瓜蒌薤白汤对肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子β1表达的影响

目的探讨瓜蒌薤白汤防治肺纤维化作用及机理.方法用平阳霉素复制大鼠肺纤维化模型后,用药组每天灌胃瓜蒌薤白汤,28d后处死,观察、比较各组大鼠肺部病理组织学改变及肺组织中转化生长因子(TGF-β1)表达.结果模型组大鼠肺泡炎及纤维化程度、肺组织中TGF-β1表达均明显高于正常对照组及用药组(P＜0.05).结论瓜蒌薤白汤能明显减轻平阳霉素所致的大鼠肺泡炎及纤维化程度,抑制肺组织中TGF-β1过度表达.     

化瘀理肺方对大鼠肺间质纤维化时Smad7和TGF-β表达的影响

目的：探讨化瘀理肺方对博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的治疗作用及机制。方法:将大鼠随机分为对照组、模型组、中药组、激素组,采用博莱霉素经气管内插管注入方法(5mg/kg)建立肺间质纤维化模型,对照组注入生理盐水（0.25ml/只）,从造模后的第2天起中药组给予化瘀理肺方药物灌胃（13410mg/kg）;对照组、模型组给予生理盐水灌胃（2ml/只）;激素组给予氢化可的松琥珀酸钠腹腔注射（25mg/kg）,于给药后的第14、28天分别处死,称取肺重计算肺系数;取肺组织行苏木素-伊红（HE）染色观察病理变化情况;免疫组化法测定肺组织中TGF-β、Smad7蛋白的表达情况。结果:进入结果分析的大鼠44只：①大鼠纤维化程度比较：模型组肺泡炎和肺纤维化程度较重,且胶原纤维沉积较多;中药组可见炎性细胞较少,肺泡结构基本正常,肺泡炎与肺纤维化较轻;激素组肺泡炎及纤维化减轻不明显。②TGF-β、Smad7蛋白表达量比较：中药组TGF-β蛋白表达明显低于模型组和激素组;Smad7蛋白表达明显高于模型组和激素组。结论:化瘀理肺方可明显减轻大鼠肺泡炎和肺纤维化的程度,可能通过促进Smad7蛋白的表达从而反馈抑制TGF-β蛋白的表达发挥作用。     

环孢素A对肺纤维化大鼠模型TGF-β1／Smad3表达的影响

目的研究环孢素A（CsA）对大鼠肺纤维化的干预作用及TGF—β1／Smad3信号转导通路的作用机制。方法54只SD大鼠随机分为对照组、模型组和干预组。模型组、干预组经气管内注入博莱霉素（BLM，5mg／kg）诱导肺纤维化模型，干预组次日CsA灌胃进行干预，对照组用生理盐水代替。各组注药后7天、14天和28天3个时间点分别处死6只大鼠。观察肺泡炎及肺纤维化程度；用免疫组织化学法检测转化生长因子β1（TGF-β1）和smad3的表达；TUNEL检测28天各组大鼠肺组织细胞凋亡情况。结果对照组肺泡结构正常，模型组7天时以肺泡炎改变为主，14天时肺泡炎较前有所减轻，28天时以广泛性肺纤维化为主。干预组病理改变与模型组有同一规律，但肺泡炎和肺纤维化程度都轻于模型组。干预组各时间点TGF-β1和smad3表达明显低于模型组（P〈0．05），28天时大鼠肺组织中细胞凋亡指数干预组明显低于模型组。结论环孢素A可下调博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1／Smad3介导的细胞内信号转导途径，减少肺组织上皮细胞的凋亡，最终改善肺间质纤维化。     

扶正剔邪搜络方对肺纤维化大鼠的防治作用及机制研究

目的探讨扶正剔邪搜络方对博莱霉素致大鼠肺间质纤维化不同时相的防治作用及其作用机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、激素组、扶正剔邪搜络组,气管内插管注射博莱霉素制备肺纤维化大鼠模型,假手术组注入等体积生理盐水作为正常对照,造模24 h后给予相应药物灌胃,于第7、14、28、45天分别处死,取肺组织行HE、Masson染色,ELISA法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)含量、RT-PCR法测定Smad3、Smad4、Smad7蛋白的表达。结果扶正剔邪搜络组大鼠第7、14天肺泡炎程度均较模型组明显减轻(P0.05),第14、28、45天纤维化程度较模型组明显减轻(P0.05);扶正剔邪搜络组大鼠各时相TGF-β1含量均低于模型组;扶正剔邪搜络组大鼠各时相Smad3/4蛋白表达明显减弱(P0.05),Smad7蛋白表达明显增强(P0.05)。结论扶正剔邪搜络方不仅可以早期预防博来霉素致大鼠肺泡炎、肺纤维化的形成,长期用药还可以延缓其病程的发展,其机制可能与Smad3、Smad4信号低表达及Smad7高表达,进而影响TGF-β1通路有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1及Smad2/7mRNA表达的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的作用及其机制。方法健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、泼尼松组及EGCG大、中、小剂量组,经气管内滴注博莱霉素复制肺纤维化模型,于造模后第2天开始给药,给药28 d后,取肺组织作病理形态学观察并测定其羟脯氨酸含量,采用RT-PCR法检测肺组织中转化生长因子（TGF）-β1、Smad2、Smad7 mRNA的表达。结果 EGCG各给药组大鼠肺组织肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻（P〈0.05或〈0.01）,羟脯氨酸含量明显降低（P〈0.05或〈0.01）。RT-PCR检测结果显示,EGCG给药组大鼠TGF-β1、Smad2表达下调（P〈0.05或〈0.01）,Smad7表达明显上调（P〈0.05或〈0.01）。结论 EGCG可减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化程度,其作用机制可能与其调控TGF-β1/Smad信号通路有关。     

TGF-β1/Smad3在博来霉素肺纤维化大鼠中的作用

目的 通过Smad3特异性抑制剂(specific inhibitor of Smad3,SIS3)干预博来霉素肺纤维化大鼠,观察转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3蛋白表达情况,探讨TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中的作用.方法 选取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为4组:生理盐水对照组(NS组),博来霉素组(BLM组),SIS3干预组(SIS3组),二甲基亚砜溶媒组(DMSO组),每组15只.BLM组、SIS3组和DMSO组气管内注射博来霉素溶液(5 mg/kg)建立大鼠肺纤维化模型;NS组以同样方法注入等量生理盐水;SIS3组大鼠腹腔内注射SIS3(2.5 μg/g)干预处理,BLM组注射等量生理盐水,DMSO组注射等量DMSO.各组于造模后第7、14、28天分别处死5只大鼠,行Masson染色观察各组肺组织胶原纤维差异.免疫组化检测各组TGF-β1、Smad3表达情况.结果 与NS组比较,BLM组、DMSO组大鼠肺组织出现明显纤维化,TGF-β1、Smad3表达明显增高;与BLM组、DMSO组相比,SIS3组大鼠肺纤维化程度减轻,TGF-β1、Smad3表达减少.结论 SIS3干预肺纤维化大鼠,能够减轻大鼠肺泡炎,降低肺纤维化程度;TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中可能起到重要作用.     

抗纤合剂对肺纤维化大鼠TGF-β/Smad信号通路调控的研究

目的:观察益气养阴法中药组方——抗纤合剂对博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织中Smad3和Smad7蛋白质表达的影响,探讨抗纤合剂治疗肺纤维化的可能分子作用机制。方法:将健康雄性Wistar大鼠120只随机分为正常对照组、模型组、强的松组、抗纤合剂组。每组30只。除正常对照组,其他3组采用Szapiel SV经典博莱霉素致肺纤维化模型。模型建成后,强的松组以6.25 mg·kg~(-1)的强的松溶液灌胃,抗纤合剂组以5 g·kg~(-1)灌胃。正常对照组与模型组以等溶生理盐水灌胃,每组每只大鼠每日灌胃给药2次,观察大鼠一般行为状态,分别于7、14、28 d 3个时间点处死大鼠,取肺组织固定。每个时间点每组大鼠10只。分别观察3个时间点Smad3 mRNA、Smad7mRNA的蛋白表达的变化。结果:模型组在14 d时,Smad3的mRNA表达水平达到峰值,Smad7的mRNA表达水平达到低点。到28 d时,Smad3的mRNA表达水平有下降,Smad7的mRNA表达水平有上升。强的松组和抗纤合剂组大鼠肺组织中Smad3 mRNA表达水平随着时间的推移,逐渐下降,Smad7 mRNA表达水平逐渐升高。且从总体上与模型组相比,Smad3 mRNA表达水平显著降低,Smad7 mRNA表达水平显著升高,差异明显(P0.05)。结论:抗纤合剂可以对TGF-β/Smad信号通路中Smad3、Smad7 mRNA的表达进行有效调控,通过下调BLM致肺纤维化大鼠Smad3的表达,促进Smad7表达的升高,抑制大鼠肺纤维化的形成,对肺纤维化起到一定的治疗作用。     

栝蒌薤白汤对肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液中层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原含量的影响

观察栝蒌薤白汤对肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)含量的影响.用平阳霉素复制大鼠肺纤维化模型后,用药组每天灌胃栝蒌薤白汤,28 d后处死,观察各组大鼠肺病理组织学改变.结果:模型组大鼠肺泡炎及纤维化程度、BALF中LN及PC-Ⅲ含量均明显高于正常对照组及用药组(P<0.05).说明栝蒌薤白汤能明显减轻平阳霉素所致的大鼠肺泡炎及纤维化程度,抑制BALF中LN、PC-Ⅲ含量的增高.     

N-乙酰半胱氨酸对肺纤维化大鼠Smad3基因表达的影响

目的：探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对博莱霉素(BLM)诱导的大鼠肺纤维化模型Smad3表达的影响及意义。方法选取2013年5~12月提供的健康Wistar大鼠60只,随机分为四组,每组15只。A组：单纯BLM处理组,B组：BLM处理及氢化可的松琥珀酸钠干预组;C组：BLM处理及NAC干预组;D组：空白对照组。四组动物在给药处理后的第7、14天和28天随机处死5只;用免疫组化检测肺组织中Smad3蛋白表达水平。结果不同时期各组大鼠Smads 蛋白表达：A组Smad3蛋白表达最强,B组次之（P<0.05),C组较B组差异无统计学意义（P>0.05),D组最低（P<0.05)。结论 NAC通过参与调控博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织Smad3的表达,抑制大鼠肺纤维化程度。     

养阴清肺汤对大鼠肺纤维化的干预作用及对TGF-β1表达的影响

目的:观察养阴清肺汤对博莱霉素(bleomycin,BLM)致大鼠肺纤维化模型的干预作用和转化生长因子-β1(transforminggrowth factorβ1,TGF-β1)的影响,探讨养阴清肺汤参与肺纤维化的机制。方法:健康SD大鼠60只随机分3组:正常对照组(生理盐水),模型组(博莱霉素),治疗组(博莱霉素+养阴清肺汤)。分别在第71,42,1,28天,每组5大鼠,HE染色观察支气管肺组织病理改变,免疫组化观察肺组织中TGF-β1表达。结果:(1)治疗组大鼠肺泡炎和肺纤维化发生率明显降低,且程度轻,无严重肺纤维化发生。(2)治疗组肺间质中TGF-β1表达比模型组明显减少(P<0.05)。结论:养阴清肺汤能减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能是通过下调TGF-β1的表达而起作用。     

氯沙坦抗鼠肝纤维化的实验研究

目的 探讨CCL4诱导的肝纤维化模型鼠肝组织Smad2/3,Smad7,TIMP-1,TGF-β1的表达及氯沙坦干预后对其表达的影响.方法 Wistar大鼠40只,随机分成正常对照组、模型组、氯沙坦预防组和治疗组,采用CCL4皮下注射构建肝纤维化模型.行HE和VG染色,判断肝组织炎症和纤维化的程度.免疫组化方法检测各组Smad2,3 Smad7和TIMP-1,TGF-β1的表达.结果 氯沙坦预防组和治疗组的肝组织炎症和纤维化程度明显低于模型组;Smad2,3 TIMP-1 TGF-β1在氯沙坦预防组和治疗组的阳性表达均低于模型组(分别为Smad2,31.69±0.42,1.90±0.59,2.51±0.39; TIMP-11.09±0 28,1.32±0.23,2.60±0.35;TGF-β11.65±0.31,2.04±0.42,2.72±0.36),P＜0.05;Smad7在氯沙坦预防组和治疗组的阳性表达高于模型组(分别为2.50±0.35,2.21±0.59,0.47±0.26),P＜0.05.Smad2,3 Smad7 TIMP-1和TGF-β1在氯沙坦预防组和治疗组的表达差异无显著性,P＞0.05.结论 氯沙坦抗肝纤维化作用可能与抑制TGF-β1,TIMP-1,Smad2,3和促进Smad7的表达有关.     

氯沙坦对大鼠实验性肺纤维化的治疗作用及其机制

目的:研究血管紧张素Ⅱ的1型受体拮抗剂氯沙坦对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的治疗作用及其可能机制。方法:45只大鼠随机分为3组,每组15只。①氯沙坦组,经气管插管灌注博莱霉素诱导肺纤维化,随后每日用氯沙坦10 mg/kg灌胃进行干预;②模型组,气管内灌注用博莱霉素,灌胃用生理盐水;③对照组,气管内灌注和灌胃均用生理盐水。各组动物于气管内灌注后第7,14,28天分别处死5只。取肺组织用Masson胶原染色法及检测羟脯氨酸来评价治疗效果。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子β(TGF-β)蛋白表达水平。结果:模型组肺纤维化程度和肺组织羟脯氨酸含量在各时间点均高于对照组,氯沙坦组肺纤维化程度在各时间点均低于同期模型组,其肺组织羟脯氨酸含量在第14和28天均低于同期模型组,差异有统计学意义(P均<0.05);模型组肺组织TGF-β蛋白水平在各时间点均高于对照组,该组HGF蛋白水平在第7天高于对照组,而第14和28天低于对照组,氯沙坦组在第14和28天肺组织TGF-β蛋白水平均低于同期模型组,而HGF蛋白水平均高于同期模型组(P均<0.05)。结论:氯沙坦对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有治疗作用,可能与抑制肺组织TGF-β表达和促进HGF表达有关。     

中药软肝饮对CCl4诱导的肝纤维化大鼠TGF-1/Smad信号通路的影响

[目的]研究中药软肝饮对CCl4诱导的大鼠肝纤维化肝脏TGF-1及Smad3,Smad7表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。[方法]Wistar大鼠40只,随机分成正常对照组,模型对照组,软肝饮治疗组,鳖甲软肝片对照组,采用CCl4背部皮下注射构建肝纤维化模型,行HE和VG染色,光镜下观察肝组织肝纤维化程度。同时免疫组化SABC方法检测各组TGF-1、Smad3和Smad7的表达。[结果]与正常对照组相比,模型组TGF-1、Smad3表达明显增强,Smad7表达明显下降。经软肝饮治疗后大鼠肝脏TGF-1表达比模型组减弱。软肝饮同时下调Smad3的表达,上调Smad7的表达。另外,软肝饮组大鼠肝脏病理变化显著改善。[结论]肝炎平对大鼠肝纤维化肝脏TGF-1/Smad信号通路有明显的影响,能抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化,其作用机制可能为抑制TGF-1表达,下调Smad3及上调Smad7的表达。     

氧化苦参碱对新生鼠高氧性肺损伤的保护作用及机制探讨

目的观察高氧致慢性肺疾病（CLD）新生大鼠肺组织转化生长因子β1（TGF？β1）、Smad3、Smad7及结缔组织生长因子（CTGF）水平的动态变化,以探讨氧化苦参碱对高氧性肺损伤的保护作用及机制。方法新生Wistar大鼠128只随机分为空气对照组、氧化苦参碱治疗组、盐水对照组和高氧组,每组各32只,高氧组、盐水对照组和氧化苦参碱治疗组的新生Wistar大鼠（连同母鼠）生后即置于氧舱内,持续吸入高浓度氧（FiO2=0.90）21 d,造成高氧性肺损伤模型;空气对照组吸入空气。氧化苦参碱治疗组于生后当日始每日腹腔注射氧化苦参碱（100 mg/kg）,盐水对照组每日腹腔注射等量生理盐水。每组分别于实验开始后第3、7、14、21天随机选取8只麻醉后处死。肺组织采用免疫组化方法检测TGF？β1、Smad3、Smad7及CTGF蛋白的表达并同时观察肺组织形态学变化。结果与空气对照组比较,高氧组、盐水对照组肺组织TGF？β1、Smad3、CTGF蛋白表达在实验后第14天明显升高,第21天达高峰（P〈0.05或P〈0.01）,氧化苦参碱治疗组上述指标与高氧组、盐水对照组比较明显降低（P〈0.05或P〈0.01）,Smad7蛋白表达明显增多（P〈0.01）。高氧组、盐水对照组第14天肺组织间质细胞增多,出现纤维化改变。第21天正常肺泡结构消失,肺组织出现严重的纤维化。氧化苦参碱治疗组肺组织纤维化病变明显减轻。结论氧化苦参碱干预抑制了高氧致CLD新生大鼠肺组织TGF？β1、Smad3、CTGF蛋白表达,增加Smad7蛋白表达,减轻了肺纤维化病变,这可能是氧化苦参碱对高氧性肺损伤具有保护作用的机制之一。     

黄芪和当归各提取物优化配方对特发性肺纤维化小鼠生存状况及肺细胞新生相关基因表达水平的影响

【目的】观察黄芪当归各提取物优化配方对特发性肺纤维化(IPF)小鼠生存状况、转化生长因子(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响,确定最佳治疗方案,并探讨其内在机理。【方法】选用SPF级ICR雄性小鼠105只,随机分为正常组、模型组、5个中药治疗组(即黄芪当归组分优化方1~5组)。模型组和治疗组于气管内注射博莱霉素(剂量为5 mg/kg)复制小鼠肺纤维化模型,在第21天时剪取小鼠肺组织,采用碱水解法检测羟脯氨酸(HYP)的含量;苏木素—伊红(HE)染色及Mallory氏染色,观察肺组织形态变化;聚合酶链反应(PCR)技术检测肺细胞新生相关基因转化生长因子(TGF)-β、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。【结果】HE染色及Mallory氏染色结果显示,5个中药治疗组较模型组肺纤维化程度均有所改善,其中优化方1组改善明显,肺泡结构恢复较好。治疗组小鼠的21 d死亡率较模型组均有所降低,且优化方1组、5组作用显著,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,治疗组小鼠肺组织HYP含量各有不同程度的降低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。TGF-β、VEGF基因表达水平模型组均高于正常组,治疗各组(除优化方5组TGF-β表达外)较模型组有不同程度的降低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。【结论】黄芪水提物和当归醇提物所占比例较大时,可降低肺中HYP的含量,抑制TGF-β、VEGF表达水平,从而改善小鼠肺纤维化的程度。     

IL-10在博莱霉素诱导大鼠所致肺纤维化中的作用

目的 :通过研究外源性IL 10对博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型的作用 ,探讨IL 10对肺纤维化的作用机理。方法 :5 0只Wistar大鼠随机分为博来霉素组 (A组 )、正常对照组 (D组 )及根据给博来霉素后第 1,15日始按 5μg·kg-1× 3次·(7d) -1给予IL 10腹腔注射分为治疗组 (B组和C组 )。于第 7,14 ,2 8d分批处死动物 ,提取肺组织 ,HE染色行肺纤维化程度分级 ,图象分析仪定量比较肺间隔宽度及免疫组化测定肺组织TNF α、TGF β1、FN蛋白表达。结果 :①B组肺纤维化程度较A组明显减轻 ,TNF α、TGF β1、FN蛋白表达明显下调 (P <0 .0 1) ;②C组肺纤维化程度与A组相似 ,TNF α、TGF β1、FN蛋白表达与A组比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :IL 10在肺间质纤维化的发生发展中特别是肺泡炎阶段中起重要的抑制作用。