光质对灵芝菌丝体生长及三萜酸量影响的研究

目的 研究光质对灵芝菌丝体生长及三萜酸量和组分的影响。方法 采用新型LED冷光源设置不同光质处理,动态观测灵芝菌丝体生长、总三萜酸量及三萜酸组分的变化情况。结果 不同光质处理灵芝菌丝体形态、生长速度、生物量和总三萜酸量及单体三萜酸在组分、相对量及各组分间的比例都有所变化。蓝光处理菌丝体在整个培养期始终保持稳定增长;红光处理菌丝体前期生长速度及生物量最大,但是中后期生长速度显著下降,生物量增加缓慢,次于蓝光;绿光处理菌丝体前中期生长速度及生物量均最小,然而培养后期增加明显,干物质迅速积累。灵芝三萜酸在菌丝体培养第7天时已大量产生,随培养时间延长种类增多,组分量降低。绿光和蓝光处理对提高灵芝菌丝体三萜酸种类和量均有明显优势。结论 光质对灵芝菌丝体生长及三萜酸量和成分均有显著影响,蓝光对促进灵菌丝体生长及三萜酸积累综合优势明显。     

蜜环菌菌丝体液体培养条件的优化

目的:对蜜环菌的液体培养条件进行优化,确定蜜环菌菌丝体的适宜培养条件。方法:通过测定菌丝体生物量的方法,利用液体摇瓶培养方式,筛选适宜的碳源、氮源、无机盐和生长因子,用统计学方法确定液体发酵培养基中碳源、氮源、无机盐和生长因子的最适浓度,最终确定蜜环菌的液体培养基配方。结果:碳源的最适种类为糊精,氮源最适种类为豆饼粉提取液,玉米浆、硫胺素都有促生长作用,乙醇作为小分子碳源对蜜环菌菌体生长有显著促进作用,培养基中添加硫酸铵和硝酸钠对菌体生长有抑制作用,添加磷酸二氢钾促进菌体生长。结论:通过对液体发酵培养条件优化,蜜环菌液体培养的培养基配方如下:25%的豆饼粉提取液,2%的玉米浆,2.5%的糊精,0.06%的硫胺素,1.0%的乙醇,0.3%的磷酸二氢钾,pH值6.0。以此培养基培养蜜环菌,最终菌丝体收率可达到1.9 g/100m l。     

纵条纹炭角菌菌丝体液体培养条件的优化

目的:建立纵条纹炭角菌菌丝体液体培养的最佳条件。方法:以菌丝体生物量为指标,采用单因素试验及正交优化试验,统计学方法确定纵条纹炭角菌液体培养的最佳条件。结果:单因素实验表明,碳源以麦芽糖、葡萄糖或玉米粉最佳,最佳氮源为黄豆饼粉,最佳碳氮比为5∶1,其他最佳培养参数为pH 6、接种2块菌饼、振荡培养7 d。K、Mg、P及VB1对菌丝体生长有明显的促进作用。正交试验表明,在麦芽糖4%、黄豆饼粉0.8%、pH 7、25℃及振荡培养13 d的条件下,菌丝体生物量最大。结论:液体培养优化条件下可大量获得纵条纹炭角菌菌丝体,菌丝体干重可达8.65 g/L以上。     

茯苓发酵菌丝体中3种主要三萜酸类成分积累动态研究

目的:考察茯苓发酵菌丝体中3种主要三萜酸类成分动态积累变化.方法:建立茯苓菌的液体培养方法,采用RP-HPLC测定茯苓发酵菌丝体中去氢土莫酸(DTA),3-表去氢土莫酸(eDTA)和猪苓酸C(PAC)3种主要三萜酸类成分的含量,色谱条件如下:PLATISIL ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.5％磷酸水(80:20);流速1.0 mL·min-1;检测波长242 nm.结果:在培养后的第8天,生物量达到最大值,但是3种主要三萜酸类成分(DTA,eDTA,PAC)的含量在培养周期内呈持续上升趋势,第17天测得3种成分质量分数分别为1.2％ (DTA),0.4％ (eDTA),1.0％ (PAC),均显著高于栽培茯苓中对应成分[0.2％(DTA),0.12％ (eDTA),0.16％ (PAC)].另外,3种成分含量比例的线性回归分析结果表明,DTA与eDTA和PAC的含量比例呈显著负相关,相关系数(R2)分别为0.858 7,0.971 7.该结果表明DTA为茯苓中三萜酸类成分生合成途径中的重要中间体.结论:发酵培养17 d的茯苓菌丝体中DTA,eDTA,PAC含量之和为栽培茯苓中含量的5.55倍,说明在本发酵培养条件下,发酵培养生产茯苓中三萜酸类有效成分技术可行.     

灵芝的液体培养

灵芝是一种名贵中药,属担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科、灵芝菌属.近年研究表明灵芝含有能提高人体免疫能力、具有抗肿瘤活性的灵芝多糖,所以灵芝具有抗癌、延缓衰老、镇静止痛和护肝等功效[1],且毒性极低[2].灵芝的子实体和菌丝体在药用价值方面相同,目前我国主要从灵芝子实体中提取灵芝多糖,人工栽培子实体生产周期长,生产力低下,而采用液体发酵法,工业化生产灵芝菌丝体和灵芝多糖可缩短生产周期,大大提高灵芝多糖的生产能力.因此,要发展灵芝生产,提高灵芝液体培养的生物学产量有重要意义.为了提高灵芝菌丝体液体发酵的生产能力,为工业化生产灵芝菌丝体及多糖提供经济实用的培养基,我们对灵芝菌丝体液体生长的营养条件进行了研究.     

灵芝子实体与菌丝体及破壁菌丝主要活性成份的比较

目的:对人工栽培的灵芝子实体、茵丝体及破壁处理菌丝体的主要化学成分进行测定分析,为灵芝药材品质及检测产品质量提供依据.方法:用硫酸蒽酮法测定灵芝多糖含量;采用齐墩果酸作对照,香草醛一冰醋酸显色,分光光度计测吸光值测定三萜化合物.结果:无论多糖还是三萜化合物,菌丝体含量均高于子实体,破壁处理高于未处理.     

海南产不同种类灵芝活性分析及其总三萜含量分析

目的比较海南产不同种灵芝子实体中总三萜(TGT)含量,分析比较灵芝子实体乙醇粗提物的生物活性。方法以齐墩果酸为对照品,用香草醛-高氯酸显色,测定海南产17种灵芝子实体总三萜含量,并采用PNPG法、DPPH法和MTT法测定海南产17种灵芝乙醇粗提物的α-糖苷酶抑制活性、抗氧化活性和抗肿瘤活性。结果海南产17种灵芝子实体总三萜含量在0.274%～0.975%,其中黄边灵芝含量最高,橡胶灵芝含量最低。对浓度为25 mg/ml的海南产17种灵芝乙醇粗取物活性进行测定,结果显示,喜热灵芝、南方灵芝、茶病灵芝和紫光灵芝乙醇粗提物对α-糖苷酶的抑制率均达到了65.0%以上,阿卡波糖(5 mg/ml)对α-糖苷酶的抑制率为32.3%;浓度为25 mg/ml的喜热灵芝、布朗灵芝、大青山灵芝、紫光灵芝及热带灵芝乙醇粗提物对DPPH清除率均大于75.0%,坏血酸(5 mg/ml)清除率为84.6%;赭漆灵芝、橡胶灵芝、吊罗山灵芝和栽培赤芝等一半以上灵芝乙醇粗提物有一定的抗肿瘤活性。结论海南产不同灵芝TGT含量差异较大,其生物活性差别也较大,灵芝乙醇粗提物的α-糖苷酶抑制活性、抗氧化活性及抗肿瘤活性与其TGT含量无显著相关。     

植物激素及木质素对牛樟芝菌丝体生长情况的影响

目的探究植物激素及木质素对牛樟芝菌丝体生长情况的影响,并对其培养产物进行粗多糖、粗三萜含量及抗氧化活性测定研究。方法采用皿式培养法培育牛樟芝,超声提取培养产物,选用苯酚-硫酸法测定粗多糖含量、香草醛-冰醋酸法测定粗三萜含量,并以DPPH自由基、ABTS自由基的半数清除浓度(IC_(50))作为培养产物抗氧化活性的评价指标。结果菌种活化方法为培养20 d后靠近菌丝层边缘取样,可获得生长活力好的接种原料;改良PCA培养基上牛樟芝菌丝长势较好、粗三萜及粗多糖含量高;以改良PCA培养基为基础,向其中添加0.5g/L木质素时菌丝生长最快,菌丝层直径为对照组的1.19倍;当IBA添加质量浓度为0.5 mg/L时,菌丝体干质量较对照组增加了89.51%,粗多糖产量较对照组提升了130.57%,远高于其他组别,与此同时,菌丝体粗三萜含量及产量也显著提升,其含量较对照组提高了61.31%,粗三萜产量达到133.24mg/L;添加牛樟树粉末0.5 g/L时,菌丝体粗三萜含量最高,为5.62%,较对照组提升了84.26%;此外,向培养基中加入植物激素及木质素对牛樟芝菌丝体的抗氧化能力提升有一定作用,整体来说加入不同物质后实验组抗氧化活性良好。结论通过向改良PCA培养基中添加植物激素及木质素,可有效促进牛樟芝菌丝体生长、提高活性成分含量并提升其抗氧化活性。     

灵芝深层发酵菌丝体多糖含量测定

本文以8个灵芝菌株为研究对象,比较不同菌株菌丝体液体发酵产物、子实体多糖等指标。结果表明:8个菌株深层发酵产物,由于生物学特性不同而有差别,各菌株菌丝体生物量与次生代谢产物多糖之间,相关性较小;甜芝菌丝体生物量最大但自溶速度最快,灵芝5760最慢,血芝次生代谢产物多糖最高;各菌株菌丝体多糖含量均高于子实体;以超声波破壁处理后,再以热水浸提法提取,多糖得率可明显地提高。     

LED光源的不同光质对灵芝菌丝体生长及抗氧化酶活性的影响

目的:研究不同光质对灵芝菌丝体生长及抗氧化酶活性的影响,为灵芝菌丝体培养提供科学的理论依据.方法:采用新型半导体发光二极管(LED)光源设置不同光质处理,动态观测灵芝菌丝体生长、多糖含量及抗氧化酶活性变化.结果:蓝光处理及黑暗对照条件下灵芝菌丝体生长较快,黑暗对照条件下菌丝体形态纤细、菌落淡薄,蓝光、白光处理菌丝体粗壮、菌落浓密.白光处理菌丝体生物量积累最高,蓝光次之.绿光处理灵芝菌丝体POD酶活性波动变化较大,生长中后期显著高于其他处理.白光处理菌丝体CAT酶在生长过程中始终保持较高活性.生长前期黄光处理菌丝体SOD酶活性最高,后期黑暗对照SOD酶活性较高.前期绿光处理菌丝体多糖含量较高,生长后期蓝光处理菌丝体多糖含量显著高于其他处理.结论:光质影响灵芝菌丝体生长代谢,蓝光利于灵芝菌丝体生长代谢.     

中药治疗帕金森病方法及其药理作用研究

目的：探讨使用中药治疗帕金森病的方法及其药理作用。方法：回顾性分析近10年来采用中药治疗帕金森病的病例,对使用频率较高的中药材药理作用进行归纳分析。结果：在过去的10年中,医院在治疗帕金森病方面使用较多的中药分别为银杏叶、党参、枸杞、丹参、川芎、白术、熟地黄、石菖蒲等。结论：用来治疗帕金森病的几味中药均有活血止痛、提高记忆力的效果,毒副作用小,患者适应性好,中药治疗是目前治疗帕金森病的重要方法之一。     

指纹图谱的化学模式识别分析——若干实质性问题的探讨(三)

中药色谱指纹图谱实际上是中药材中各种不同化学成分浓度分布的一个整体表征。如何采用化学计量学多变量解析手段来简便且不失整体特征地表征中药色谱指纹图谱是目前分析化学面临的一个新问题。本文采用化学模式识别的方法对银杏叶提取物及制剂进行的定量鉴定分析,对此问题进行了初步探索。     

Effect of an herbal formula containing Ganoderma lucidum on reduction of herpes zoster pain: a pilot clinical trial

Administration of hot water extracts of a herbal formula containing Ganoderma lucidum, WTMCGEPP (Wisteria floribunda 0.38, Trapa natans 0.38, Miristica agrans 0.38, Coix lachryma-jobi 0.75, cultivated Ganoderma lucidum 0.75, Elfuinga applanata 0.38, tissue cultured Panax ginseng 0.3, and Punica granatum 0.38: numerals designate dry weight gram/dose), decreased herpes zoster pain for five Japanese patients suffering from shingles. Pain relief started within a few days of intake and was almost complete within 10 days. Two acute herpes zoster with manifestations including trigeminal nerve ophthalmia (both 74 years old), lower body zoster (70 years old), herpes zoster oticus (17 years old), and leg herpes (28 years old), responded quickly to treatment and no patient developed post-herpetic neuralgia (PHN) after more than one year of follow-up.     

Traditional herbal remedies that influence cell adhesion molecule activity

Many traditional medicines have demonstrated immune activity, however, research has largely neglected their effects on cell adhesion molecules (CAMs). This review reports on extracts from 37 medicinal plant species, similar to or replicating traditional preparations, that up- or downregulate either gene or protein activity of CAMs. The majority of the investigations were in vitro, primarily of the immunoglobulin superfamily of CAMs, specifically intercellular cell adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) and secondarily on the integrin (CD11b or MAC-1) and selectin (E-selectin and P-selectin) families of CAMs. The following plant species have demonstrated modulation of multiple CAMs: Artemisia asiatica, Boswellia serrata, Canscora decussata, Cinnamomum povectum, Dehaasia incrassate, Ganoderma lucidum, Ginkgo biloba, Hypericum perforatum, Juglans regia, Lycopus lucidus, Panax notoginseng, Rheum undulatum, Salvia miltiorrhiza. Many other species have documented activity on one CAM. Currently there are limited in vivo/ex vivo investigations, including a clinical trial on Mahonia aquifolium. Although further evidence is needed, the data suggest that the reviewed botanical medicines may have the potential to provide therapeutic potential in disease processes involving CAMs. Additionally, the reported success of many of these plant extracts by traditional cultures and modern phytotherapists may involve the modulation of CAMs.     

指纹图谱的化学模式识别分析--若干实质性问题的探讨(三)

中药色谱指纹图谱实际上是中药材中各种不同化学成分浓度分布的一个整体表征。如何采用化学计量学多变量解析手段来简便且不失整体特征地表征中药色谱指纹图谱是目前分析化学面临的一个新问题。本文采用化学模式识别的方法对银杏叶提取物及制剂进行的定量鉴定分析，对此问题进行了初步探索。     

基于中医传承辅助系统分析张士舜治疗食管癌的用药规律

目的 采用"中医传承辅助平台(V2.0)"软件,分析张士舜名老中医治疗食管癌的用药规律.方法 收集张士舜名老中医治疗食管癌的病案,录入"中医传承辅助平台",采用频数分析、关联规则分析、改进互信息法等方法进行数据挖掘,确定处方中核心药物组合及药物间的关联规则等.结果 共收集166个处方,包含316味药物,其中使用频次较高的药物包括灵芝、通关藤、瓜蒌、冬凌草、姬松茸等;频次较高的药物组合包括"灵芝、核桃枝"山豆根、通关藤"冬凌草、通关藤"等.获得不同药物组合模式的关联规则11条.结论 张士舜主张辨病理、辨病位、辨证论治相结合治疗食管癌.强调标本兼顾,善用灵芝、核桃枝、姬松茸扶正,山豆根、通关藤、冬凌草祛邪,鸡内金、焦三仙顾护胃气,瓜蒌、薤白、银杏叶扩张食管,瓜蒌、黄芩引药入食管.     

赤芝菌体中三萜抑菌作用研究

目的检测赤芝发酵菌体中三萜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌以及黑曲霉和青霉的体外抑菌活性。方法管碟法。结果赤芝菌体三萜化合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的生长均具有显著抑制作用;对枯草芽孢杆菌、青霉和黑曲霉抑制作用较弱;该三萜样品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉和青霉的最小抑菌浓度分别为25,25,50,100和50 mg/ml。结论赤芝发酵菌体中三萜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和青霉有明显的抑制作用。     

Anti-hepatitis activities in the broth of Ganoderma lucidum supplemented with a Chinese herbal medicine

The anti-hepatitis B virus activity and hepatoprotective activity of a liquid fermentation broth of Ganoderma lucidum were investigated. The cultured broth was supplemented with aqueous extract of Radix Sophorae flavescentis, a kind of Chinese herbal medicine. Our results indicated that the cultured broth had effects of anti-hepatitis B virus activity in vitro and protected mice from liver damage in vivo. Our results also indicated that the co-fermentation broth of Ganoderma lucidum in the presence of aqueous extract of Radix Sophorae flavescentis has better medicinal effects than simply mixing these two ingredients together, suggesting a potential novel way to prepare Chinese herbal mixtures.     

灵芝液体发酵产漆酶最佳培养基和培养条件研究

目的研究灵芝液体发酵产漆酶的最佳培养基和培养条件。方法以灵芝S3号菌株为试验材料,以灵芝漆酶活性为衡量指标,通过正交试验分别对灵芝液体发酵培养基及培养条件进行优化筛选。结果筛出最佳培养基组成为葡萄糖30g/L、棉花0.2%、磷酸氢二铵0.66g/L、干酪素0.5%、聚山梨酯-800.15%;优化培养条件为初始pH5.5、装液量75mL、接种量12.5%、菌龄5×24h、培养时间9×24h。结论优化培养基及培养条件后,发酵液中灵芝漆酶活性显著提高。     

欧盟最新银杏叶专论详细解读及对银杏叶产品在欧盟注册的影响分析

2014年1月, 欧洲药品监督管理局(EMEA)发布了最新的欧盟银杏叶专论的征求意见稿。自此, 讨论了近2年的银杏叶专论在欧盟终于尘埃落定。概述了银杏叶专论的基本内容, 介绍了植物药在欧盟进行传统注册的2种途径和各自的注册要求, 详细解读了新银杏叶专论。分析新专论对银杏叶产品在欧盟注册的影响, 该专论的出台将为银杏叶产品在欧盟的传统植物药注册提供重要的参考和依据。