未成熟树突状细胞表面CD1d分子在体外移植免疫中的作用☆

背景：树突状细胞具有双向免疫调节作用,成熟树突状细胞激活免疫应答,而未成熟树突状细胞则倾向诱导免疫耐受。 目的：探讨鼠CD1d分子在未成熟树突状细胞诱导移植免疫耐受中的作用,以及在此过程中细胞因子的参与机制。 方法：利用vIL-10转染的BALB/c小鼠未成熟树突状细胞在体外用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因、脂多糖刺激成熟,经抗CD1d(anti-CD1d)干预。观察培养后的细胞表型、细胞因子表达。为探明CD1d分子在异体T细胞存在下的免疫作用,进行不同实验条件的初次、再次混合淋巴细胞培养(1stMLC、2ndMLC),观察T细胞增殖、细胞因子表达。 结果与结论：Anti-CD1d的干预降低了未成熟树突状细胞增殖异体T细胞的能力,anti-CD1d干预的未成熟树突状细胞致敏异体T细胞后其免疫功能低下;anti-CD1d干预在异体T细胞存在时影响未成熟树突状细胞在功能上的成熟,主要表现在抑制白细胞介素12的分泌,加强白细胞介素10的分泌。     

耐受性树突状细胞体外培养的基本特征

背景：树突状细胞是体内最重要的抗原提呈细胞,在免疫调节中扮演着免疫应答和免疫耐受的双重角色,对维持机体的免疫平衡起重要作用。 目的：探讨耐受性树突状细胞的体外培养方法,观察不同培养条件下耐受性树突状细胞的基本特征。 设计、时间及地点：以细胞为观察对象,随机分组设计,于2006-09/2008-02在南昌大学第一附属医院中心实验室完成。 材料：8周龄的Balb/c纯系雄性小鼠,体质量20~25 g,用于分离和制备骨髓单个核细胞。 方法：将小鼠骨髓单个核细胞分为5组在不同的培养体系中进行体外诱导培养：空白对照组(不加任何因子)、树突状细胞组(粒-巨噬细胞集落刺激因子+白细胞介素4)、血管活性肠肽组(粒-巨噬细胞集落刺激因子+血管活性肠肽)、地塞米松组(粒-巨噬细胞集落刺激因子+地塞米松)、血管活性肠肽+地塞米松组(粒-巨噬细胞集落刺激因子+血管活性肠肽+地塞米松)。 主要观察指标：光镜下动态观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞CD80、CD86、CD40、CD11c表达,四甲基偶氮唑盐法检测树突状细胞刺激淋巴细胞增殖的活性,特异性夹心酶联免疫分析测定树突状细胞上清液中白细胞介素10、白细胞介素12的水平。 结果：①利用粒-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素4、血管活性肠肽、地塞米松、脂多糖等因子体外培养能生成具有典型树枝状突起的树突状细胞。②树突状细胞组、血管活性肠肽组、地塞米松组、血管活性肠肽+地塞米松组CD11c的表达高于空白对照组(P < 0.05)。血管活性肠肽组、地塞米松组、血管活性肠肽+地塞米松组CD40、CD80和CD86表达,淋巴细胞增殖活性及培养上清液白细胞介素12水平均低于树突状细胞组(P < 0.05),血管活性肠肽组以质量浓度为40 μg/L、地塞米松组以10 μg/L减低明显,其中血管活性肠肽+地塞米松组在血管活性肠肽质量浓度为40 μg/L、地塞米松为10 μg/L条件下为最低,差异具有显著性意义(P < 0.05)。③血管活性肠肽组、地塞米松组、血管活性肠肽+地塞米松组细胞培养上清液中白细胞介素10水平均高于树突状细胞组(P < 0.05),血管活性肠肽组以质量浓度为40 μg/L,地塞米松组以10 μg/L升高明显,其中血管活性肠肽+地塞米松组在血管活性肠肽质量浓度为40 μg/L、地塞米松为10 μg/L条件下为最高,差异具有显著性意义(P < 0.05)。 结论：①小鼠骨髓单个核细胞体外经粒-巨噬细胞集落刺激因子、血管活性肠肽或/和地塞米松、脂多糖联合诱导培养生成致耐受性树突状细胞。②与常规诱导培养树突状细胞方法比较,耐受性树突状细胞具有CD40、CD80、CD86表达低,刺激淋巴细胞增殖弱的特点;耐受性树突状细胞培养体系上清液白细胞介素10水平高而白细胞介素12水平低。③粒-巨噬细胞集落刺激因子、血管活性肠肽+地塞米松、脂多糖联合诱导培养生成耐受性树突状细胞效果较佳,其中以血管活性肠肽40 μg/L、地塞米松10 μg/L的培养条件为最好。     

树突状细胞诱导免疫耐受与神经系统自身免疫性疾病的治疗

近年来树突状细胞(dendritic cells,DCs)诱导免疫耐受成为免疫学的研究热点之一,其作用机制包括诱导调 节性T细胞产生、诱导自身反应性T细胞无能或凋亡等。细胞因子修饰DCs或抗原负载DCs为神经系统自身免疫 性疾病的治疗开辟了新途径。     

致耐受树突状细胞与神经系统自身免疫性疾病

致耐受树突状细胞(Tol-DC)具有诱导免疫耐受特性.该文对Tol-DC诱导免疫耐受的机制及其在神经系统自身免疫性疾病治疗中的应用进行综述.     

糖酵解代谢旁路与树突状细胞诱导免疫耐受的相关性

<正>树突状细胞(dendritic cell,DC)是人类目前已知的免疫系统功能最强大的抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC),其功能为高效地识别、捕获、呈递抗原,从而激活抗原特异性T细胞,启动免疫应答,因此在固有免疫应答(innate immune response)及适应性免疫应答(adaptive immune response)中均具有重要作用。DC自1973年被加拿大科学家Steinman~([1])发现以来,一直是自身免疫性疾病研究的重点。近来关于DC代谢的研究     

树突状细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎和多发性硬化中的作用

树突状细胞(Dendritic cells,DC)作为一种专职的抗原呈递细胞(antigen-presenting cell,APC),既能激活机体免疫系统,又可以诱导免疫耐受,是许多自身免疫性疾病和肿瘤免疫研究的热点。本文介绍树突状细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎和多发性硬化发病及治疗过程中所发挥的作用。1树突状细胞的特点DC是一种专职的APC,能激活静止的T细胞和B细胞。DC遇到抗原刺激后迅速表达趋化因子受体(CCR)7,它们能从组织间隙,如肠粘膜、呼吸道粘膜下移行到附近的淋巴结并成熟。人和鼠不同的DC亚群的特性是不一样的,DC既能针对外界的感染作出反应,对机…     

树突状细胞在重症肌无力发病中的作用

树突状细胞是目前所知功能最强的专职抗原递呈细胞,是启动、调控并维持免疫应答的中心环节,在重症肌无力发病中发挥着重要作用。     

树突状细胞的培养及其诱导的神经胶质瘤体外杀伤作用研究

目的　研究负载肿瘤抗原的树突状细胞 (DCs)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTLs)对神经胶质瘤细胞的体外杀伤效应 ,探讨其用于临床治疗的可行性。方法　体外原代培养 12例胶质瘤细胞 ,冻融法获取胶质瘤细胞抗原 ,联合应用粒细胞 /巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素 4和肿瘤坏死因子 α等 ,对人外周血单核细胞进行体外诱导来获取DCs并负载肿瘤抗原 ,激活自体T淋巴细胞 ,制备特异性CTLs,MTT法检测对胶质瘤细胞的体外杀伤效应。结果　负载胶质瘤抗原的DCs激活的CTLs对胶质瘤细胞有明显的杀伤作用 ,显著高于K5 6 2细胞对照组 ,并且杀伤率随着效靶比的增加而增加。结论　从人外周血中诱导的DCs负载胶质瘤抗原后 ,激活的CTLs在体外对胶质瘤能产生高效的杀伤作用 ,为临床应用DCs瘤苗奠定基础     

树突状细胞与重症肌无力免疫耐受治疗的研究进展

重症肌无力(MG)是累及神经-肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体(AchR)的自身免疫性疾病,同时亦是迄今为止抗原抗体最为明确的自身免疫性疾病,患者细胞和体液免疫应答均存在异常,但MG确切的发病机制仍不完全清楚,它可能是一种由多基因调控、多种机制参与的复杂性疾病[1].     

冻融肺癌细胞对骨髓树突状细胞的免疫调节作用

背景：冷冻免疫是近年来倍受关注的课题,但冷冻对细胞免疫功能的影响一直缺乏深入的研究,特别是在细胞凋亡和树突状细胞方面。 目的：观察体外培养的肺癌NCI-H446细胞经氩氦刀冻融处理后细胞形态和细胞表面免疫表型的变化,及其能否有效激发骨髓树突状细胞产生特异性抗瘤效应。 设计、时间及地点：细胞免疫水平的对照实验,于2002-08/2003-04在解放军海军总医院血液实验室及解放军军事医学科学院细胞与基因治疗中心完成。 材料：小细胞肺癌细胞系NCI-H446细胞购自上海科学院细胞库。 方法：取体外培养的肺癌NCI-H446细胞经氩氦刀处理后,在体外树突状细胞培养过程中,加入冻融的肺癌细胞,分别观察肺癌细胞的形态结构、混合淋巴细胞反应及细胞毒T淋巴细胞杀癌细胞效应。 主要观察指标：培养树突状细胞的细胞形态和细胞表面免疫表型变化,培养细胞的混合淋巴细胞反应结果,培养细胞的凋亡情况。 结果：骨髓树突状细胞体外培养后,符合树突状细胞特征。在培养过程中加入冻融的肺癌细胞,不影响树突状细胞细胞表面抗原的表达,混合淋巴细胞反应增强,细胞毒T淋巴细胞可引起肺癌细胞凋亡。 结论：经氩氦刀处理的肺癌细胞溶解,胞膜不完整,体外能有效激发骨髓树突状细胞产生特异性抗瘤效应。     

Modulating dendritic cells (DC) from immunogenic to tolerogenic responses: A novel mechanism of AZA/6-MP

Azathioprine (Aza), 6-Mercaptopurine (6-MP) and 6-Thioguanine (6-TG) are thiopurine drugs widely used as immunosuppressants/anti-inflammatory agents in organ transplantation and chemotherapy. Aza is well tolerated and effective in modifying the course of MS. Here we investigated the action of 6-MP on human dendritic cells (DCs). We described for the first time that 6-MP impairs in vitro differentiation of DCs, has an inhibitory effect during DC activation processes inducing a functionally less immunogenic phenotype. Moreover, 6-MP significantly reduces DC IL-23 production and CCR7 expression, at the same time induces IL-10 augmentation. All these findings add a novel action mechanism in Aza immune modulation.     

Statin-modified dendritic cells regulate humoral immunity in experimental autoimmune myasthenia gravis

We previously demonstrated that atorvastatin induced immature dendritic cells (DCs) derived from spleen in vitro. Administration of these tolerogenic DCs led to amelioration of experimental autoimmune myasthenia gravis (EAMG). The protective effect was mainly mediated by inhibited cellular immune response, including up-regulated regulatory T cells and shifted Th1/Th17 to Th2 cytokines. The present study employed atorvastatin-modified bone marrow-derived DCs (AT-BMDCs) to explore the effect of tolerogenic DCs on humoral immune response of EAMG and further elucidate the underlying mechanisms. Our data showed that AT-BMDCs reduced the quantity and the relative affinity of pathogenic antibodies, suppressed germinal center response, decreased follicular helper T cells and IL-21, and increased regulatory B cells. These results suggest that AT-BMDCs ameliorate EAMG by regulating humoral immune response, thus providing new insights into therapeutic approaches of myasthenia gravis and other autoimmune diseases.     

骨髓间充质干细胞对移植免疫的影响

背景：近年来研究发现,骨髓间充质干细胞除具有支持体外造血、促进体内造血功能重建外,还具有较低的免疫原性和抑制异体T淋巴细胞增殖的作用,在调节移植免疫方面发挥重要作用,但其机制尚不十分明确。目的：就近年来关于骨髓间充质干细胞的免疫调节特性及其在造血干细胞移植中的作用简要综述。方法：由第一作者检索2000/2008 PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)有关骨髓间充质干细胞对移植免疫影响的文章,检索词为“BMSCs,hematopoietic stem cell transplantation,transplantantion immunity”,排除重复性研究。共保留37篇文献归纳总结。 结果与结论：骨髓间充质干细胞是存在于骨髓中除了造血干细胞外的另一种干细胞,在免疫反应中可以逃避免疫识别、抑制免疫反应。骨髓间充质干细胞的免疫抑制作用能有效地运用于造血干细胞移植,降低移植物抗宿主病、促进移植物存活等,有广阔的应用前景。但目前为止尚未能建立鉴定骨髓间充质干细胞的统一标准,至今还未能筛选到骨髓间充质干细胞特异性的标记分子;缺乏安全性评价;影响移植物抗宿主病同时是否影响移植物抗白血病效应;以及对肿瘤细胞生长的影响等问题都有待于进一步的研究才能解决。     

Bone marrow-derived dendritic cells pulsed with tumor homogenate induce immunity against syngeneic intracerebral glioma

To evaluate the efficacy and toxicity of dendritic cell (DC) based therapy for intracerebral gliomas, we utilized a cell line derived from an astrocytoma that arose spontaneously in a VM/Dk mouse. This astrocytoma mirrors human gliomas phenotypically, morphologically and secretes transforming growth factor (TGF)-betas, immunosuppressive cytokines secreted by human gliomas. Systemic vaccination of mice with DCs pulsed with tumor homogenate followed by intracranial tumor challenge produced a > 160% increase in median survival (p = 0.016) compared with mice vaccinated with PBS or unpulsed DCs (p = 0.083). Fifty percent of mice treated with pulsed DCs survived long-term. Immunologic memory was demonstrated by survival of mice rechallenged with tumor. Both cell-mediated and humoral immunity was induced. On histological examination only focal areas of demyelination at the tumor implantation site were present. There was no evidence that autoimmune encephalomyelitis was induced by DC vaccination. Therefore, in a murine model, vaccination with DCs pulsed with glioma tumor homogenate is a safe and effective therapy against a syngeneic glioma located in the immunologically privileged central nervous system (CNS).     

Immunogenic dendritic cells primed by social defeat enhance adaptive immunity to influenza A virus

Dendritic cells (DCs) sample their surrounding microenvironment and consequently send immunogenic or regulatory signals to T cells during DC/T cell interactions, shaping the primary adaptive immune response to infection. The microenvironment resulting from repeated social defeat increases DC co-stimulatory molecule expression and primes DCs for enhanced cytokine responses in vitro. In this study, we show that social disruption stress (SDR) results in the generation of immunogenic DCs, capable of conferring enhanced adaptive immunity to influenza A/PR/8/34 infection. Mice infected with influenza A/PR/8/34 virus 24 h after the adoptive transfer of DCs from SDR mice had significantly increased numbers of D^bNP_366-74CD8⁺ T cells, increased IFN-γ and IFN-α mRNA, and decreased influenza M1 mRNA expression in the lung during the peak primary response (9 days post-infection), compared to mice that received DCs from naïve mice. These data demonstrate that repeated social defeat is a significant environmental influence on immunogenic DC activation and function.     

他克莫司处理供者树突状细胞在诱导大鼠同种心脏移植免疫耐受中的作用

背景：诱导供者特异性免疫耐受被认为是最终克服器官移植后排斥反应的有效途径，近年来关于未成熟树突状细胞在诱导免疫耐受中的重要作用日益受到关注。 目的：观察他克莫司处理的供者未成熟树突状细胞对大鼠同种异体心脏移植免疫耐受的影响，分析未成熟树突状细胞诱导免疫耐受的作用途径。 设计：随机对照动物实验。 材料：实验于2006-04/2006-12在青岛大学医学院附属医院动物实验中心完成。以45只Wistar大鼠为供体，45只SD大鼠为受体，行颈部心脏移植45例次。按随机数字表法分为3组，每组15例次，进行不同的预处理。 方法：对照组、未经他克莫司处理组及他克莫司处理组移植前7 d分别经尾静脉注射生理盐水、供者未成熟树突状细胞和他克莫司处理的未成熟树突状细胞。分别测定移植后SD大鼠与Wistar大鼠及第3品系Lewis大鼠的单向混合淋巴细胞反应。 主要观察指标：各组受体大鼠移植心脏存活时间、心肌病理及血清白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素10、γ-干扰素含量变化。 结果：①未经他克莫司处理组大鼠的移植心脏存活时间较对照组明显延长（P < 0.01），他克莫司处理组大鼠的移植心脏存活时间进一步延长（P < 0.05）。②混合淋巴细胞培养结果显示为供者特异性。③各组大鼠血清白细胞介素2、γ-干扰素、白细胞介素4、白细胞介素10含量差异具有显著性意义（P < 0.01）。代表Th1的白细胞介素2、γ-干扰素水平明显降低，代表Th2的白细胞介素4、白细胞介素10水平明显增高。 结论：未成熟树突状细胞能够诱导同种异体大鼠心脏移植免疫耐受；他克莫司处理的未成熟树突状细胞能够加强这种免疫耐受，且这种耐受是供者特异性的。其可能主要通过调节T细胞免疫应答类型（Th1至Th2的免疫偏移）、诱导调节性T细胞和诱导T细胞失能等途径来参与免疫耐受的形成。     

5000/灯盏花提取物对异基因大鼠肾移植外周血树突状细胞的影响

目的：研究灯盏花提取物对异基因大鼠肾脏移植模型血中树突状细胞（dendritic cell,DC）的影响。方法：取Wistar大鼠作为供体,SD大鼠作为受体,行原位左肾移植手术并同时切除受体右侧肾脏,将移植术后大鼠随机分为灯盏花提取物低剂量组（5mg•kg-1•d-1）、中剂量组（10mg•kg-1•d-1）、高剂量组（15mg•kg-1•d-1）和NS组。术后按不同剂量向受体大鼠腹腔注射提取物或NS。手术后3d收集大鼠外周血,观察DC形态学变化并测定成熟状态;酶联免疫吸附法检测外周血白细胞介素-12（IL-12）水平;混合淋巴细胞培养（MLR）测定细胞的抗原递呈功能。结果：灯盏花提取物组DC形态较为幼稚,表面标记物、血中IL-12水平及MLR中的刺激指数（SI）均低于NS组（P<0.01）,随提取物剂量加大,各组指标逐渐下降,各组间比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论：灯盏花提取物能抑制大鼠肾移植后外周血中树突状细胞的成熟和功能,随剂量加大,抑制作用增强。     

Myeloid dendritic cells in inclusion-body myositis and polymyositis

Dendritic cells (DCs), immune system cells central to the development of immunity, have not previously been reported in muscle in inclusion-body myositis (IBM). We performed immunohistochemical studies on muscle biopsy specimens from 50 patients using monoclonal antibodies that distinguish two classes of DCs, myeloid DC and plasmacytoid DC. In 17 of 20 IBM and 9 of 10 polymyositis (PM) specimens, myeloid DCs were present in substantial numbers, frequently surrounded and sometimes invading otherwise intact myofibers, and were part of dense collections of cells that included T cells. Dermatomyositis muscle had more plasmacytoid DCs than myeloid DCs, whereas IBM and PM had greater numbers of myeloid DCs. The stellate morphology of myeloid DCs in dense collections of cells that included T cells suggests local intramuscular antigen presentation in IBM and PM.