大鼠小肠缺血／再灌注休克中一氧化氮,内皮素检测及意义

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）对大鼠小肠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）的作用及内皮素的改变。方法：复制内脏血管阻塞（ＳＡＯ）性休克模型,用左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）及硝基精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理动物模型后分别测定血浆中ＥＴｓ、ＭＤＡ、组织蛋白酶Ｄ（ＣＤ）、ＮＯ－２／ＮＯ－３含量。结果：Ｌ－Ａｒｇ减缓了大鼠Ｉ／Ｒ血压下降（Ｐ＜０．０１）,降低了血浆ＭＰＯ、ＬＤＨ、ＣＤ、ＭＤＡ的含量（Ｐ＜０．０１）及肠组织中伊文思蓝（ＥＢ）的含量（Ｐ＜０．０５）;Ｌ－ＮＡＭＥ与Ｌ－Ａｒｇ相反。ＭＰＯ与ＥＢ正相关（Ｐ＜０．０１）,ＮＯ－２／ＮＯ－３与ＥＴｓ负相关（Ｐ＜０．０５）。结论：ＮＯ对小肠Ｉ／Ｒ损伤有保护作用,ＥＴｓ参与ＳＡＯ休克过程。     

血清肌酸激酶同功酶BB和神经元特异性烯醇酶用于小细胞肺癌的临床价值

用层析荧光法和ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测了２０例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ），３０例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ），２５例良性肺疾病和３０例正常对照者血清中肌酸激酶同功酶ＢＢ（ＣＫ－ＢＢ）和神经元特异性烯醇酶（ＮＳＥ）。结果表明：ＳＣＬＣ组血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ含量高于其它３组（Ｐ＜０．００１）；４组血清的ＣＫ－ＢＢ均值分别为３０．２、８．４、６．３和４．３ＩＵ／Ｌ，ＮＳＥ分别为５２．２、１２．７、１０．３、和９．２ｎｇ／ｍｌ．以９．５ＩＵ／Ｌ（ＣＫ－ＢＢ）和２０．８ｎｇ／ｍｌ（ＮＳＥ）为正常值上限，ＳＣＬＣ组的阳性率分别是７０％（ＣＫ－ＢＢ）和８０％（ＮＳＥ），高于ＮＳＣＬＣ组（Ｐ＜０．００５）。ＳＣＬＣ血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ显著相关（ｒ＝０．７９３４，Ｐ＜０．００１），联合检测可使敏感性提高到９０％，特异性提高到９４％。因此，作者认为血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ可以作为ＳＣＬＣ的诊断指标，联合检测可提高临床应用价值。     

病毒性心肌炎小鼠LPO与NK细胞活性观察

目的：探讨自然杀伤（ＮＫ）细胞活性及过氧化脂质（ＬＰＯ）在病毒性心肌炎发病中的作用及其相关性。方法：采用＾１２５ＩｄｕＲ释放法及ＭＤＡ－ＴＢＡ比色法,分别测定２３只柯萨奇９Ｃｏｘｓａｃｋｉｅ）Ｂ３病毒接种ＢＡＬＢ／ｃ小鼠（模型组）和１０只健康小鼠（对照组）脾脏的ＮＫ细胞活性及以及组织中的ＬＰＯ含量。结果：模型组小鼠的ＮＫ细胞活性明显低于对照组（Ｐ〈０．００１）,而ＬＰＯ明显谪于对照（Ｐ〈０．００５     

用镉还原NO3^—法测定小鼠血清及肝组织一氧化氮的含量

采用镉还原法测定了小鼠血清及肝组织内一氧化氮（ＮＯ）的含量，并观察了ｉｐ细菌内毒素（ＬＰＳ）后小鼠血清ＮＯ含量变化。通过检测ＮＯ在体内稳定的代谢产物ＮＯ２－／ＮＯ３－来表示ＮＯ的含量。用本法测定的正常昆明、ＩＣＲ、ＢＡＬＢ／ｃ小鼠血清及肝组织内ＮＯ２－／ＮＯ３－含量分别为３８．７±７．９，４８．８±４．４，４４．２±５．９μｍｏｌ／Ｌ及６４．４±２．２，７９．５±１２．１，７３．３±２９．３ｎｍｏｌ／ｇ；应用本法测定的正常ＩＣＲ小鼠血清及肝组织内ＮＯ２－／ＮＯ３－含量与应用硝酸根还原酶试剂合法测得值基本吻合；ｉｐ１，２，３ｍｇ／ｋｇ细菌内毒素后，ＩＣＲ小鼠血清的ＮＯ２－／ＮＯ３－含量分别上升至１６２．５±４７．８，４９４±１２３．６，６７４．８±２５９．７μｍｏｌ／Ｌ。表明本法测定这些生物样品中ＮＯ的含量是简便、可靠、有效的     

一氧化氮在大鼠梗阻性黄疸肝损伤中的作用

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）在大鼠梗阻性黄疸肝损伤中的作用。方法：采用双重结扎、切断大鼠胆总管造成梗阻性黄疸模型。分别给不同组大鼠腹腔注Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）或Ｌ－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ），７ｄ后观察肝组织匀浆ＮＯ２＾－，丙二醛（ＭＤＡ），肝功能及肝组织形态改变。结果：胆道梗阻一周后，肝组织ＮＯ２＾－和ＭＤＡ含量均升高；注射Ｌ－Ａｒｇ［３００ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）］组大鼠肝细胞ＮＯ２＾－含量较单纯胆     

NO在兰索拉唑对大鼠胃粘膜保护中作用的研究

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）在兰索拉唑对大鼠胃粘膜保护中的作用。方法：在乙醇诱导大鼠胃粘膜损伤前,预先给予兰索拉唑（２０ｍｇ／ｋｇ）灌胃,Ｌ－硝基－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ,４ｍｇ／ｋｇ）、Ｌ－精氨酸（２５０ｍｇ／ｋｇ）,Ｄ－精氨酸（２５０ｍｇ／ｋｇ）静脉注射,测定胃粘膜血流量（ＧＭＢＦ）、胃液ｐＨ、胃粘膜和血浆的ＮＯ２＾－／ＮＯ３＾－,并观察了胃粘膜损伤指数（ｕｌｃｅｒ ｉｎｄｅｘ,ＵＩ）、溃疡坏     

诱导型一氧化氮合酶在实验性病毒性心肌炎心肌内的表达及其与心肌损害的关系

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）在急性病毒性心肌炎心肌内的表达及其与心肌损害的关系。方法 ６～８周龄ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠２４只,随机分两组：感染组１６只以柯萨奇病毒Ｂ３ｍ（ＣＶＢ３ｍ）腹腔内注射,另８只为正常对照组。采用免疫组化法检测两组小鼠心肌组织内ｉＮＯＳ表达,并将其半定量与心肌病理变化程度进行相关分析,用比色法测定了血清中ＮＯ间接含量。结果 ①感染组小鼠心肌标本病理组织学检查均有不同     

病毒性心肌炎中一氧化氮促脂质过氧化作用的实验研究

为了探索病毒性心肌炎中一氧化氮（ＮＯ）和脂质过氧化作用的关系,应用柯萨奇病毒Ｂ３诱导的小鼠病毒性心肌炎模型进行研究（将滴度为５×１０３ＰＦＵ的ＣＶＢ３病毒接种到小鼠腹腔内）,然后随机将其分为两组：第１组每ｄ用５％Ｌ 精氨酸１ｍｌ灌胃２次,第２组正常饮水。结果表明：第１组ＮＯ水平显著高于第２组（５３１７±８８０,３０８０±８６０,Ｐ＜００１）;第１组ＭＤＡ较第２组明显升高（１２３０±１８０,９９０±１６０,Ｐ＜００１）;而超氧化物歧化酶活性第１组较第２组显著降低（６４３０±１２８０,７９８０±１４２０,Ｐ＜００１）;组织病理学检查发现,第１组心肌病变程度明显重于第２组。提示：ＮＯ在病毒性心肌炎中具有促进脂质过氧化作用,从而加重对心肌的损害。     

烧伤大鼠肺组织一氧化氮水平的改变

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）在烧伤后肺损伤中的作用。方法：选用ＳＤ大鼠，麻醉后制成２０％Ⅲ度烧伤。分成对照组、烧伤组和烧伤＋单甲基精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）组。伤后定期取肺组织测定ＮＯ２＾－／ＮＯ３＾－和ｃＧＭＰ，并分析ＮＯ与肺含水量之间的关系。结果：烧伤后肺组织ＮＯ和ｃＧＭＰ水平均明显升高，肺含水量也相应增加。给予一氧化氮合成酶特异性抑制剂Ｌ－ＮＭＭＡ后，随着肺内ＮＯ的减少，肺含水量也显著降低。结论：     

NO在外源性自由基损伤内皮细胞中的作用

目的：探讨ＮＯ在外源性自由基损伤内皮细胞（ＥＣ）中的作用。方法：培养的家兔主动脉ＥＣ随机分为四组：１．对照组（Ｃ,ｎ＝６）：２ｍｌＰＢＳ;２．自由基损伤组（Ｘ／ＸＯ,ｎ＝６）：２ｍｌＰＢＳ中加入终浓度为１μｍｏｌ／ｍｌＸ,０．１ＩＵ／ｍｌ的ＸＯ;３．Ｌ－Ａｒｇ组：含终浓度为１０＾－３Ｍ的Ｌ－Ａｒｇ,余同２;４．ＳＮＰ组：含终浓度为１０＾－５Ｍ的ＳＮＰ,余同２。在观察Ｌ－ＮＡＭＥ对自由基损伤的作用时     

肉桂油治疗小鼠CVB3m病毒性心肌炎的实验研究

目的:研究肉桂油(OC)对柯萨奇病毒B3m(CVB3m)诱发性小鼠病毒性心肌炎(VMC)的治疗作用.方法:0.1 mL CVB3m ip建立BALB/c小鼠VMC模型.正常对照组同法接种0.1 mL不含病毒的Eagle液,与感染病毒小鼠隔离饲养.于接种病毒72 h后给药,OC治疗组(49.1,36.7,26.5 mg/kg肉桂油,ig)、阳性药物组(50 mg/kg黄芪注射液,ip)、模型组与正常对照组(2500 mg/kg生理盐水,ig),连续给药1 wk.观察指标:累计死亡率与中位生存时间;接种病毒后10 d心肌组织光、电镜组织病理学检查;心肌匀浆MDA含量、SOD活性;血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量;21 d心肌组织光镜病理检查.结果:OC 49.1和36.7 mg/kg治疗组可降低小鼠死亡率,延长中位生存时间,降低急性期血清中CK,CK-MB含量以及心肌中MDA含量,提高SOD活性;减轻急性期、亚急性期小鼠心肌组织的坏死与钙化,与模型组比较差异显著(P<0.05).结论:OC具有治疗柯萨奇病毒B3m诱发性小鼠VMC的作用.     

mMCP-1对病毒性心肌炎小鼠心肌病变的干预作用

目的研究N端2—8位氨基酸缺失的突变型MCP-1（mutated MCP-1，mMCP-1）对病毒性心肌炎小鼠心肌病变的干预作用。方法CVB3腹腔注射BALB／c小鼠，随机分组：病毒性心肌炎组（A组）、mMCP-1干预组（B组）、空质粒pVAX1对照组（C组）和未感染生理盐水对照组（D组）。比较各组小鼠心脏重量和体重的比值（HW／BW）、心肌组织病理学积分（PS）、心肌组织病毒载量、血清CK—MB水平和心肌浸润的单个核细胞变化。结果与A组相比，B组血清CK—MB水平降低（P〈0．01）、PS减少（P〈0．05），HW／BW和CVB3载量未呈明显改变（P〉0．05）；B组小鼠心肌浸润的单个核细胞减少（P〈0．01），平均下降41、7％；与D组相比，B组CK—MB、PS、HW／BW和CVB3载量均明显升高。而与A组相比，C组CVB3载量、血清CK—MB水平、HW／BW和心肌组织病理学积分均未呈明显改变。结论mMCP-1可缓解病毒性心肌炎中心肌组织病变和心肌损伤，这与单个核细胞浸润减少有关。     

基于MCP-1的不同干预方式对病毒性心肌炎的影响作用

目的:比较N端2-8氨基酸缺失的突变型MCP-1(mMCP-1)干预和抗-MCP-1抗体干预对病毒性心肌炎小鼠发病的影响作用。方法:CVB3腹腔注射BALB/c小鼠,随机分组处理:病毒性心肌炎模型组、抗体干预组、羊IgG对照组、mMCP-1干预组和空质粒对照组,并设未感染生理盐水对照组。采用心肌注射的方式在心肌转移抗体或mMCP-1真核表达质粒pVMm。观察小鼠心脏重量和体重的比值(HW/BW)、血清CK-MB水平、心肌组织病理学积分(PS)、心肌组织病毒载量和心肌浸润的单个核细胞变化。结果:经20μg、40μg和60μg pVMm干预的小鼠,心肌组织病变和心肌损伤较模型组减轻;不同pVMm干预剂量对心肌组织浸润的单个核细胞数的影响作用不同,40μg或60μg pVMm干预的小鼠,心肌组织中浸润的单个核细胞数明显低于模型组,20μg pVMm干预的小鼠,心肌组织中浸润的单个核细胞数与模型组相比没有明显的差异。抗-MCP-1抗体干预和mMCP-1干预小鼠相比,HW/BW、血清CK-MB水平和PS未见明显差异。结论:mMCP-1和抗-MCP-1抗体均可缓解病毒性心肌炎心肌组织病变和心肌损伤,mMCP-1可替代抗-MCP-1抗体用于病毒性心肌炎的干预治疗。     

大蒜多糖对小鼠病毒性心肌炎的治疗作用

目的 :探讨大蒜多糖对实验性小鼠病毒性心肌炎的治疗作用。方法 :采用BALB C小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)建立实验性小鼠病毒性心肌炎模型。小鼠随机分为正常对照组、模型组、大蒜多糖组、黄芪组。注射病毒 1h后给药 ,连续 7d ,于第 8d处死存活鼠取材。观察小鼠存活率及心肌病理变化 ,测定血清心肌酶、丙二醛(MDA)、一氧化氮 (NO)含量和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)活力、心肌组织中病毒滴度及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果 :大蒜多糖治疗组与模型组相比小鼠存活率明显增高 ,心肌组织病理损伤减轻 ,血清心肌酶、MDA、NO含量显著降低 ,GSH Px活力升高 ,心肌组织中病毒滴度及iNOS表达降低。结论 :大蒜多糖对实验性小鼠病毒性心肌炎具有治疗作用     

CD4+T淋巴细胞在小鼠病毒性心肌炎发生发展中的作用

目的探讨CD4⁺ T淋巴细胞（CD4⁺ T细胞）在小鼠柯萨奇病毒B₃(coxsackievirus, CVB₃)所致病毒性心肌炎发生发展中的作用。方法随机将70只BALB/c健康雄性小鼠分为正常对照组(n=15)和病毒感染组(n=55)，正常对照组小鼠腹腔接种不含病毒的eagle氏液0.15mL，病毒感染组小鼠腹腔接种0.15mL TCID50 为109/mL的CVB₃ Nancy株病毒液。分别于接种病毒后第7、10、14、21、28d随机取正常对照组小鼠3只、病毒感染组小鼠8只断髓处死，无菌条件下取心脏，光镜下观察心肌组织的病理变化并计算心肌病理组织学积分，应用免疫组化方法检测CD4⁺ T细胞在心肌中的表达，并与心肌病理组织学积分作相关性分析。结果病毒感染组小鼠心肌可见CD4⁺ T细胞的表达，且与心肌病理组织学积分成显著正相关（r=0.98，P＜0.01），不同时期CD4⁺ T细胞表达强弱不同，以第10～14d最强（P＜0.01)。结论CD4⁺ T细胞在小鼠病毒性心肌炎发病过程中，清除病毒的同时还引起了自身心肌损伤。     

L-精氨酸致大鼠皮脂腺增生的机制

目的研究L-arg对大鼠皮脂腺增生作用机制的研究。方法雌、雄性SD成年大鼠各20只，5周龄小雌、雄性SD鼠各20只，按照不同性别和鼠龄随机分组，每组10只，共8组。不同性别、年龄的4组大鼠每天以10mg／kg L-arg灌胃14d，另外4组给予生理盐水。待大鼠皮肤出现被毛潮湿、油腻、黄染等病理现象时．取血进行性激素检测．取皮肤组织进行组织学观察。结果L-arg灌胃7d左右，雄性成年大鼠组全部动物背部皮肤被毛潮湿、油腻、黄染，其血清中雄激素水平明显升高，组织学观察可见皮肤组织中皮脂腺异常丰富。雌性成年大鼠组用药时间至14d，8例动物有背部皮肤被毛潮湿、油腻、黄染发生，组织学改变同样是皮脂腺异常增生。有皮脂腺增生改变的动物血清中雄激素水平明显高于对照组，也高于未发生皮脂腺增生的动物。5周龄小鼠组雌雄动物需用药时间至14d全部动物才出现背部皮肤被毛潮湿、油腻、黄染，组织学改变也为皮脂腺异常增生，血清中雄激素水平明显高于对照组。结论L-arg可致大鼠正常皮肤皮脂腺异常增生，分泌增多，造成皮肤被毛潮湿、油腻、黄染发生，与L-arg及其体内产生的NO可使大鼠的雄激素分泌增多密切相关。     

哈巴苷对病毒性心肌炎模型小鼠的影响

目的:本研究旨在探讨哈巴苷对病毒性心肌炎模型小鼠的作用。方法:将小鼠随机分为6组:对照组、柯萨奇病毒B3(coxsackievirus group B type3,CVB3)组、哈巴苷(低、中、高剂量)组和卡托普利组,采用CVB3诱导病毒性心肌炎小鼠模型。HE染色观察心肌病理损伤程度;紫外分光光度法检测肌酸激酶同工酶-MB(creatine kinase lsoenzyme-MB,CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactatedehy drogenase,LDH)、心肌肌钙蛋白I(myocardialtroponin I,cTnI)和心肌钙蛋白T(cardiac troponin,cTnT)水平;超声心动图检测小鼠左室舒张期后壁厚度(LVPWd)、射血分数(EF%)、舒张早期二尖瓣血流速度(E)、舒张早期二尖瓣环运动速度(E′IVS);ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β);蛋白免疫印迹法检测NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱天冬酶-1(cleaved caspase-1)的蛋白表达。结果:与CVB3组相比,哈巴苷低、中、高剂量组和卡托普利组心肌病理损伤程度明显改善;CK-MB、LDH、cTnI、cTnT水平明显降低(P<0.05);LVPWD、E/E′IVS明显降低(P<0.05),EF%明显升高(P<0.05);TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显降低(P<0.05);NLRP3、cleaved caspase-1蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论:哈巴苷对CVB3诱导的病毒性心肌炎小鼠具有治疗作用。     

TNF-α和明胶酶在病毒性心肌炎中的动态变化

目的：探讨TNF-α和明胶酶MMP-2、MMP-9在病毒性心肌炎（VMC）中的动态变化及其意义。方法：6周龄近交系雄性Balb/c小鼠随机分为对照组（n=35）和感染组（n=60）,分别给予PBS和含10-5.69 TCID50/mL的CVB3液0.1 mL注射,分别在第4、第10、第21、第30天各随机取8只小鼠处死并取血和心脏标本。Reed-Muench法测定接种病毒滴度;HE染色后光镜观察心肌组织病理学改变;免疫组织化学法、Western blot和实时荧光定量PCR法分别检测心肌组织MMP-2、MMP-9蛋白及其mRNA的表达;ELISA法检测血清TNF-α的浓度变化。结果：与对照组比较,感染组血清TNF-α浓度明显升高（P＜0.05）,心肌组织MMP-2和MMP-9蛋白及其mRNA表达均显著增高（P＜0.05）。MMP-2、MMP-9表达与心肌病理积分、TNF-α浓度均呈正相关。结论：在小鼠CVB3心肌炎中TNF-α及其下游产物MMP-2和MMP-9水平上调,可能参与VMC的病理生理过程。     

参附注射液对病毒性心肌炎小鼠心肌能量代谢的保护作用

目的 探讨参附注射液对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌能量代谢的保护作用.方法 将雄性Balb/c小鼠随机分为柯萨奇B3病毒(CVB3)感染组、CVB3感染加参附注射液治疗组和对照组.分别采用电镜和形态计量学方法观察心肌线粒体形态、数量和膜磷脂定位;酶细胞化学法分析线粒体细胞色素C氧化酶(CCO)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性.结果 感染组小鼠心肌线粒体大量破坏,膜磷脂严重缺失、定位改变;CCO和SDH活性降低.各时间点治疗组上述各项指标均较感染组显著改善.结论 VMC心肌线粒体结构严重破坏、功能明显下降,参附注射液能有效保护VMC心肌线粒体结构和功能,改善心肌能量代谢.     

胰岛素样生长因子-1对小鼠病毒性心肌炎心肌细胞凋亡蛋白p53的表达的影响

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌凋亡蛋白p53的影响。方法:将60只Balb/c雄性小鼠随机分为3组,正常对照组、柯萨奇病毒(CVB3)感染组(感染组)和病毒感染加IGF-1干预组(治疗组)。在实验第10天处死动物,留取心肌标本。免疫组织化学法检测心肌组织p53的变化。结果:治疗组心肌p53为123.5±11.2,明显低于感染组(167.9±15.6,P<0.01),故IGF-1能显著降低VMC小鼠心肌凋亡蛋白p53的表达。结论:IGF-1对VMC小鼠的心肌细胞有保护作用。