RP-HPLC法同时测定酚酞含片中酚酞及杂质荧光母素的含量

目的:建立同时测定酚酞含片中酚酞及杂质荧光母素含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex-C18,流动相为甲醇-水(80:20),流速为1.0mL·min-1,检测波长为285nm,进样量为20μL。结果:酚酞与荧光母素色谱峰可有效分离,酚酞、荧光母素检测浓度的线性范围分别为4～100(r=0.9999)、0.21～5.30(r=0.9999)μg·mL-1,平均回收率分别为100.27%、99.89%,RSD分别为0.45%、1.04%;3批样品中杂质含量<0.11%。结论:本方法专属性强,操作简便,结果准确可靠,可用于该制剂的质量控制。     

高效液相色谱法测定酚酞溶液与酚酞片中荧光母素含量

目的建立测定酚酞及酚酞片中杂质荧光母素含量的高效液相色谱法。方法固定相：Shim pack VP ODS（4.6 mm×150 mm，5 μm）色谱柱；流动相：甲醇 0.02%磷酸溶液（V/V）（80：20）；检测波长：285 nm。结果荧光母素的线性范围为0.16～103.00 μg·mL 1，r＝1.000 0（n＝6），酚酞溶液中荧光母素的平均方法回收率为100.31%，RSD＝0.61%（n＝6）；酚酞片中荧光母素的平均方法回收率为100.82%，RSD＝1.34%（n＝6）。结论该方法快速、准确，能有效测定酚酞溶液及酚酞片中荧光母素含量。     

酚酞片中荧光母素的HPLC法限量检查

目的建立酚酞片中荧光母素限量检查的方法。方法采用高效液相色谱法,甲醇-0.05%磷酸溶液(70∶30)为流动相;流速0.8 ml.min-1;检测波长为284 nm。结果荧光母素在0.214 4～5.36 mg.L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为98.30%,RSD=1.32%(n=5)。结论该方法简便、准确、重复性好,能更好地控制酚酞片质量。     

酚酞片中荧光母素的限量检查方法研究

目的 建立RP-HPLC法测定酚酞片中荧光母素的含量.方法 采用 Agilent C18色谱柱（5μm,4.6mm×150mm）,柱温为25℃,以甲醇-0.05mol·L-1 NH4H2PO4（用磷酸调pH至3.31）（70：30）为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长为284nm.结果 荧光母素在1.988μg·mL-1～11.928μg·mL-1的范围内线性关系良好（r=0.9995,n=5）,测得平均回收率为99.78%,RSD=0.45%（n=9）.结论 该方法稳定可靠,重现性好,灵敏度高,能更好的控制酚酞片的质量.     

HPLC法测定酚酞片中酚酞的含量

目的 建立酚酞片中酚酞含量的测定方法.方法 采用高效液相色谱法,甲醇-0.05%磷酸溶液(70:30)为流动相;流速0.8 ml/min;检测波长为275 nm.结果 酚酞在10.00～250.00 mg/L范围内呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为100.10%,RSD=0.27%(n=5).结论 该方法简便、准确、重复性好,能很好地控制酚酞片的质量.     

高效液相色谱法测定酚酞片的含量

目的:建立酚酞片的HPLC含量测定方法.方法:色谱柱为XterraTM Waters C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水(60:40),在275 nm波长处检测.结果:线形范围为10.02～501 μg·ml-1,平均回收率为99.8%(n=9),RSD=1.07%.结论:方法简便快速,专属性强,灵敏度高,适合于酚酞片的质量控制.     

HPLC法测定酚酞含片的含量

目的建立高效液相色谱测定酚酞含片中酚酞含量的方法。方法色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水(60∶40)为流动相;检测波长为275 nm。结果线性关系为Y=47.5392X-21.5621,r=0.9999,线性范围在10.03~401.2μg,平均回收率100.1%(n=6),RSD=0.43%。结论本法操作简便准确,可作为酚酞含片中酚酞含量的质量控制方法。     

RP-HPLC法测定酚酞片的含量

目的建立用RP-HPLC法测定酚酞片的含量。方法用C18柱,甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(60∶40),用磷酸调pH至3.50±0.1为流动相,检测波长为275 nm。结果酚酞在10~200 mg.L-1范围内,线性关系良好,相关系数r=0.999 99。平均回收率在99.5%~100.5%,RSD均小于0.5%。结论本法简便、灵敏、准确、重现性好。     

酚酞及其试纸变色性能的观测

目的 观测酚酞及其试纸在碱性区域的pH分辨能力.方法 紫外可见分光光度法和色差计法.结果 碱性溶液中酚酞在553 nm处的吸光度随pH值增加而加大,pH14时快速褪色.酚酞试纸在pH8 ～ 14区间相邻pH值之间的色差较大.结论 可按相邻pH值之间吸光度之差或色差的大小判断酚酞和酚酞试纸的pH分辨能力.可用酚酞试纸和配套使用的比色版检测碱性溶液的pH值.     

高效液相色谱法测定酚酞栓的含量

目的建立高效液相色谱测定酚酞栓中酚酞含量的方法。方法色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水（60：40）为流动相;检测波长为275nm。结果线性关系为Y=15．8649X＋3．8656,r=0．9999,线性范围在10．035～401．400μg,平均回收率104．99％（n=9）,RSD=1．09％。结论本法操作简便准确,可作为酚酞栓中酚酞含量的质量控制方法。     

酚酞片含量测定方法的改进

目的对《中国药典》2010年版二部收载的酚酞片含量测定进行改进。方法用紫外一可见分光光度法,分别用改进的方法与《中国药典》收载的方法对5种不同批次,不同厂家的酚酞片进行含量测定。结果改进的方法与《中国药典》收载的方法相比,其含量测定结果一致。结论新设计的操作方法比《中国药典》收载的方法更加简便,测定结果也更为准确。     

UFLC-MS／MS法快速测定酚酞片中的酚酞

目的建立超快速液相色谱-质谱／质谱联用（UFLC—MS／MS）法测定酚酞片中酚酞的量。方法样品以乙醇提取、微孔滤膜滤过、离心后,通过电喷雾离子化（ESI）,采用多反应检测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的检测离子为m／z319．0→225-2。采用Shim-packXR-ODS色谱柱（75mm~3．0mm,2．0μm）分离,以乙腈-水．甲酸（55：45：0．1）为流动相,体积流量为0．40mL／min,在3min内完成酚酞定量分析。结果线性范围为2．5～1000．0ng／mL,最低检测限为2．5ng／mL;日内RSD小于1．85％,日问RSD小于2．56％。结论本方法灵敏度高,分析速度快,操作简单,可作为酚酞片中酚酞质量控制方法。     

紫外分光光度法测定酚酞片含量的不确定度评定

目的:评定以紫外分光光度法测定酚酞片含量的不确定度。方法:根据《测量不确定度评定与表示》,并参考《化学分析中不确定度的评估指南》,对酚酞片的含量测定进行测量不确定度的分析与评定。结果:扩展不确定度为1.0%,相对扩展不确定度为1.0%,含量测定结果可表示为(97.0±1.0)%。结论:严格按照操作规范,尽可能减少稀释过程影响,可有效降低引入的不确定度,保证测定结果准确。     

UFLC-MS/MS法快速测定酚酞片中的酚酞

目的 建立超快速液相色谱-质谱/质谱联用（UFLC-MS/MS）法测定酚酞片中酚酞的量。方法 样品以乙醇提取、微孔滤膜滤过、离心后,通过电喷雾离子化（ESI）,采用多反应检测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的检测离子为m/z 319.0→225.2。采用Shim-pack XR-ODS色谱柱（75 mm×3.0 mm,2.0 μm）分离,以乙腈-水-甲酸（55∶45∶0.1）为流动相,体积流量为0.40 mL/min,在3 min内完成酚酞定量分析。结果 线性范围为2.5～1 000.0 ng/mL,最低检测限为2.5 ng/mL;日内RSD小于1.85%,日间RSD小于2.56%。结论 本方法灵敏度高,分析速度快,操作简单,可作为酚酞片中酚酞质量控制方法。     

减肥产品中非法添加酚酞的检测方法研究

目的 建立减肥产品中非法添加泻药"酚酞"的检测方法.方法 采用快筛试管法和TLC方法鉴别所含的酚酞,采用HPLC-DAD法和HPLC-MS法对酚酞进行定性定量分析.结果 103批次产品中有42批次检出酚酞.结论 所建立的方法专属性强、灵敏度高、重现性好,可作为该类产品是否添加酚酞的检测方法.     

Phenolphthalein metabolite inhibits catechol-O-methyltransferase-mediated metabolism of catechol estrogens: a possible mechanism for carcinogenicity

Phenolphthalein (PT), used in over-the-counter laxatives, has recently been identified as a multisite carcinogen in rodents, but the molecular species responsible for the carcinogenicity is not known. A catechol metabolite of PT, hydroxyphenolphthalein (PT-CAT), was recently identified and may be the molecular species responsible for at least part of the toxicity/carcinogenicity of PT. We hypothesize that PT-CAT inhibits the enzyme catechol-O-methyltransferase (COMT) and therefore potentiates genotoxicity by either PT-CAT itself or the endogenous catechol estrogens (CEs) in susceptible tissues. The present studies were conducted to determine the effects of PT treatment and PT-CAT itself on the COMT-mediated metabolism of 4- and 2-hydroxyestradiol both in vitro and in vivo. Female mice were treated with PT (50 mg/kg/d) for 21 days and then euthanized. PT-CAT concentration in urine reached plateau levels by 7 days of exposure. An O-methylated metabolite of PT-CAT was detected in feces. In vitro experiments demonstrated that PT treatment resulted in an increase in free CEs, which are normally cleared by COMT and a concurrent decrease in the capacity of hepatic catechol clearance by COMT. In vitro, PT-CAT was a substrate of COMT, with kinetic properties within the range measured with endogenous substrates. PT-CAT was an extremely potent mixed-type inhibitor of the O-methylation of the catechol estrogens, with 90-300 nM IC50s. The above data, when taken together, suggest that chronic administration of PT may enhance metabolic redox cycling of both PT-CAT and the catechol estrogens and this, in turn, may contribute to PT-induced tumorigenesis.