P0.01)。结论5年铜绿假单胞菌对10种抗菌药物的耐药率呈波动性下降趋势,部分抗菌药物使用量与铜绿假单胞菌耐药水平变化之间存在相关性。     

70例铜绿假单胞菌产酶与耐药性的检测

[目的]探讨铜绿假单胞菌产AmpC酶、金属酶与其耐药的相关性.[方法]分离70株铜绿假单胞菌,采用纸片扩散法检测AmpC酶、纸片协同法检测金属酶,并选用7种广谱抗生素进行药敏实验.[结果]70株铜绿假单胞菌中,AmpC酶和金属酶阳性率分别为35.7%和7.14%. AmpC酶阳性菌株对头孢他啶(CAZ),头孢他啶/棒酸(CD02),头孢噻肟(CTX),头孢噻肟/棒酸(CD03),氧氟沙星(OFX),阿米卡星(AK)表现高度耐药,对亚胺培南(IPM),头孢吡肟(FEP),氨曲南(ATM)敏感;金属酶阳性菌株仅对阿米卡星(AK)敏感,对其余抗生素表现高度时药.[结论]铜绿假单胞菌产AmpC酶和金属酶阳性率较高,两种酶与铜绿假单胞菌多重耐药性相关.     

巯乙磺酸钠对铜绿假单胞菌生物被膜作用的实验研究

目的 研究巯乙磺酸钠(Mesna)对铜绿假单胞菌生物被膜(BF)形成的影响,以及对成熟铜绿假单胞菌BF的作用.方法 微量稀释法检测Mesna对铜绿假单胞菌PAO1的最低抑菌浓度;建立铜绿假单胞菌BF体外模型,扫描电镜(SEM)观察Mesna对铜绿假单胞菌BF形成的作用;经Mesna作用成熟的铜绿假单胞菌BF后,平板计数法检测BF内活菌数,激光共聚焦显微镜(CLSM)观察Mesna对铜绿假单胞菌BF空间结构的影响并结合BF图像结构分析软件(ISA)定量分析BF结构参数.结果 Mesna对PAO1的MIC为10 mg/ml;铜绿假单胞菌BF形成过程中,Mesna能减少BF中基质样物质以及被膜的厚度;与生理盐水对照组(7.45±0.10)比较,Mesna能使成熟铜绿假单胞菌BF中的活菌数减少(P＜0.05),高浓度组(5.84±0.24)较低浓度组(4.06±0.12)更明显(P＜0.05);CLSM图像显示,经Mesna作用后的BF厚度逐渐减少,密度逐渐稀疏;ISA软件定量分析显示,Mesna作用后,BF厚度、平均扩散距离(ADD)和结构熵(TE)均较生理盐水对照组减少(P＜0.05),区域孔率(AP)增加(P＜0.05),高浓度组较低浓度组更明显(P＜0.05).结论 Mesna能够抑制铜绿假单胞菌BF形成,破坏成熟铜绿假单胞菌BF形态结构.     

广州市荔湾区集中空调系统冷却水塔铜绿假单胞菌污染状况

目的了解集中空调冷却水塔铜绿假单胞菌污染状况,为铜绿假单胞菌的防控工作提供科学依据。方法 2010年4—9月,对荔湾区公共场所28个集中空调冷却水塔水样的pH值、嗜肺军团菌、铜绿假单胞菌等微生物指标进行检测,嗜肺军团菌按照卫生部《公共场所集中空调通风系统卫生规范》（2006）检测,铜绿假单胞菌分析按照GB 8538-2008饮用天然矿泉水检验方法进行,pH值按照《生活饮用水检验标准方法》（GB/T 5750-2006）中检验方法进行。结果检测的28份冷却水塔中的水样品,铜绿假单胞菌总阳性检出率为57.14%,嗜肺军团菌阳性检出率为60.71%,两者比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,铜绿假单胞菌的阳性检出率和pH值之间存在负相关关系。结论集中空调冷却水塔铜绿假单胞菌污染严重,应加强冷却水塔的清洗消毒。     

苏州市包装饮用水中铜绿假单胞菌污染调查

目的了解苏州市包装饮用水中铜绿假单胞菌的污染状况。方法按GB 19298—2014 《食品安全国家标准包装饮用水》要求,采用GB/T 8538—2008 《饮用天然矿泉水检验方法》、GB 8538—2016《食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法》对送检包装饮用水进行检测。结果 2016—2017年,共检测992批次包装饮用水,铜绿假单胞菌检出率为7.66%,桶装水检出率(11.41%)高于瓶装水(1.11%),2017年检出率(3.56%)低于2016年(11.48%),差异均有统计学意义(χ2值分别为15.247、21.972,P值均0.05)。不同品种的水样检出率差异无统计学意义(P0.05);夏秋季检出率较高(分别为8.36%、9.68%),冬春季较低(分别为未检出、0.71%)。结论苏州市包装饮用水存在铜绿假单胞菌污染现象,应加强监管。     

链置换扩增压电DNA传感器检测铜绿假单胞菌的临床应用研究

目的探讨链置换扩增(SDA)压电DNA传感器检测铜绿假单胞菌的临床应用.方法应用SDA压电DNA传感器芯片技术和特异性寡核苷酸探针,对临床标本33份进行铜绿假单胞菌检测,并以荧光定量PCR作参照,与常规培养进行对比分析.结果在33份临床标本中,SDA压电DNA传感器检出17份铜绿假单胞菌阳性,与荧光定量PCR结果完全一致,而这两种方法与常规分离培养略有差异.结论 SDA压电DNA传感器芯片技术能直接检测铜绿假单胞菌基因组DNA,具有准确、快速、灵敏的优点.     

压电免疫传感器微阵列检测铜绿假单胞菌的实验研究

目的构建一种新型压电铜绿假单胞菌免疫传感器,并对铜绿假单胞菌进行检测,以探索临床应用的可行性.方法在免疫传感器微阵列表面固定铜绿假单胞菌单克隆抗体,对铜绿假单胞菌菌液进行检测,绘制用于检测的标准曲线并进行曲线拟合,并对50例临床标本进行检测,结果与传统分析方法进行对比.结果铜绿假单胞菌菌液的浓度在103～109细胞/ml范围内,菌量与传感器频率的变化之间呈良好的指数线性关系,指数式回归方程为△F=12.6625×C01757,r=0.9949;通过对未知浓度的铜绿假单胞菌菌液进行检测,定量结果与吖啶橙荧光显微镜直接计数法(AODC)的相关系数r为0.973;50例临床标本检测结果与常规培养检测法高度符合(P＞0.05).结论应用压电石英晶体铜绿假单胞菌微阵列免疫传感器能够对铜绿假单胞菌进行的定量和定性分析,该技术应用于检测铜绿假单胞菌具有时间短、结果准确、无需长时间培养等特点,有较高的推广应用价值.