3种酶联免疫吸附试验试剂检测丙型肝炎抗体结果分析

目的：通过对国产3种丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂盒间接法和夹心法检测的结果比较,分析评价双抗原夹心法试剂的性能。方法设计不同的试验方法,用3种试剂对收集的阳性和阴性标本进行丙型肝炎病毒抗体检测,对单试剂和双试剂呈阳性反应的标本同时进行第三组重组免疫印迹试验（RIBA）和核酸检测;另外,用已知浓度的质控物倍比稀释后,用3种试剂平行检测。对得到的所有检测结果进行比对,综合分析。结果与确证试剂相比,2种间接法试剂和1种夹心法试剂的假阳率分别为42.2％、57.8％和1.6％,阳性检出率均为100％,但夹心法的分析灵敏度比间接法高1～4倍。结论夹心法 ELISA 检测试剂在灵敏度、特异性方面优于间接法 ELISA 检测试剂。     

酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒抗体影响因素分析

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎病毒抗体（抗HCV）目前已是血站、医院的常用检测方法,虽然该方法操作简单、灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗-HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,给临床诊断、治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗-HCV的因素较多,现就比较常见的影响因素进行分析总结。     

双抗原夹心酶联免疫技术检测丙型肝炎病毒抗体

1993年3月，国家卫生部下发文件要求对献血员进行抗HCV抗体的检测，随后有10几家检测HCV抗体的ELISA试剂上市，并进行批批检定，但全是间接ELISA法。由于间接法技术自身的缺陷及各生产厂家的产品存在一定的质量问题，导致了一些误诊和漏检。为此，应从根本上解决试剂本身的质量问题，建立双抗原夹心ELISA技术检测抗HCV抗体可大大提高检测试剂的特异性和敏感性。目前双抗原夹心法大多用于检测抗HIV和Tp抗体。此类试剂的敏感性和特异性均优于标记抗人免疫球蛋白的间接法。而丙型肝炎病毒抗体的检测仍采用间接ELISA技术，目前已有快速金标试剂采用双抗原夹心法原理，通过免疫层析检测抗HCV抗体。但灵敏度较低，不能用于献血员的筛选。我们通过对基因工程抗原进行改造，以适应标记辣根过氧化物酶，建立双抗原夹心ELISA法检测抗HCV抗体。     

温湿度对高通量酶联免疫吸附实验测定丙型肝炎病毒抗体结果的影响

目的探讨实验室温湿度对高通量酶联免疫吸附实验(ELISA)测定丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)标准品结果的影响。 方法利用艾德康全自动酶免仪(ELISA 1100型),恒温24℃、不同相对湿度(%RH)(30%RH、40%RH,50%RH、60%RH、70%RH、80%RH、90%RH)条件下及湿度50%RH、不同温度(16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃、36℃、38℃、40℃)条件下,分别对HCV-Ab标准品进行测定。 结果在排除湿度影响的情况,在温度16℃～36℃条件下进行实验显示,HCV-Ab的S/CO值(分别为3.93±0.09,4.43±0.15,5.16±0.11,6.00±0.17,6.43±0.12,7.43±0.10,7.84±0.15,7.97±0.47,8.24±0.29,8.64±0.61,9.24±0.43)之间差异有统计学意义(F＝620.08,P＝0.000),且标准品S/CO值均随着温度升高而逐渐升高,HCV-Ab标准品的ELISA结果与温度呈正相关(r＝0.97)。36℃和38℃之间S/CO值(9.24±0.43,9.29±0.30)差异无统计学意义(t＝0.52,P>0.05),而38℃和40℃之间的S/CO值(9.29±0.30,8.65±0.77)差异有统计学意义(t＝8.17,P<0.05)。而在排除温度影响的情况,不同湿度(30%RH、40%RH,50%RH、60%RH、70%RH、80%RH、90%RH)间S/CO值结果(分别为7.20±0.18,7.09±0.32,5.83±0.27,5.38±0.24,3.91±0.28,3.27±0.49,3.04±0.85)差异有统计学意义(F＝985.64,P＝0.000),且标准品S/CO值随着湿度升高而逐渐降低,HCV-Ab标准品ELISA结果与湿度呈负相关(r＝－0.98)。 结论不同的温湿度对高通量ELISA检测结果有着重要影响,尽量选择温度不超过36℃和湿度较低的环境进行高通量的ELISA测定,综合考虑推荐全自动酶免仪工作温度范围控制在18℃～25℃之间,湿度控制在35%RH～50%RH之间。     

献血者丙型肝炎病毒抗体的检测结果分析

丙型肝炎病毒是世界上几乎所有输血后非甲非乙型肝炎的致病病毒。为尽可能减少患者输血后感染丙型肝炎,在献血者中进行丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）检测是减少输血后感染肝炎的一个重要环节。为了进一步了解本市献血者丙型肝炎病毒感染状况,对本院2004年7月至2007年6月的29747例献血者进行了抗-HCV检测,现将检测结果报道如下。     

化学发光微粒子免疫分析法与酶联免疫吸附法检测感染性疾病抗原抗体的比较

目的 对化学发光微粒子免疫分析(CMIA)法检测感染性疾病的抗原抗体进行评价.方法 采用CMIA法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别对2006~2010年度卫生部临床检验中心及北京市临床检验中心感染性疾病抗原抗体室间质评品进行检测,以室间质评品靶值作为参考,计算两种方法检测结果的准确率,并分析两种方法检测结果的一致率.结果 CMIA法检测感染性疾病抗原抗体具有较高灵敏度,有较好的重复性和特异性,但同时也存在乙型肝炎表面抗原假阳性率高的检测结果.结论 CMIA法对提高感染性疾病抗原抗体准确率具有重要意义.     

酶联免疫吸附试验检测乙肝核心抗体假阳性分析

目的 对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝核心抗体(抗HBc)的假阳性分析.方法 ELISA法采用的是竞争抑制法检测抗HBc;化学发光微粒子免疫测定法(CMIA)检测抗HBc.结果 用ELISA法初检210份标本,其中抗HBc高值80例、抗HBc低值130例,在抗HBc低值组中,ELISA法、CMIA法复检的阳性率分别为46.1％、15.4％,三者之间差异都有统计学意义(P均＜0.01),两对半模式主要以2、5阳和5阳为主.结论 用ELISA法初检时,当抗HBc值处在低值时,两对半模式为2、5或5阳时,应对标本用ELISA法复检,甚至用CMIA法重测,以确保结果的准确性.     

化学发光法和酶联免疫吸附法检测丙型肝炎病毒抗体的比较分析

目的 探讨化学发光法(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对丙型肝炎病毒(HCV)抗体的检测意义.方法 分别用CLIA法和ELISA法检测2 460例血清样本,收集CLIA/ELISA法检测阳性及可疑血清标本,以重组免疫印迹法(RIBA)最终确认.结果 两种方法共筛选57例CLIA/ELISA法检测阳性及可疑血清...     

以合成肽作抗原的酶联免疫吸附法检测抗精子抗体

血清、精浆和宫颈粘液中的抗精子抗体 (AsAb)是导致不孕和自然流产的原因之一。现常用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测AsAb ,但该法以正常生育者的精子直接或制成包被抗原来包被酶标板[1] ,受抗原来源限制 ,且稳定性和重复性不理想。本研究用人工合成的特异性精子肽作包被抗原 ,以ELISA检测AsAb ,取得较满意结果。一、材料和方法1.标本来源 :本院特检中心不明原因不育患者血清 2 83份 ,男 75份 ,女 2 0 8份 ;对照组为本院未婚男女血清各 5 0份。冰冻保存待测。2 .合成肽抗原 :采用固相法Fmoc策略 ,人工合成[2 ] 具有免疫原性、能与人…     

酶联免疫吸附法与胶体金法抗-HCV检测对比分析

我们自 2 0 0 1～ 2 0 0 2年对漯河市无偿献血人员 16 82 8人 ,采用酶联免疫吸附 (EL ISA)法与胶体金法两种方法进行了抗 -HCV的检测比较 ,现将结果报告如下。1　对象和方法1.1　对象　来自漯河市三县一区无偿献血人员 ,人群分布为干部、职员、工人、农民、学生等 ,年龄在 2 5～ 5 5岁之间。1.2　试剂　 EL ISA检测试剂 ,系上海实业科华生物技术有限公司及英科新创科技有限公司提供 ,胶体金法检测试剂 ,系艾康生物技术 (杭州 )有限公司提供 ,两种方法检测试剂均在有效期内使用。1.3　方法　两种方法都是常规静脉采血。EL ISA法 ,应…     

酶联免疫吸附试验定量检测乙型肝炎病毒表面抗体的研究

乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）浓度是人机体对乙型肝炎病毒（HBV）免疫能力的评价指标，而目前很多实验室特别是基层单位仅对抗-HBs作定性检测。定性检测抗-HBs的临界值一般设在10mIU／mL左右，大于此值的标本被判定为阳性。仅被判定为抗-HBs阳性的标本，难对其免疫能力作进一步的评价。本院用国产酶联免疫吸附试验（EuSA）定性检测抗-HBs试剂作定量检测，并用美国Abbott公司AxSYM免疫分析仪抗-HBs定量检测作比较，评价其效果。     

酶联免疫吸附法检测梅毒抗体试验灰区结果分析

目的：分析梅毒酶联免疫吸附法（TP-ELISA）在更换为两步法后的灰区结果。探讨适宜的梅毒检测操作规程以减少误诊。方法随机选取50288例血清标本进行TP-ELISA法筛查;对处于灰区的样本,再进行快速血浆反应素试验（RPR）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（T PPA ）进行验证。按疾病及年龄段分组,统计各组抗梅毒抗体灰区率。结果50288例血清样本,经过TP-ELISA法初筛灰区结果为61例。不同年龄段造成的灰区率61岁以上年龄段最高。结论 TP-ELISA 检测仍存在一定的假阳性,设定合理的灰区范围,对灰区内的样本进行确认试验具有重要的临床意义。     

酶联免疫吸附试验两种方法检测梅毒螺旋体抗体结果比较

目的比较梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)一步法和二步法检测梅毒螺旋体抗体(抗-TP)的结果,研究钩状效应对TP-ELISA一步法检测抗-TP结果的影响,评价TP-ELISA二步法检测抗-TP的应用价值。方法分别用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、TP-ELISA一步法和二步法检测3 600份住院患者血清,并用TP-ELISA一步法(稀释法)检测怀疑存在钩状效应的血清标本12份。结果 TPPA、TP-ELISA二步法分别检测出91份抗-TP阳性,结果一致;TP-ELISA一步法检测出79份抗-TP阳性,12份TP-ELISA一步法检测结果阴性怀疑存在钩状效应的血清标本进行1∶5、1∶10、1∶40、1∶80倍稀释后,再采用TP-ELISA一步法进行检测,分别有12份、12份、8份、4份结果转为阳性。结论采用TP-ELISA二步法或TP-ELISA一步法同时对标本进行一定倍数稀释后检测,可以克服钩状效应,提高检测的敏感度。     

6种不同加样量对酶联免疫吸附测定法检测乙型肝炎病毒核心抗体结果的影响

目的探讨采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）时,不同加样量对检测结果的影响。方法收集乙型肝炎病毒标志物HBcAb阳性标本93例,HBcAb阴性标本93例。共采取6种（A～G）加样方式。加样方式A：按说明书将待测血清作1：30倍稀释;加样方式B～G分别为直接加入血清10、20、30、40、50μL。然后,用ELISA法进行HB-cab的检测。结果93例阳性样本中,各种加样方式检测结果一致,未造成结果的假阴性。93份阴性样本中,加样方式B组与A比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,其余4种方式与方式A比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论用ELISA法检测大批号标本的HBcAb时．可肯辖加入10μL血清．以减少加样环节。提高检测质量．     

质粒DNA抗原酶联免疫吸附试验检测抗双链DNA抗体的研究

目的 建立以质粒DNA为抗原的检测血清抗双链DNA(ds-DNA)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法及探讨其临床应用价值。方法 将原核表达载体质粒pBV220用碱裂解法提取纯化DNA后，按1：150稀释包被在多聚-L-赖氨酸处理的微孔板上，以辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)为酶标记物，建立检测血清抗双链DNA抗体的ELISA方法。并以短膜虫为底物的间接免疫荧光法(IIF)为参比方法，对6_4例系统性红斑狼疮(SLE)、8例混合性结缔组织病、17例类风湿性关节炎患者的血清抗ds-DNA抗体进行对比检测。结果 紫外分光法于波长260nm测DNA浓度为1．54g/L。ELISA抗ds-DNA法和IIF法检测3组患者阳性率分别为23．4％和17．2％、12．5％和12．5％、11．8％和5．9％，符合率分别为93．8％、100％、94．1％。以经典IIF法为金标准，ELISA检测抗ds-DNA抗体的特异性为93．4％，敏感性为100％。结论 用质粒DNA作抗原建立的检测血清抗ds-DNA抗体具有良好的精密度、敏感性和特异性，检出率高于IIF法，有助于对SLE的诊断和病情活动程度进行监测。     

酶联免疫吸附测定法检测脑脊液抗隐球菌抗体IgG的临床应用研究

隐球菌性脑膜炎(cryptococcal neoformans meningitis,CNM)是一种严重的中枢神经系统疾病,临床表现复杂,病死率高.近年来,CNM的发病率和病死率明显增加,尤其表现在艾滋病(AIDS)人群,美国、西欧、澳大利亚6%～10 %的AIDS患者并发CNM,非洲卢旺达的AIDS患者15%～20%并发CNM[1].治疗不及时,1年内病死率80%,致残率达20%,AIDS患者10%～30%死于真菌感染.国外的研究主要集中在AIDS人群,我国CNM多为非 AIDS人群,呈散发[2],相关的免疫学资料很少.目前,国内用于临床快速诊断CNM的试剂盒缺乏,常规的诊断手段单一,准确率低.本实验旨在建立间接酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,检测临床神经系统性疾病患者脑脊液中抗隐球菌抗体IgG,评价ELISA方法对诊断CNM的临床应用价值.     

酶联免疫吸附试验与微粒子酶免疫法检测血清乙型肝炎病毒核心抗体IgM的结果比较

急性乙型肝炎患者在乙肝病毒(HBV)感染早期、血清丙氨酸转氨酶(ALT)异常达峰值时,即可检出HBV核心抗体IgM(抗HBc IgM),急性乙型肝炎患者血清中抗HBc IgM近乎100%阳性,抗HBc IgM为急性乙型肝炎早期确诊的免疫学指标之一,一般滴度较高,可持续3~6个月[1~3]。慢性乙型肝炎患者抗HBc IgM阳性,说明HBV在肝内复制活跃,肝脏炎症损害明显。抗HBc IgM既是乙型肝炎近期感染的指标,也是HBV在体内复制的指标,并提示患者血液有传染性[3]。慢性活动性乙型肝炎患者血清抗HBc IgM阳性时,通常滴度较低。抗HBcIgM阴转预示急性乙型肝炎逐渐恢…     

酶联免疫吸附试验与微粒子酶免疫法检测血清乙型肝炎病毒核心抗体IgM的结果比较

急性乙型肝炎患者在乙肝病毒（HBV）感染早期、血清丙氨酸转氨酶（ALT）异常达峰值时,即可检出HBV核心抗体IgM（抗HBc IgM）,急性乙型肝炎患者血清中抗HBc IgM近乎100％阳性,抗HBc IgM为急性乙型肝炎早期确诊的免疫学指标之一,一般滴度较高,可持续3—6个月。慢性乙型肝炎患者抗HBc IgM阳性,说明HBV在肝内复制活跃,肝脏炎症损害明显。抗HBc IgM既是乙型肝炎近期感染的指标,也是HBV在体内复制的指标,并提示患者血液有传染性。慢性活动性乙型肝炎患者血清抗HBc IgM阳性时,通常滴度较低。抗HBc IgM阴转预示急性乙型肝炎逐渐恢复。     

洗板对酶联免疫吸附试验检测结果的影响

目的 探讨酶标洗板机洗板程序对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果 的影响.方法 将已知乙肝表面抗原(HBsAg)阴性者血清样本30份和HBsAg 0.5 ng阳性及2 ng阳性质控血清按酶标仪清洗方式分行洗、板洗2组,每种洗板方式依清洗次数分为5小组,采用ELISA法对样本进行HBsAg检测.结果 在相同工作条件下,洗板次数以8～9次为宜,本次试验采用行洗法洗板假阳性率略低于板洗法洗板,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 酶标洗板机的洗涤次数直接影响ELISA法检测结果 判定,不同洗板机依据性能需设定相应的洗板程序,并严格操作规程,以降低由洗板引发的假阳性、假阴性结果 .