前癃通胶囊对大鼠前列腺增生组织中转化生长因子β1及其mRNA表达的影响

目的通过免疫组化、原位杂交等实验方法观察前癃通对大鼠前列腺增生组织中TGF-β1及其mRNA阳性表达的影响,从翻译和转录水平探讨该胶囊治疗良性前列腺增生的相关分子机制,以便前癃通胶囊能更好地应用。方法选择60只雄性SD大鼠,完全随机选取10只作为正常对照组,其余50只进行造模。造模成功后完全随机分为模型组、癃闭舒组及前癃通低、中、高剂量组各10只,采用免疫组化及原位杂交观察各组大鼠前列腺增生组织中TGFβ1平均灰度值、积分光密度及阳性细胞总面积的差异。结果前癃通高、中剂量组及癃闭舒组大鼠前列腺组织中TGF-β1平均灰度值分别为（2．00±0．69）×10^4、（2．84±0．54）×10^4和（2．62±0．62）×10^4,与模型组的（3．66±0．89）×10^4比较,差异有统计学意义（P〈0．01）;前癃通高、中剂量组及癃闭舒组大鼠前列腺组织中TGF-β1积分光密度分别为（1．05±0．29）×10^3、（1．74±0．51）×10^3和（1．76±0．47）×10^3,与模型组的（2．83±1．15）×10^3比较,差异有统计学意义（P〈0．01）;前癃通高、中剂量组及癃闭舒组大鼠前列腺组织中TGF-β1阳性细胞总面积分别为（4．78±0．95）×10^3、（5．76±0．69）×10^3和（5．63±0．88）×10^3,与模型组的（7．13±0．98）×10^3比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。低剂量组大鼠前列腺组织中TGF-β1积分光密度、阳性细胞总面积分别为（2．14±0．44）×10^3和（6．36±1．06）×10^3,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。前癃通高剂量组大鼠前列腺组织中TGF-β1平均灰度值、积分光密度、阳性细胞总面积均低于癃闭舒组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论前癃通胶囊可以降低大鼠前列腺组织中TGF-β1的阳性表达,降低大鼠前列腺组织中TGF-β1,mRNA的阳性表达。     

前列癃闭通胶囊对大鼠前列腺增生影响的实验研究

目的观察前列癃闭通胶囊对大鼠前列腺增生的影响, 为临床中药治疗前列腺增生提供依据。方法取SD雄性2个月龄大鼠30只, 完全随机分成正常对照组、模型组和前列癃闭通治疗组各10只。 应用去势大鼠皮下注射丙酸睾丸酮诱导前列腺增生, 观察正常对照组、模型组、前列癃闭通组大鼠前列腺的湿重、前列腺指数、酸性磷酸酶的变化。结果前列癃闭通组大鼠前列腺的湿重（375±58）mg、前列腺指数（1.68±0.22）和酸性磷酸酶（5.6±1.2）均明显低于模型组［湿重：（419±53）mg; 前列腺指数： 2.11±0.19;酸性磷酸酶：（8.2±1.3）U/L］,差异有统计学意义（P〈0. 01）,并接近正常组的数值［湿重：（321±20）mg;前列腺指数： 1.08±0.12;酸性磷酸酶：（5.1±0.1）U/L］。结论前列癃闭通胶囊可明显抑制大鼠前列腺增生, 抑制大鼠血清酸性磷酸酶水平升高,临床上可以利用中药前列癃闭通胶囊治疗良性前列腺增生症。     

癃闭康抑制前列腺增生作用的实验研究

目的 探讨癃闭康抑制大鼠前列腺增生的作用.方法 应用去势并皮下注射丙酸睾丸酮方法制备大鼠前列腺增生模型,随机分为对照组,模型组,前列康组,癃闭康低剂量组、中剂量组、高剂量组,观察各组大鼠前列腺湿重、前列腺指数以及前列腺组织在光镜和电镜下的病理变化.结果 模型组大鼠前列腺湿重、前列腺指数高于对照组(P＜0.01);癃闭康治疗组、前列康组各项指标低于模型组(P＜0.01);癃闭康高剂量组各项指标低于癃闭康中、低剂量组(P＜0.01)及前列康组(P＜0.01),光镜下病理结构接近对照组.结论 癃闭康具有抑制前列腺增生的作用, 疗效与剂量呈正相关关系.     

贝那普利对肝纤维化大鼠TGF-β1和α-SMA影响的研究

目的研究贝那普利对大鼠肝纤维化程度及对肝纤维化大鼠TGF～β1和α-SMA表达的影响。方法建立40％CCL诱导的大鼠肝纤维化模型,42只大鼠分为对照组（n=10）、模型组（n=16）、观察组（n=16）。对3组大鼠肝组织进行HE染色、网状纤维染色、免疫组织化学染色,观察肝组织病理变化、纤维增生及TGF—β1和α-SMA的表达情况。结果模型组的肝纤维化程度、TGF—β1阳性表达、α-SMA阳性表达计分明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;观察组的肝纤维化程度、TGF—β1阳性表达、α-SMA阳性表达计分明显低于模型组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论贝那普利可有效降低肝组织TGF—β1和α—SMA的表达,从而抑制大鼠肝纤维化的进程。     

戈舍瑞林对前列腺增生模型大鼠血管生长因子和免疫功能的影响

目的:研究戈舍瑞林对前列腺增生模型大鼠血管生长因子及免疫功能的影响。方法:取大鼠建立前列腺增生模型,然后随机分为模型组和戈舍瑞林低、中、高剂量组(0.4、0.8、1.2 mg/kg),另取正常大鼠作为正常对照组,每组10只。正常对照组和模型组大鼠ig生理盐水,戈舍瑞林各剂量组大鼠ig相应剂量的药物,每日1次,连续25 d。检测各组大鼠前列腺体积、湿质量、前列腺指数和前列腺组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)、成纤维细胞生长因子(FGF)、CD4、CD8的阳性细胞面积。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠前列腺体积、湿质量、前列腺指数和VEGF、TGF-β_1、FGF、CD4、CD8阳性细胞面积均增加(P<0.05)。与模型组比较,戈舍瑞林各剂量组大鼠上述指标均改善(P<0.05),且中、高剂量组较低剂量组改善效果更明显(P<0.05),中、高剂量组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:戈舍瑞林可改善大鼠的前列腺增生,减少前列腺组织中VEGF表达并调节免疫功能。     

TGF-α在自发性高血压大鼠心脑肾内的表达

目的：探讨自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat,SHR）血压升高前后心、脑、肾靶器官内转化生长因子-α（transforming growth factor-α,TGF-α）表达水平的变化及其意义.方法：应用免疫组化SP法及计算机图像分析技术,对幼年和成年SHR大鼠及幼年和成年正常血压对照组京都Wistar大鼠（Wistar-Kyoto,WKY）心、脑、肾TGF-α蛋白的表达水平进行了定量观测.结果：4组大鼠心、脑、肾内均观察到TGF-α阳性细胞,阳性反应产物呈棕色颗粒状.在脑内阳性细胞主要见于大脑皮质和纹状体,在心内分布于心肌细胞中,在肾分布于肾小球足细胞中.对上述3个器官阳性细胞数、积分光密度和灰度值的测量结果显示WKY幼年和成年组及SHR幼年组3组间阳性细胞数及其灰度差别无统计学意义（P＞0.05）,而成年SHR组阳性细胞数及其灰度较其他3组均高（P＜0.05）.结论：成年SHR的TGF-α表达水平上调,可能参与了高血压病时阻力血管的重塑.     

前列冲剂对前列腺增生大鼠血清酸性磷酸酶及T和E_2的影响

目的观察前列冲剂对前列腺增生大鼠血清前列腺特异性酸性磷酸酶活性和性激素水平的影响。方法50只SD雄性大鼠中,10只为正常对照组用蓖麻油造模。其余40只中,10只为模型组,另30只为实验组,给他们皮下注射丙酸睾丸酮(4ml/kg)诱导前列腺增生,实验组(分低、中、高剂量组)每天分别给予不同剂量前列冲剂(2.5ml/kg,5ml/kg,10ml/kg)灌胃。5周后将大鼠处死,摘取前列腺,称体重及前列腺湿重,计算前列腺指数;测定大鼠血清睾酮(T)、雌激素(E2)、总酸性磷酸酶(ACP)、非前列腺特异性酸性磷酸酶(NPAP),并计算前列腺特异性酸性磷酸酶(PAP)。结果中剂量和大剂量前列冲剂明显降低血清PAP,与模型组比较差异显著(P<0.01);明显拮抗实验性前列腺增生大鼠血清T水平升高(P<0.01),对血清E2水平无明显影响。中剂量(5ml/kg)和大剂量(10ml/kg)前列冲剂可以明显减少前列腺湿重和减小前列腺指数。结论前列冲剂有明显降低实验性前列腺增生模型大鼠血清PAP的作用,可以明显拮抗血清T水平的升高。前列冲剂抑制良性前列腺组织增生的作用与血清性激素水平变化有关。     

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮整合素连接激酶和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮整合素连接激酶和α-平滑肌肌动蛋白(α-SM A)表达的影响。方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、阳性对照组和罗格列酮处理组,每组10只,正常对照组给予普通营养饲料喂养,阳性对照组和罗格列酮处理组给予高脂饲料喂养,连续喂养12周后,阳性对照组和罗格列酮处理组大鼠腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素,正常对照组给予等量枸橼酸缓冲液。成功制备DKD模型后,罗格列酮处理组大鼠给予罗格列酮3 mg/kg灌胃,正常对照组和阳性对照组给予等量生理盐水灌胃。连续给药28周后,对各组大鼠进行称重,检测FBG、Hb A1c和24 h尿蛋白水平,实时荧光定量PCR检测右肾上极皮质组织中ILK和α-SMA表达。结果罗格列酮处理组和阳性对照组大鼠体重均低于正常处理组,而相对肾重均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),罗格列酮处理组大鼠体重均高于阳性对照组,而相对肾重低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);罗格列酮处理组大鼠FBG、Hb A1c和24 h尿蛋白水平均高于正常对照组,但均低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);罗格列酮处理组大鼠右肾上极皮质组织中ILK mRNA和α-SMA mRNA相对表达量均高于正常对照组,但均低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DKD大鼠肾组织中ILK和α-SMA呈高表达,罗格列酮可下调DKD大鼠肾组织中ILK和α-SMA表达,可能通过抑制肾小管上皮细胞转分化发生而延缓肾小管间质纤维化。     

前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层中iNOS和eNOS表达的影响

目的:探讨前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法:取大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照(尼莫地平1mg.kg-1)组和前列地尔低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00μg.kg-1)组,每组10只,腹腔注射相应药物6d,每日1次,末次给药后建立局灶性脑缺血模型,大鼠清醒后进行神经功能缺损评分,采用免疫组化法和免疫印迹法检测各组大鼠建模2h后iNOS、eNOS的表达。结果:与假手术组比较,其余各组神经功能缺损评分均明显增加,iNOS阳性细胞数和表达量均明显增加,除模型组外其余各组eNOS阳性表达量均增加(P均<0.05);与模型组比较,阳性对照组和前列地尔中、高剂量组神经功能缺损评分均明显降低,阳性对照组和前列地尔3个剂量组iNOS阳性细胞数和表达量均明显降低、eNOS阳性细胞数和表达量均明显增加(P均<0.05)。结论:前列地尔预处理对局灶性脑缺血模型大鼠具有保护作用,其机制可能与下调大脑皮层iNOS、上调eNOS的表达有关。     

肾安胶囊对5/6肾大部切除大鼠肾脏的保护作用

目的探讨肾安胶囊对肾大部切除大鼠肾脏功能的影响。方法将大鼠随机分为假手术组和手术组,术后3天再将手术组大鼠随机分为肾安胶囊组和Nx组。8周后测尿蛋白和血肌酐;取肾组织做病理检查;用免疫组织化学检查肌成纤维细胞标志抗原(α-平滑肌肌动蛋白α-SMA)。结果Nx组大鼠肾脏出现肾小球硬化和肾间质纤维化;和Sham组相比α-SMA表达明显升高;肾安胶囊组肾脏纤维化明显减轻(P<0.05),α-SMA表达比Nx组明显下降。结论肾安胶囊可抑制肌成纤维细胞增殖和浸润,减轻肾脏纤维化从而保护肾功能。     

花天胶囊对前列腺增生大鼠超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的 观察花天胶囊对前列腺增生大鼠超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的药理作用。方法 应用甲睾酮8 mg/kg灌胃给药,构建前列腺增生模型,各组大鼠(对照组,模型组,前列康组,花天胶囊高、中、低剂量组)连续28 d给予相应药物或0.9%氯化钠注射液。检测SOD活力和MDA含量。结果 给药后花天胶囊高剂量组大鼠SOD活力为(110.58±31.87)U/mgprot,中剂量组大鼠SOD活力为(115.70±45.76)U/mgprot,均比模型组明显增加(P<0.05);且高剂量组的MDA含量为(112.22±32.75)nmo L/mg,明显减少(P<0.01)。结论 花天胶囊可明显增加SOD活力、降低MDA含量,可能是其抗前列腺增生的作用机制之一,还需进一步研究。     

阿霉素肾病大鼠α-SMA表达特点及缬沙坦的干预治疗

目的观察阿霉素诱导的肾病模型大鼠肾脏αSMA、FN、LN的表达特点、意义和缬沙坦干预治疗的影响。方法单侧肾切除加重复阿霉素尾静脉注射制作肾病模型,以αSMA、FN、LN等为观察指标,采用免疫组化、病理图像分析和流式细胞检测等方法,进行阳性表达定位、半定量和蛋白表达定量分析。结果阿霉素肾病模型组大鼠肾小管间质αSMA表达明显,阳性细胞率和蛋白表达半定量分析明显高于假手术组(P<0.01),且伴有FN、LN在肾小管间质和肾小球的大量沉积,缬沙坦组明显低于模型组(P<0.01)。结论阿霉素肾病模型中肾小管间质存在细胞表型转化现象,缬沙坦能抑制肾小管间质细胞表型转化,同时,减少FN、LN等细胞外基质的沉积。     

高血糖对肝纤维化大鼠肝组织α—SMA和CTGF表达的影响

目的 探讨高血糖对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA反映肝星状细胞HSC活化)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 将52只SD雄性大鼠随机分为糖尿病肝纤维化组、正常血糖肝纤维化组与正常对照组.通过链脲佐菌素(streptozocin,STZ)诱导糖尿病,后用四氯化碳诱导肝纤维化.肝组织HE染色检测病理改变.免疫组化法检测肝组织α-SMA、CTGT蛋白表达.结果 高血糖肝纤维化组α-SMA(灰度值142.5±3.67)和CTGF(灰度值144.2±5.01)表达水平较正常血糖肝纤维化组(α-SMA灰度值158.9±2.18,CTGF灰度值157.7±6.80)显著升高(P＜0.05).结论 高血糖可通过诱导肝脏α-SMA、CTGF表达,加重大鼠肝纤维化的程度,促进肝纤维化的形成.其机制与促进肝星状细胞的增殖活化及细胞外基质的合成分泌等有关.     

复元胶囊对晚期膝骨关节炎大鼠软骨中Ⅱ型胶原及基质金属蛋白酶1和3的影响

目的观察复元胶囊对实验性大鼠晚期膝骨关节炎软骨组织中基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-3及Ⅱ型胶原的影响,探讨其治疗骨关节炎的作用机制。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分为六组,每组10只。除正常组外,其余各组均采用Hulth法建立晚期膝骨关节炎模型。手术后第2周开始,抗骨增生胶囊组予抗骨增生胶囊557 mg·kg-1·d-1,复元胶囊低、中、高剂量组分别给予复元胶囊371.65、743.30、2 229.90 mg·kg-1·d-1,正常组和模型组给予等体积生理盐水,每日灌胃1次,持续12周。12周后评价各组大鼠关节肿胀情况,并取大鼠胫骨平台的软骨组织。按Pelletier-JP标准评价关节软骨大体情况,并通过HE染色进行Mankin’s评分。采用免疫组织化学法和Western blot法检测各组关节软骨中MMP-1、MMP-3及Ⅱ型胶原的蛋白表达量。结果与正常组相比,模型组大鼠关节肿胀评分、PelletierJP标准和Mankin’s评分均升高(P<0.05或P<0.01),而各给药组关节肿胀评分、Pelletier-JP标准和Mankin’s评分均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。复元胶囊中、高剂量组Mankin’s评分低于抗骨增生胶囊组(P<0.05或P<0.01)。与正常组相比,模型组软骨组织中MMP-1、MMP-3表达量明显升高,Ⅱ型胶原表达量明显降低(P<0.01)。各给药组MMP-1、MMP-3表达量低于模型组,Ⅱ型胶原表达量高于模型组(P<0.05或P<0.01)。复元胶囊高剂量组MMP-1、MMP-3的表达量低于抗骨增生胶囊组和复元胶囊低、中剂量组,Ⅱ型胶原表达量高于抗骨增生胶囊组和复元胶囊低、中剂量组(P<0.05或P<0.01)。结论复元胶囊能通过抑制MMPs的表达,减少胶原的降解,达到对晚期骨关节炎的防治作用。     

穿山龙总皂苷经TGF-β1/α-SMA通路减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化的实验研究

摘要：目的:探讨穿山龙总皂苷（TSRDN）经转化生长因子-β1/α-平滑肌动蛋白（TGF-β1/α-SMA）通路减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化的作用机制。方法:96只大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、泼尼松组（3 mg·kg-1）,以及TSRDN低、中、高剂量组（20,40,80 mg·kg-1）,每组16只。以博莱霉素5 mg·kg-1滴入气管建立肺纤维化动物模型,连续给药28 d后,检测羟脯氨酸含量、肺系数,观察肺组织病理变化,同时采用反转录·聚合酶链反应（RT-PCR）及蛋白免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织中TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白表达量。结果:假手术组肺组织结构正常,无间质纤维组织增生,偶见炎性细胞;模型组大鼠组织巨噬细胞活化,炎性细胞浸润,肺泡隔增宽,表面有较多出血灶,形成弥散性肺纤维化,多呈3级纤维化和2级肺泡炎改变;泼尼松组和TSRDN给药组胶原组织增生降低,肺泡间隔增宽不明显,多数肺组织结构较为清晰,多呈2级和1级纤维化改变,炎性细胞浸润减少。与假手术组比较,模型组大鼠肺系数、肺组织羟脯氨酸含量、肺泡炎评分、肺纤维化评分、TGFβ1、α-SMA mRNA和蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;与模型组比较,泼尼松组和TSRDN各剂量组大鼠上述相关指标均降低（P<0.05）,且随着TSRDN剂量的升高,TSRDN各剂量组大鼠上述相关指标逐渐降低,呈剂量依赖性（P<0.05）;与泼尼松组比较,TSRDN低、中剂量组大鼠肺系数、肺组织羟脯氨酸含量、肺泡炎评分、肺纤维化评分、TGFβ1、α-SMA mRNA和蛋白表达水平均升高（P<0.05）,TSRDN高剂量组大鼠上述相关指标差异无统计学意义（P>0.05）。结论:TSRDN具有一定的抗肺纤维化作用,其机制可能通过TGF-β1/α-SMA信号途径干预纤维蛋白形成和沉积。     

断乳后铝暴露对大鼠学习、记忆的影响及其机制的初步研究

目的研究断乳后不同浓度慢性铝暴露的大鼠海马细胞内钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)表达变化,探讨铝损害学习记忆的突触机制。方法对照组、低剂量和高剂量组大鼠从断乳后分别自由饮用蒸馏水、Al3+浓度为15mmol.L-1和30mmol.L-1的A1C13水溶液;采用跳台法测试大鼠学习记忆能力;Western blot法测定大鼠海马内CaN蛋白表达;免疫组化方法测定大鼠海马CA1、CA3区的CaN阳性细胞平均积分光密度。结果与对照组相比,两铝暴露组大鼠跳台实验反应时间明显延长而潜伏期明显缩短,5min内错误次数明显增加,且两铝暴露组间的差异具有显著性;与对照组相比,两铝暴露组大鼠海马内CaN蛋白表达明显增加、CaN阳性神经元平均积分光密度明显增加,且两铝暴露组间差异亦具有显著性。结论断乳后铝暴露损害了大鼠的学习与记忆行为,可能与海马内CaN的表达增加有关。     

双参饮对肝纤维化模型大鼠的改善作用及机制研究

目的:研究双参饮对肝纤维化模型大鼠的肝功能和肝纤维化程度的改善作用及其机制。方法:取健康SD大鼠,以含40%四氯化碳的橄榄油溶液连续7周腹腔注射,建立肝纤维化模型。将造模成功的47只大鼠随机分为模型组、阳性对照组和双参饮低、中、高剂量组,各组分别为9、9、9、10、10只;另取10只健康SD大鼠作为正常组。从造模结束后次周开始,模型组与正常组大鼠灌胃水,阳性对照组[秋水仙碱0.2 mg/(kg·d)]和双参饮各剂量组[双参饮水煎液3、6、12 g/(kg·d),以总生药量计算]大鼠分别灌胃相应药液,连续给药28 d。采用赖氏分析法检测血清中肝功能指标[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)]水平,采用酶联免疫吸附法检测血清中肝纤维化指标[透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(Ⅲ-PC)、Ⅳ型胶原前体(Ⅳ-C)]水平;采用苏木精-伊红染色法和苦味酸酸性复红染色法观察大鼠肝组织病理学变化;采用分光光度法检测大鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(HYP)水平;采用免疫组化法检测大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST、TBIL、HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C水平均显著升高,ALB水平显著降低(P<0.05);大鼠肝组织出现空泡变性、纤维组织增生等病理现象;肝组织中SOD水平显著降低,MDA、HYP水平均显著升高(P<0.05);肝组织中可见大量α-SMA蛋白阳性染色颗粒,其蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,双参饮各剂量组大鼠血清中ALT、AST和肝纤维化指标水平均显著降低,ALB水平显著升高,双参饮中、高剂量组TBIL水平均显著降低(P<0.05);肝细胞变性、纤维化组织增生现象均有较大改善;肝组织中SOD水平显著升高,MDA、HYP水平均显著降低(P<0.05);α-SMA蛋白阳性染色明显减少,其蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:双参饮对肝纤维化模型大鼠有保肝、抗肝纤维化的作用,其机制可能主要是通过增强机体抗氧化能力、下调α-SMA蛋白表达、抑制肝星状细胞的活化、减少细胞外间质的合成,从而逆转肝纤维化进程。     

基于NF-κB信号通路研究前列闭尔通栓对大鼠慢性非细菌性前列腺炎的影响

目的 探讨前列闭尔通栓对自身免疫性前列腺炎（EAP）大鼠的影响及作用机制。方法 50只SD大鼠采用前列腺蛋白提纯液联合完全弗氏佐剂制备EAP大鼠模型，另取10只作为对照组，造模成功大鼠随机分为模型组、前列通栓（0.42 g·只^-1）组和前列闭尔通栓低、中、高剂量（0.33、0.66、0.99 g·只^-1）组，直肠给药28 d。压力换能器测定膀胱内压变化速率，显微镜计数测定前列腺液中卵磷脂小体、白细胞数量，ELISA法检测前列腺组织炎症因子，HE染色观察前列腺组织病理变化，Westernblotting检测前列腺组织核因子κB（NF-κB）p65、磷酸化κB抑制因子激酶（p-IKK-α）/IKK-α、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、磷酸化IκB激酶-α（p-IκB-α）/IκB-α、环氧化酶-2（COX-2）蛋白表达；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测重组人趋化因子配体5（CXCL5）、白细胞介素-6（IL-6）、TNF-α、COX-2基因表达。结果 与对照组比较，模型组大鼠膀胱内压变化速率显著降低（P<0.01）；白细胞数量显著增加、卵磷脂小体数量显著减少（P<0.01）；前列腺组织TNF-α、IL-8水平显著升高（P<0.01），IL-10水平显著降低（P<0.01）；前列腺组织炎症反应明显，病理评分显著升高（P<0.01）；前列腺组织NF-κB p65、p-IKK-α、p-IκB-α、TNF-α、COX-2蛋白表达显著升高（P<0.05、0.01）；前列腺组织CXCL5、COX-2、TNF-α基因表达升高（P<0.05）。与模型组比较，前列闭尔通栓中剂量组膀胱内压变化速率显著升高（P<0.01）；各剂量组白细胞数量显著减少、卵磷脂小体数量显著增加（P<0.01）；中、高剂量组TNF-α、IL-8水平显著降低（P<0.05、0.01）；各剂量组前列腺组织炎症反应明显减轻，病理评分显著降低（P<0.01）；各剂量组前列腺组织p-IκBα/IκBα、COX-2蛋白表达显著降低（P<0.01）；低剂量组前列腺组织p-IKK-α/IKK-α蛋白表达显著降低（P<0.05）；低、高剂量组前列腺组织NF-κB p65蛋白表达显著降低（P<0.05）；中剂量组前列腺组织TNF-α蛋白表达显著降低（P<0.05） ；各剂量组前列腺组织CXCL5、IL-6、COX-2基因表达显著降低（P<0.05）。结论 前列闭尔通栓可有效改善EAP大鼠前列腺组织病理形态，减轻炎症反应，其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路相关蛋白NF-κB p65、p-IKK-α、TNF-α、p-IκB-α表达相关。     

自噬抑制剂对乙醇诱导的肝星状细胞活化作用的影响

【摘要】目的 观察自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）对乙醇诱导的肝星状细胞（HSC）活化作用,并探讨其作用机制。方法 体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,设立空白对照组、阳性对照组（乙醇刺激组）、低剂量组（5 mmol/L3-MA+100mmol/L乙醇）、高剂量组（10mmol/L3-MA+100mmol/L乙醇）。RT-PCR分析各组HSC活化标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原基因表达,Western blot法检测各组HSC中自噬水平标志蛋白LC3Ⅱ、α- SMA、Ⅰ型胶原表达;MTT法检测3-MA对乙醇诱导的HSC增殖的影响。结果与空白对照组比较,阳性对照组中α- SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量明显增加（P＜0.05）,高剂量组却显著减少（P＜0.01）;与阳性对照组比较,低剂量组和高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量逐渐减少（P＜0.05）;与低剂量组比较,高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达减少（P＜0.05）。与阳性对照组比较,加入3- MA处理后的HSC增殖显著减少（P＜0.05）。结论3-MA可抑制乙醇诱导的HSC-T6细胞中LC3Ⅱ蛋白的表达、α- SMA、Ⅰ型胶原mRNA及蛋白的表达,抑制HSC增殖,且高剂量的作用更明显。     

异甘草酸镁对肝组织中波形蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 研究异甘草酸镁抑制肝纤维化进程中肝细胞上皮间质转化作用的机制.方法 将60只小鼠随机分为6组,每组10只,分别为空白对照组,模型组,异甘草酸镁低剂量组(4 mg/kg)、中剂量组(16 mg/kg)和高剂量组(32mg/kg),水飞蓟宾组(16 mg/kg),其中模型组为运用CCl4.HE染色观察各组肝组织的病理学改变,免疫组化法检测肝组织中波形蛋白(Vimentin)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,Western Blot检测肝组织中Vimentin、Collagen Ⅰ和α-SMA的蛋白表达情况.结果 病理学结果显示,与空白对照组相比,模型组小鼠肝组织的纤维化程度明显加重,肝脏炎症坏死区及纤维间隔明显增多;异甘草酸镁各剂量组小鼠肝组织纤维化水平均明显低于模型组.免疫组化检测和Western Blot结果均显示,模型组肝细胞Virnentin、Collagen Ⅰ和α-SMA的表达量明显增强;异甘草酸镁能抑制小鼠肝组织中Vimentin、Collagen Ⅰ和α-SMA的蛋白表达,且具有一定剂量依赖关系.结论 异甘草酸镁对CCl4所致小鼠肝纤维化形成有明显的抑制作用.